乙型肝炎病毒基因型和血清亚型在我国部分地区的分布及其特点

目的 研究乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）基因型和血清亚型的分布特点及其基因的相关性。方法 湖南、广西、河南和河北4省（区）25个县（市）280例慢性HBV携带者,应用聚合酶链反应（PCR）扩增和脱氧核糖核酸（DNA）序列分析,确定HBV基因型和血清亚型。结果 HBV基因型B、C和D均有分布,分别占29.3%、67.9%和2.9%,其中B和C为优势基因型。adr、adw2、ayr、aywl、ayw2和ayw3等6种血清亚型均有分布,其中adr和adw2为优势血清亚型,分别占64.3%和31.4%。基因型B与adw2血清亚型,基因型C与adr血清亚型有非常密切的基因相关性。280例HBV携带者表面抗原基因序列每100个核苷酸的平均置换频数为2.94。基因型B(adw2血清亚型）毒株核苷酸置换频数为5.63(5.48）,而基因型C（adr血清亚型）仅为1.6(1.51）。结论 HBV基因型和血清亚型的分布均有明显的地区性;基因型B及相对应的adw2血清亚型毒株的基因可变性明显高于基因型C及相应的adr血清亚型。     

慢性乙型肝炎病毒感染者乙型肝炎病毒S基因变异分析

目的探讨湖州地区慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者乙型肝炎病毒S基因序列变异状况,了解该地区乙型肝炎病毒S基因的病毒学特点。方法应用聚合酶链反应(PCR)扩增湖州地区40例HBV-DNA阳性的慢性乙型肝炎病毒感染者S基因,并对扩增产物进行测序,将测序结果与GenBank中的标准序列进行比对分析。结果 40例HBV感染者中B基因型26例,C基因型14例,血清学分型adw型25例,adr型13例,ayw和ayr各有1例;随无症状携带者、慢性肝炎、肝硬化、肝癌疾病的进展,氨基酸变异有逐渐增加的趋势,肝硬化、肝癌患者与携带者、慢性肝炎患者比较,S基因变异率在主要亲水区(MHR)、a决定簇以及第一茎环区差异均有统计学意义(P<0.05);126位点氨基酸变异在较为严重的肝脏疾病中发生率较高(P<0.05)。结论湖州地区乙型肝炎病毒血清型以adw型和adr型为主,S基因变异可能与肝病严重程度相关,特别126位点变异可能与较为严重肝病有一定相关性。     

德阳市乙型肝炎病毒基因型、血清亚型和变异分析

目的了解德阳市乙型肝炎病毒基因型、血清亚型和变异。方法从HBsAg阳性的血清标本提取病毒DNA,S基因全序列多聚酶链反应和测序后,根据进化树和推导氨基酸确定基因型、血清亚型及＂α＂抗原决定簇氨基酸变异。结果 41份标本中,33份标本为B基因型/adw2血清亚型,7份标本为C基因型/adrq＋血清亚型,另1份标本为B基因型/ayw1血清亚型;6份标本＂α＂抗原决定簇内氨基酸发生变异,分别为Thr126Ser,Thr126Ala,Gln129His,Met133Leu和Thr143Met,且变异集中在第1环内氨基酸（6/7,85.7%）。1份标本在114位和115位氨基酸间插入额外1个氨基酸,1份标本的216位氨基酸变异为终止码。结论德阳市HBV以B基因型/adw2为主,自发的＂α＂决定簇氨基酸变异集中在第一环氨基酸。     

乙型病毒性肝炎隐匿性感染与S基因氨基酸变异的研究

目的了解新疆中小学生中乙型病毒性肝炎(HB)病毒(HBV)表面抗原(HBs Ag)阴性而HBV核酸(HBV DNA)阳性的隐匿性HBV的感染情况及S基因氨基酸变异。方法采用整群抽样的方法对新疆4所中小学校的学生进行检测,对HBs Ag阴性样本进行HBV DNA提取和S基因扩增,对扩增阳性的样本进行测序;采用分子遗传学分析(MEGA 5.0)软件对测得序列进行基因序列分析。结果 413例HBs Ag阴性样本中,33例在S基因测序中呈现阳性,其中9例学生S基因的亲水区(MHR)氨基酸发生了变异,分别发生7次T143S,5次I110L,5次S113T,5次T126I,3次K122R,3次K160R,2次F134Y和2次K159G。26例B基因型样本中有1例样本为ayw2血清型,其余25例均为adw2血清型。5例C基因型样本均为adrq+血清型。2例D基因型样本均为ayw2血清型。结论 HBs Ag阴性的学生血液中存在HBV隐匿性感染,S基因存在氨基酸突变,需重视HBV隐匿性感染的发生和发展。     

