基于AMPK/Sirt1通路延龄草总皂苷对脑缺血再灌注继发肺损伤大鼠的保护作用

摘 要 目的：探讨延龄草总皂苷（TST）对脑缺血再灌注大鼠肺组织的影响及其可能机制。 方法: 选取80只雄性大鼠随机分为8组：假手术组、模型组、阳性对照组（尼莫地平,200 mg·kg-1）、TST低（50 mg·kg-1）、中（100 mg·kg-1）、高（200 mg·kg-1）剂量组、腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）/沉默信息调节因子1（Sirt1）通路抑制剂组(1 mg·kg-1)、TST+AMPK/Sirt1通路抑制剂组(200 mg·kg-1+1 mg·kg-1),每组10只。苏木精 伊红（HE）染色检测大鼠肺组织病理变化;检测各组大鼠氧分压（PaO2）;酶联免疫吸附（ELISA）法检测各组大鼠支气管肺泡灌洗液中炎性因子水平;检测各组大鼠肺组织氧化应激水平。蛋白免疫印迹（Western blot）法检测肺组织AMPK、磷酸化AMPK（p AMPK）、Sirt1蛋白表达水平。 结果: 模型组大鼠肺损伤评分较假手术组高,而阳性对照组与TST不同剂量组均较模型组低（P＜0.05）;模型组大鼠PaO2、氧合指数（OI）、超氧化物歧化酶（SOD）、p AMPK及Sirt1蛋白表达水平均较假手术组低,而阳性对照组与TST组（高剂量）较模型组高,AMPK/Sirt1通路抑制剂组与TST+AMPK/Sirt1通路抑制剂组较TST组低,AMPK/Sirt1通路抑制剂组较TST+AMPK/Sirt1通路抑制剂组低（P＜0.05）;模型组IL-18、IL-1β、TNF-α、IL 6、肺组织湿干质量比、MDA、ROS、Ac NF κB p65蛋白表达水平均较假手术组高,而阳性对照组与TST组（高剂量组）较模型组低,AMPK/Sirt1通路抑制剂组与TST+AMPK/Sirt1通路抑制剂组较TST组高,AMPK/Sirt1通路抑制剂组较TST+AMPK/Sirt1通路抑制剂组高（P＜0.05）;阳性对照组与TST组比较差异均无统计学意义（P＞0.05）。 结论: TST可通过激活AMPK/Sirt1通路并减轻肺组织炎性反应及氧化应激反应进而减缓脑缺血再灌注继发肺损伤。     

盐酸青藤碱对实验性结肠炎小鼠TLR4/NF-κB信号通路的影响

摘 要 目的：研究盐酸青藤碱对葡聚糖硫酸钠诱导的实验性结肠炎小鼠的治疗作用。方法: 制备实验性结肠炎小鼠模型,随机分为空白对照组、葡聚糖硫酸钠（DSS）模型对照组、柳氮磺吡啶组及青藤碱低、中、高剂量组（n=6）。空白对照组与DSS模型对照组每天给予生理盐水0.2ml,柳氮磺吡啶组（100 mg·kg-1）,青藤碱低剂量组（30 mg·kg-1）、中剂量组（90 mg·kg-1）、高剂量组（270 mg·kg-1）,连续灌胃10d。评价各组小鼠疾病活动指数（DAI）和组织学损伤评分,Western blotting检测结肠组织中Toll样受体4（TLR4）、髓样分化因子（Myd88）表达,免疫组织化学法检测结肠组织中核转录因子 κB（NF-κB）的表达。结果:DSS模型对照组小鼠DAI和组织损伤评分、结肠组织中TLR4、Myd88、NF-κB表达均显著高于空白对照组（P＜0.01）,柳氮磺吡啶组和青藤碱低、中、高剂量组均能降低DAI和组织损伤评分,降低结肠组织中TLR4、Myd88、NF-κB表达（P＜0.01）,且呈浓度依赖性。柳氮磺吡啶组与青藤碱中、高剂量组间差异无统计学意义（P>0.05）。结论:青藤碱能通过影响实验性结肠炎小鼠TLR4/NF-κB信号通路,降低TLR4、Myd88、NF-κB表达,发挥治疗作用。     

