肾茶提取物防治大鼠慢性肾功能衰竭的实验研究

目的研究肾茶提取物对慢性肾功能衰竭(CRF)大鼠肾功能的影响。方法采用腺嘌呤致大鼠慢性肾功能衰竭动物模型,将SD大鼠随机分成5组:1组为正常组、2组为模型组、3组为肾茶提取物高剂量组、4组为肾茶提取物低剂量组、5组为尿毒清对照组。将2～5组实验动物腺嘌呤灌胃,18d后收集1组、2组24h尿液,并眼底采血测24h尿蛋白定量(UTP)、血清尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)、尿酸(UA)、血红蛋白(Hb)、尿微量白蛋白(UMA)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α),验证造模成功。19d后3、4组给予肾茶提取物,5组给予尿毒清,1、2组给予生理盐水。49d后收集全部大鼠24h尿液,然后处死大鼠,采血及取肾、称肾重、体重。检测UTP、BUN、Cr、Hb、UMA、UA、TNF-α、Ca、P等指标。HE染色观察肾脏病理结构。结果实验前后肾茶高、低剂量组大鼠的肾功能指标与模型组相比较,均具有显著性,与对照组相比,效果亦显著;明显降低CRF大鼠体内TNF-α,明显抑制肾小球系膜细胞及基质增生,减轻肾小管-间质损害。结论肾茶提取物能够降低CRF大鼠UTP、Cr、BUN、UA、P、UMA、TNF-α水平、升高血中Hb、Ca等水平,从而有效改善CRF大鼠的肾功能及免疫功能。     

银杏叶提取物对实验性大鼠肝纤维化抑制作用的研究

为探讨银杏叶提取物 (EGb)对四氯化碳 (CCL4)导致的实验性肝纤维化水平的抑制作用及其机制 ,用CCL4诱发Waister大鼠肝纤维化模型 ,分为模型组 (C) 6只 ,EGb治疗组 (E组 ) 8只 ,正常大鼠 4只为对照组 (N组 )。实验中分批处死动物获取肝组织 ,用常规石蜡切片 ,做免疫组化染色观察肝组织中I型胶原 (CI)的含量及转化生长因子 β1 (TGF β1 )表达水平的变化 ,并用图象分析法测定CI、TGF β1 平均光密度值 (MOD)和阳性面积百分比。结果显示 ,N、E组与C组之间CI、TGF β1 水平表达 ,ALT、AST、MDA值存在显著性差异 ,P <0 .0 1。提示EGb与CCL4导致的实验性肝纤维化胶原水平有显著抑制和治疗作用 ,机制可能与其抗氧化作用有关。     

ROS对FOXO蛋白激活和基因表达的影响

叉头框转录因子家族O亚族（FOXO）是多种细胞内过程的重要调节因子,如能量代谢、氧化应激应答、氧化还原信号通路、细胞周期进展、凋亡等。活性氧簇（ROS）和其他能够产生活性氧簇的应激刺激能够在多个水平调节叉头框转录因子家族O亚族的激活和蛋白基因表达。一方面,从转录水平调节叉头框转录因子家族O亚族的蛋白表达,如作用于叉头框转录因子家族O亚族的上游调节蛋白p53、影响miRNA对叉头框转录因子家族O亚族 mRNA的调节、影响HuR对叉头框转录因子家族O亚族 mRNA的调节。另一方面也可以通过磷酸化和乙酰化等影响叉头框转录因子家族O亚族的活性、稳定和与DNA的结合。另外活性氧簇还能通过影响叉头框转录因子家族O亚族转录共激活因子调节叉头框转录因子家族O亚族蛋白激活。在与氧化应激相关的一些病理条件下,叉头框转录因子家族O亚族过度活化和过多表达会导致各种疾病,如癌症、糖尿病等的发生。因此本文综述了活性氧簇对叉头框转录因子家族O亚族活性和表达的影响,从而能够进一步明确疾病的发病机制,为研发新的药物提供思路。     

