骨髓幼红细胞转铁蛋白结合铁摄入与年龄的关系

为观察骨髓幼红细胞转铁蛋白(Tf)受体(TfR)介导铁摄入途径的功能与年龄的关系,将雌性SD大鼠随机分为5、8和14个月共三个年龄组,分离骨髓单个核细胞,观察细胞膜TfR的表达和细胞Tf结合铁摄入的动力学变化。14月龄时幼红细胞表面Tf受体的表达显著低于5月龄和8月龄。受体的解离常数没有显著差异。14月龄时幼红细胞Tf的内吞平台和细胞铁聚积速度显著降低。结果表明,在到达一定年龄后骨髓幼红细胞TfR介导铁摄入的功能降低,这种变化的机制尚未清楚。     

青蒿琥酯抗SHI-1细胞的作用及机制的初步研究

目的研究青蒿琥酯对急性单核细胞白血病SHI-1细胞的细胞毒作用及其对转铁蛋白受体(Transferrin receptor,Tf R或CD71)表达的影响。方法四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同浓度的青蒿琥酯作用下SHI-1细胞存活率,流式细胞术检测有无青蒿琥酯作用SHI-1细胞表面Tf R表达率。结果青蒿琥酯作用于SHI-1细胞,IC50为556.47±57.65 ng/m L,无青蒿琥酯作用SHI-1细胞表面CD71表达率分别为(24h)65.40±5.15%、(48h)64.80±4.84%。5、10、20 ng/m L青蒿琥酯作用后,SHI-1细胞CD71表达率分别为(24h)51.50±5.11%、47.40±4.82%、35.60±4.52%,(48h)50.30±4.93%、43.90±5.04%、31.20±4.92%。不同浓度青蒿琥酯作用后SHI-1细胞CD71表达明显下降,与无青蒿琥酯作用组相比,差异均具有统计学意义(P0.05),24h组与48h组组间差异无统计学意义(P0.05)。结论青蒿琥酯对SHI-1细胞具有细胞毒性,与SHI-1细胞高表达转铁蛋白受体,青蒿琥酯下调细胞CD71表达有关。     

小肠铁吸收机制研究进展

铁是人体必需的金属微量元素 ,广泛参与机体内的代谢过程 ,如氧的运输、DNA的合成、电子的传递等。铁的缺乏和过多均可导致机体的疾病状态 ,十二指肠和空肠上段是铁吸收的主要部位 ,是调节铁代谢的重要环节。多年来 ,人们对铁的吸收过程了解不多 ,提出了许多假说 ,如离子通道机制、载体转运等。一般认为 ,铁的吸收是通过转铁蛋白 (transferrin ,Tf)和转铁蛋白受体 (transferrinreceptor,TfR)的途径完成铁的吸收 ,但是小肠上皮细胞不含TfR。近年 ,在小肠粘膜上皮细胞相继发现了二价金属离子转运蛋白 1(divalentmetaltransporter 1,DMT1)…     

脑泰方对血红蛋白诱导的大鼠皮质神经元损伤的保护作用及机制

目的探讨脑泰方对体外血红蛋白(Hb)诱导的大鼠皮质神经元损伤的保护作用及其机制。方法原代培养新生SD大鼠皮质神经元,采用Hb诱导神经元模拟建立脑出血后神经元损伤细胞模型;实验设正常组、模型组、空白血清对照组、去铁胺组和10%脑泰方含药血清组。采用CCK8法检测各组细胞活力;采用Calcein-AM染色法检测各组细胞内铁含量;采用免疫荧光与高内涵细胞成像分析技术(HCA)检测各组神经元转铁蛋白(Tf)及其受体(TfR)、二价金属离子转运体(DMT-1)蛋白表达情况;采用酶联免疫吸附法检测各组上清液中脂质活性氧自由基(lipid-ROS)含量;采用real-time PCR法检测各组Tf、TfR和DMT-1 mRNA表达水平。结果与正常组比较,模型组神经元细胞活力明显降低(P0.01),细胞内铁含量、细胞上清液中lipid-ROS水平显著升高(P0.01),Tf、TfR及DMT1蛋白及mRNA表达水平明显上调(P0.01)。与模型组比较,去铁胺组和10%脑泰方含药血清组细胞活力显著提高(P0.01或P0.05),细胞内铁含量、细胞上清液中lipid-ROS水平明显降低(P0.01),Tf、TfR及DMT-1蛋白及其mRNA表达显著下调(P0.01或P0.05),去铁胺组和10%脑泰方含药血清组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论脑泰方可通过调节Hb诱导的大鼠皮质神经元细胞铁代谢,减轻神经元铁超载及lipid-ROS累积,从而提高神经元细胞活力;其作用与铁死亡抑制剂去铁胺一致,提示脑泰方可能通过抑制脑出血后神经元铁死亡而发挥神经保护作用。     

