Notch及Wnt信号通路与急性T淋巴细胞白血病

急性T淋巴细胞白血病(T acute lymphoid leukemia,TALL)是一种高度恶性的血液系统恶性肿瘤,在儿童和成人中发病率较高,且患者常伴随表达T细胞免疫表型的不成熟淋巴细胞浸润骨髓。流行病学显示,T-ALL分别占儿童ALL的10%~15%及成人ALL的25%。T-ALL患者病情凶险,常伴有高外周血白血病细胞计数、纵隔肿块等症状,部分患者可于初诊时即     

Notch1信号通路与白藜芦醇抗急性T淋巴细胞白血病作用机制研究进展

摘要: 急性T淋巴细胞白血病（T-ALL）是一类预后不良的恶性淋巴细胞增殖性疾病。T-ALL的发生与Notch1及其介导的信号通路密切相关。Hes-1基因是Notch1的靶基因,被激活后通过PTEN/PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制抑癌基因p53表达阻止细胞凋亡,诱导TALL发生。白藜芦醇（Res）是一种具有化学防癌作用的多酚类植物抗生素。Res对T-ALL Molt-4细胞具有抑制增殖、诱导凋亡的作用。但Res是否通过Notch1通路发挥作用及其机制尚不十分清楚。本文就Notch1信号通路与T-ALL的发生、治疗以及Notch1信号通路与白藜芦醇抗T-ALL作用机制的研究现状作一综述。     

急性白血病的治疗及逆转多药耐药的研究

白血病(leukemia)是造血系统的一种恶性肿瘤，临床上分为急性和慢性两型，以急性白血病为多。其多见于儿童及青少年，该病起病急，不治疗一般病程不超过6个月，是小儿时期最常见的恶性肿瘤。15岁以下儿童白血病的发病率为4／10万左右。其特点是白血病细胞在骨髓中恶性增生，并浸润至其他组织与器官，从而产生一系列临床症状。     

IL-7介导的JAK/STAT信号通路在白藜芦醇抗急性T淋巴细胞白血病中的作用研究

目的:观察T-ALL细胞株和小鼠模型中IL-7及JAK/STAT通路中信号分子的变化,探讨白藜芦醇抗T-ALL的作用机制。方法:将T-ALL细胞株Molt4分成对照、DMSO处理和白藜芦醇处理(Res)共3组,其中对照组不做任何处理,DMSO组用0.05%DMSO处理48 h, Res组用200μmol/L白藜芦醇处理48 h。将15只6-8周龄健康雌性C57BL/6J小鼠随机分为正常对照、T-ALL模型(T-ALL)和白藜芦醇处理(Res)共3组,其中对照和T-ALL组均以0.05%DMSO灌胃处理,Res组以10 mg/ml白藜芦醇灌胃处理。采用RT-qPCR法检测各组细胞和小鼠脾脏组织中IL-7、IL-7R及靶基因Pim1 mRNA的表达,CCK-8法检测细胞的增殖情况,Western blot检测各组细胞和小鼠脾脏组织JAK1、JAK3、STAT5、Pim1及磷酸化JAK1(p-JAK1)、磷酸化JAK3(p-JAK3)、磷酸化STAT5(p-STAT5)的蛋白表达,ELISA法检测各组细胞和小鼠血清中IL-7、IL-7R水平。结果:Res抑制Molt4细胞增殖,下调Molt4...     

秦巴硒菇提取物硒蛋白多糖荷瘤药物血清促慢性红白血病细胞株K562凋亡的实验研究

目的:探讨秦巴硒菇提取物硒蛋白多糖制备的含药血清对慢性红白血病细胞株(K 562)凋亡的影响。方法:建立荷瘤小鼠模型,采用血清药理学方法制备硒蛋白多糖含药血清,常规培养K 562细胞。通过甲基噻唑基四唑(M TT)比色法检测硒蛋白多糖含药血清对肿瘤生长的抑制率;用形态学和DNA电泳技术观察细胞凋亡的发生;用比色法检测凋亡相关基因caspase 3的表达。结果:秦巴硒菇提取物硒蛋白多糖含药血清可显著抑制K 562细胞生长,且呈时间剂量依赖性。形态学、DNA电泳结果均证实有凋亡发生,与空白血清组比较,caspase 3基因上调明显。结论:秦巴硒菇提取物硒蛋白多糖含药血清可促进K 562细胞凋亡,其机制可能与上调caspase 3基因有关。     

