CD7抗原在急性髓系白血病微小残留病灶检测中的应用研究

目的研究CD7抗原在急性髓系白血病(AML)中的表达及CD7在AML微小残留病灶(MRD)检测中的意义。方法选取安阳地区医院2012年5月至2015年6月收治的186例初发AML患者,应用流式细胞术(FCM)进行免疫表型分析,观察CD7在骨髓原始细胞中的表达情况。对于完全缓解的CD7+AML患者,将其他多种髓系抗体与CD7构成组合,进行MRD检测;对于CD7-AML完全缓解患者,根据初发免疫表型进行多种髓系抗体组合,进行MRD检测。以MRD≥1.0×10~(-4)者计为阳性,MRD<1.0×10~(-4)计为阴性,跟踪随访3~24个月,记录MRD值、是否复发及骨髓确诊复发时间。结果 186例AML患者中检测出51例CD7+患者,对达完全缓解的33例患者,应用FCM进行MRD追踪检测,检测到26例MRD阳性患者中的21例骨髓复发,7例阴性患者中的3例骨髓复发。CD7+组MRD阳性复发率为63.6%。CD7-组135例,对达完全缓解的90例患者应用FCM进行MRD追踪,检测到35例MRD阳性患者中的20例复发,55例阴性患者中的17例骨髓复发,CD7-组MRD阳性复发率为22.2%。CD7+组MRD阳性患者复发率比CD7-组MRD阳性患者高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在CD7+AML患者MRD检测中,CD7抗原与其他髓系抗原组合能够很好区分正常细胞和白血病细胞。CD7抗原可以作为AML-MRD检测的重要指标,为调整AML治疗策略提供依据。     

急性B淋巴细胞白血病微小残留病变临床研究

目的研究多参数流式细胞术对急性B淋巴细胞白血病微小残留病变的应用价值。方法选取2014年3月到2016年3月入本院行急性B淋巴细胞白血病治疗患者骨髓标本80例,均经骨髓形态学及细胞学确诊。采用两组四色荧光标记单克隆抗体组合,将选定组合抗体应用多参数流式细胞术检测患者的骨髓样本。结果根据检测结果将样本分为三组,表达异常免疫表型组合细胞群36例(A组),不能检测到存在异常免疫表型组合细胞群36例(B组),可以检测到原始细胞但是检测不到异常免疫表型的细胞群8例(C组)。对A、B组骨髓样本进行形态学检测,并进行比较。A组MRD检测结果在0.009%到0.270%之间。B组MRD呈阴性,C组共8例可观察到一定数量的原始细胞群,且未发现表达异常的免疫表型。流式细胞术检测MRD A组和B组原始淋巴细胞和幼淋巴细胞占骨髓有核细胞比值差异有统计学意义(P0.05)。术后一年复查,有8例患者白血病复发,A组6例(复发率16.67%),B组2例(复发率5.56%),采用多参数流式细胞术监测的患者比通过传统形态学监测的患者提前2个月预测到复发。结论多参数流式细胞术检测MRD可提前预测患者复发,实验灵敏度高,方法简便,耗时短,减少了患者的医疗费用。     

白血病患者化疗前后调节性T细胞的表达与微小残留白血病的关系

目的 探讨急性白血病患者Treg细胞与MRD的关系及其临床意义.方法 对2012年至2014年在玉溪市人民医院血液科规律诊治的53例急性白血病患者利用流式细胞术进行MRD、Treg细胞检测,从首次诱导缓解治疗结束后第14天开始,每3～6月检测1次,并动态监测,对治疗前后、不同疾病组别、不同危险度Treg细胞进行比较分析,并分析MRD阴性、MRD阳性组Treg细胞表达差别.结果 AL患者诱导缓解前Treg细胞明显高于治疗缓解后、正常对照组(P＜0.01),ANLL与ALL组间治疗前后Treg细胞无明显差别,高危组Treg细胞明显高于低危组(P＜0.01),与中危组无明显差别,而中危组与低危组无明显差别,MRD阴性组复发率明显低于MRD阳性组(P＜0.01),MRD阳性组Treg细胞明显高于MRD阴性组(P＜0.01).结论 初诊白血病患者体内Treg细胞明显增高,且恶性程度越高,Treg细胞水平越高,治疗缓解后Treg细胞水平明显下降,接近正常水平,MRD阳性患者Treg细胞明显高于MRD阴性患者,提示Treg细胞可能抑制机体对肿瘤细胞的免疫杀伤,对白血病患者判断预后、评估疗效、预测疾病复发、改善治疗方案,有着十分积极的作用和临床应用价值.     

