原发性肝细胞癌中mdr1基因表达的研究

目的 研究多药耐药基因ｍｄｒ１产物Ｐ－糖蛋白在原发性肝细胞癌（ＰＨＣ）及其癌旁组织中的探讨ＰＨＣ的多药耐药机制。方法 应用链菌素亲生物素－过氧化物酶标免疫组织化学染色（Ｓ－Ｐ法）观察２４例未化疗、３６例化疗后ＰＨＣ及其癌旁组织Ｐｇｐ的表达,２０例门脉性肝硬化,２０例正常肝组织的Ｐｇｐ表达。结果 肝动脉插管化疗栓塞（ＴＡＣＥ）前、后的ＰＨＣ与非癌肝组织Ｐｇｐ的表达为６６．６７％,８０．５６％与９０．     

人肝癌和癌旁肝组织中肝细胞生长因子及其受体基因表达的研究

人肝癌和癌旁肝组织中肝细胞生长因子及其受体基因表达的研究罗运权，吴孟超，丛文铭，陈汉作者采用肝细胞生长因子（ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｇｒｏｗｔｈｆａｃ－ｔｏｒ，ＨＧＦ）及其受体基因的ＮＤＡ探针，对人原发性肝癌及癌旁肝组织进行自身对照研究，从转录水平观察基...     

原发性肝细胞癌中细胞周期G1期相关基因CyclinD1的表达及其临床？…

目的 研究原发性肝细胞癌（ＨＣＣ）中ＣｙｃｌｉｎＤ１基因的表达及其与ｐ５３基因、肝癌细胞增殖活性的关系，探讨其在ＨＣＣ的发生，发展中可能的作用。方法 应用免疫组织化学及定量ＤＮＡ图像分析的方法，检测ＣｙｃｌｉｎＤ１，Ｐ５３基因在３２例ＨＣＣ和６例正常肝组织中的表达，并分析ｃｙｃｌｉｎＤ１蛋白的表达与肝癌细胞增殖活性的关系。结果 肝癌组织中ｃｙｃｌｉｎＤ１蛋白的过表达率明显高于癌旁肝组织（７１．８％     

原发性肝细胞癌中细胞周期G1期相关基因Cyclin D1的表达及其临床病理学意义

目的研究原发性肝细胞癌（ＨＣＣ）中ＣｙｃｌｉｎＤ１基因的表达及其与ｐ５３基因、肝癌细胞增殖活性的关系,探讨其在ＨＣＣ的发生、发展中可能的作用。方法应用免疫组织化学及定量ＤＮＡ图像分析的方法,检测ＣｙｃｌｉｎＤ１、Ｐ５３基因在３２例ＨＣＣ和６例正常肝组织中的表达,并分析ｃｙｃｌｉｎＤ１蛋白的表达与肝癌细胞增殖活性的关系。结果肝癌组织中ｃｙｃｌｉｎＤ１蛋白的过表达率明显高于癌旁肝组织（７１．８％,２３／３２对０％,０／３２;Ｐ＜０．０１）。ｃｙｃｌｉｎＤ１蛋白的表达与ＨＣＣ的Ｐ５３基因表型状况及其它临床病理学指标无关。ＨＣＣ中Ｓ期细胞比例在不同ｃｙｃｌｉｎＤ１蛋白水平的ＨＣＣ中未见显著性差异（Ｐ＞０．０５）。结论ＣｙｃｌｉｎＤ１基因的过度表达可能参与ＨＣＣ的发生、发展。ｃｙｃｌｉｎＤ１蛋白的免疫组化染色可作为ＨＣＣ的辅助病理学诊断指标之一。     

P16基因蛋白在原发性肝癌及癌旁组织中的表达及其临床意义

目的 探讨抑癌基因ｐ１６在肝癌及癌旁组织中的表达及临床意义。方法 应用免疫组织化学方法对５０例肝细胞性肝癌（ＨＣＣ）及癌旁肝硬化组织（４４例）手术切除石蜡包埋标本进行Ｐ１６基因蛋白表达的测定,并结合临床病理指标进行分析。结果 ｐ１６基因在ＨＣＣ中表达的阳性率为４８％,癌旁９１％。     

