CD138表达水平对不同免疫表型弥漫大B细胞淋巴瘤患者预后临床价值分析

目的探讨CDl38表达水平对不同免疫表型弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者预后的临床价值。方法选取自2014年1月至2016年1月就诊的103例DLBCL患者为研究对象。采用免疫组化En Vision法对研究对象的组织标本进行CDl38表达水平的检测,同时测定CD10、MUM1以及bcl-6表达水平辅助完成免疫分型,比较两种免疫学分型患者CD138表达水平的差异,分析患者的存活率,并对CD138与患者总生存期的相关性进行Cox回归分析。结果 GCB型和非GCB型患者分别为53例和50例。GCB型和非GCB型患者在性别、年龄、原发部位、Ann Arbor分期及国际预后指数(IPI)等方面比较,差异均有统计学意义(P <0. 05)。GCB型和非GCB型患者免疫组化检出CD138阳性率分别为15. 1%(8/53)和14. 0%(7/50),差异无统计学意义(P> 0. 05)。GCB型中,CD138阳性患者的生存期为(11. 22±4. 60)个月,1年存活率为35. 8%(19/53); CD138阴性患者的生存期为(16. 92±4. 38)个月,1年存活率为47. 2%(25/53),CD138阳性GCB型患者的生存期,1年存活率均低于CD138阴性GCB型患者,差异有统计学意义(P <0. 05)。在非GCB型中,CD138阳性患者的生存期为(11. 08±4. 41)个月,1年存活率为40. 0%(20/50); CD138阴性非GCB型患者的生存期为(17. 01±4. 57)个月,1年存活率为50. 0%(25/50),CD138阳性非GCB型患者的生存期、1年存活率显著低于CD138阴性非GCB型患者,差异均有统计学意义(P <0. 05)。Cox回归模型分析CD138与患者生存期相关性提示,CD138阳性是生存期降低的危险因素(OR=1. 399,95%可信区间为1. 022～1. 914,P <0. 05)。结论不同免疫分型DLBCL患者CD138阳性状态下生存期、1年生存率均较低; CD138阳性是造成患者生存期短的危险因素。     

多发性骨髓瘤外周血T细胞亚群和B细胞相关免疫表型分析

 目的分析不同临床期多发性骨髓瘤(Multiple myeloma,MM)细胞免疫功能的变化和外周血肿瘤相关B淋巴细胞的免疫表型特点.方法采用直接或间接免疫荧光标记流式细胞术分析MM患者外周血T和B淋巴细胞的免疫表型.结果初治MM患者CD4、CD25及CD4/CD8比值显著降低(P＜0.05),CD8升高(P＜0.01);稳定期除了CD25降低外,T细胞亚群正常;进展期CD3,CD4及CD4/CD8比值均显著降低(P＜0.05或P＜0.01),CD8细胞升高(P＜0.01).结论不同临床期细胞免疫功能不同,细胞免疫调节与MM发病和病情进展有关,MM患者外周血肿瘤相关B细胞表达CD10抗原.     

CD44在结直肠癌病灶及转移淋巴结中的表达及临床意义

目的探讨CD44在结直肠癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组化方法,检测65例结直肠癌原发灶、正常结肠黏膜、转移淋巴结CD44表达。采用寿命表法分析CD44表达对患者生存的影响。结果 65例结直肠癌原发灶、正常结肠黏膜、转移淋巴结CD44表达阳性率分别为:47.7%、21.5%、89.2%。癌原发灶和转移淋巴结中CD44表达阳性率高于正常肠黏膜组织(P<0.01)。按结直肠癌TNM分期,Ⅱ、Ⅲ期CD44阳性率高于Ⅰ期(P<0.01),Ⅲ期阳性率高于Ⅱ期(P<0.05)。比较不同病理组织学类型CD44表达检测结果,低分化腺癌CD44阳性率高于中分化和高分化腺癌(P<0.05)。结直肠癌原发灶CD44阳性组淋巴结转移率为74.2%。CD44阴性组淋巴结转移率为41.2%。两组比较有显著统计学差异(P<0.01)。采用寿命表法分析CD44表达对患者生存率的影响,3年无病累积生存率CD44阳性组为52.4%,CD44阴性组为77.5%,两组比较有统计学差异(P<0.05)。结论 CD44表达与结直肠癌发生、淋巴结转移及患者预后密切相关。     