黄连总生物碱对溃疡性结肠炎模型大鼠肠黏膜损伤及p38 PPARγ/NF-κB通路的影响

摘 要 目的：黄连总生物碱对溃疡性结肠炎（UC）模型大鼠肠黏膜损伤的保护作用,并初步探究其可能的作用机制。 方法: 将60只大鼠随机分为6组：正常对照组、模型组、黄连总生物碱低（0.1 g·kg-1）、中（0.2 g·kg-1）、高（0.3 g·kg-1）剂量组、阳性对照组（柳氮磺吡啶,0.6 g·kg-1）组,每组10只。建立UC大鼠模型,造模4 d后各组灌胃给药,1次/d,给药容积为每只10 ml,正常对照组和模型组给予等量生理盐水,连续给药2周。观察大鼠一般情况,评估大鼠结肠组织大体形态学损伤情况;HE染色观察结肠组织病理损伤情况;Elisa法检测结肠组织匀浆液中白介素 6（IL 6）、白介素 10（IL 10）、肿瘤坏死因子 α（TNF α）水平;Western blot检测结肠组织中p38、过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）、核因子κB（NF-κB）蛋白表达;免疫组化法检测结肠组织中PPARγ、NF-κB蛋白阳性表达情况。 结果: 正常对照组大鼠无异常性改变;模型组大鼠毛发干枯、精神倦怠、肛周污秽、大便黏腻、体型明显消瘦,经黄连总生物碱干预后,大鼠体质量升高,精神状态好转,饮食增加,大便粘腻、出血情况得到有效改善。与正常对照组相比,模型组结肠组织大体形态损伤评分、肠黏膜损伤评分、IL 6和TNF α水平、p p38 MAPK和NF-κB蛋白表达水平、NF-κB蛋白表达阳性率显著升高,IL 10水平、PPARγ蛋白表达水平和阳性率显著降低（P＜0.05）。与模型组相比,黄连总生物碱各剂量组和阳性对照组结肠组织大体形态损伤评分、肠黏膜损伤评分、IL 6和TNF α水平、p p38 MAPK和NF-κB蛋白表达水平、NF-κB蛋白表达阳性率显著降低,IL 10水平、PPARγ蛋白表达水平和阳性率显著升高（P＜0.05）,黄连总生物碱组的作用呈剂量依赖性（P＜0.05）。 结论: 黄连总生物碱能够缓解溃疡性结肠炎模型大鼠肠黏膜损伤,激活PPARγ,抑制p38/NF-κB通路,减轻结肠组织炎症反应。     

二甲双胍调控PI3K/Akt通路对心肌缺血再灌注模型大鼠心肌细胞自噬的影响研究

摘 要 目的：探讨二甲双胍调控磷脂酰肌醇3 激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）通路对心肌缺血再灌注模型大鼠心肌细胞自噬的影响。 方法: 将60只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、二甲双胍低（150 mg·kg-1）、中（300 mg·kg-1）、高（500 mg·kg-1）剂量组、自噬激动剂组（雷帕霉素,5 mg·kg-1）,制备心肌缺血再灌注大鼠模型,药物处理组于建模前3 d以不同剂量二甲双胍及雷帕霉素每天灌胃治疗,模型组及假手术对照组采用等体积生理盐水灌胃,持续3 d。造模成功12 h后,处死大鼠,三苯基氯化四氮唑（TTC）染色观察各组大鼠心肌梗死面积,酶联免疫吸附实验（ELISA）试剂盒检测血清中磷酸肌酸同工酶（CK MB）及肌钙蛋白I（cTnI）含量,免疫组织化学检测自噬相关蛋白Beclin 1、LC3、P62阳性细胞比例,蛋白免疫印迹（Western blot）检测自噬相关蛋白Beclin 1、LC3（包括LC3 Ⅰ、LC3 Ⅱ）、P62及PI3K/Akt 通路蛋白p PI3K、PI3K、Akt、p Akt表达情况。 结果: 与假手术组比较,模型组大鼠心肌梗死面积、血清中CK MB、cTnI含量、心肌组织中P62阳性细胞比例、P62、p PI3K、p Akt蛋白表达明显升高,心肌组织中Beclin 1、LC3阳性细胞比例、Beclin 1、LC3 Ⅱ蛋白表达明显降低（P＜0.05）;心肌组织中LC3 Ⅰ、PI3K、Akt蛋白表达差异无统计学意义（P＞0.05）。与模型组比较,各药物处理组大鼠心肌梗死面积、血清中CK MB、cTnI含量、心肌组织中P62阳性细胞比例、P62、p PI3K、p Akt蛋白表达明显降低,心肌组织中Beclin 1、LC3阳性细胞比例、Beclin 1、LC3 Ⅱ蛋白表达明显升高（P＜0.05）,且二甲双胍各组呈剂量依赖性。二甲双胍低、中剂量组与自噬激动剂组比较,以上各指标差异有统计学意义（P＜0.05）。 结论: 二甲双胍通过促进心肌缺血再灌注模型大鼠心肌细胞自噬,发挥心肌保护作用,其机制可能与下调PI3K/Akt通路有关。     