流式细胞术检测白血病微小残留病变与疗效判断及预后关系

目的 :研究流式细胞术方法在检测白血病微小残留病变(MRD)中的作用及地位,判断其与疗效及预后的关系。方法:选择急性淋巴细胞白血病(ALL)初发患者56例,将其按照成人ALL危险分组分为低危组、中危组和高危组三组,在所有患者巩固及维持治疗阶段,每3个月运用FCM方法检测白血病微小残留病变,对其进行为期一年的随访,记录下复发率。结果:56例白血病患者在诱导化疗后都获得了完全缓解,巩固及维持治疗阶段四次检测的不同疾病危险度的MRD阳性率差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01),HR组的MRD阳性率要明显高于LR和MR组;巩固、维持治疗阶段四次检测结果的MRD阳性组和阴性组的复发率比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:运用流式细胞术方法检测白血病微小残留病变对评价疗效、提早预防复发、重新确定疾病危险度和调整治疗策略方法有着重要意义。     

成人急性淋巴细胞白血病微小残留病的监测及临床意义

目的动态监测成人急性淋巴细胞白血病(Acute lymphoblastic leukemia,ALL)患者治疗期间微小残留病(Minimal residual diseas,MRD)水平,分析MRD水平及动态变化与成人ALL的临床特征、治疗效果及预后之间的关系。方法采用八色流式细胞仪检测患者治疗期间MRD水平,收集和分析2010年2月至2015年4月期间诊断和治疗的182例成人ALL患者的临床资料,分析患者临床特征、及其与患者体内白血病细胞MRD水平的关系。结果动态监测182例ALL患者的MRD,中位监测次数6.0次(1-17次),MRD阳性患者134例(73.6%),与MRD阴性组患者性别构成、年龄水平及外周血白细胞计数、血红蛋白水平、血小板计数及骨髓原始细胞比例上无显著性差异(P0.05)。MRD阳性较阴性患者临床复发提早中位时间2月(2周-7月)。MRD阴性组患者的DFS率(75.5%)显著高于MRD阳性组(56.4%)(P=0.035),但OS率(均为71.4%)无显著性差异(P=0.779)。16例死亡患者MRD监测均为阳性(P=0.028)。高危组患者中,MRD阴性患者的DFS率(76.0%)显著高于阳性患者(51.5%)(P=0.039),但OS率无显著差异。而在标危组中,二者无显著性差异。结论八色多参数FCM技术能较好的监测成人ALL患者MRD水平。MRD水平高者复发率高、预后差,且MRD水平阳性较临床复发早,有助于临床预测患者预后,早期监测复发。     

供者型CIK细胞输注对清除异基因造血干细胞移植后微小残留病灶的疗效

目的 观察供者型细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine induced killer,CIK)细胞免疫治疗对异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT)后微小残留病灶(minimal residual disease,MRD)清除的疗效.方法 回顾性分析我科2012年11月至2015年11月间的10例恶性血液病患者,其中急性淋巴细胞白血病5例,急性髓性白血病4例,慢性粒单细胞白血病1例.在allo-HSCT后出现分子生物学复发(7例)以及形态学复发(3例)后经减停免疫抑制剂、化疗、供者淋巴细胞输注等治疗后形态学缓解,但MRD仍阳性的患者,给予供者型CIK细胞输注治疗,分析其疗效.结果 输注供者型CIK中位次数3(2～8)次.1例输注2次无效,最终血液学复发死亡;9例患者MRD转阴,其中1例输注10个月后再次复发死亡,1例因减停免疫抑制剂出现重度移植物抗宿主病死亡,另7例患者无病存活.输注CIK后中位随访时间为10(3 ～14)个月,中位生存时间8(3 ～14)个月,中位无病生存时间8(0～14)个月,其中5例患者输注CIK后无病生存时间长于移植后无病生存时间.结论 供者型CIK细胞输注治疗对allo-HSCT后复发的患者可使其再次达到分子生物学缓解,减少血液学复发,提高造血干细胞移植疗效,且不良反应小.     