莪术醇通过SIRT1/FOXO1通路改善重症急性胰腺炎大鼠肺损伤及诱导肺泡巨噬细胞凋亡的机制

目的：探讨莪术醇通过沉默信息调节因子1(SIRT1)/叉头转录因子1(FOXO1)通路对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis, SAP)大鼠肺损伤的改善作用及其对肺泡巨噬细胞凋亡的影响。方法：按照体重排序法将75只大鼠随机分为对照组、模型组、莪术醇低剂量组(4 mg·kg^–1)、莪术醇高剂量组(16 mg·kg^–1)和拮抗剂组(莪术醇16 mg·kg^–1+EX527 2 mg·kg^–1),每组15只。除对照组外均建立急性胰腺炎大鼠模型,然后立即灌胃相应药物或生理盐水,12 h后再次给药1次。72 h后处死大鼠,比较各组血清淀粉酶(AMS)、内毒素水平,肺组织病理评分,肺泡巨噬细胞凋亡率,肺泡巨噬细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、一氧化氮(NO)水平,以及肺泡巨噬细胞中SIRT1、FOXO1、乙酰化FOXO1(Ac-FOXO1)、核因子-κB p65(NF-κB p65)蛋白表达量。结果：与对照组比较,模型组血清AMS、内毒素水平,肺组织病理学评分和肺泡巨噬细胞TNF...     

促红细胞生成素对慢性肾功能衰竭大鼠肾功能的影响

目的:研究促红细胞生成素(EPO)对慢性肾功能衰竭(CRF)大鼠肾功能的影响及其作用机制.方法:将5/6肾切除大鼠随机分为3组:Ⅰ组为假手术组;Ⅱ组为CRF组;Ⅲ组为给予促红细胞生成素的CRF组.第2次术后8周检测各组血压、尿蛋白、血清尿素氮、血肌酐、血红蛋白;观察肾组织病理改变,检测血清及肾组织中血红蛋白氧合酶 1(HO 1)活性;用免疫组化方法检测HO 1在肾脏中的表达.结果:Ⅲ组与Ⅱ组比较,血压、尿蛋白、血肌酐及尿素氮水平明显降低(P＜0.05),肾小球系膜增生及间质纤维化程度明显减轻(P＜0.05);HO 1活性检测显示,Ⅲ组大鼠血清中HO 1活性明显高于Ⅱ组(P＜0.05),免疫组化显示Ⅲ组大鼠肾组织中HO 1表达明显高于Ⅱ组(面密度、平均光度)(P＜0.05).结论:EPO使CRF大鼠肾功能得到改善,并使CRF大鼠血清及肾组织中HO 1表达及活性明显升高.     

miR-582-5p靶向调控FOXO1对新生大鼠缺血缺氧性脑病神经元损伤的影响

目的 探讨微小RNA-582-5p(miR-582-5p)靶向调控叉头框转录因子1(FOXO1)对新生大鼠缺血缺氧性脑病（HIE）神经元损伤的影响。方法 90只新生大鼠按照随机数字表法均分为对照（NC）组、模型（HIE）组、miRNA对照（LV-miRNA-NC）组、miR-582-5p过表达（LV-miR-582-5p）组、miR-582-5p过表达+mRNA对照（LV-miR-582-5p+LV-NC）组、miR-582-5p过表达+FOXO1过表达（LV-miR-582-5p+LV-FOXO1）组。除NC组外的各组大鼠建立HIE模型,对大鼠进行神经功能缺损评分,TTC染色测定脑梗死体积,Real-time PCR检测miR-582-5p和FOXO1表达,双萤光素酶报告基因实验检测miR-582-5p和FOXO1靶向关系,HE染色观察海马组织病理变化,TUNEL和Neu N荧光双标共定位检测海马组织神经元凋亡,免疫组化染色检测FOXO1、胱天蛋白酶3(Caspase-3)蛋白表达。结果miR-582-5p和FOXO1具有靶向关系,与NC组比较,HIE组大鼠神经功能缺损评分、脑梗死体...     