肝细胞癌与p53基因突变的关系研究

目的 探讨肝细胞癌（ＨＣＣ）和ｐ５３基因突变的关系，方法 采用聚合酶链反应－限制性片段长度多态性分析技术，检测ＨＣＣｐ５３基因第７外显子点突变，研究来自黄曲霉素Ｂ１（ＡＦＢ１）污染严重的南宁地区的ＨＣＣ标本５５例，结果 ３４例ＨＣＣｐ５３基因２４９密码子中的点突变，突变频率为６２％（３４／５５），伴乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）阳性组ｐ５３基因突变率６２．５％，ＨＢｓＡｇ阴性组ｐ５３基因突变率５７     

原发性肝细胞癌组织中kruppel样因子6基因mRNA突变的测定

目的　探讨kruppel样因子 (KLF) 6基因与原发性肝细胞肝癌发生、发展的关系。方法分别用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术和聚合酶链单链构象多态分析 (PCR SSCP)技术、DNA序列测定方法 ,检测 2 7例肝细胞癌患者的癌组织与癌旁组织、5例肝转移癌患者的正常肝组织中KLF6基因mRNA的表达及突变情况。结果　正常肝组织及癌旁组织中 ,只有 1例KLF6mRNA无表达 ,阳性率 97% (31/ 32 ) ;肝细胞癌组织中 ,有 4例无表达 ,阳性率 85 % (2 3/ 2 7) ,两者表达率间差异无显著性(χ2 =2 5 8,P >0 0 5 )。 2 7例肝细胞癌组织中 ,6例出现DNA片段异常泳动带 ,突变率为 2 2 % (6 / 2 7) ;14例出现信息个体 ,其中 5例 (5 / 14 ,36 % )为杂合子缺失 ,这 5例中有 3例出现DNA片段异常泳动带 ,突变比例为 3/ 5。在 2 7例癌旁组织中 1例检测出突变 ,但在检测出突变的肝癌组织的配对癌旁组织中无一例检测出突变。结论　肝细胞肿瘤存在KLF6基因突变 ,突变的起源是体细胞性的     

原发性肝细胞癌中WAF1/CIP1基因的表达及其临床病理意义

目的　探讨原发性肝细胞癌（ＨＣＣ）中ＷＡＦ１／ＣＩＰ１ 基因ｍＲＮＡ 的表达与临床病理学指标的关系和意义。方法　采用半定量ＲＴＰＣＲ方法,检测ＷＡＦ１／ＣＩＰ１ 基因在３０ 例ＨＣＣ及其癌旁肝组织中的表达。结果　肝癌组织ＷＡＦ１／ＣＩＰ１ｍＲＮＡ 表达相对值低于其相应癌旁肝组织［（１ ．１０±０ ．４３）Ｕ 对（１．３１±０．４１）Ｕ,Ｐ＜０ ．０５］ ,有卫星灶形成的肝癌低于无卫星灶形成的肝癌［（０．８６ ±０．２９）Ｕ 对（１ ．３２ ±０．４４）Ｕ,Ｐ＜ ０．０１］ ,但其在ＨＣＣ的其他病理学指标中差异无显著性（ Ｐ＞０ ．０５） 。结论　ＷＡＦ１／ＣＩＰ１ 基因的表达异常可能参与ＨＣＣ的发生、发展,并与肝癌细胞的浸润和转移分子机制有关。     

抑癌基因p53突变与肝细胞癌预后的关系

探讨抑癌基因ｐ５３突变与肝细胞癌预后的关系。方法 采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性分析技术，检测ＨＣＣｐ５３基因第７外显子点突变，研究５５例来自南宁地区的ＨＣＣ。结果３４例ＨＣＣｐ５３基因２４９密码子发生点突变，伴ＨＣＣ转移者１６例，未转移者１８例；级分化１例，Ⅱ－Ⅲ级１５例，Ⅳ级１８例。     