wt1定量联合FCM在急性髓细胞白血病MRD监测中的临床应用

目的 探讨在急性髓细胞白血病(AML)中Wilms瘤基因1(wt1) mRNA定量联合多参数流式细胞术(FCM)分析监测微小残留病灶的临床应用.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应技术(qRT-PCR)检测35例AML患者的wt1表达水平;将患者根据不同亚型分组检测;并且对9例缓解和4例复发患者进行随访,检测wt1表达水平.采用FCM分析AML中微小残留病灶(MRD)水平.结果 与对照组比较,AML病例组wt1表达水平明显增高,差异有统计学意义(P<0.05).在初诊的各种AML亚型中,M2亚型wt1表达水平最高,M6亚型wt1表达水平最低.9 例随访患者提示在达到完全缓解时wt1表达水平下降,而4例随访复发患者在复发时再次升高.FCM检测MRD在不同阶段异常髓系细胞比例明显不同.联合qRT-PCR和FCM技术对MRD检测的敏感性和特异性大大提高,两者具有一致性;利用ROC曲线对复发病例进行分析得到的监测阈值为3.33%.结论 在急性髓细胞白血病中wt1 mRNA定量联合多参数流式细胞术分析可用于监测MRD、评估治疗效果、预后及预测疾病复发风险.     

亲缘间外周血异基因移植后白血病复发的危险因素分析

目的 分析急慢性白血病患者行亲缘间、外周血异基因造血干细胞移植（Allo-HSCT）后复发的危险因素。方法 选取2016年1月至2020年10月期间行Allo-HSCT的62例白血病患者为研究对象,其中急性髓系白血病（AML）30例,急性淋巴细胞白血病（ALL）24例,慢性粒细胞白血病（CML）8例。造血干细胞来源均为亲缘供者外周血,给予改良BU/CY±ATG清髓性预处理方案,统计移植后疾病复发情况,分析复发的危险因素。结果 随访至2021年10月,中位随访时间为38(12～52)个月,共20例患者复发,总体复发率为32.3%(20/62),其中,AML复发率为33.3%(10/30),ALL复发率为37.5%(9/24),CML复发率为12.5%(1/8)。单因素分析显示,移植后复发的发生与患者性别、年龄、疾病类型、血型、人类白细胞抗原（HLA）配型、初诊时伴髓外病变、急性移植物抗宿主病（aGVHD）的发生、巨细胞病毒（CMV）感染无明显关系（P>0.05）;与移植前微小残留病（MRD）水平、慢性移植物抗宿主病（cGVHD）的发生有关,移植前MRD阳性、移植后未并发cGVHD患...     

多参数流式细胞术检测白血病微小残留在急性髓细胞性白血病诱导治疗阶段的临床意义

目的研究急性髓细胞性白血病（AML）患者第1次诱导治疗后和第1次完全缓解时多参数流式细胞术（MFC）监测白血病微小残留（MRD）对预测疾病复发和判断预后的作用,探讨MRD监测的临床价值。方法回顾性研究246例成人AML患者治疗及MRD的监测数据,分析MRD水平与疾病复发和预后的相关性。结果（1）第1次标准方案诱导化疗后,ROC分析确定MRD阈值为1．5×10-2,Cox比例风险模型显示相对于MRD阴性组,MRD阳性组的相对危险度（RR）为2．41。在缓解后采用联合方案化疗的患者中,MRD阳性组和MRD阴性组的中位无复发生存时间（RFS）分别为（19．45±3．74）个月和（56．46±4．28）个月,中位总生存时间（os）分别为（29．37±4．47）个月和（77．97±4．30）个月,差异均有高度统计学意义（均P〈0．01）。（2）第1次达完全缓解时,ROC分析所确定的MRD阈值为3．0×10-3,Cox比例风险模型显示相对于MRD阴性组,MRD阳性组的RR值为1．75。缓解后采取联合化疗,MRD阳性组和MRD阴性组患者的中位RFS分别为（28．36±3．40）个月和（55．70±4．32）个月,中位OS分别为（39．30±3．73）个月和（70．19±4．34）个月,差异均有高度统计学意义（均P〈0．01）。结论MFC检测MRD在AML诱导治疗过程中具有预测复发、判断预后的价值。     