芦荟大黄素对胃癌SGC-7901细胞凋亡、自噬及p53/AMPK/mTOR信号通路的影响

摘 要 目的：探讨芦荟大黄素（AE）对胃癌SGC-7901细胞凋亡、自噬及p53蛋白（p53）/磷酸腺苷蛋白激酶（AMPK）/雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路的影响。 方法: 实验分为对照组（AE 0 μmol·L-1）、AE低（10 μmol·L-1）、中（30 μmol·L-1）、高（50 μmol·L-1）剂量组和自噬阻断剂3 甲基腺嘌呤（3 MA）+ AE组（20 μmol·L-1+50 μmol·L-1）。CCK 8法检测各组细胞增殖抑制率,采用透射电镜及单丹磺酰尸胺（MDC）染色观察各组细胞自噬体及自噬溶酶体的变化,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP 缺口末端标记测定（TUNEL）法观察各组细胞凋亡率变化,Western blot法检测各组细胞p53、AMPK、mTOR信号通路蛋白及自噬标致蛋白Beclin 1蛋白（Beclin 1）、微管相关轻链蛋白Ⅰ（LC3Ⅰ）及微管相关轻链蛋白Ⅱ（LC3Ⅱ）表达情况。 结果: 与对照组相比,AE各剂量组及3 MA+AE组细胞的增殖抑制率、凋亡指数（AI）显著升高（P<0.05）,且呈剂量依赖性;AE中、高剂量组的增殖抑制率和AI与3 MA+AE组相比差异有统计学意义（P<0.05）。与对照组相比,AE各剂量组细胞自噬体、自噬空泡增多,溶酶体积分光密度（IOD）/所选区域面积（Area）值及p53、AMPK、Beclin 1表达显著升高,mTOR表达及LC3Ⅰ/LC3Ⅱ比值显著降低（P<0.05）,且呈剂量依赖性;3 MA+AE组细胞自噬体、自噬空包等超微结构减少,IOD/Area值及p53、AMPK及Beclin 1表达显著降低,mTOR表达及LC3Ⅰ/LC3Ⅱ比值显著升高（P<0.05）。 结论: AE可通过提高胃癌SGC-7901细胞自噬水平,诱导SGC-7901细胞凋亡,其机制可能与促进p53/AMPK/mTOR信号通路表达有关。     

基于IKK2/NF-κB信号通路探讨虫草素对大鼠创伤性脑损伤后神经元的保护作用

摘 要 目的：基于IκB激酶2/核因子κB（IKK2/NF-κB）信号通路探讨虫草素对大鼠创伤性脑损伤后神经元的保护作用。 方法: 将120只SD大鼠分为6组：正常对照组、模型组、阳性对照组（盐酸纳美芬,20.0 mg·kg-1）、虫草素低、中、高剂量组（20.0,40.0,80.0 mg·kg-1）,每组20只。除正常对照组外,其余各组建立大鼠创伤性脑损伤模型,盐酸纳美芬组及虫草素各剂量组灌胃给予相应药物,1次/d,持续1周,正常对照组及模型组给与等体积生理盐水。实验结束后,测定大鼠认知功能,制作海马病理切片,测定海马组织IKK2、NF-κB mRNA及蛋白水平,测定白细胞介素 4（IL 4）、白细胞介素 6（IL 6）、肿瘤坏死因子 α（TNF α）水平。 结果: 与正常对照组比较,模型组逃避潜伏期、IKK2、NF-κB mRNA及蛋白表达水平、IL 4、IL 6、TNF α水平显著升高（P<0.05）,经过原平台位置的次数、原平台象限停留的时间显著降低（P<0.05）;正常对照组海马区神经元细胞完整,结构正常,染色清晰,核呈卵圆形位于中央;模型组海马区可见大量坏死神经元,且细胞脱失现象明显,细胞核固缩;虫草素低、中剂量组坏死神经元细胞减少,但神经元疏松紊乱,细胞核固缩,脱失现象明显;盐酸纳美芬组、虫草素高剂量组海马区见少量坏死神经元细胞,且神经元细胞结构较为完整,神经元细胞核呈卵圆形位于中央,分布均匀。与模型组比较,盐酸纳美芬组、虫草素各剂量组逃避潜伏期、IKK2、NF-κB mRNA及蛋白表达水平、IL 4、IL 6、TNF α水平显著降低（P<0.05）,经过原平台位置的次数、原平台象限停留的时间显著升高（P<0.05）,且虫草素各剂量组呈明显的剂量 效应关系（P<0.05）。虫草素低、中剂量各检测指标与盐酸纳美芬组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。结论: 虫草素能减轻大鼠创伤性脑损伤后海马神经元的损伤,其机制可能与虫草素可通过抑制IKK2、NF-κB mRNA及蛋白的表达进而抑制炎性因子IL 4、IL 6、TNF α的表达有关。     

一种中草药组方对裸鼠皮肤衰老的影响研究

摘 要 目的：考察一种中草药组方对D 半乳糖联合紫外线（UV）光照诱导衰老模型裸鼠皮肤的影响。方法: 每日皮下注射D 半乳糖1 000 mg·kg-1·d-1联合350 ~ 400 nm UV持续照射40 min,连续40 d,诱导亚急性衰老模型。雄性裸鼠随机分为正常对照组,模型组,中草药组方制剂低剂量组（4.16 ml·kg-1）、中剂量组（8.33 ml·kg-1）、高剂量组（16.66 ml·kg-1）,阳性对照组（纽崔莱润妍饮品8.33 ml·kg-1）,每组10只。于造模第11天分别灌胃给药30 d。检测血清中透明质酸,皮肤中透明质酸、羟脯氨酸、总胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白、弹性蛋白的含量以及皮肤含水量;HE染色观察皮肤形态学改变。结果: 与模型组比较,中草药组方制剂中剂量组皮肤透明质酸含量显著增加（P <0.05）,高剂量组各项生化指标指标均有显著改善（P <0.05或P<0.01）;中、高剂量组各项指标与阳性对照组基本相当（P＞0.05,且低、中、高剂量组间无明显差异（P＞0.05））。中草药组方制剂中、高剂量组皮肤含水量显著增加（P <0.01）,与阳性对照组相当（P＞0.05）;低剂量组含水量明显低于高剂量组与阳性对照组（P＞0.05）。中草药组方制剂中、高剂量组与阳性对照组裸鼠。衰老皮肤的形态明显改善。结论: 该中草药组方具有一定的体内抗皮肤衰老作用。     