前列腺素E1对改善慢性肾功能衰竭的作用

目的观察前列腺素E1(简称PGE1)注射液对慢性肾功能衰竭(CRF)患者的治疗作用。方法应用PGE1治疗46例CRF患者，并与同期住院条件匹配的慢性肾功能衰竭患者作比较(对照组)，对治疗结果作对比分析。结果治疗组BUN、Scr明显下降。Alb、Hb明显上升，优于对照组。结论PGE1有扩张肾血管，改善肾血供，增加肾小球滤过率，保护残余肾单位的储备功能和改善低蛋白血症的作用。     

银杏叶提取物对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠ET-1、TGF-β_1的影响

目的:研究银杏叶提取物(EGb)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠中内皮素-1(ET-1)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的影响。方法:实验分为3组,即正常对照、COPD模型、EGb组。采用熏吸香烟并经气管内注入脂多糖(LPS)法复制COPD大鼠模型,EGb组于COPD模型开始复制后第8天起每天igEGb200mg·kg-1,至第28天。对各组大鼠肺脏行病理学检测和支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数、中性粒细胞(PMN)数、ET-1、TGF-β1的测定。结果:EGb组大鼠肺组织形态学改变较COPD模型组减轻;定量指标肺平均内衬间隔(MLI)较COPD模型组显著降低(P<0.05)。EGb组BALF中白细胞总数、PMN数和ET-1、TGF-β1浓度较COPD模型组显著下降(P<0.05)。结论:EGb对COPD模型大鼠的肺脏具有保护作用,而抑制COPD大鼠ET-1、TGF-β1水平可能是其重要作用机制。     

肾茶对Adenine所致慢性肾功能衰竭大鼠的改善作用

以含０．７５％Ａｄｅｎｉｎｅ饲料喂养，造成慢性肾功能衰竭的大鼠，同时灌胃肾茶水提液（１０，４ｇ／ｋｇ）可有效地降低血清ＢＵＮ、肌酐含量，并可改善贫血症状，增加内生肌酐清除率及尿肌牙的排泄。这种促进毒性代谢产物排出的作用与其增加肾小球滤过率和肾血流量有关。     

银杏叶提取物对糖尿病模型大鼠肾脏ET-1、TGF-β_1的影响

目的:研究银杏叶提取物(EGb)对糖尿病模型大鼠肾组织中内皮素-1(ET-1)、转化生长因子β1(TGF-β1)水平变化的影响。方法:SD大鼠24只随机分为3组,即正常对照、糖尿病模型和EGb组,经相应处理后8周,观察大鼠血糖、胰岛素、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、肌酐清除率(Ccr)、尿白蛋白排泄率(UAE)、尿β2微球蛋白排泄率(β2-MG)等水平变化;以放射免疫法检测血浆、尿液及肾组织中ET-1水平;以ELISA法检测血清、尿液中TGF-β1水平。结果:糖尿病大鼠的血糖、胰岛素、TC和TG升高;经EGb治疗后,血糖、血胰岛素、TC和TG显著降低。糖尿病模型组血、尿中ET-1、TGF-β1及肾组织中ET-1水平均显著高于正常对照组;EGb可显著降低血、尿中ET-1、TGF-β1和肾组织中ET-1水平及Ccr、UAE、β2-MG。结论:EGb对糖尿病大鼠的肾脏具有保护作用,而抑制糖尿病大鼠ET-1、TGF-β1水平可能是其重要作用机制。     

海昆肾喜胶囊对慢性肾功能衰竭患者肾功能指标的影响

目的:观察海昆肾喜胶囊对慢性肾功能衰竭(CRF)患者肾功能指标的影响.方法:采用随机数表将2017年1月至2018年6月在佳木斯骨科医院肾内科进行治疗的90例CRF患者展开研究,将其分为对照组与观察组,各45例.对照组采用复方丹参注射液治疗,观察组采用海昆肾喜胶囊治疗.对比两组临床疗效及肾功能指标[素氮(BUN)、血肌...     