血管活性肠肽对人脐血CD34+细胞增殖分化的影响

目的 探索血管活性肠肽(vasoactive intestinal polypeptide,VIP)对造血干细胞(hematopoietic stem cells,HSC)增殖分化的影响及其可能机制.方法 采用免疫磁珠分选技术纯化人脐血CD34 细胞;VIP孵育人CD34 细胞后,通过体外集落形成、扩增培养了解细胞增殖;ELISA测定细胞内外TNF-α、TGF-β水平;流式细胞术检测细胞表面CD13、CD14、CD71、CD41、CD19、CD4/CD8、CD33、CD34等抗原;生物分子相互作用系统检测人CD34 细胞VIP受体;RT-PCR分析其受体亚型.结果 在1×10-7～1×10-12mol/L浓度范围内,VIP抑制人CD34 细胞集落形成及扩增倍数,其细胞集落形成抑制与VIP浓度呈正相关(r=0.925,P＜0.01).VIP(1×10-8mol/L)作用于人CD34 细胞14 d后,粒系(CD13 蓝色)及单核系(CD14 )细胞百分比均明显下降(P＜0.05).VIP增加人CD34 细胞的CD34抗原表达(P＜0.05).VIP作用后CD34 细胞内、外TNF-α及TGF-β1浓度显著增加(P＜0.05);人脐血CD34 细胞表达VIPⅠ型受体.结论 VIP通过人脐血CD34 细胞上VIPⅠ型受体介导,提高造血抑制因子TNF-α、TGF-β水平,抑制人CD34 细胞的增殖、维持其干细胞特性,阻止其向粒、单系细胞分化.     

1-磷酸鞘氨醇受体信号在造血干/祖细胞迁移中的作用

目的 探讨1-磷酸鞘氨醇受体(S1PRs)在CD34+造血干/祖细胞迁移中的作用.方法 用密度梯度离心法分离脐血 CD34+细胞,悬浮于transwell培养板的上层,在不同组细胞中分别给予FTY720预处理、含或不含百日咳毒素(PTX)或CXCR4单抗,下层添加SDF-1,流式细胞仪检测迁移细胞数,计算迁移率.同时用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)的方法检测迁移前后CD34+细胞的SlPRs的表达情况.另用兀Y720处理脐血CD34+细胞,在不同时间点(1、8、16h)用流式细胞仪检测CD49d(VLA-4)、CD11a(LFA-1)、CD62L(L-selectin)的表达.结果 FTY720不影响CD34+细胞的自发迁移,但明显促进SDF-1诱导的CD34+细胞迁移(15.262.14 vs 28.64 2.37),这种作用可以被PTX和CXCR4单抗完全阻断.新鲜分离的脐血CD34+细胞表达S1P1-5,但在FTY720和SDF-1作用下发生迁移的CD34+细胞只表达S1P1、S1P3,S1P4.CD34+细胞在FTY720作用下各个时间点测得的黏附分子表达水平无差别.结论 S1PRs可能与CD34+细胞快速迁移有关,激活S1PRs能够增加SDF-1对CD34+细胞的趋化作用,这种作用是通过CXCR4介导的,信号传递偶联PTX敏感的Gi蛋白受体家族.表达特定S1PRs的CD34+细胞才容易发生快速迁移.FTY720不改变CD34+细胞黏附分子的表达.     

B类清道夫受体与糖、脂代谢及动脉粥样硬化关系的研究进展

以糖、脂代谢异常为特征的疾病(如2型糖尿病)易引起动脉粥样硬化(As),治疗糖脂代谢异常疾病的主要目的之一就是预防As的发生、发展。B类清道夫受体是低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)代谢中的重要受体蛋白,包括CD36和B类1型清道夫受体B(SRB1)两种。CD36是一种细胞膜糖蛋白,存在多种配体(如氧化的和乙酰化的低密度脂蛋白胆固醇等),参与包括脂质代谢和As等在内的生理和病理过程。SRB1是CD36蛋白家族成员之一,与CD36共享30%的同源序列,是脂蛋白受体中唯一能真正介导细胞与HDL-C作用的膜受体。     