Wnt/β-catenin信号通路在肝癌耐药中的作用研究

目的 建立肝癌顺铂耐药细胞系,探讨Wnt/β-catenin信号通路在肝癌顺铂耐药中的作用.方法 使用顺铂逐步增加剂量法诱导人肝癌HepG-2细胞,以建立其多药耐药细胞株HepG-2/DDP;MTT细胞毒实验检测顺铂对HepG-2和HepG-2/DDP细胞的生长抑制作用;荧光定量-PCR检测β-catenin 基因的表达;基因转染双链SiRNA干扰β-catenin基因的表达;Western blot实验检测目的蛋白的表达改变.结果 成功建立了人肝癌HepG-2顺铂耐药细胞株;MTT细胞毒实验结果显示顺铂对HepG-2和HepG-2/DDP细胞的IC50值分别为(2.29±0.14) μmol/L和(20.51±0.84)μmol/L(t=95.68,P＜0.01),与HepG-2细胞比较,HepG-2/DDP细胞对顺铂耐药8.96倍.荧光定量PCR结果显示:HepG-2和HepG-2/DDP细胞中β-catenin基因表达的2-△Ct值分别为0.323±0.065和0.674±0.097(P＜0.01),Western blot检测也显示β-catenin蛋白的表达在HepG-2/DDP细胞也显著高于HepG-2细胞.化学合成的靶向SiRNA可以显著下调β-catenin的表达,顺铂对照组、SiRNA靶向干扰组、SiRNA阴性干扰组HepG-2/DDP细胞的IC50值分别为(21.02±1.64)、(6.23±0.68)、(20.44±1.26) μmol/L,对照组和SiRNA靶向干扰组之间差异有统计学意义(P＜0.01).结论 顺铂耐药细胞HepG-2/DDP出现了Wnt/β-catenin信号通路的激活,SiRNA干扰β-catenin基因表达可显著提高顺铂耐药细胞HepG-2/DDP对顺铂的敏感性,为克服肝癌顺铂新靶点的寻找提供了理论依据.     

难治性急性白血病、恶性淋巴瘤多药耐药基因表达及其逆转研究

目的：判断环孢素Ａ（ＣｓＡ）加地尔硫Ｚｈｕｏ对难治性急性白血病、恶性淋巴瘤（ＮＨＬ）多药耐药基因逆转的疗效。方法：采用逆转录ＰＣＲ扩增检测２０１例恶性血液病ｍｄｃｌ表达情况,用高效液相层色法测定ＣｓＡ血药浓度。对１２例对照组及１２例逆转组的难治性急性白血病、ＮＨＬ采用联合化疗方案、ＣｓＡ加地尔硫Ｚｈｕｏ进行逆转,并分析,结果：２０１例恶性血液病ｍｄｒｌ表达情况为ｍｄｒｌ表达阳性９４例,阳性率为４６     

miR-1294靶向SOX15调节Wnt/β-catenin信号通路促进小儿急性淋巴细胞白血病细胞增殖的机制研究

目的：探讨miRNA异常表达对小儿急性淋巴细胞白血病（ALL）细胞增殖能力的影响及其相关机制。方法：收集2018年7月至2021年3月于海南医学院第二附属医院就诊的ALL患儿和健康受试者各15例，对其骨髓细胞进行miRNA测序，并使用qRT-PCR进行验证。将miR-1294和miR-1294抑制分子（miR-1294-inhibitor）转染至Nalm-6细胞，通过CCK-8和集落形成实验检测Nalm-6细胞增殖情况，Western blot和ELISA检测Nalm-6细胞凋亡情况。对miR-1294进行生物学预测，寻找靶基因，使用荧光素酶报告实验进行验证。将si-SOX15转染至Nalm-6细胞，Western blot检测Wnt信号通路相关蛋白表达情况，并验证si-SOX15对Nalm-6细胞增殖和凋亡的影响。结果：与健康受试者相比，ALL患者骨髓细胞中有22个miRNA显著上调，其中miR-1294上调最为显著。此外，在ALL患者骨髓细胞中SOX15基因表达水平显著降低。与NC组相比，miR-1294组Wnt3a和β-catenin蛋白表达水平升高、细胞增殖速度增加、集落形成数...     

Notch信号通路与慢性淋巴细胞白血病的研究进展

慢性淋巴细胞白血病（chronic lymphocytic leukemia,CLL）是一种惰性B淋巴细胞肿瘤,临床病程异质性较大.Notch信号通路是进化上十分保守的一条信号通路,参与调控正常细胞的生存、增殖、分化、凋亡等生理过程.近年来,越来越多学者研究Notch信号通路与CLL的关系,发现CLL细胞中存在Notch分子高表达或突变,与患者预后相关,参与肿瘤细胞抗凋亡及耐药机制等等.本文就近年来CLL与Notch信号通路的研究进展作一综述,包括CLL细胞Notch分子表达水平,CLL细胞Notch分子抗凋亡和耐药,CLL细胞中Notch分子突变,Notch分子与CL预后关系和Notch分子抑制剂应用前景等.     