隆安县乙肝疫苗免疫逃避株的研究

目的 查明隆安县部分乙肝疫苗免疫失败的原因。方法 用套式PCR(nPCR)扩增41例隆安县接受乙肝疫苗免疫的儿童及其母亲血清HBV S基因,阳性者用直接测序法测序。结果 23例HBV DNA阳性,阳性率为56％(23／41);表面抗原的4个主要亚型(adr、adw、ayr、ayw)都出现在本研究中,其中以adw为主,占65．2％(15／23),标本3及27儿童感染的亚型(adw)不同于他们母亲感染的亚型(adr及ayw);标本46兄弟俩及标本37均在aa145发生突变(甘氨酸一精氨酸),标本64也在aa145发生突变(甘氨酸→丙氨酸)。另外,标本38在aa120发生突变(脯氨酸→丝氨酸),标本27在aa129发生突变(谷氨酰胺→精氨酸)。结论 隆安县存在乙肝疫苗免疫逃避株。提示免疫逃避株的产生是隆安县部分乙肝疫苗免疫失败的原因之一,这些免疫逃避株是目前阻断乙肝病毒母婴传播的难点。     

四川省两县区乙型肝炎病毒基因型、血清亚型分析

[目的]了解四川省两县区乙型肝炎病毒的基因型和血清型. [方法]从HBsAg、HBeAg均阳性的血清中提取病毒DNA,经多聚酶链反应和S基因核苷酸片段测序后,用进化树和推导氨基酸序列确定基因型和血清亚型.[结果]49份血清标本中,含w亚决定簇的均为B基因型,含r亚决定簇的均为C基因型;其中B基因型/adw2血清亚型31份,B基因型/aywl血清亚型1份,B基因型/adw3血清亚型1份,C基因型/adrq+血清亚型14份,C基因型/ayr血清亚型2份. [结论]两县区乙型肝炎病毒以B基因型/adw2血清亚型和C基因型/adrq+血清亚型为主,B基因型/adw2血清亚型占优势;同时存在少见的B基因型/adw3血清亚型.     

广东省乙型肝炎病毒S基因变异与乙型肝炎疫苗免疫失败关系探讨

目的研究广东省儿童乙型肝炎(乙肝)病毒(HBV)表面抗原(HBsAg)携带者中HBV S基因变异对乙肝疫苗免疫效果的影响。方法收集乙肝疫苗免疫后HBsAg阳性的儿童血清标本36份,利用聚合酶链反应(PCR)扩增HBV S基因片段,对PCR产物进行脱氧核糖核酸(DNA)序列测定。结果在36份标本中,HBV核酸阳性26份,完成测序23份,11份标本S基因片段出现氨基酸变异,其中4份在“α”决定簇片段内出现了氨基酸变异,2种变异形式未见报道,结论广东省免疫失败儿童存在不同位点的HBV S基因变异,可能是导致部分儿童免疫失败的原因。尚未出现稳定的变异株,对现用乙肝疫苗的免疫效果影响不大。     

HBsAg与抗-HBs同时阳性者体内S基因序列分析

目的 报告乙型肝炎病毒（HBV）表面抗原（HBsAg）／表面抗体（抗－HBs )同时阳性患血清中S区编码碱基序列及基氨基酸序列的为异特点。方法 以adr亚型的HBV基因序列为依据，设计特异性多聚酶链反应（PCR）引物，自2例HBsAg/抗－HBs均阳性的患体内扩增的HBV全S基因片段，克隆入pGEMTasy质粒，DNA测序确定病毒的变异特点。结果 测序结果发现双阳患与HBsAg阳性患血清中的HBV全S基因比较，核苷酸序列有4个核苷酸位点（0．3％）的替换突变，表面抗原氨基酸序列无特异性替换突变，但HBV多聚酶的间隔区氨基酸序列有3个位点的特异性替换突变。结论 HBV长期携带体内有HBV准种共存：HBsAg与抗－HBs同时阳性的原因不能归因于病毒的变异，应归结于患免疫系统的个体化反应。     

四川遂宁地区居民乙肝病毒基因型别分析

目的了解遂宁地区人群乙型肝炎病毒(HBV)基因型及血清亚型流行特征。方法在遂宁6个县级行政区域内共采集血清样本1 468人份筛出HBsAg检测阳性的血清样本,用巢氏PCR法扩增提取HBV DNA S区,根据PCR产物基因测序结果对样本HBV进行基因分型。结果测出基因序列118例HBsAg阳性标本中,B基因型40例(33.89%),C基因型73例(61.86%),D基因型5例(4.23%),未发现BCD以外的其他基因型。42份(35.59%)血清亚型分型为adr型,76份(64.41%)为adw型。结论遂宁地区乙肝病毒基因型别以B、C为主要基因型,其中C型基因占优势,存在少量D基因型。血清亚型的分布以adr\adw亚型为主,其中adw亚型占优势。     