多发性骨髓瘤的类PET表现及其与临床分期的相关性研究

目的分析多发性骨髓瘤(MM)的全身磁共振类PET表现;探讨MM全身磁共振类PET分期与临床分期之间的相关性。方法采用Siemens 3.0T磁共振对28例经病理或临床综合资料确诊的多发性骨髓瘤患者进行全身磁共振类PET检查;采用Fisher精确概率法对MM全身磁共振类PET分期与临床分期的相关性进行分析。结果多发性骨髓瘤比较常见的临床表现有骨骼疼痛、感染、出血、肾功能损害、肝脾肿大和表浅淋巴结肿大等;28例患者中全身磁共振类PET表现为正常型2例,轻度浸润型6例,中度浸润型12例,重度浸润型8例;临床分期为I期7例,II期10例,Ⅲ期11例;两种分期方法进行统计学分析得出P=0.480.05。结论全身磁共振类PET成像对于多发性骨髓瘤具有良好的成像作用以及诊断和分期价值,MM全身磁共振类PET分期与临床分期之间没有统计学差异。     

抗CD25单克隆抗体对肾移植受者CD4~+ CD25~(high)调节性T细胞的影响

目的 评价抗CD25单克隆抗体对肾移植受者术后早期CD4~+ CD25~(high)调节性T细胞(CD4~+ CD25~(high)Treg)的影响.方法 2007年2-9月接受初次亲属活体供肾移植的受者41例,根据是否使用抗CD25单克隆抗体(商品名daclizumab)分为抗体组(21例)和对照组(20例).其中抗体组在肾移植术前2h及术后第14天分别给予抗CD25单抗各50mg.在移植前及移植后第13、17、60天分别留取肝素抗凝外周血15ml.应用流式细胞仪测定两组受者外周血CD4~+T细胞和CD4~+ CD25~(high)Treg比例的变化,半定量RTPCR检测CD25 mRNA的表达变化.结果 肾移植术后13、17、60d抗体组的CD25~+ T细胞占CD4~+ T细胞的比例(20%±8%、13%±7%、24%±9%)低于对照组(45%±6%、41%±5%、40%±6%),差异有统计学意义(P<0.05).抗体组术后第17天CD4~+ CD25~(high)Treg占CD4~+ T细胞的比例为4.40%±0.26%,明显低于对照组(8.56%±0.36%,P<0.01);而术后13、60d抗体组CD4~+ CD25~(high)Treg所占比例分别为7.00%±0.47%、3.75%±0.19%,与对照组(分别为8.04%±0.32%、3.66%±0.31%)比较差异无统计学意义(P>0.05).抗体组CD25 mRNA相对表达水平在给予第二次抗体前(术后第13天)为1.65±0.22,术后第17天为1.84±0.27,两者间差异无统计学意义(P>0.05).对照组术后第17天CD25 mRNA相对表达水平为1.70±0.23,与抗体组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 两剂共100mg抗CD25单抗仅一过性地降低CD4~+ CD25~(high)Treg,不会影响其活化扩增,无损于术后早期的免疫耐受诱导及维持.     