浙贝母碱逆转白血病细胞多药耐药的研究

浙贝母因其以化痰散结为主要药用功能,我们常常配合化疗药物治疗复发和难治性白血病（或）肿瘤,往往获得理想疗效。浙贝母中含有多种活性成分,其中浙贝母碱（贝母素甲,Ｐｅｉｍｉｎｅ）是其主要活性成分之一,属异甾类生物碱中的瑟文类（Ｃｅｖｉｎｅｇｒｏｕｐｓ）生物碱［１］。为了探讨浙贝母抗白血病的作用机制,我们研究了浙贝母碱逆转白血病细胞多药耐药作用。材料和方法１　细胞株　Ｋ５６２／Ａ０２：多药耐药细胞株,以Ｐ糖蛋白（Ｐｇｐ）蛋白升高为主要耐药机制。由中国医学科学院血液学研究所药物室提供。对阿霉素耐药４０…     

miR-21介导Wnt信号通路诱导胰腺癌细胞凋亡的机制研究

目的 选择miR-21介导Wnt信号通路诱导胰腺癌细胞凋亡的机制研究。方法 选择人胰腺腺癌细胞株ASPC-1,分为As组（正常ASPC-1细胞）、Ay组（ASPC-1细胞转染+miR-21-inhibitions）、Nc组（ASPC-1细胞转染+miR-21-阴性对照）。RT-PCR法检测Wnt1、β-catenin水平变化,Westernblot法检测Wnt1、β-catenin蛋白,Transwell法、MTT法检测ASPC-1细胞的迁移、活力变化,流式细胞仪检测ASPC-1细胞凋亡率。结果 三组miR-21、Wnt1、β-catenin水平、Wnt1蛋白、β-catenin蛋白、ASPC-1细胞凋亡率比较,差异均有统计学意义（F分别=55.47、14.30、123.60、3.54、5.85、30.27,P均<0.05）。与As组、Nc组比较,Ay组miR-21、Wnt1、β-catenin水平、Wnt1蛋白、ASPC-1细胞凋亡率有明显下降,β-catenin蛋白明显上升（P均<0.05）,ASPC-1细胞迁移能力明显下降。培养24 h、48 h、72 h时,三组间A...     

秦巴硒菇提取物对NCG小鼠慢性髓系白血病模型体内抗肿瘤的初步研究

目的:验证秦巴硒菇提取物酸性RNA蛋白复合物FA-2-b-β诱导肿瘤细胞凋亡及免疫调节的作用.方法:采用CCK-8法计算FA-2-b-β对K562细胞的增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率.通过尾静脉/皮下注射K562细胞构建慢性髓系白血病模型,观察小鼠成瘤负荷,每天2次观察小鼠一般情况,定期检测小鼠外周血细胞数.RT...     

急性髓性白血病膜糖蛋白介导的多药耐药

急性白血病治疗中存在的主要问题是白血病细胞对化疗药物产生耐药性。这种现象由多种耐药机制所致,包括细胞对化疗药物反应所经历的凋亡失败或药物到达及(或)影响细胞内目标的失败。本综述重点讨论后一种机制，特别是细胞内药物转运耐药机制。有报道ATP结合盒(ABC)转运体P-糖蛋白(P—gp)与急性髓性白血病顸后相关。另外更引人瞩目的是ABC转运体多药耐药蛋白(MRP)和穹隆转运体肺耐药蛋白(LRP)的表达在AML也与预后有关。     

复发难治性急性白血病多药耐药性及耐药逆转的体内外研究

目的 :探讨复发难治性急性白血病多药耐药性及耐药性的逆转。方法 :采用RT PCR法检测白血病细胞的多药耐药性 ,采用MTT法进行体外药敏及耐药逆转试验。结果 :35例患者中MDR1mRNA阳性表达例数为 2 6例(74.3% ) ,体外耐药逆转环胞素组逆转率 6 4.7%、异搏定组 41.2 %、两药合用组 76 .5 % ;临床耐药逆转环胞素组逆转率 14.3%、异搏定组 45 .8%、两药合用 37.5 % ;结论 :复发难治性急性白血病MDR1mRAN高表达 ,环胞素和异搏定单用及两药联合应用体外逆转效果明显优于临床疗效 ,耐药逆转药物的剂量及给药方式可能是影响逆转疗效的重要因素     