急性乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒序列的研究

目的:研究急性乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒序列。方法:提取急性乙型肝炎患者血清中HBV DNA,扩增其表面抗原序列,测序并相互比较。结果:测定5例急性乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒均为adw亚型,其中3例同源性>99%。结论:adw亚型HBV感染后较多为急性病变,由于病毒变异少,机体有可能清除HBV。     

一起氟乙酰胺蓄积性中毒分析

氟乙酰胺急性中毒时有发生 ,其中毒者临床表现与实验室诊断技术已为预防医学工作者所掌握 ,但氟乙酰胺蓄积性中毒十分罕见 ,经检索国内尚无个案报道。现就集宁市发生的一起氟乙酰胺蓄积性中毒分析报告如下。患者男性 6 3岁 ,2 0 0 1年 6月 2 0日由家属陪送入院 ,主诉神志有时不清 ,妄语 ,肢体阵发性抽搐 ,大小便失禁 ,视力模糊 ,病史已有 4个多月 ,院方即按颠痫收住入院 ,经过 1周对症治疗但疗效甚微 ,遂建议其转入精神病院 ,经精神病专家会诊 ,发现患者有接触鼠药史 ,于是要求卫生防疫部门协助检验。该病例系鼠药商贩 ,同时经销数种鼠药 ,…     

遂宁市乙型肝炎病毒主要基因型S区氨基酸位点置换分析

目的分析四川省遂宁市自然人群中乙型肝炎（乙肝）病毒（Hepatitis B Virus,HBV）主要基因型S基因主要亲水区[Major Hydrophilic Region,MHR;氨基酸（Amino Acid,aa）99-169]及人类白细胞抗原I型（The Putative Human Leukocyte Antigen Class I-Restricted,HLA-I）细胞毒性T淋巴细胞（Cytotoxic T Lymphocyte,CTL）表位aa位点置换特点。方法遂宁市乙肝血清流行病学调查中乙肝病毒表面抗原阳性人群,扩增HBV S基因片段并测序得到的完整S基因片段序列,进行生物信息学比对分析。结果在遂宁市共得到108份序列,其中B基因型40份,C基因型68份,在S基因MHR发生aa置换位点为Y100C、Q101H、L110F、T126A/S、T131I、S136F、T143M、G145R、V168A,在HLA-I型CTL表位aa置换位点为V47A、P46L、T47K、L88P、I92T、L98V、Y100C、Q101H、V177A、V194A,位点置换在年龄分布和基因型分布的差异无统计学意义。结论遂宁市HBV S基因MHR及HLA-I型CTL表位aa位点置换与基因型分布无关,未发现接种乙肝疫苗与人群中HBV S区aa位点置换相关。     

乙型肝炎病毒表面抗原在慢性乙型肝炎病毒感染后不同临床阶段的定量检测及临床意义

目的 测定慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染后不同临床阶段患者血清乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）定量,同时探究其与患者血清HBV DNA水平和年龄的相关性.方法 将未经抗病毒治疗的774例慢性HBV感染患者按照临床特征分为六组：慢性HBV携带组（102例）、非活动性HBsAg携带组（211例）、乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）阳性慢性乙型肝炎组（236例）、HBeAg阴性慢性乙型肝炎组（114例）、HBeAg阳性乙型肝炎肝硬化组（52例）、HBeAg阴性乙型肝炎肝硬化组（59例）,采用化学发光微粒子免疫分析法测定患者血清HBsAg定量,实时荧光定量聚合酶链反应法测定患者血清中HBV DNA定量,血清HBsAg和HBV DNA需要经常用对数转换后进行组间比较.结果 HBsAg定量由高到低分别为慢性HBV携带组、HBeAg阳性慢性乙型肝炎组、HBeAg阴性慢性乙型肝炎组、非活动性HBsAg携带组、HBeAg阴性乙型肝炎肝硬化组和HBeAg阳性乙型肝炎肝硬化组[7.80（6.69 ～ 8.32）、7.11（5.42～8.27）、6.57（5.66 ～ 7.53）、6.38（4.39～ 7.40）、6.22（4.84～ 6.91）、6.13 （5.48～7.01）].HBeAg阳性慢性乙型肝炎组和HBeAg阴性慢性乙型肝炎组HBsAg定量与HBV DNA呈正相关（r=0.714和0.390,P＜0.01）.慢性HBV感染患者血清HBsAg的定量与年龄呈负相关（r=-0.416,P＜0.01）;监测年龄≥40岁非活动性HBsAg携带者的血清HBsAg定量有重要的临床价值.结论 慢性HBV感染后不同临床阶段患者血清HBsAg定量不同,血清HBsAg定量与患者HBV DNA水平和年龄相关,临床上应重点监测年龄≥40岁非活动性HBsAg携带患者血清HBsAg定量.     