放射损伤对鼻咽癌外周血CD4+CD25high调节性T细胞的影响

目的通过分析放疗前后鼻咽癌(NPC)患者外周血CD4+CD25high调节T(Tr)细胞比例及其变化规律.初步探讨NPC患者免疫抑制机制和放疗对免疫抑制的影响,为有效提高NPC的治疗疗效提供参考.方法采用流式细胞术检测36例初治的鼻咽癌患者放疗前、放疗后和30例正常健康者(对照组)外周血中T细胞亚群及CD4+CD25high T细胞比例.结果放疗前鼻咽癌患者CD3+、CD4+、CD8+T细胞比例及CD4/CD8比值接近正常对照组(P＞0.05);而CD4+CD25high Tr细胞比例明显高于正常对照组[分别为(2.76±1.06)%,(2.06±0.98)%,P＜0.05];放疗结束时,与放疗前比较,外周血CD4+T细胞比例减低、但差异无统计学意义(P＞0.05);CD4+/CD8+比值减低(P＜0.05),而CD4+CD25high Tr细胞比例明显升高,差异有统计学意义[(4.88±1.02)%,P＜0.05].结论CD4+CD25high Tr细胞可能是鼻咽癌患者免疫抑制的重要原因之一,与鼻咽癌免疫逃逸有关.放疗后外周血CD4+CD25high Tr细胞比例比CD4+/CD8+比值更能敏感反映免疫功能状态,有可能成为鼻咽癌的更有效的免疫监测指标.     

肾癌患者外周血淋巴细胞CD44的表达

目的:研究细胞表面粘附分子CD44在肾细胞癌外周血淋巴细胞中表达及临床意义。方法:根治术的肾细胞癌59例,男39例,女20例,年龄20～67岁。CD44表达应用流式细胞免疫学方法检测,并与正常对照(n=30)进行比较。结果:肾细胞癌外周血淋巴细胞中CD44表达均明显高于正常对照(P<0.01),手术后2周和12个月表达降低,但仍高于对照(P<0.05)。T3+T4期CD44表达明显高于T1+T2期(P<005),肾癌有转移患者CD44表达均高于无转移者(P<0.01),肾癌不同组织类型的CD44表达无显著性差异(P>005)。结论:肾癌患者CD44表达水平明显高于正常对照,且手术后可以明显下降,其表达水平与肾癌的进展情况及有无转移、预后有一定关系。     

肾细胞癌外周血淋巴细胞CD44定量检测的临床意义

目的　探讨细胞表面黏附分子CD44在肾细胞癌外周血淋巴细胞中的表达及临床意义。方法　应用流式细胞免疫学方法 ,检测 3 0例肾细胞癌外周血淋巴细胞中CD44的表达 ,并与肾良性病变组 ( 2 0例 )和正常对照组 ( 2 0例 )进行对照。结果　 3 0例肾细胞癌外周血淋巴细胞中CD44的表达均明显高于肾良性病变组和正常对照组 (P <0 0 1) ,肾良性病变组和正常对照组之间CD44的表达 ,差异无显著性 (P <0 0 5 )。T3+T4 期和T1 +T2 期之间CD44的表达比较 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。肾癌伴淋巴结转移CD44的表达均高于不伴淋巴结转移(P <0 0 1)。肾癌不同组织类型的CD44的含量差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论　肾细胞癌外周血淋巴细胞中CD44的检测对肾肿瘤性质鉴别、肾癌浸润转移和预后的估计有重要临床价值     

MiR-32-3p在多发性骨髓瘤中的表达及其临床意义

目的 探索miR-32-3p在多发性骨髓瘤（multiple myeloma,MM）中的表达及意义。方法 分析8例健康供者和26例初诊骨髓瘤患者骨髓CD138+细胞,RT-PCR检测骨髓CD138+细胞中miR-32-3p的表达水平。建立miR-32-3p过表达的MM细胞系（ARP1-miR-32-3pOE）和对照组（ARP1-EV）,检测miR-32-3p对于MM细胞增殖的影响;检测miR-32-3p对细胞增殖相关蛋白（c-Myc,Aurka,Bcl2,Notch1,p53,p-H2AX）的影响。小鼠体内成瘤实验检测miR-32-3p肿瘤细胞增殖的影响。结果 骨髓瘤患者骨髓CD138+细胞miR-32-3p表达水平低于健康供者（7.33±6.17 vs 40.49±27.97,P<0.001）。ARP1-miR-32-3pOE细胞系增殖速度较ARP1-EV组减低(P<0.001)。硼替佐米（Bortezomib）药物作用下,ARP1-EV细胞系存活率均高于同时点的ARP1-miR-32-3p-OE细胞系（P<0.05),ARP1-miR-32-3pOE细胞系c-Myc,Aurka,Bcl2,Notch1表达较ARP1-EV下调,p-53,p-H2AX的表达上调。成瘤实验中,ARP1-miR-32-3pOE组小鼠肿瘤体积（V3=2.67±1.06）较ARP1-EV组肿瘤体积（V3=4.70±2.15）减小(P<0.05)。结论 MiR-32-3p在MM 患者中低表达,体内体外实验证实miR-32-3p能够抑制MM细胞增殖,增加对抗癌药物硼替佐米的敏感性,显示出潜在的抑癌作用,有望成为治疗MM的新靶点。     

