葡萄球菌诱导型克林霉素耐药的检测

目的：通过检测葡萄球菌诱导型克林霉素耐药，为临床提供比较可靠的药敏状况，指导用药。方法：应用生物-梅里埃-VETEK全自动微生物分析系统、API细菌鉴定系统鉴定细菌，GPS及K—B法进行药敏试验。根据NCCLS 2004年版“增加对检测诱导克林霉素耐药的注释”对红霉素耐药菌进行D试验。结果：金黄色葡萄球菌诱导型克林霉素耐药占17％，凝固酶阴性葡萄球菌诱导型克林霉素耐药占24％。结论：检测葡萄球菌诱导型克林霉素耐药，避免盲目使用克林霉素而导致治疗失败，防止将大环内酯类耐药误认为克林霉素耐药而失去克林霉素的治疗机会。     

葡萄球菌属红霉素诱导克林霉素耐药检测

目的:测定葡萄球菌属对红霉素和克林霉素耐药性及诱导克林霉素耐药率.方法:药敏试验采用K-B法,D-试验检测红霉素对克林霉素诱导耐药表型.结果:269株葡萄球菌红霉素和克林霉素同时耐药占48.7%.D-试验阳性占所检测葡萄球菌的24.5%,占红霉素耐药克林霉素敏感株的68.0%.结论:D-试验检测葡萄球菌属中红霉素对克林霉素诱导性耐药可帮助临床正确选用大环内酯-林可酰胺-链阳霉素B类(BLSB)抗菌药物.     

金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性的葡萄球菌红霉素诱导克林霉素耐药的检测

目的通过对齐市中医院临床分离葡萄球菌株中红霉素和克林霉素耐药性及红霉素诱导克林霉素的耐药发生率,为临床提供比较可靠的药敏结果。方法采用D试验检测280株葡萄球菌的可诱导克林霉素耐药性。结果红霉素和克林霉素均耐药占35%。D试验阳性占所测葡萄球菌的20.71%,占红霉素耐药克林霉素敏感株的70.73%。结论检测葡萄球菌属诱导型耐药,避免盲目使用克林霉素而导致治疗无效,帮助临床正确选用大环内酯类-林可酰胺类-链阳霉素B类（MLSB）抗菌药物。     

金黄色葡萄球菌苯唑西林及红霉素耐药基因多重PCR快速检测

目的 建立金黄色葡萄球菌苯唑西林和红霉素耐药基因的多重PCR快速检测体系,并进行临床应用评价.以了解耐药基因mecA、ermA、ermC在广州地区的流行分布,指导临床合理使用抗生素.方法 全自动仪器鉴定菌株及药敏试验,克林霉素耐药试验检测克林霉素诱导耐药,通过优化PCR反应体系建立多重PCR反应并应用于检测金黄色葡萄球菌耐药基因:mecA、ermA和ermC.结果 成功构建四重PCR快速检测体系,临床评价所分离的124株金黄色葡萄球菌中,mecA、ermA、ermC检出率分别为59.7%、50%、33.9%;克林霉素诱导耐药菌株主要是ermC基因;苯唑西林耐药菌株中均能检测出mecA,红霉素耐药菌株中97.7%携带耐药基因ermA或/及ermC.结论 所构建的多重PCR检测体系为临床实验室提供快速而有效的菌株耐药基因检测手段.mecA、ermA、ermC是本地区分离的金黄色葡萄球菌对苯唑西林和红霉素耐药的主要机制之一.     

葡萄球菌属红霉素诱导克林霉素耐药性检测

目的了解柳州市妇幼保健院临床分离葡萄球菌株中红霉素诱导克林霉素的耐药发生率。方法采用双纸片法检测该院临床分离的392株葡萄球菌的可诱导克林霉素耐药性。结果225株金黄色葡萄球菌中,39株持续性克林霉素耐药,45株为可诱导克林霉素耐药。167株凝固酶阴性的葡萄球菌中61株持续性克林霉素耐药,49株可诱导性克林霉素耐药。结论临床微生物实验室须加强可诱导克林霉素耐药的检测,以指导临床合理运用抗生素。     

244株耐红霉素葡萄球菌的克林霉素耐药表型和基因型检测分析

大环内酯类、林可酰胺类等抗生素因其组织渗透性强、口服效果好、对肾脏无不良反应且价格低等特点被广泛应用于治疗葡萄球菌引起的感染。然而,葡萄球菌属细菌耐药迅速增长的问题已成为当今全球关注的热点,尤其是耐甲氧西林葡萄球菌比例日益增高成为临床治疗的棘手问题。葡萄球菌对大环内酯类抗生素耐药主要有MS型耐药和MLS型耐药2种。     