流式技术检测外周血白血病细胞在AML复发监测中的应用

目的：探讨多参数流式技术(FCM)检测外周血白血病细胞在急性髓细胞白血病(AML)复发监测中的临床应用价值。方法选择2012年1月至2014年6月我院血液科收治的56例AML患者,于首次诱导化疗结束、巩固化疗6个月、巩固化疗12个月应用FCM定期检测患者外周血标本,同时检测骨髓细胞形态学的变化。MRD≥0.01%为MRD阳性,否则为MRD阴性。AML患者首次诱导化疗结束后外周血MRD水平分为高(MRD≥10-2)、中(10-20.05)。结论 FCM检测外周血白血病细胞对诊断AML复发及指导个体化治疗有重要意义。     

急性淋巴细胞白血病微小残留病的检测及临床意义

海军总医院儿科吴南海等,为探讨聚合酶链反应(PCR)技术检测白血病微小残留病(MRD)的临床应用价值及进一步提高检测效率,采用IgH和TcR_γ两个基因标志相结合的方法,运用PCR技术对18例终止治疗的儿童急性淋巴细胞白血病患儿进行了检测。 结果显示,18例患儿中检出MRD者9例,随访了1.5～102个月,9例MRD阳性者中有3例3～6个月内白血病复发,而术检出MRD的9例患儿无1例复发。提示终止治疗的白血病患儿如仍存在MRD,则有复发危险,应进行定期监测;MRD阴     

急性白血病完全缓解微小残留病检测的意义

目的：探讨急性白血病（AL）患者骨髓微小残留病（MRD）的监测对疾病预后和疗效评价的临床意义．方法对2009年1月2012年12月在玉溪市人民医院血液科正规治疗的43例急性白血病患者采用骨髓液,利用流式细胞术（FCM）进行MRD检测,从首次诱导缓解治疗结束后第14天开始,每1～3月检测1次,并动态监测,分为阴性（MRD〈10-4）、阳性（MRD〉10-4）,2组进行比较分析．结果阴性、阳性2组3 a的复发率分别为0、80%,2组复发率的差异有统计学意义（＜0.05）．而在形态学完全缓解时,MRD阳性组复发率明显高于阴性组（＜0.05）．结论采用FCM检测AL患者的MRD,MRD〉10-4患者复发率高于MRD〈10-4患者,MRD阳性比传统骨髓形态学复发出现早,连续对完全缓解AL患者进行MRD监测对指导治疗及早期预测复发具有重要的临床意义．     

TRX-2基因表达在急性白血病微小残留病灶监测中的作用

目的: 探讨硫氧还蛋白-2(TRX-2)基因表达在急性白血病(AL)微小残留病灶(MRD)监测中的价值。方法: 采用实时荧光定量聚合酶反应(RQ-PCR)检测AL初发组(68例)、血液学完全缓解(CHR)组(57例)和复发组(25例)TRX-2基因表达的变化,25名骨髓捐献者作为正常对照组,TRX-2基因表达量的上限(91)为参考值上限,回顾分析复发组在CHR期(骨髓原始细胞计数<5%)TRX-2基因表达的水平,比较其与流式细胞术(FCM)检测的MRD的相关性。结果: TRX-2基因表达在完全缓解组与初治组和复发组之间差异有统计学意义(P<0.01);复发患者CHR期(骨髓原始细胞<5%),21例(21/25)TRX-2基因呈高表达(>91),与流式细胞术检测的MRD具有相关性(r=0.874, P=0.0005)。结论: TRX-2基因为急性白血病新的广谱标志,适用于MRD的监测。     