IgA型多发性骨髓瘤25例的临床特征分析

目的探讨IgA型多发性骨髓瘤(MM)的临床特征,以提高对该类型多发性骨髓瘤的认识。方法回顾性分析我院2000—2011年收治的25例IgA型多发性骨髓瘤患者的临床资料。结果 (1)IgA型多发性骨髓瘤占所有多发性骨髓瘤的13.2%(25/198),发病中位年龄66(48～82)岁,多见于女性(60%),骨痛、乏力、肾功损害是其主要的首发症状。(2)发生骨事件24例,腰骶部是其主要损害部位,经白蛋白校正后血钙≥2.78 mmol/L 5例。(3)25例患者中,20例进行了血清、尿液轻链水平的测定,其中IgA-κ13例(65%),IgA-λ7例(35%);DS分期:Ⅱ期3例,Ⅲ期22例;ISS分期:Ⅰ期1例,Ⅱ期7例,Ⅲ期17例。(4)化疗以PD、VADT、M2、MP、LD方案为主,2例患者在达到CR后进行CIK细胞过继免疫治疗,1例患者在达到nCR后进行自体造血干细胞移植,中位随访13月,生存15例。结论 IgA型多发性骨髓瘤诊断时大多处于Ⅲ期,骨事件、肾功损害发生率高,对治疗反应及预后差。     

Comparative analysis of multiple myeloma treatment by CD138 antigen targeting with bismuth-213 and Melphalan chemotherapy

IntroductionMultiple myeloma (MM) is a B-cell malignancy of terminally differentiated plasma cells within the bone marrow. Despite intense research to develop new treatments, cure is almost never achieved. Alpha-radioimmunotherapy (RIT) has been shown to be effective in vivo in a MM model. In order to define where alpha-RIT stands in MM treatment, the aim of this study was to compare Melphalan, MM standard treatment, with alpha-RIT using a [213Bi]-anti-mCD138 antibody in a syngeneic MM mouse model.MethodsC57BL/KaLwRij mice were grafted with 1 × 10⁶ 5T33 murine MM cells. Luciferase transfected 5T33 cells were used for in vivo localization. The first step of the study was to assess the dose-response of Melphalan 21 days after engraftment. The second step consisted in therapeutic combination: Melphalan followed by RIT at day 22 or day 25 after engraftment. Toxicity (animal weight, blood cell counts) and treatment efficacy were studied in animals receiving no treatment, injected with Melphalan alone, RIT alone at day 22 or day 25 (3.7 MBq of [213Bi]-anti-CD138) and Melphalan combined with alpha-RIT.ResultsFifty percent of untreated mice died by day 63 after MM engraftment. In mice treated with Melphalan alone, only the 200 μg dose improved median survival. No animal was cured after Melphalan treatment whereas 60% of the mice survived with RIT alone at day 22 after tumor engraftment with only slight and reversible hematological radiotoxicity. No therapeutic effect was observed with alpha-RIT 25 days after engraftment. Melphalan and alpha-RIT combination does not improve overall survival compared to RIT alone, and results in increased leukocyte and red blood cell toxicity.ConclusionsAlpha-RIT seems to be a good alternative to Melphalan. Association of these two treatments provides no benefit. The perspectives of this work would be to evaluate RIT impact on the regimens incorporating the novel agents bortezomide, thalidomide and lenalidomide.     