基于Nrf 2/HO 1/NF-κB通路探讨栀黄止痛散汤对急性痛风性关节炎大鼠的保护作用

摘 要 目的：探究栀黄止痛散汤对痛风性关节炎（AGA）大鼠的保护作用以及对NF E2相关因子2（Nrf 2）/血红素氧合酶 1/（HO 1）/核转录因子κB（NF-κB）通路的影响。 方法: 采用随机数字表法将90只SD大鼠分为正常对照组、模型组（踝关节腔注射尿酸钠复制AGA大鼠）、栀黄止痛散汤低（2.5 g·kg-1）、中（5 g·kg-1）、高（10 g·kg-1）剂量组、阳性对照组（秋水仙碱 1 mg·kg-1）,每组15只。酶联免疫法（ELISA）检测关节液中白细胞介素 6(IL 6)、肿瘤坏死因子 α(TNF α)、白细胞介素 1β(IL 1β)、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平,造模后对大鼠步态、关节炎症指数进行分级评定,于造模前以及造模后6,12,24,48 h采用容积测定法检测裸关节肿胀度;苏木精 伊红染色法（HE）观察踝关节组织形态学变化情况,实时荧光定量PCR（RT PCR）测定关节组织中Nrf 2、HO 1mRNA表达,免疫印迹法（WB）测定关节组织中Nrf 2、HO 1、P P65、P65、P IKBa、IKBa蛋白表达。 结果: 与正常对照组相比,模型组大鼠步态、关节炎症指数分级、6,12,24,48 h关节肿胀度、关节液中TNF α、IL 6、IL 1β、MDA水平、关节组织中P P65、P IKB蛋白表达显著升高,SOD水平及Nrf 2、HO 1 mRNA和蛋白表达显著降低（P＜0.05）。与模型组相比,栀黄止痛散汤组和阳性对照组大鼠步态、关节炎症指数分级、6,12,24,48 h关节肿胀度、关节液中TNF α、IL 6、IL 1β、MDA水平、关节组织中P P65、P IKB蛋白表达显著降低,SOD水平及Nrf 2、HO 1 mRNA和蛋白表达显著升高,且栀黄止痛散汤组具有剂量依赖性（P＜0.05）。结论: 栀黄止痛散汤能够降低AGA大鼠关节炎症反应,缓解关节肿胀,其可能通过激活Nrf 2/HO 1/NF-κB通路来实现。     

益母草碱对小鼠肝药酶含量的影响

摘 要 目的：研究益母草碱对小鼠肝药酶含量的影响。 方法: 将40只ICR小鼠随机分为5组：空白对照组、益母草碱高（120 mg·kg-1）、中（90 mg·kg-1）、低剂量组（60 mg·kg-1）、阳性对照组（苯巴比妥钠,80 mg·kg-1）,每组8只。益母草碱组灌胃给药,1次/d,连续进行7 d;阳性对照组腹腔注射给药,1次/d,连续进行5 d;空白对照组给予同等体积的生理盐水。检测肝微粒体蛋白、细胞色素P450酶（CYP450）、细胞色素b5（CYPb5）、氨基比林N 脱甲基酶（ADM）、红霉素N 脱甲基酶（ERD）、谷胱甘肽S 转移酶（GST）含量。结果: 与空白对照组相比,益母草碱各剂量组肝微粒体蛋白含量变化不明显（P>0.05）,CYP450、CYPb5、ADM含量显著降低（P<0.01）,中、高剂量组的ERD和高剂量组的GST含量显著降低（P<0.01）。益母草碱各剂量组与阳性对照组相比,以上各指标差异均有统计学意义（P<0.01）。 结论: 益母草碱能明显降低小鼠肝微粒体肝药酶的含量,下调CYP3A和CYP2E1的表达,其作用效果与益母草碱给药剂量相关。     