流式细胞术在急性淋巴细胞性白血病微小残留病检测中的应用

目的　用流式细胞术检测急性淋巴细胞性白血病 (ALL)患者的微小残留病 (MRD) ,为临床MRD的检测提供科学依据 ,并在此基础上 ,探讨MRD的临床意义。方法　 3 3例初发白血病患者均接受 4～ 6周诱导化疗 ,获得完全缓解后 ,进行巩固化疗。在诱导化疗结束时 ,巩固化疗第 12、2 4、3 6周 ,应用流式细胞仪 (FCM)以ALL患者白血病细胞的特异分化抗原为标志监测MRD。结果　初诊时FCM检测 3 3例患者骨髓均有淋巴系分化抗原表达 ,在诱导化疗结束时 ,巩固化疗第 12、2 4、3 6周 ,FCM检测MRD检出率分别为 42 4%、3 1 3 %、13 8%、12 5 %。在按年龄 (以 18岁为界 )、性别、初发病时白细胞计数 (5 0×10 9/L为界 )、Ph染色体、My表达、CNSL等因素分别分组中 ,各个时间段MRD的检出率均无差别。MRD阳性及白细胞计数大于 5 0× 10 9/L(P <0 10 )为复发的高危因素。结论　①白细胞分化抗原可作为免疫学标志用FCM方法检测ALL患者的MRD。②MRD与临床复发高度相关。③MRD可能为ALL患者一个独立的预后不良的因素。     

流式细胞术外周血细胞检测对急性白血病微小残留病变的诊断价值

目的 探讨流式细胞术（FCM）外周血细胞检测对急性白血病（AL）微小残留病变（MRD）的诊断价值。方法 选择2020年5月至2022年5月柘城县人民医院收治的AL患者160例,采用相同的治疗方案,治疗结束后72 h内进行FCM外周血细胞检测。以骨髓细胞形态学检查作为金标准,分析FCM外周血细胞检测对AL MRD的诊断价值,并计算FCM外周血细胞检测结果与金标准的一致性。随访1年,比较MRD阳性、阴性患者复发情况。结果 160例AL患者经骨髓细胞形态学检查发现105例MRD阳性,55例阴性。FCM外周血细胞检测诊断AL MRD的敏感度[95.2%(100/105)]、特异度[94.6%(52/55)]、准确度[95.0%(152/160)]、阳性预测值[97.1%(100/103)]、阴性预测值[91.2%(52/57)]。FCM外周血细胞检测结果与骨髓细胞形态学检查结果一致性极好（Kappa=0.890）。MRD阳性患者复发率为72.4%(76/105)高于阴性患者的30.9%(17/55),差异有统计学意义（P<0.05）。结论 AL MRD诊断中应用FCM外周血细胞检测准确度...     

微小残留病变检测在急性高危白血病异基因造血干细胞移植中的意义

目的 分析急性白血病(AL)高危患者异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)前后微小残留病变(MRD)水平与移植后预后的关系.方法 采用以CD45/SS设门的4色或5色荧光标记多参数流式细胞术(MFC)动态检测90例高危AL患者allo-HSCT前第30天、移植后第30、60、100天和6、9、12个月的MRD水平,以0.1％为界,将患者分为MRD高水平组(≥0.1％)和低水平组(＜0.1％),其中高水平组根据移植后是否干预治疗分为两组,回顾性分析MRD水平与预后的关系.结果 移植前MRD水平与移植后预后无明显关系,移植后第60、100天MRD高水平组患者移植后复发率明显高于低水平组.移植后第100天,MRD高水平干预组、MRD高水平未干预组、MRD低水平组1年无复发生存率(RFS)分别为100％、60.87％和91.30％,3年RFS分别为85.71％、44.72％和68.48％,组间差异均有统计学意义(均P＜0.05).复发患者首次检出MRD高水平的时间比临床诊断复发提前了2.5(1.0 ～26.0)个月.移植后第100天,30例MRD高水平组患者中,7例患者及时接受干预治疗后均未复发,而另外23例未接受干预治疗的患者中11例出现复发(P＜0.05).结论 多参数流式细胞术动态监测高危AL患者移植后MRD可以有效评估其临床预后,并可根据移植后第100天MRD进行危险分层,MRD≥0.1％的患者预后较差,及时进行有效的干预可以明显降低其复发率,增加长期生存率.     