辐射对EL-4、J774A.1细胞CD2、CD48表达的影响

目的　通过时程及量效研究观察不同剂量X射线照射对EL 4和J774A 1细胞株中表面分子CD2、CD4 8的影响。方法　采用荧光免疫流式细胞术检测蛋白表达的变化。结果　 (1)EL 4细胞CD2分子表达结果显示 ,0 0 75GyX射线照射后CD2合成在照射后 4h即开始升高 ,至 8～ 16h达峰值 (P <0 0 5～ 0 0 1) ,2Gy照射后则从照射后 4h开始下降 ,至 8h达最低点 (P <0 0 1) ,一直持续较低至 4 8h恢复 ;8h量效结果显示 ,在低剂量区 0 0 5 0 ,0 0 75Gy使CD2表达上调 ,而高剂量范围中 1,2Gy使CD2表达下调。 (2 )J774A 1细胞CD4 8分子表达结果显示 ,0 0 75GyX射线照射后CD4 8合成在照射后 2h即开始升高 ,至 4h达峰值 (P <0 0 5 ) ,随后急剧下降 ,8h恢复至假照射水平 ,16～4 8h下降明显低于假照射水平 (P <0 0 5 ) ,2Gy照射后则从照射后 2h开始下降 ,至 8h达最低点(P <0 0 1) ,随后有所恢复 ,但直至 4 8h仍未能恢复至假照射水平。 4h量效结果显示 ,在低剂量区0 0 5 0 ,0 0 75 ,0 10 0Gy使CD4 8表达上调 ,而高剂量范围中 1～ 6Gy均使CD4 8表达下调 (P <0 0 5～0 0 1)。结论　X射线照射可引起CD2、CD4 8不同的辐射效应 ,两者的相互作用体现出低剂量辐射具有不同于高剂量辐射的兴奋效应。     

miR-503对辐射诱导U937细胞CD40表达的调控作用

目的 探讨miR-503在U937细胞中与CD40的靶向关系,并观察其对辐射诱导U937细胞CD40表达的调控作用。方法 将miR-503序列插入载体pcDNA-DEST-47中构建真核表达质粒;同时构建CD40基因3’-UTR-荧光素酶报告质粒,与pcDNA-DEST-miR-503质粒共转染至U937细胞,分析miR-503对其调控作用;同时用miR-203和miR-29b作为对照,观察miR-503对CD40的靶向作用。采用Western blot方法,证实miR-503对CD40蛋白表达的抑制作用及照射后U937细胞CD40蛋白表达变化;采用Real-Time PCR方法检测 5 Gy电离辐射照射后U937细胞miR-503表达量。结果 psiCHECK2-CD40和pcDNA-DEST-miR-503两种质粒共转染组的荧光素酶表达明显低于单独转染的空载体和靶基因CD40组(t=3.16,P<0.05),miR-203和miR-29b不能抑制CD40荧光素酶活性,而miR-503明显抑制CD40荧光素酶活性(t=5.25,P<0.01);转染pcDNA-DEST-miR-503质粒后在U937细胞中,靶基因CD40蛋白的表达受抑制。5 Gy电离辐射照射后,U937细胞中miR-503表达量上调(t=3.63~17.00,P<0.01),而CD40蛋白表达下降。结论 miR-503与CD40可能是靶向关系,并参与其调控作用。辐射上调人急性白血病细胞株U937细胞的miR-503的表达量,而且抑制CD40蛋白表达,说明miR-503可能参与辐射对肿瘤细胞CD40蛋白表达的调控作用。     