金黄色葡萄球菌对大环内酯类抗生素的耐药性及耐药表型

目的 了解金黄色葡萄球菌对大环内酯类抗生素的耐药性和耐药表型，探讨其耐药规律，为临床合理用药提供依据。方法 采用K-B纸片扩散法测定96株金葡菌对红霉素、阿奇霉素、克林霉素的耐药性，并分析其对大环内酯类抗生素的耐药表型。结果 42株甲氧西林敏感金葡菌（MSSA）对红霉素、阿奇霉素的耐药率同为45、2％（19／42），克林霉素为23．8％（10／42），对大环内酯类的耐药表型主要为诱导型（iMLS）（10／19）和内在型（CMLS）（9／19）；54株耐甲氧西林金葡菌（MRSA）对红霉素、阿奇霉素的耐药率同为96.3％（52／54），克林霉素为94.4％（5l／54），对大环内酯类的耐药表型主要为内在型（51／52），其次为诱导型（1／52）。结论 MSSA和MRSA对红霉素、阿奇霉素、克林霉素的耐药率差异有显著性，而在MSSA或MRSA中，红霉素和阿奇霉素的耐药率一致；对大环内酯类的耐药表型，MSSA以诱导型和内在型为主，MRSA以内在型为主。     

葡萄球菌属诱导型克林霉素耐药及基因型分析

目的测定葡萄球菌属对红霉素及克林霉素的耐药性,分析红霉素诱导克林霉素耐药的发生率以及耐药基因的类型。方法用K-B法检测葡萄球菌属对红霉素及克林霉素的耐药性,依据CLSI2011年推荐的D试验方法,测定红霉素对克林霉素的诱导耐药表型,并采用聚合酶链反应PCR技术检测耐药基因型。结果2009~2011年红霉素和克林霉素同时耐药（cMLSB）菌株占葡萄球菌的比例分别是48.9%、52.0%、61.2%,随着时间的增长有升高的趋势。而D试验阳性（iMLSB）菌株占所检测葡萄球菌属的比例随着时间的增长有下降的趋势,分别是19.6%、18.5%、11.9%。这两种趋势在金黄色葡萄球中表现尤为明显。D试验阳性（iMLSB）菌株在对红霉素耐药而克林霉素敏感的葡萄球菌株所占的比例在三个不同时间段分别是58.2%、56.6%、56.5%。耐药基因分析表明：红霉素核糖体甲基化酶基因ermC是诱导耐药的主要基因。结论临床微生物实验室应开展D试验,检测葡萄球菌属中红霉素对克林霉素的诱导耐药,指导临床医生更合理使用抗菌药物。     

葡萄球菌对克林霉素诱导性耐药的检测及耐药性分析

目的:了解我院葡萄球菌对克林霉素诱导性耐药的检出率及耐药性情况,指导临床合理用药.方法:按美国国家临床实验室标准化研究所(CLSI/NCCLS)2004年推荐的D试验检测红霉素对克林霉素诱导耐药的葡萄球菌,同时检测耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)和甲氧西林敏感葡萄球菌(MSS)对12种常用抗生素的耐药性.结果:310株临床分离葡萄球菌中,红霉素耐药而克林霉素敏感的菌株中D试验阳性的MRS、MSS分别为6.6%(12/183)、18.1%(23/127),MSS菌株明显高于MRS菌株的检出率,具有统计学意义(x2=9.99,P＜0.01).51株红霉素耐药、克林霉素敏感的葡萄球菌中,D试验阳性菌株35株,检出率为68.6%(35/51).对于12种常用抗生素的耐药性除复方新诺明和万古霉素外,MRS对其余10种抗生素的耐药率明显高于MSS,具有统计学意义(P＜0.01).结论:常规开展D试验检测红霉素对克林霉素诱导耐药的葡萄球菌,D试验阳性应报告分离株对克林霉素耐药,可避免不适当使用克林霉素导致临床上的治疗失败,有助于医生正确选用大环内酯类及林可霉素类抗生素;并且MRS的耐药性较高,对各类抗生素多重耐药,需加强其耐药性监测.     