Heparanase-1和Syndecan-1与肝细胞癌侵袭转移的关系

目的探讨heparanase-1（HPR-1）和syndecan-1在孤立性大肝癌、结节性肝癌和小肝癌中的表达及其临床意义。方法选用30例肝细胞癌（HCC）癌组织和癌旁组织标本，用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测标本中的HPR1和Syndecan-1的表达，并结合临床病理资料进行分析。结果HPR-1 mRNA在HCC中的表达较癌旁肝组织高，差异有显著性意义（P=0．037）；Syndecawl在HCC中的表达较癌旁组织低，差异有显著性意义（P=0．007）。本研究显示HPR-1的高表达和Syndecanl的低表达同有无包膜、静脉浸润密切相关，而同性别、细胞分化程度、肝硬化程度无关。将30例HCC分为孤立性大肝癌组，结节性肝癌组和小肝癌组分析发现：孤立性大肝癌组同结节性肝癌组HPR-1mRNA的表达有着显著性差异（P〈0．05）。结论HPR1基因和Syndecan-1基因与HCC的发生发展和侵袭转移密切相关；孤立性大肝癌较结节性肝癌具有较好的生物学行为。     

人原发性肝癌病人多药耐药基因表达及意义

目的 探讨原发性肝癌（ＰＨＣ）癌组织及癌周组织ｍｄｒｌ表达与多药耐药性的关系。方法 采用敏感性高,特异性强的逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术,定量检测４８例ＰＨＣ病人癌组织及癌周组织中ｍｄｒｌ表达水平。其中１８例病人要前行肝动脉化疗栓塞（ＴＡＣＥ）治疗。结果 ＰＨＣ癌组织中ｍｄｒｌ阳性率为６３．３％,远高于癌周组织的２６．７％（Ｐ〈０．０１）;术前行ＴＡＣＥ组癌组织中ｍｄｒｌ阳性率为８８．９％,远比未化疗组６３．３％高。结论 ＰＨＣ存在内源性ＭＤＲ和获得性ＭＤＲ,ｍｄｒｌ高表达是ＰＨＣ病人ＭＤＲ产生的重要机制之一。     

原发性肝癌多药耐药基因的表达及其意义

目的 探讨５种多药耐药（ＭＤＲ）基因肝癌组织中的表达,建立ＭＤＲ的基因诊断标准。方法 用逆转录－聚合酶链（ＲＴ－ＰＣＲ）方法,流式细胞术检测肝癌组织中５种ＭＤＲ基因ｍＲＮＡ和蛋白质的表达,用四氮唑蓝快速比色（ＭＴＴ）法检测抗癌药物对肝癌原代细胞的ＩＣ５０值。结果 肝癌耐药涉及ｍｄｒ１,ＭＲＰ,ＬＲＰ,ＧＳＴｐ１和ＴｏｐｏⅡα基因,ｍｄｒ１ ｍＲＮＡ≥０．５、ＭＲＰｍＲＮＡ≥０．６、ＬＲＰ ｍｒｎＡ     

肝细胞肝癌中bcl-10基因突变的研究

目的 研究ｂｃｌ－１０基因在早期和进展期人肝细胞肝癌中的突变频率。方法 提取４６例新鲜肝癌及癌周组织的基因组ＤＮＡ，应用聚合酶链式反应－单链构像多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）方法，研究ｂｃｌ－１０基因３个外显子的突变情况，并对每个外显子随机抽取６例突变样本进行测序分析。同时分析ｂｃｌ－１０基因突变与血清甲胎蛋白（ＡＦＰ）水平以及肝癌大小的关系。结果 ４６例肝细胞肝癌中共检测到外显子１突变２６例，占     

原发性肝癌组织中明胶酶A基因表达增强

目的　了解基质降解对原发性肝癌的作用。方法　 33例原发性肝细胞癌患者术中取癌组织及癌旁组织 ;提取组织总RNA ;用逆转录共扩增定量PCR方法测定明胶酶A (MMP2 )基因表达水平。结果　肝癌组织明胶酶A基因表达水平 (3 2 0± 0 34 )明显高于癌旁的肝硬化组织 (0 70±0 16 )及正常肝组织 (0 34± 0 0 7)。肝癌患者MMP2 基因表达水平与血清AFP浓度、肿瘤大小无关。结论　明胶酶A在原发性肝癌的进展中可能起重要作用。     