蝉花菌丝体对慢性肾功能衰竭大鼠的治疗作用

采用肾脏5/6切除和肾脏电灼建立慢性肾衰大鼠模型,考察蝉花菌丝体的治疗作用.结果表明,蝉花菌丝体的3个剂量组(0.6、1.2和2.4 g/kg)均能明显抑制肾脏5/6切除所致慢性肾衰大鼠血清中尿素氮和肌酐水平的升高,也能抑制由肾脏电灼引起慢性肾衰大鼠肌酐的升高.这提示蝉花菌丝体能有效延缓大鼠慢性肾衰的进程.     

银杏叶提取物对肝纤维化模型大鼠的影响及抗肝纤维化机制的研究

目的 探讨银杏叶提取物(GBE)对肝纤维化模型大鼠的影响及抗肝纤维化机制.方法 SD大鼠60只随机分为正常组(n=12)和模型组(n=48),模型组大鼠又分为4个亚组:模型对照组、GBE低、中、高剂量组(n=12),GBE低、中、高剂量组每天分别灌胃给予GBE 50mg/kg、100mg/kg及200mg/kg,正常组和模型组给予等体积的0.9%氯化钠溶液,连续2个月(1次/d).给药结束后腹主动脉取血,分离血清,试剂盒检测肝功能指标(ALT、AST、MDA、SOD、白蛋白、球蛋白及白/球),放免法检测肝纤维化指标(HA、PC-Ⅲ、C-Ⅳ及LN),大鼠脱颈椎处死后立即取右叶部分肝组织,液氮速冻后于-80℃保存,RT-PCR检测肝组织TGF-β1、TIMP1、Ⅰ型胶原mRNA的表达水平.结果 与模型对照组比较,GBE中、高剂量组AST、ALT、球蛋白及肝纤维化各项指标显著降低,TGF-β1、TIMP1、Ⅰ型胶原mR-NA表达水平显著降低(P<0.05),白蛋白水平、白/球值显著升高(P<0.05),MDA水平差异无统计学意义(P>0.05).结论 GBE能显著改善肝纤维化大鼠的肝功能指标,肝纤维化指标,其机制可能是通过降低TGF-β1、TIMP1、Ⅰ型胶原mRNA表达水平来实现的.     

银杏叶提取物对大鼠实验性重症胰腺炎肠粘膜屏障功能的影响

目的　探讨银杏叶提取物 (EGb)对大鼠急性重症胰腺炎 (ASP)肠粘膜屏障功能的影响。方法　胰胆管内注射 5 %牛磺胆酸钠溶液制作大鼠ASP模型 ,72只SD大鼠随机分为假手术组 (SO组 )、ASP组和EGb治疗组。治疗组腹腔注射EGb 2 0mg·kg 1,每 6h注射一次 ;SO组与ASP组腹腔注射等量 0 9%氯化钠液 ,各组分别在 3、6、12和 2 4h取材并分别作下述检测 :(1)小肠粘膜病理变化 ;(2 )血浆内毒素测定 ;(3)肠道细菌移位检测 ;(4)回肠粘膜细胞原位凋亡 ;(5 )存活时间与存活率观察。结果　术后早期肠粘膜的超微病理损害EGb组较ASP组减轻 ;EGb组血浆内毒素水平于 6、12和 2 4h较ASP组明显下降 (P <0 0 5 ) ;术后 6h肠道菌群易位率ASP组和EGb组分别为 14 3%和 12 5 % ,两组间差异无显著性 ;术后 2 4hASP组和EGb组分别为 6 4 7%和 33 3% (P <0 0 5 ) ;肠粘膜原位凋亡检测EGb组在 6h和 12h细胞凋亡指数较ASP组明显下降 (P <0 0 5 )。ASP组术后 4 8h内全部死亡 ,平均存活时间 2 3 6h ;EGb组术后 72h存活率为 2 9 4 % ,平均存活时间为 4 2 2h(P <0 0 5 )。结论　EGb早期腹腔灌注对大鼠ASP肠粘膜屏障功能具有保护作用 ,从而改善大鼠ASP的预后。     