丹参提取物改善大鼠重症急性胰腺炎肺损伤模型的ROS-NLRP3炎症小体信号通路机制

摘 要 目的：探讨活性氧簇（ROS） 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NLRP3）炎症小体信号通路在丹参提取物改善急性胰腺炎肺损伤大鼠的作用机制。 方法: 60只SD大鼠随机分组5组：假手术组、模型组、丹参提取物（1.5 g·kg-1）组、ROS抑制剂组[N 乙酰 L 半胱氨酸（NAC）,20 mg·kg-1]、丹参提取物+NAC组（1.5 g·kg-1＋20 mg·kg-1）,每组12只。以逆行胆胰管注射5%牛磺胆酸钠（1 ml·kg-1）法建立急性胰腺炎肺损伤大鼠模型,各组灌胃给药,模型组和假手术组给予等量生理盐水,qd,持续5 d。处死大鼠,测量腹水量、右肺干质量、右肺湿质量,计算湿质量/干质量（W/D）比值,采用苏木精 伊红（HE）染色法对大鼠肺组织病理症状进行Holfbauer评分,以全自动血气分析检测仪检测动脉血中氧分压（PaO2）、二氧化碳分压（PaCO2）、氧合指数（OI）,用酶联免疫吸附（ELISA）法检测血清肿瘤坏死因子 α（TNF α）、白介素 6（IL 6）水平,ROS检测试剂盒检测肺组织中ROS水平,蛋白免疫印迹（Western blot）法检测NLRP3、半胱氨酸蛋白酶 1（caspase 1）、凋亡相关的斑点样蛋白（ASC）表达。 结果: 与假手术组比较,模型组大鼠腹水量、W/D比值、Holfbauer评分、PaCO2、TNF α、IL 6、ROS水平、NLRP3、caspase 1、ASC蛋白表达显著升高（P＜0.05）,PaO2、OI显著降低（P＜0.05）;与模型组比较,各药物处理组大鼠腹水量、W/D、Holfbauer评分、PaCO2、TNF α、IL 6、ROS水平、NLRP3、caspase 1、ASC蛋白表达显著降低（P＜0.05）,PaO2、OI显著升高（P＜0.05）;与丹参提取物组及NAC组分别比较,丹参提取物+NAC组大鼠腹水量、W/D、Holfbauer评分、PaCO2、TNF α、IL 6、ROS水平、NLRP3、caspase 1、ASC蛋白表达均显著降低（P＜0.05）,PaO2、OI显著升高（P＜0.05）。结论: 丹参提取物可以保护急性胰腺炎肺损伤大鼠的肺组织,可能通过下调ROS-NLRP3炎症小体信号实现。     

苦参碱促进胰高血糖素样肽1分泌与肠苦味受体途径的相关性研究

摘 要 目的：研究苦味物质苦参碱促进胰高血糖素样肽1（GLP 1）分泌与肠苦味受体途径的相关性。方法: 噻唑蓝比色法（MTT）测定苦参碱对小鼠肠道内分泌细胞株（STC 1）增殖的影响;采用ELISA法检测培养基上清中的GLP 1及胞内三磷酸肌醇（IP3）含量;采用荧光分光光度仪进行Fluo 3荧光检测STC 1细胞内游离钙离子浓度;免疫印迹法（Western blot）检测磷脂酶C β2（PLC β2）、α 味导素蛋白（Gαgust）的表达水平。结果: 苦参碱（0.2,0.5,1,5,10,15,20 mmol·L-1）可浓度和时间依赖性抑制STC 1细胞增殖,作用24,48,72 h处理后的半数抑制浓度（IC50）分别为10.32,8.37,6.58 mmol·L-1;与正常对照组比较,苦参碱中、高剂量组（6,12 mmol·L-1）可显著升高STC 1细胞内IP3含量（P<0.05）及胞内游离钙离子的浓度（P<0.05）。苦参碱高剂量组（12 mmol·L-1）可明显升高Gαgust蛋白表达量（P<0.05）。结论: 苦参碱可通过激活肠上苦味受体下游信号分子PLC β2及Gαgust促进胞内IP3及钙离子浓度增加,进而刺激GLP 1分泌。     

葛根素对油酸致大鼠急性肺损伤组织中核因子-κB表达的影响

摘 要 目的:观察核因子 κB（NF-κB）在油酸致大鼠急性肺损伤时肺组织中的表达变化,探讨葛根素对急性肺损伤的保护作用及其可能机制。方法: 24只大鼠随机分为3组：对照组（Control）、油酸组（OA）、葛根素预处理组（Pue）。Control组大鼠尾静脉注射生理盐水0.1 ml·kg^-1;OA组大鼠尾静脉注射油酸0.1 ml·kg^-1;Pue组大鼠在注射油酸前30 min腹腔注射葛根素30 mg·kg^-1。光镜下观察肺组织病理形态学改变,免疫组织化学染色技术观察NF-κB在肺组织中的表达变化。结果 Pue组较OA组肺组织损伤情况明显减轻。OA组肺组织NF-κB的阳性表达（0.39±0.07）与Conrtol组（0.12±0.04）相比显著增加（P<0.05）;应用葛根素后肺组织NF-κB的阳性表达（0.24±0.05）明显减少,但仍高于Conrtol组（P<0.05）。结论 葛根素可能通过抑制NF-κB的表达减轻急性肺损伤时肺组织的炎症反应。     