刺五加叶皂甙对肝癌癌基因表达的调节作用

目的 探讨刺五加叶皂甙（ＡＳＳ）抑制宿主肝癌生长和转移的作用机制。方法 给ＢＡＢＬ／ｃ小鼠腹腔内注射Ｈｅｐ Ｇ２肝癌细胞，１０ｄ后给予ＡＳＳ腹腔注射，８周后处死小鼠，取瘤称重。用免疫组织化学方法检测ＡＳＳ对移植肝癌组织ｎｍ２３－Ｈ１和ｐ５３基因蛋白表达的影响及抑瘤率，观察ＡＳＳ对肝癌细胞在小鼠腹腔生长和转移的抑制作用。结果 当ＡＳＳ剂量为０．２５，１．００ｍｇ／ｋｇ体重时，抑瘤率分别为４５．４３％     

体外培养人成骨细胞骨相关基因表达

目的 探讨体外培养人成骨细胞骨相关基因表达情况。方法 应用组织块移行生长法分离培养人成骨细胞，活体观察与碱性磷酸酶杂色观察其生物学特性，采用RT-PCR方法检测培养14d的二代人成骨细胞基因COL1，BGP，OPG，ON，IGF-1，TGF-β的表达情况，并用GAPDH予以矫正。结果 相差倒置显微镜观察可见细胞呈三角形，四角形或不规则形，50%-90%的的细胞碱性磷酸酶呈阳性，培养14d的二代人成骨细胞检测到基因COL1，BGP，OPG，ON，IGF-1，TGF-β的mRNA表达。结论 体外培养人成骨细胞可表达COL1，BGP，OPG，ON，IGF-1，TGF-β等骨相关基因。     

原发性肝细胞癌中错配修复基因hMLH1的表达及其意义

目的　探讨错配修复基因hMLH1在原发性肝细胞癌(HCC)组织中的表达及其意义。方法　采用免疫组织化学和逆转录 聚合酶链反应(RT PCR)检测48例肝癌组织、2 3例癌旁组织和2 5例正常肝组织中hMLH1蛋白和mRNA的表达情况,同时采用原位末端标记法测定癌组织的细胞凋亡指数。结果　48例肝癌组织、2 3例癌旁组织和2 5例正常肝组织的hMLH1mRNA表达分别为62 .5 % (3 0 /4 8)、10 0 .0 % (2 3 /2 3 )和10 0 .0 % (2 5 /2 5 ) ,蛋白表达分别为60 .41% (2 9/4 8)、91.3 0 % (2 1/2 3 )和10 0 .0 0 % (2 5 /2 5 )。hMLH 1表达与肝癌组织的临床分期有明显相关,hMLH1表达阳性的肝癌组织的细胞凋亡指数升高为(3 .5 62±0 .2 3 3 ) %。结论　hMLH1在肝癌组织中低表达,提示错配修复基因hMLH1功能缺陷在肝癌的发生、发展过程中起重要作用     

p16与粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子联合基因疗法治疗小鼠肾癌的研究

目的 探讨瘤体内直接注射途径的Ｐ１６抑癌基因疗法与粒细胞－巨噬细胞落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）的基因疗法联合应用对小鼠肾癌（ｒｅｎｅａ）的治疗效果及其免疫学机理。方法 建立皮下荷瘤肾癌小鼠模型,干接种肿瘤细胞３天后将荷瘤小鼠随机分为５组,分别给予不同的治疗,检测每组小鼠的免疫功能,观察每组小 的存活期,并行肿瘤病理学分析。结果 Ａｄｐ１６＋ＡｄＧＭ－ＣＳＦ联合治疗组有２只长期存活（存活时间〉９０ｄ）     

血栓调节蛋白在胃癌组织中的表达

目的 研究血栓调节蛋白（ＴＭ）的胃癌组织中的表达。方法 应用免疫组织化学ＡＢＣ法对４０例手术切除胃癌标本进行ＴＭ表面的研究。结果 １８例肠型胃癌中,１５例ＴＭ表达阳性（８３．３％）,２２例弥漫型胃癌中,１１例ＴＭ表达阳性（５０．０％）;６０岁以上病人是２３例,其中１９例ＴＭ表达阳性（８２．６％）,６０岁以下病人１７例,其中７例ＴＭ表达阳性（４１．２％）,肠型胃癌ＴＭ的表达明显高于弥漫型胃癌（Ｐ〈０