银杏叶提取物对大鼠实验性结肠炎肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的观察银杏叶提取物对三硝基苯磺酸灌肠诱导大鼠实验性结肠炎肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响及其作用机制。方法大鼠随机分为正常对照组、三硝基苯磺酸模型组、阳性药物对照组、EGB组4组。用三硝基苯磺酸灌肠诱导大鼠实验性结肠炎,评估结肠组织大体形态和组织学评分;生化法检测大鼠肠组织谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及一氧化氮(NO)含量;免疫组化检测肠组织TNF-α,核因子-κBp65(NF-κBp65)蛋白表达。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肠组织诱生型一氧化氮合酶(iNOS)表达。结果EGB组大体形态和组织学评分较模型组明显下降,GSH-Px活性明显增高,NO含量明显减少,结肠黏膜TNF-α,NF-KBp65和iNOS表达明显降低。结论EGB可能通过抑制TNF-α的表达和NF-κBp65及iNOS的激活从而抑制炎症级联来保护TNBS诱导的实验性结肠炎。     

清肾颗粒对腺嘌呤所致慢性肾功能衰竭大鼠血清甲状旁腺素的影响

目的观察清肾颗粒对慢性肾功能衰竭大鼠血清甲状旁腺素水平的干预作用。方法将腺嘌呤摄入量按每日300 mg.kg-1体重给予,制作慢性肾功能衰竭动物模型。用清肾颗粒(每ml含生药0.5 g)治疗,用保肾康(6 g.L-1)作对照。检测大鼠血清甲状旁腺素、肌酐、尿素氮和24 h尿蛋白定量及肾脏病理改变。结果造模各组大鼠上述指标和正常组相比明显增加(P<0.001)。治疗后上述指标和模型组相比明显减少(P<0.001)。结论清肾颗粒可显著降低CRF大鼠血清上述指标,其效果优于保肾康。     

翠云草提取物调控miR-145对肝星状细胞增殖、凋亡的影响

摘要：目的:探讨翠云草提取物对肝星状细胞增殖、凋亡的影响及分子机制。方法:分别用12.5,25.0,50.0μg·ml-1翠云草提取物处理肝星状细胞HSC-T6,分别记为翠云草提取物低、中、高浓度组;未经任何处理的细胞作为对照组。将miR-145转染至HSC-T6细胞中,记为miR-145组;将miR-145转染至HSC-T6细胞后再用50.0μg·ml-1翠云草提取物处理,记为翠云草提取物+miR-145组。细胞计数试剂盒8（CCK-8）检测细胞活性;克隆形成实验检测细胞克隆形成数;蛋白质印迹（Western blot）法检测细胞增殖核抗原Ki67、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（caspase-3）蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测miR-145表达水平。结果:与对照组比较,翠云草提取物中、高浓度组肝星状细胞的吸光度（A）值、克隆形成数、Ki67表达水平显著降低,细胞凋亡率、caspase-3和miR-145表达水平显著升高,且呈浓度依赖性（P<0.05）。过表达miR-145可抑制肝星状细胞HSC-T6增殖,促进细胞凋亡,且miR-145增强了翠云草提取物对肝星状细胞增殖、凋亡的影响。结论:翠云草提取物可通过上调miR-145抑制肝星状细胞增殖、促进细胞凋亡。     