利伐沙班对下肢动脉硬化闭塞症大鼠血管内皮功能及p38MAPK/NF-κB通路的影响

摘 要 目的：探究利伐沙班对下肢动脉硬化闭塞症（ASO）大鼠血管内皮功能及p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）/核因子κB（NF-κB）通路的影响。方法: 将大鼠分为假手术组、模型组、利伐沙班低剂量组、利伐沙班中剂量组、利伐沙班高剂量组,给药2周后检测各组大鼠血清中一氧化氮（NO）和内皮素（ET-1）含量;检测血清中内皮细胞的数量;检测动脉血管中p38MAPK、p p38MAPK、NF-κB表达情况。结果:与模型组相比,利伐沙班组静脉血中内皮细胞数量减少;利伐沙班组血清中NO显著高于模型组,ET-1显著低于模型组（P<0.05）;利伐沙班组动脉中p p38MAPK的表达量显著低于模型组,NF-κB的表达量显著高于模型组（P<0.05）,呈剂量依赖性。结论:利伐沙班能够改善ASO大鼠血管内皮功能,推测是通过调控p38MAPK / NF-κB通路实现的。     

多巴胺下调 XIAP表达促进胶质瘤U251细胞凋亡的实验研究

摘 要 目的：探究多巴胺（DA）通过下调X连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）对胶质瘤U251细胞凋亡的影响。 方法: DA处理胶质瘤U251细胞,Cell Counting Kit 8（CCK 8）法检测细胞增殖情况;线粒体膜电位（MMP）检测细胞凋亡情况;流式细胞术检测细胞凋亡率;实时荧光定量多聚酶链式反应（qRT PCR）和蛋白免疫印迹检测XIAP、B淋巴细胞瘤 2基因（BCL2）、Bcl 2相关X蛋白（BAX）、生存素（survivin）、活化的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶（cleaved caspase3）表达情况。 结果: 与U251组相比,U251+100 μmol·L-1DA组、U251+50 μmol·L-1DA组、U251+100 μmol·L-1DA组的细胞增殖抑制率、凋亡率、BAX、cleaved caspase3 mRNA和蛋白表达量均升高（P＜0.05）,红绿荧光相对比例、XIAP、BCL2、survivin mRNA和蛋白表达量、BCL2/BAX比值均降低（P＜0.05）。与U251+25 μmol·L-1DA组相比,U251+50 μmol·L-1DA组、U251+100 μmol·L-1DA组的细胞增殖抑制率、凋亡率、BAX、cleaved caspase3 mRNA和蛋白表达量均升高（P＜0.05）,红绿荧光相对比例、XIAP、BCL2、survivin mRNA和蛋白表达量、BCL2/BAX比值均降低（P＜0.05）。与U251+50 μmol·L-1DA组相比, U251+100 μmol·L-1 DA组的细胞增殖抑制率、凋亡率、BAX、cleaved caspase3 mRNA和蛋白表达量均显著升高（P＜0.05）,红绿荧光相对比例、XIAP、BCL2、survivin mRNA和蛋白表达量、BCL2/BAX比值均显著降低（P＜0.05）。 结论: DA可能通过下调XIAP表达,从而促进胶质瘤U251细胞凋亡。     

二氢杨梅素对胶质瘤细胞株U87增值凋亡及PI3K/Akt通路的影响

摘 要 目的：探讨二氢杨梅素（DMY）对胶质瘤细胞株U87增殖、凋亡、自噬及磷脂酰肌醇 3激酶/丝 苏氨酸蛋白激酶（PI3K/Akt）信号通路的影响。 方法: 体外培养胶质瘤U87细胞,U87细胞分为4组：空白对照组、DMY低（25 μmol·L-1）、中（50 μmol·L-1）、高（100 μmol·L-1）剂量组。采用MTT法检测U87细胞增殖情况,Hoechst染色法检测U87细胞凋亡,透射电镜下观察自噬体形成,蛋白印迹（WB）法检测凋亡蛋白B细胞淋巴瘤 2（Bcl 2）及其相关蛋白（Bax）、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 3（cleaved caspase 3）、自噬相关蛋白Beclin 1、微管相关蛋白1轻链3（LC3）、P62及PI3K/Akt信号通路相关蛋白PI3K及其磷酸化激酶（p PI3K）、Akt及其磷酸化蛋白（p Akt）表达。 结果: 与空白对照组相比,DMY处理后U87细胞存活率、P62、Bcl 2、p PI3K及p Akt蛋白表达量均显著降低（P＜0.05）,且高剂量组显著低于低、中剂量组（P＜0.05）;与空白对照组相比,DMY处理后U87细胞凋亡率、自噬体数量、自噬泡/胞质总面积、LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ比值、LC3 Ⅱ、Beclin 1、Bax及cleaved caspase 3蛋白表达量均显著升高（P＜0.05）,且高剂量组显著高于低、中剂量组（P＜0.05）。 结论: 二氢杨梅素可有效抑制胶质瘤U87细胞增殖,并可诱导自噬发生促使细胞凋亡,其作用机制可能与PI3K/Akt信号通路有关。     