天津口岸出入境人员乙型肝炎病毒基因分型研究

[目的]探讨天津口岸出人境人员乙型肝炎病毒（HBV）的基因类型分布特征。[方法]调查天津口岸出入境人员HBV血清学指标，采用实时荧光定量PCR结合Taqman探针技术对180份乙型肝炎表面抗原（HBsAg）阳性血清标本中的HBVDNA进行定量检测和基因分型；对非B非C型HBsAg阳性血清标本采用通用引物PCR方法结合序列分析进行基因分型。[结果]180份HBsAg阳性血清标本中，B型23份（40．35％）；C型30份（52．63％）；D型4份（7．02％），其余123份血清HBVDNA浓度均低于定量检测试剂盒的下限（500IU／ml）。[结论]天津口岸出入境人员中HBV基因型以C型为主，B型次之，D型极少。     

福州市健康人群中乙肝病毒感染的检测分析

目的了解福州市健康人群中乙肝病毒感染情况及HBV流行株的基因分布特性,为福州市乙型肝炎防制工作提供科学依据。方法采用ELISA方法检测乙肝病毒免疫学标志物,应用荧光定量PCR检测HBV-DNA含量,用型特异性引物套式PCR进行乙型病毒基因分型。结果1710份样品中HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb阳性率分别为12.51%、50.23%、2.40%、16.73%、60.18%;201份HBsAg阳性样品中HBV-DNA阳性率为76.12%;HBV-DNA阳性标本中,B型62份(41.89%)、C型57份(38.51%)、B、C混合型7份(4.73%)、未能分型22份(14.86%)。结论福州市健康人群中HBsAg携带率为12.51%,高于全国平均水平,HBV基因型以B、C型为主,应该加强乙肝的预防控制工作。     

Epidemiological serosurvey of Hepatitis B in China—Declining HBV prevalence due to Hepatitis B vaccination

Objective

To determine the prevalence of hepatitis B surface antigen (HBsAg), hepatitis B surface antibody (anti-HBs), and hepatitis B core anti-body (anti-HBc) in a representative population in China 14 years after introduction of hepatitis B vaccination of infants.

Methods

National serosurvey, with participants selected by multi-stage random sampling. Demographics and hepatitis B vaccination history collected by questionnaire and review of vaccination records, and serum tested for HBsAg, antibody to anti-HBc and anti-HBs by ELISA.

Findings

The weighted prevalences of HBsAg, anti-HBs and anti-HBc for Chinese population aged 1–59 years were 7.2%, 50.1%, 34.1%, respectively. HBsAg prevalence was greatly diminished among those age <15 years compared to that found in the 1992 national serosurvey, and among children age <5 years was only 1.0% (90% reduction). Reduced HBsAg prevalence was strongly associated with vaccination among all age groups. HBsAg risk in adults was associated with male sex, Western region, and certain ethnic groups and occupations while risk in children included birth at home or smaller hospitals, older age, and certain ethnic groups (Zhuang and other).

Conclusions

China has already reached the national goal of reducing HBsAg prevalence to less than 1% among children under 5 years and has prevented an estimated 16–20 million HBV carriers through hepatitis B vaccination of infants. Immunization program should be further strengthened to reach those remaining at highest risk.     

广州市青少年学生乙型肝炎病毒感染状况及危险因素调查

目的了解推广使用乙型肝炎疫苗后,广州市青少年学生乙型肝炎病毒感染状况和感染危险因素。方法选取广州市29所中学的初一和高一学生共14744人作为调查对象,检测乙型肝炎表面抗原（HBsAg）和抗体（抗-FiBs）,HBsAg与抗-HBs同时阳性者作乙型肝炎病毒S基因扩增和DNA序列分析。以统一的问卷对HBsAg阳性者进行流行病学调查。结果检出HBsAg阳性者424人,阳性率为2．9％。抗-HBs阳性者12201人,阳性率为82.8％。4人HBsAg、抗-HBs同时阳性,其中1人S基因“a”决定族第126位的异亮氨酸（ATT）变为苏氨酸（ACT）,第143位由丝氨酸（TCG）变为苏氨酸（ACG）,第145位由甘氨酸（GGA）变为精氨酸（AGA）,另外3人未检出S基因“a”决定簇氨基酸变异。流行病学调查提示部分学生问卷可能通过母婴传播以及日常生活密切接触感乙型肝炎病毒。结论乙型肝炎疫苗是预防乙型肝炎的有效制荆。病毒S基因“a”决定簇变异可使乙型肝炎疫苗保护失败,但目前的发生率较低,无须改变疫苗的制备及免疫策略。