银杏叶提取物对肝纤维化大鼠肝组织GRP78及CHOP表达的影响

目的：观察银杏叶提取物（GbE）对肝纤维大鼠内质网应激通路相关分子GRP78、CHOP表达的影响,探讨GbE抗肝纤维的作用机制。方法：采用40％的CCl4皮下注射（3mL.Kg-1.d-1,2次/周,首剂加倍） 6周诱导大鼠肝纤维化模型,同时分别以200、100、50mg.Kg-1.d-1的GbE灌胃干预6周,空腹取肝组织,RealTime-PCR及免疫组化法分别检测肝组织GRP78及CHOP基因的mRNA及蛋白表达。结果：肝组织GRP78和CHOP的mRNA及蛋白的表达较正常组明显增加（P〈0.05 P〈0.01）;应用高、中、低剂量GbE干预后,大鼠肝组织GRP78和CHOP基因的mRNA及蛋白表达显著下降（P〈0.05 P〈0.01）。结论：肝纤维化大鼠肝脏发生了ERS反应,GbE下调肝纤维化大鼠肝组织内质网应激通路相关分子GRP78和CHOP的mRNA及蛋白的表达可能是其抗肝纤维化作用的机制之一。     

miR-199a在妊娠糖尿病中的表达及参与胰岛素抵抗的作用机制研究

目的　探究微小RNA（miR）-199a在妊娠糖尿病（GDM）中的表达及调控沉默信息调节因子1（SIRT1）/叉头盒转录因子O1（FOXO1）通路参与胰岛素抵抗（IR）的机制。方法　GDM孕妇56例为GDM组,正常孕妇60例为正常孕妇组,实时荧光定量PCR（qPCR）检测2组胎盘中miR-199a水平;计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）;Pearson相关分析miR-199a与HOMA-IR的相关性。体外培养人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo并建立IR模型。miR-199a功能验证：细胞依处理方式不同分为模型组、miRNA inhibitor NC组、miR-199a inhibitor组、miRNA mimic NC组、miR-199a mimic组;qPCR检测各组细胞中miR-199a表达情况,蒽酮法检测细胞内葡萄糖吸收量,试剂盒检测超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平,Western blot检测SIRT1、FOXO1、乙酰化（Ac）-FOXO1蛋白水平,双荧光素酶报告基因实验鉴定miR-199a与SIRT1的靶向关系。结果　与正常孕妇组比较,GDM组胎盘中miR-199a、HOMA-IR水平升高（P＜0.05）;GDM组miR-199a水平与HOMA-IR呈正相关（P＜0.05）。棕榈酸、胰岛素共同作用细胞24 h成功建立IR模型。与模型组和miRNA inhibitor NC组比较,miR-199a inhibitor组miR-199a、MDA水平降低,葡萄糖吸收量、SOD水平、SIRT1蛋白水平升高（P＜0.05）。与模型组和miRNA mimic NC组比较,miR-199a mimic组miR-199a和Ac-FOXO1蛋白表达升高、MDA水平升高,葡萄糖吸收量、SIRT1蛋白水平降低（P＜0.05）。Tarbase数据库分析显示,miR-199a与SIRT1存在互补的结合位点,并经双荧光素酶实验证实。结论　GDM患者胎盘中miR-199a高表达,升高的miR-199a可通过靶向下调SIRT1而促进FOXO1乙酰化,导致IR。     

人基因重组红细胞生成素对慢性肾功能衰竭未透析患者贫血的疗效和肾功能的影响

目的:观察人基因重组红细胞生成素(rHuEPO)对慢性肾功能衰竭未透析患者贫血的疗效和肾功能的影响.方法:39例患者rHuEPO起始剂量100IU/kg,每周3次sc,观察5～30mo.结果:rHuEPO治疗20wk后所有患者贫血明显纠正,平均Hct由(18±2)%上升至(32±3)%(P<0.001),生活质量显著提高.治疗早期Hct上升幅度尿毒症未透析组显著低于氮质血症组.尿毒症未透析组rHuEPO维持剂量显著高于氮质血症组.分别为(150±57.7)和(275.0±42.5)IU·kg~(-1)·wk~(-1)(P<0.01).以血Cr倒数为指标,治疗期间患者肾功能恶化速度与治疗前无显著差别.治疗期间50%患者BP升高.结论:rHuEPO能有效纠正慢性肾功能衰竭未透析患者贫血,不加速肾功能恶化.