晚期糖基化终末产物通过LOX-1调节HUVEC-12细胞CD40的表达

目的研究晚期糖基化终末产物(AGEs)对人脐静脉内皮细胞株(HUVEC-12)细胞CD40表达的影响及凝集素样氧化低密度脂蛋白受体(LOX-1)的作用。方法实验分组:不同浓度(0,100、200、400、800 mg/L)的AGEs处理细胞24 h;400 mg/L的AGEs处理细胞不同时间(0、6、12、24 h);250μg/mL的LOX-1抑制剂PIA预处理后,加入200 mg/L的AGEs处理细胞。采用实时定量PCR和Western-blot技术分别检测各处理组HU-VEC-12细胞CD40 mRNA和蛋白质的表达。结果不同浓度AGEs处理细胞24 h,随着处理浓度增大,HUVEC-12细胞CD40的表达逐渐上调;400 mg/L的AGEs处理细胞不同时间,随着处理时间的延长,CD40表达逐渐增高;250μg/mL的PIA预处理细胞,明显下调AGEs诱导的HUVEC-12细胞CD40高表达,对正常状态下的CD40表达没有影响。结论AGEs诱导HUVEC-12细胞CD40表达上调,并存在量效和时效关系;LOX-1参与介导了AGEs作用下HUVEC-12细胞CD40的高表达。     

细胞粘附分子CD44与乳腺癌

粘附分子在癌细胞的侵袭和转移中有重要作用。近年来 ,国内外许多学者深入研究了粘附分子与肿瘤侵袭和转移的关系 ,报道较多。透明质酸受体类 (CD4 4 )是细胞粘附分子(Cellularadhesionmolecules,CAMs)的一种 ,本文着重讨论粘附分子CD4 4与乳腺癌的侵袭、转移 ,相互关系及在乳腺癌中的表达。CD4 4又称Hermes抗原、pgq - 1、ECMR -Ⅲ ,为分布极为广泛的细胞表面跨膜糖蛋白 ,主要参与细胞与间质之间特异性粘连过程。CD4 4基因是粘附分子家庭成员之一 ,其编码的跨膜糖蛋白为细胞外基质透明质酸的受体 ,参与体内多种正常生理功能。1　CD…     

NK细胞受体与相关配体

NK细胞表面表达非抗原特异性的受体。按分子结构分类,NK细胞受体可分为Ig超家族和C型凝集素超家族。按其介导的功能,可分为NK细胞激活性受体(NKAR)与NK细胞抑制性受体(NKIR)。NKAR包括介导ADCC的CD16,介导自然杀伤的NKR-P1、与DAP12相偶联的KAR,以及协同刺激受体等。它们多依赖胞浆内ITAM模体传递激活信号。NKIR主要包括KIR与CD94/NKG2复合体,其特异性配体为MHC-I类分子,与NK细胞识别自体细胞密切相关。NKIR需要与NKAR共聚,借助胞浆内的ITIM模体来抑制激活性受体的活化及NK细胞的细胞毒作用。     

维生素D通过影响PBMC炎症相关基因对IBD的机制研究

目的 通过研究外周血单个核细胞(PBMC)中炎症相关基因的变化，探讨维生素D对炎症性肠病(IBD)发病的作用机制。方法 在GEO数据库中的GSE50012下载24个样本量，分为服用维生素D患者组和未服用维生素D患者组，每组12例，寻找2组患者PBMC中mRNA的差异性表达，同时对差异性表达的基因进行GO/KEGG和GSEA富集分析，寻找可能参与的通路或分子功能，对差异基因进行分子互作网络分析，寻找关键基因Hub。收集处于活动期的128例溃疡性结肠炎(UC)和62例克罗恩病(CD)患者，通过是否服用维生素D分为4组，分别测定每组PBMC中的候选关键基因表达，评价维生素D对IBD的作用。结果 GEO数据库筛选出差异表达基因(DEGs)共计128个，其中高表达53个，低表达75个，GO分析结果显示DEGs主要参与细胞因子活性、趋化因子与受体结合、调节炎症反应、参与免疫效应过程、介导淋巴细胞免疫等过程，KEGG分析得出细胞因子-细胞因子受体相互作用、IBD、IgA介导的肠道免疫网络等信号通路；GSEA分析结果表明差异性表达的分子主要参与了维生素D受体途径、KEGG趋化因子信号通路等，蛋白互作网...     