金钗石斛多糖对阿霉素肾病大鼠肾纤维化及PI3K/Akt/HIF-1α通路的影响【证明信、版权转让书、校对稿已收到】

摘 要 目的：探讨金钗石斛多糖对多柔比星肾病大鼠肾组织纤维化及磷脂酰肌醇3激酶/丝氪酸 苏氪酸蛋白激酶/缺氧诱导因子 1α（PI3K/Akt/HIF-1α）信号通路的影响,并分析其可能的作用机制。 方法: 将48只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、阳性对照组（依那普利,4 g·kg-1·d-1）、金钗石斛多糖低（5 g·kg-1·d-1）、中（10 g·kg-1·d-1）、高（20 g·kg-1·d-1）剂量组,每组各8只。除正常对照组外,其余各组大鼠制备多柔比星肾病大鼠模型。造模成功后灌胃给药,1次/d,连续给药4周,正常对照组和模型组给予等量生理盐水。采用Masson染色观察多柔比星肾病大鼠肾脏纤维化程度;检测各组大鼠肾功能指标;采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测肾组织中平滑肌肌动蛋白(α SMA)、纤维连接蛋白(FN)、结缔组织生长因子(CTGF)mRNA表达水平;Western blot法检测α SMA、FN、CTGF、PI3K及磷酸化PI3K（p PI3K）、Akt及磷酸化Akt （p Akt）、HIF-1α蛋白表达。 结果: 与正常对照组相比,模型组大鼠血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）水平、24 h尿蛋白含量、胶原纤维阳性区占观察视野面积比、肾组织中α SMA、FN、CTGF及p PI3K、p Akt、HIF-1α表达水平均显著升高（P＜0.05）;与模型组相比,阳性对照组与金钗石斛多糖不同剂量组大鼠Scr、BUN水平、24 h尿蛋白含量、胶原纤维阳性区占观察视野面积比、肾组织中α SMA、FN、CTGF及p PI3K、p Akt、HIF-1α表达水平均显著降低（P＜0.05）,且金钗石斛多糖高剂量组与阳性对照组均显著低于金钗石斛多糖低、中剂量组（P＜0.05）,阳性对照组与高剂量组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。各组PI3K、Akt蛋白表达差异无统计学意义（P＞0.05）。 结论: 金钗石斛多糖可改善多柔比星肾病大鼠肾功能并减缓肾纤维化,其机制可能与抑制PI3K/Akt/HIF-1α信号通路有关。     

熊果酸对子宫内膜异位症模型大鼠内膜血管生成及ERK-VEGF/MMP-9通路的影响

摘 要 目的：探讨熊果酸对子宫内膜异位症模型大鼠内膜血管生成及细胞外调节蛋白激酶（ERK） 血管内皮生长因子（VEGF）/基质金属蛋白酶9（MMP-9）通路的影响。 方法: 建立子宫内膜异位症大鼠模型,随机分为模型组、熊果酸低（100 mg·kg-1）、中（250 mg·kg-1）、高（500 mg·kg-1）剂量组、孕三烯酮（60 mg·kg-1）组,每组12只,另取12只设为假手术组。造模后以熊果酸及孕三烯酮灌胃治疗,1次/d,持续给药7 d。给药结束24 h后处死大鼠,观察药物对大鼠异位子宫内膜体积生长的抑制作用;采用免疫组织化学染色检测各组大鼠异位子宫内膜组织中CD31表达情况;采用免疫酶联吸附实验（ELISA）检测大鼠血清中VEGF和MMP-9水平;采用实时荧光定量（qRT PCR）检测大鼠异位子宫内膜组织中VEGF、MMP-9 mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠异位子宫内膜组织中ERK、磷酸化ERK（p ERK）、VEGF、MMP-9蛋白表达水平。 结果: 与假手术组相比,模型组大鼠CD31阳性细胞表达、血清中VEGF及MMP-9水平、异位子宫内膜组织中VEGF及MMP-9 mRNA水平、异位子宫内膜组织中p ERK/ERK、VEGF及MMP-9蛋白表达均显著升高（P＜0.05）;与模型组相比,熊果酸组大鼠CD31阳性细胞表达、血清中VEGF及MMP-9水平、异位子宫内膜组织中VEGF及MMP-9 mRNA水平、异位子宫内膜组织中p ERK/ERK、VEGF及MMP-9蛋白表达均显著降低（P＜0.05）,异位子宫内膜生长抑制率升高（P<0.05）且熊果酸各剂量组之间呈剂量依赖性;熊果酸高剂量组和孕三烯酮组相比,差异无统计学意义（P＞0.05）;ERK蛋白表达各组之间无明显变化（P＞0.05）。 结论: 熊果酸可抑制子宫内膜异位症模型大鼠内膜血管生成,可能是通过下调ERK-VEGF/MMP-9通路来实现。     