早期梅毒皮损组织CD3、CD20和CD68的表达

为探讨一，二期梅毒皮损组织细胞免疫应答过程及机制，采用免疫组织化学及计算机图像分析的探讨，对一，二期梅毒病损组织中的CD3，CD20，CD68表达进行定性定量分析研究。结果显示，43例一，二期梅毒标本中CD3，CD20，CD68表达均阳性，表达水平病期发展，皮肤损害加重而逐渐升高。CD68表达水平高于CD3，CD20，尤其在血管周围表达明显增高，CD20表达较低。研究表明，T细胞，B细胞，特别是巨噬细胞在清除早期梅毒组织内感染的梅毒螺旋体过程中起着重要的细胞免疫调节作用，但作用不完全。     

严重创伤及合并内毒素攻击后小鼠肝、肺组织巨噬细胞CD14和清道夫受体的表达及其意义

目的　进一步揭示创伤及合并内毒素攻击后 ,小鼠肝、肺组织内CD14和清道夫受体(scavengerreceptor,SR)的表达变化规律及器官间的差异性。　方法　小鼠 84只分为正常对照组 (4只 )、创伤组 (40只 )、创伤合并内毒素攻击组 (40只 )。采用双侧股骨骨折合并内毒素血症小鼠模型 ,以免疫组化方法检测肝、肺组织巨噬细胞CD14和SR在创伤后 2 ,4 ,6 ,9,13h时的动态变化。　结果　肝组织巨噬细胞CD14和SR分别在创伤后 9h发生上调和下调 (P <0 .0 5 ) ,肺组织巨噬细胞CD14和SR分别在创伤后 6h发生上调和下调 (P <0 .0 5 )。创伤合并内毒素攻击后 ,肝、肺组织巨噬细胞CD14和SR均于伤后 2h分别呈显著的上调和下调改变 (P <0 .0 5和 0 .0 1) ,并呈显著负相关关系 (r=- 0 .82 3,- 0 .797,P <0 .0 1) ,而且创伤后 6 ,9,13h时肺组织内CD14和创伤后 4hSR表达变化幅度大于肝组织 (P <0 .0 5和 0 .0 1)。　结论　创伤及合并内毒素攻击后 ,肝、肺组织内CD14和SR表达发生双向调节 ,CD14表达上调和SR表达下调可能与炎症反应由“自控”向“失控”转化有关。肝、肺组织内CD14和SR表达上的差异可能与创伤及合并内毒素攻击时器官功能损害的序贯性相关。     

Diagnostic value of whole-body low-dose computed tomography (WBLDCT) in bone lesions detection in patients with multiple myeloma (MM)

Purpose

To assess the role of whole-body low-dose computed tomography (WBLDCT) in the diagnosis and staging of patients with suspicion of multiple myeloma (MM).

Materials and methods

A total of 138 patients (76 male and 62 female; mean age 63.5 years, range 50–81 years), with early MM, underwent WBLDCT protocol study, performed on 16-slice scanner (Brilliance, Philips Medical System, Eindhoven, The Netherlands): tube voltage 120 kV; tube current time product 40 mAs. Diagnosis of osteolytic lesions was performed on the basis of axial and multiplanar reformatted images, whereas the assessment of spinal misalignment and fracture was done by using multiplanar reformatted images. The overall dose delivered to each patient was 4.2 mSv. Every patient gave personal informed consent, as required by our institution guidelines.

Results

The diagnosis was established either by histopathology or imaging follow-up (size increase of over a period time). In all 138 patients, image resolution was diagnostic, enabling correct classification of multiple myeloma patients. WBLDCT showed a total of 328 pathologic bone findings in 81/138 patients. CT scanning resulted in complete evaluation of the bone lesions in these areas of the skeleton: skull (42), humerus (15), femur (20), ribs (7), scapulae (13), pelvis (35), clavicle (13), sternum (10), cervical (39), dorsal (65), lombar (48) and sacral rachis (21). In 40/81 bone involvement detected by CT was the only CRAB criterion present. Furthermore, WBLDCT demonstrated pleuro-pulmonary lesions in 20 patients (11 infective, 9 as MM localizations) and 1 renal neoplasia.

Conclusion

WBLDCT, detecting bone marrow localizations and demonstrating extra-osseous findings, with a fast scanning time and high resolution images, is a reliable imaging-based tool for a proper management of MM patients.