神经节苷脂GM_1和GM_3对受体介导的转铁蛋白内吞过程的影响

我们从正常人脑及肝脏中分离得到纯化的神经节苷脂GM_1[Gal-GalNAc-(NeuNAc)Gal-Glc-Cer]和GM_3[NeuNAc-Gal-Glc-Cer],发现外源性GM_1或GM_3的加入能不同程度地抑制SMMC-7721人肝癌细胞的生长,但仅GM_3能抑制转铁蛋白(Tf)促进的细胞生长。进一步的研究发现,GM_3并不影响Tf与细胞膜表面受体的结合,而是抑制了受体介导的Tf内吞过程,内吞囊泡的形成及融合均受到影响。结果提示:GM_3在膜中的嵌入,可能使受体的构象发生变化或影响了膜的流动性,从而抑制Tf的内吞过程。     

胃癌细胞转铁蛋白受体的表达与化疗药物敏感性的关系

目的　研究胃癌细胞转铁蛋白受体 (CD71)的表达与化疗药物敏感性的关系。方法　利用流式细胞仪 (FCM)检测 5 8例胃癌组织CD71+ 细胞表达率 ,同时用MTT比色法检测化疗药物敏感性。结果　胃癌组织CD71+细胞表达率与 5 -氟脲嘧淀 (5 -FU)及氨甲喋呤 (MTX)相对抑制率存在正相关 (均P <0 0 5 ) ,而与顺铂 (DDP)及丝裂霉素 (MMC)相对抑制率无相关 (均P >0 0 5 ) ;5 -FU、MTX药物敏感与不敏感两组间的胃癌组织CD71+ 细胞表达率有明显差异 (均P <0 0 1) ,而DDP、MMC药物敏感与不敏感两组间胃癌组织CD71+ 细胞表达率无差异 (均P >0 0 5 )。结论　胃癌组织CD71+ 细胞表达增高时 ,细胞处于增殖状态 ,对周期特异性化疗药物的敏感性增高 ;而对周期非特异性化疗药物不敏感。     

熊果酸对刀豆蛋白A诱导小鼠T细胞增殖与激活的影响

目的研究熊果酸(Ursolic acid,UA)对小鼠T细胞活化和增殖的影响,并探讨其免疫调节机制。方法以刀豆蛋白A(ConA)诱导小鼠T细胞活化和增殖,用MTT法测定细胞增殖,利用流式细胞术检测T细胞早期活化标志CD69、中期活化标志CD25与晚期活化标志CD71的表达情况。结果在ConA刺激下48 h后,小鼠T淋巴细胞MTT吸收度显著高于正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。熊果酸(10～40μM)组与ConA组比较显著降低了MTT吸收度,差异具有统计学意义(P<0.01)。在ConA刺激淋巴细胞18 h后,小鼠T细胞CD3 CD69 表达率显著高于正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.01),ConA刺激36 h后,T细胞CD3 CD25 表达率显著高于正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.01),ConA刺激48 h后,T细胞CD3 CD71 显著高于正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。熊果酸组在浓度为10～40μM时与ConA组比较,均能显著降低CD25、CD69、CD71的表达率,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论熊果酸可以显著的抑制多克隆刺激剂ConA介导的小鼠T细胞的活化和增殖。     

全反式维甲酸诱导K562细胞分化过程中线粒体铁蛋白表达的研究

目的 研究K562白血病细胞在全反式维甲酸(ATRA)诱导分化过程中线粒体铁蛋白(MtF)、运铁蛋白受体1(TfR1)和铁蛋白(Fn)mRNA表达水平的变化情况,探讨MtF在白血病细胞增殖和铁代谢方面的作用.方法 K562细胞加入ATRA(终浓度1 μmol/L)中诱导培养,分别于第1、3、5 d收集细胞,分别进行:①瑞士染色观察各时间点的细胞形态;流式细胞学检测细胞表面分化抗原CD13的表达;②Trizol法提取各时间点细胞的RNA,通过半定量RT-PCR方法 检测各时点MtF、TfR1和Fn基因的表达水平.同时设未用ATRA诱导培养的K562细胞为对照组.结果 1 μmol/L的ATRA可诱导K562细胞向粒系细胞分化,诱导培养第5 d,细胞表面CD13的表达水平增加,诱导分化率为21.2%,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).诱导分化前K562细胞即有MtF mRNA表达,但随细胞诱导时间的延长,MtF和TfR1 mRNA表达呈下降趋势,诱导分化第5 d的表达水平分别为诱导分化前的86.5%和79.2%;而Fn mRNA的表达呈上调趋势,诱导分化第5 d表达水平为诱导分化前的1.21倍.结论 ATRA诱导K562细胞向粒系细胞分化过程中,MtF和TfR1 mRNA表达下调,而Fn mRNA表达上调,这种协调变化有助于降低细胞通过TfR1介导的铁摄取,从而抑制或影响细胞增殖潜能.     