脑脊液流式细胞监测在中枢神经系统白血病诊断中的临床意义

目的：探讨流式细胞术检测脑脊液在中枢神经系统白血病（central nervous system leukemia,CNSL）诊断中的运用及临床意义。方法：采用以CD34、CD45为基础的不同的单抗组合对102例急性白血病患者的脑脊液进行流式细胞术（Flow Cytometry,FCM）检测多参数微小残留病变（Minimal Residual Disease,MRD）分析;采取脑脊液自然沉降后涂片法进行脑脊液细胞形态常规检测。结果：102例患者中有23例患者脑脊液FCM检查为阳性,脑脊液形态学检查为阳性的仅为9例;8例出现神经系统症状脑脊液流式细胞检查均为阳性,仅有4例脑脊液形态学阳性;102患者中脑脊液白细胞数升高者14例（流式细胞分析阳性12例、形态学检查阳性8例）;102例患者脑脊液压力升高者10例（流式细胞检查均为阳性、形态学阳性6例）;102例患者脑脊液蛋白升高16例（流式细胞检查14例阳性、形态学检查阳性8例）。结论：FCM联合脑脊液常规检测可以提高中枢神经系统白血病诊断的阳性率,对早期发现和治疗CNSL、延长白血病患者无病生存期具有重要意义。     

染色体原位杂交检测28例急性早幼粒细胞白血病残留病变

目的:应用荧光染色体原位杂交(FISH)方法检测急性早幼粒细胞白血病(acutepromyelocyticleukemia,APL)患者完全缓解(completeremission,CR)期微小残留病变(minimalresidualdisease,MRD),并探讨MRD的动态变化与复发的关系。方法:对28例具有t(15;17)的APL患者在CR期应用中期分裂相FISH方法,进行了监测。结果:11例在CR的不同时期检出了不同比例的t(15;17)细胞,其中3例复发。17例在追踪的标本中均未检出异常细胞,目前均持续缓解。观察时间分别为10～33个月和15～44个月。结论:FISH追踪MRD较传统细胞遗传学更加快速和敏感,并具有可定量的优点,可作为APL患者CR期监测MRD的常规手段。FISH检测到MRD有增长趋势时,更有预示复发的价值。     

改良儿童方案治疗年轻成人费城染色体阴性急性淋巴细胞白血病疗效评价

目的:评估改良儿童方案治疗年轻成人费城染色体(Ph)阴性急性淋巴细胞白血病的疗效。方法:纳入2013年1月至2014年9月年轻成人Ph阴性急性淋巴细胞白血病35例,患者均采用改良儿童方案化疗,随访并评估患者疗效。结果:32例(91%)达到完全缓解(complete remission,CR),其中24例维持CR,7例复发,4例死于疾病复发,1例死于感染;24个月无病生存率(disease-free survival,DFS)为68.6%,24个月总生存率(overall survival,OS)为77.1%。结论:适当减低化疗强度的儿童方案治疗年轻成人Ph阴性急性淋巴细胞白血病有较好的疗效和安全性。     

流式细胞术检测急性白血病微小残留病的应用价值

近年来,随着化疗药物的广泛应用和新的化疗药物不断出现,急性白血病在治疗上取得了很大的进展,但仍有部分患者在治疗后3～5年内出现复发,目前认为其主要原因与微小残留病(MRD)有一定关系。流式细胞术(FCM)是现如今有效监测MRD的方法之一,它可通过白血病细胞与正常细胞不同的免疫表型将二者区分,具有快速准确、灵敏度高的优点。本文将对FCM检测MRD的优势、免疫学检测及前景展望等几个方面进行综述。