异硫氰酸苯已酯抑制T细胞白血病Jurkat细胞Wnt/β-catenin信号通路的研究

本研究目的在于探索研究异硫氰酸苯己酯(PHI)在体外对人类T细胞白血病Jurkat细胞Wnt/β联蛋白(catenin)信号通路及组蛋白调控、细胞凋亡和增殖的影响。用MTT方法检测PHI作用后Jurkat细胞的增殖率变化;用流式细胞术观察细胞凋亡;用Western blot观察Jurkat细胞Wnt/β-catenin信号转导通路相关蛋白β-catenin、TCF、c-myc、cyclinD1水平的变化,以及组蛋白甲基化H3K4,H3K9、乙酰化H3,H4的变化。结果表明,PHI可抑制Jurkat细胞增殖,诱导细胞凋亡,呈浓度和时间依赖性,48 h的IC50约为20μmol/L;PHI处理3 h后上调组蛋白乙酰化H3、H4和组蛋白甲基化H3K4,下调组蛋白甲基化H3K9,7 h时作用更明显;PHI作用3 hβ-catenin表达水平无变化,7 h后Wnt/β-catenin信号转导通路β-catenin及其周期相关基因TCF、c-myc、cyclinD1表达均下降。结论:PHI抑制Jurkat细胞Wnt/β-catenin信号转导通路,调控组蛋白甲基化、乙酰化,从而诱导细胞凋亡,抑制细胞增殖。     

CsA逆转急性白血病细胞多药耐药的药物敏感性实验观察

ＣｓＡ逆转急性白血病细胞多药耐药的药物敏感性实验观察孟海涛林修基林茂芳多药耐药是急性白血病（ＡＬ）治疗失败的主要原因之一，细胞表现过度表达耐药相关糖蛋白（ｐ１７０）［１］。环孢霉素Ａ（ＣｓＡ）作为免疫抑制剂，同时具有非免疫抑制作用，与ｐ１７０结合，达...     

序列特异性短发夹状RNA逆转白血病多药耐药性研究

本研究旨在构建并筛选MDR1序列特异性短发夹状RNA干扰载体,研究其对K562／A02细胞的影响。采用脂质体介导方法,将含mdr1—shRNA质粒转入K562／A02细胞,经G418筛选得到稳定表达细胞株,用实时定量RT—PCR和Westemblot分别检测干扰后mdrlmRNA水平及蛋白水平的表达变化,通过ccK8测定干扰后细胞对化疗药的敏感性变化,Rhodamine123外排实验检测P—gP功能的变化。结果发现：与对照组相比,4种MDR1-shR—NA载体均能显著下调P—gP的表达,其中508—526靶住点的shRNA作用效果最好。结论：筛选得到的MDR1-shRNA载体能够显著下调MDR1的表达,逆转耐药表型,为后续进行的动物实验研究创立了条件。     

急性髓细胞白血病患者多药耐药基因mdr1表达的研究

为了评估患预后，用ＲＴ－ＰＣＲ方法研究了２７例急性髓细胞白血病（ＡＭＬ）患骨髓细胞中ｍｄｒ１ｍＲＮＡ表达，同时用３例正常人白细胞、敏感Ｋ５６２和耐药Ｋ５６２／ＶＣＲ细胞系作对照。     

干扰素逆转白血病细胞多药耐药性的研究及机制的初步探讨

以人白血病细胞系Ｋ５６２／Ｓ及多药耐药细胞系Ｋ５６２／Ａ０２为对象，通过ＭＴＴ法测柔红霉素（ＤＮＲ）细胞毒性（ＩＣ５０），用流式细胞仪及荧光法测细胞内ＤＮＲ浓度，逆转录－多聚酶链反应法检测多药耐药基因ｍＲＮＡ，发现小剂量ＩＦＮ－α（５００Ｕ／ｍｌ）可增加ＤＮＲ对Ｋ５６２／Ａ０２细胞的毒性作用。加用ＩＦＮ－α与未加用组相比，ＩＣ５０下降至原来的１／１３．７，而ＩＬ－２（２５０Ｕ／ｍｌ）、ＧＭ－ＣＳＦ（０．１５μｇ／ｍｌ）、ＴＮＦ（２５０Ｕ／ｍｌ）作用组与对照组ＩＣ５０无明显改变。并发现ＩＦＮ－α可提高耐药系Ｋ５６２／Ａ０２细胞内ＤＮＲ浓度，在１５０分钟时升高了６．３倍。ｍｄｒ１ｍＲＮＡ在ＩＦＮ－α作用组与对照组无明显改变，认为ＩＦＮ－α不是通过下调ｍｄｒ１ｍＲＮＡ而达逆转作用     

急性白血病多药耐药形成的分子机制研究进展

目前化学药物是治疗白血病主要手段,但白血病的获得性或诱导耐药是导致化疗失败和预后较差的主要原因之一.多药耐药(Multidrug Resistance,MDR)仍是白血病获得性或诱导耐药的主要特征,其产生的机制十分复杂,是多种耐药机制共同作用的结果.因此,阐明白血病的MDR机制对于提高白血病治疗效果意义重大,本文就近年来有关白血病MDR分子机制的研究进展作一综述.