Toll样受体3和4在人骨髓间充质干细胞中的表达及其活化对细胞增殖的影响

  目的 研究Toll样受体（TLR）3和4在人骨髓间充质干细胞(BM-MSC)中的表达及其活化对细胞增殖的影响。方法 Ficoll法分离培养健康供体的BM-MSC;用流式细胞(FCM)检测BM-MSC中CD34、CD45、HLA-DR、CD44和CD71的表达;免疫细胞化学法检测爬片BM-MSC细胞中CD71的表达;RT-PCR法检测BM-MSC中TLR3和TLR4的表达;MTT法检测 POLY(IC)和LPS对BM-MSC增殖的影响。结果 FCM法发现体外分离培养的BM-MSC中CD34、CD45和HLA-DR表达呈阴性,CD44和CD71表达呈阳性;爬片BM-MSC细胞中CD71的表达呈阳性;BM-MSC中有较高水平的TLR 3和TLR4表达;体外培养第5天时,各浓度POLY(IC)组存活细胞数均少于血清组（P＜0.01）,而多于单纯培养基组（P <0.05）,浓度和存活细胞数间存在半对数直线相关关系（r＝?0.998,P＜0.05）;体外培养第7天时,中浓度和高浓度LPS组存活细胞数均少于血清组（P＜0.05）,而多于单纯培养基组（P＜0.01）。结论 健康供体BM-MSC中存在高水平TLR3和TLR4 mRNA的表达;POLY(IC)和LPS通过TLR3和TLR4的介导影响BM-MSC的增殖。     

B细胞活化辅助受体

B细胞活化辅助受体通过补体系统将获得性免疫与固有性免疫联系起来。其中的CD21作为补体的受体,CD19辅助BCR转导信号。CD21也表达于滤泡树突状细胞,介导抗原的长期保留,这对维持记忆B细胞是必不可少的。B细胞活化辅助受体在对自身抗原的阴性选择中也起作用。     

ROS对树突细胞表型和功能成熟作用的研究进展

树突状细胞(DC)是体内最有效的抗原提呈细胞,可以将抗原提呈给T淋巴细胞,诱生抗原特异性CTL,在免疫反应中发挥重要作用. 活性氧(ROS)、自由基(RF)是体内一系列重要的生物活性分子,大量研究表明ROS参与包括NF-κB在内的多种信号途径,诱导重要的免疫系统基因的表达. 氧化应激诱导树突状细胞几种与T细胞相互作用的表面标志分子的表达上调,包括MHCⅡ类分子(DR和DQ)及共刺激分子CD40、CD80和CD86,并通过下调由甘露糖受体介导的胞饮作用来诱导DC早期成熟. 另外ROS处理过的DC比正常细胞更能刺激T淋巴细胞增殖,此作用可以被自由基清除剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)和别嘌呤醇抑制. 本文就ROS对树突细胞表型和功能成熟作用的研究进展予以综述.     

类风湿关节炎的自身免疫应答机制

类风湿关节炎(RA)是一种病因未明的自身免疫炎性疾病,主要累及关节滑膜。致炎细胞因子和效应性CD4+T细胞在RA发病及疾病进展过程中起重要的作用。白细胞介素(IL)6通过酪氨酸激酶/信号转录子和转录激活子(JAK/STAT)信号转导通路,诱导相关细胞因子的产生,并参与骨关节的重建。IL-1、肿瘤坏死因子(TNF)α通过核因子κB信号转导通路,调节相关炎性细胞因子及趋化因子的表达,介导免疫应答。CD4+T细胞在自身免疫反应过程发挥重要的作用。现在较一致的观点是特异性表达IL-17的T辅助(Th)1细胞和表达IL-12和干扰素γ的Th1细胞在RA的发病和炎性反应进程中起协同作用,共同调节自身的免疫应答。     

CD47在急性髓细胞白血病中的研究进展

CD47是一种在多种细胞上表达的多功能表面蛋白。作为膜受体参与许多正常和病理生理过程。CD47在急性髓细胞白血病细胞表面高表达,其与巨噬细胞上的信号调节蛋白α结合,介导“不要吃我”信号,抑制巨噬细胞的吞噬功能。通过CD47抑制剂阻断CD47/信号调节蛋白α信号通路的方法已成为肿瘤免疫治疗中的研究热点。本文就CD47诱导的免疫逃逸,靶向CD47的单克隆抗体在急性髓细胞白血病治疗中的研究进展进行综述。