红霉素耐药葡萄球菌的克林霉素耐药表型和基因型检测

目的:了解红霉素耐药的葡萄球菌对克林霉素的耐药表型和基因型,指导临床合理使用抗生素.方法:收集本院2005年1月至2006年6月对红霉素耐药、克林霉素敏感和中介的葡萄球菌178株(其中金黄色葡萄球菌62株,凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)116株),用美国临床实验室标准委员会推荐的纸片法测其耐药表型,通过PCR测其耐药基因,并进行对比.结果:178株葡萄球菌中红霉素耐药、克林霉素敏感且D试验阳性(iLSM)37株(20.8%),红霉素耐药、克林霉素敏感D试验阴性(MS)46株(25.8%),红霉素、克林霉素均耐药(cLSM)95株(53.4%).PCR检测显示所有菌株中3种基因(ermA、ermC、mrsA)至少一种为阳性.MS葡萄球菌中仅检测到mrsA基因,其他均检测到ermA、ermC基因.在所测的金黄色葡萄球菌中iLSM型以检测出ermA多于ermC;cMLS中未检出ermC基因;而在CNS中iLSM 、cLSM 2型均以检测到ermC居多.结论:临床上分离的对红霉素耐药、克林霉素敏感的葡萄球菌诱导性耐药比较常见,耐药表型D试验与多重PCR检测结果相一致,且前者方法简单易行,建议实验室应加强对葡萄球菌D试验的常规检测,以指导临床正确合理使用大环内酯类、林可酰胺类抗生素.     

葡萄球菌属对抗生素的耐药性分析

目的:了解葡萄球菌属临床分离株对常用抗生素的耐药性和对大环内酯类、林可霉素类及链阳霉素类(MLS)的耐药表型。方法:用K-B法测定葡萄球菌属对14种抗生素的敏感性,进行D试验,测定链阳霉素类耐药表型。结果:在258株葡萄球菌属中,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRSCN)分别为62.8%和83.4%。对青霉素高度耐药,对磷霉素和利福平敏感率在74%以上,未发现万古霉素耐药株。195株葡萄球菌属对红霉素耐药,84.1%(69/82)株金黄色葡萄球菌为结构型耐药;在凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)中,56.6%(64/113)为结构型耐药,32.7%(37/113)为外排型耐药。对红霉素耐药但对克林霉素敏感的62株葡萄球菌中,18株为诱导型克林霉素耐药。结论:临床分离的葡萄球菌属对常用抗生素易产生多重耐药,应根据分离株耐药特点选用不同的方案。     

葡萄球菌中诱导型克林霉素株的耐药性分析

目的 了解葡萄球菌对红霉素和克林霉素的耐药性及其以红霉素诱导克林霉素耐药的发生率。方法用K-B法检测葡萄球菌对红霉素及克林霉素的耐药性，依据NCCLS2004年发布M100-S14的D-试验方法，测定红霉素对克林霉素的诱导耐药表型。结果耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）对红霉素及克林霉素同时耐药分别占80％和54．05％。D-试验阳性占所检测葡萄球菌的26．12％，占红霉素耐药而克林霉素敏感菌株的68．62％。红霉素耐药而克林霉素敏感的金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌中，D-试验阳性即对克林霉素具有诱导耐药性者分别为75％和66．66％。结论临床微生物室应开展D-试验，检测葡萄球菌中红霉素对克林霉素的诱导耐药性，指导临床医生更合理使用抗生素。     

葡萄球菌属对克林霉素诱导型耐药的检测及分析

目的：探讨葡萄球菌属中红霉素诱导克林霉素耐药的发生率。方法：依据全国临床检验操作规程（第3版）发布的葡萄球菌对克林霉素诱导耐药的检测方法，测定葡萄球菌属中红霉素对克林霉素的诱导耐药袁型。结果：36株金黄色葡萄球菌和51株凝固酶阴性葡萄球菌对红霉素和克林霉素同时耐药分别44．44％和58．82％，在红霉素耐药而克林霉素敏感的金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌中，克林霉素诱导型耐药即D-试验阳性分别为66．67％和56．25％。结论：临床微生物实验室应加强葡萄球菌属中红霉素对克林霉素诱导型耐药检测，以指导临床医生合理选用抗菌药物。     

金黄色葡萄球菌临床分离株生物膜形成能力及其相关基因的检测

目的： 检测临床分离金黄色葡萄球菌（金葡菌）的生物膜形成能力及其相关基因。方法： 用半定量微量平板法检测临床分离的92株金葡菌生物膜形成能力,并通过扫描电镜观察生物膜形态,用PCR法来检测生物膜形成的相关基因ica和sarA。结果： 92株临床分离金葡菌菌株均可形成生物膜,PCR结果显示100%的分离株均含有sarA基因,78株（84.78%）含有ica基因。结论： 临床分离的金葡菌都具有形成生物膜的能力,生物膜形成的相关基因ica和sarA的携带率较高。     