淫羊藿苷对脂多糖诱导成骨细胞凋亡及GRP78/PERK/CHOP通路的影响

摘 要 目的：探讨淫羊藿苷（ICA）对脂多糖（LPS）诱导成骨细胞凋亡及葡萄糖调节蛋白78/蛋白激酶R样内质网激酶/C/EBP同源蛋白（GRP78/PERK/CHOP）通路的影响。 方法: 采用大鼠骨髓基质干细胞定向诱导分化为成骨细胞的方法,将成骨细胞随机分成5组：对照组（只含成骨细胞）、LPS组（成骨细胞中加入终浓度为500 ng·ml-1 LPS）、ICA低、中、高剂量组（分别在LPS组基础上加入终浓度为1,10,100 μmol·L-1 ICA）。采用CCK 8法检测细胞增殖情况,采用对硝基苯棕榈酸酯（PNPP）法检测成骨细胞碱性磷酸酶（AKP）活性的变化情况,采用ELISA法检测成骨细胞Ⅰ型胶原蛋白表达情况,采用AnnexinV/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡情况,采用Western blot检测凋亡及GRP78/PERK/CHOP通路相关蛋白表达情况。 结果: 骨髓基质干细胞经定向诱导后,符合成骨细胞形态学表现,AKP染色呈阳性反应,Ⅰ型胶原蛋白免疫组织化学染色结果显示：细胞质染色呈棕黄色;与对照组相比,LPS组细胞48 h时的吸光度（A）值、AKP活性、Ⅰ型胶原蛋白和B淋巴细胞瘤 2基因（Bcl 2）蛋白表达水平显著降低（P＜0.05）,细胞凋亡率、活化的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶 3（cleaved caspase 3）、Bax、GRP78、磷酸化的PERK（p PERK）、磷酸化α亚基的真核起始因子2（p eIF2α）、CHOP蛋白表达水平显著升高（P＜0.05）;与LPS组相比,ICA各剂量组细胞48 h时的A值、AKP活性、Ⅰ型胶原蛋白和Bcl 2蛋白表达水平显著升高（P＜0.05）,细胞凋亡率、cleaved caspase 3、Bax、GRP78、p PERK、p eIF2α、CHOP蛋白表达水平显著降低（P＜0.05）,且呈剂量依赖性（P＜0.05）。     

绿原酸通过抑制内质网应激改善大鼠糖尿病氧化性肾损伤

摘 要 目的：探讨绿原酸（CGA）对链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病肾病（DN）大鼠氧化应激的肾脏保护作用及其可能机制。 方法: 将40只大鼠随机分为5组：正常对照组、模型组、 CGA低（5 mg·kg-1）、中（10 mg·kg-1）、高（20 mg·kg-1）剂量组,每组8只。除正常对照组外,其余各组腹腔单次注射STZ（60 mg·kg-1）建立大鼠糖尿病模型。腹腔注射给药,1次/d,连续给药6周。测定大鼠血糖、尿蛋白、尿素氮（BUN）、血清肌酐（SCr）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH Px）、过氧化氢酶（CAT）和超氧化物歧化酶（SOD）水平;免疫印迹法检测内质网应激（ERS）信号通路关键分子[C/EBP同源蛋白（CHOP）、活化转录因子6（ATF6）、磷酸化蛋白激酶R（p PERK）和磷酸化鸡真核生物翻译起始因子2α（p eIF2α）]的蛋白表达水平;RT-PCR检测CHOP、ATF6 和PERK的mRNA表达水平。 结果: 与模型组相比,CGA组血糖、尿蛋白、BUN、SCr、MDA水平、CHOP、ATF6、p PERK、p eIF2α的蛋白表达水平及CHOP、ATF6 和PERK的mRNA表达水平显著降低（P<0.05或P<0.01）,SOD、GSH Px和CAT活性显著提高（P <0.05或P<0.01）,以上作用均呈剂量依赖性。 结论: CGA对STZ诱导的DN大鼠有抗氧化作用,其机制可能与抑制DN内质网应激反应有关。     

人脂氧素A4对β淀粉样蛋白所致N2a细胞损伤的保护作用及机制研究

摘 要 目的：探讨人脂氧素A4（LXA4）对β淀粉样蛋白25 35（Aβ25 35）损伤小鼠脑神经瘤（N2a）细胞的保护作用及其机制。方法: 用Aβ25 35处理N2a细胞建立阿尔茨海默病（AD）细胞损伤模型,同时实验组加入不同质量浓度（50,100,200 nmol·L-1）的LXA4,采用MTT法检测N2a细胞的活性,Hoechst 33258 PI荧光染色法检测细胞凋亡,RT PCR法检测P62和TRAF6基因mRNA表达,Western blot法检测P62和TRAF6蛋白表达。结果: 与模型组相比, LXA4高、中、低3个浓度组的细胞活性明显提高（P＜0.01）;LXA4 100和200 nmol·L-1浓度组减少Aβ25 35引起的核固缩,凝集和破裂;与模型组相比,LXA4 100和200 nmol·L-1浓度组上调P62 mRNA表达以及P62蛋白表达（P＜0.05或P＜0.01）,同时下调TRAF6 mRNA表达以及TRAF6蛋白表达（P＜0.05或P＜0.01）。结论: LXA4对Aβ25 35所致N2a细胞损伤具有保护作用,其机制可能与上调P62基因和下调TRAF6基因有关。