胃癌多药耐药基因的表达及其意义

目的：探讨5种多药耐药（MDR）基因在胃癌组织中的表达，建立MDR的基因诊断标准。方法：用逆转录－聚合酶链反应法（RT－PCR）及流式细胞术检测胃癌组织中5种MDR基因的mRNA和蛋白质的表达，用四氯唑蓝快速比色法（MTT）检测抗癌药物对胃癌原代细胞的IC50值。结果：胃癌组织mdr1,MRP，LRP和GSTp1mRNA表过增加，TopoⅡαmRNA表达最减少，5种MDR基因mRNA表达量之间无相关性；胃癌耐药涉及mdr1,MRP,LRP,GSTp1和TopoⅡα基因，mdr1mRNA≥0.4,MRP mRNA≥0.5,LRP mRNA≥0.9,GSTp1 mRNA≥0．8和TopoⅡmRNA≤0．3为耐药联合诊断标准，符合率为98．6％，结论：胃癌组织中存在5种MDR基因，分别介导不同的多药耐药现象，多重MDR是胃癌耐药的主要形成，用RT－PCR方法联合检测5种MDR基因mRNA表灰在胃癌化疗敏感性预测中具有必要性和可行性。     

院内外环境分离金黄色葡萄球菌的耐药性及毒素基因检测

目的检测医院及环境样中金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,SA）耐药基因及毒素基因,了解其分布情况。方法采用多重聚合酶链反应（multiplex polymeras chain reaction,PCR）技术分别检测耐药基因mecA、femA与毒素基因TSST、PVL。结果 83株金黄色葡萄球菌,仅3株（3.61%）菌检出mecA基因,22株菌（26.50%）检出femA基因,15株菌（18.07%）同时检出mecA与femA基因。医院样本检出12株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistantStaphylococcus aureus,MRSA）,3株甲氧西林耐药凝固酶阴性的金黄色葡萄球菌（methicillin-resistant and coagulasenegative Staphylococcus aureus,MRCNS）。83株分离自医院及环境样本SA,2株分离自咽拭子的样本检出TSST基因,检出率4.54%（2/44）;1株分离自血液的样本检出PVL基因,检出率2.27%（1/44）,其余菌株未检出毒素基因。结论院内样本中,部分菌株携带mecA基因,环境样本未发现携带mecA菌株,两者存在差异。83株SA菌,毒素基因携带率较低。检测耐药、毒素基因携带率,为临床治疗及院内感染控制,食物中毒溯源提供依据。     

金黄色葡萄球菌耐药性监测分析

目的分析临床分离金黄色葡萄球菌的科室分布情况及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）检出率,比较MRSA和甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌（MSSA）的抗生素耐药情况。方法收集2010年7—2010年9月临床分离的80株金黄色葡萄球菌菌株,分别通过头孢西丁纸片法及聚合酶链反应（PCR）扩增macA基因筛选MRSA,用琼脂稀释法检测MRSA和MSSA对11种抗生素的最低抑菌浓度（MIC）,比较两者耐药性的差异。结果 80株金黄色葡萄球菌经头孢西丁纸片法检测,筛选出46株MRSA,检出率为57.50%;经PCR检测mecA基因,筛选出45株MRSA,检出率为56.25%。MRSA检出率前3位科室是神经外科（17/45,37.78%）、普外科（7/45,15.56%）和留院观察室（5/45,11.11%）。80株金黄色葡萄球菌对替考拉宁、万古霉素和利奈唑胺的敏感率均为100%,MRSA与MSSA对其余8种抗生素的耐药性差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 MRSA检出率及耐药率均较高,应引起临床各科室和微生物实验室的高度重视,以避免由其引发的大规模院内感染和流行。     

病房葡萄球菌感染与耐药性分析

目的 了解我院葡萄球菌感染与耐药情况,为临床防治葡萄球菌感染提供依据.方法 对2005年1月-2009年12月病房所分离到的葡萄球菌耐药性进行回顾性调查.结果 共分离获得金黄色葡萄球菌139株,凝固酶阴性葡萄球菌253株,检出株数在逐年增加.体外药敏试验结果显示红霉素、克林霉素、庆大霉素、四环素、左氧氟沙星对金黄色葡萄...     

外源性甘氨酸对金黄色葡萄球菌耐药及femA表达水平的影响

目的探讨外源性甘氨酸对金黄色葡萄球菌苯唑西林耐药水平及femA表达的影响。方法用琼脂平皿对倍稀释法检测不同浓度甘氨酸下苯唑西林对30株金黄色葡萄球菌的MIC值,用实时荧光定量PCR方法检测不同浓度甘氨酸下金黄色葡萄球菌femA表达水平。结果30株金黄色葡萄球茵中MSSA4株,低耐MRSA2株,高耐MR-SA24株,在0．2M外源性甘氨酸存在时MIC下降4-256倍,在0．3M外源性甘氨酸存在时MIC均〈0．25μg／ml。在所有金黄色葡萄球菌中均检测到femA表达,在0．2M甘氨酸存在时femA表达下降50％-80％,0．3M甘氨酸存在时femA表达下降75％-90％。结论外源性甘氨酸能降低金黄色葡萄球菌对苯唑西林的耐药水平及femA表达水平。