通用O型全血的初步研究

目的探讨冰冻干燥红细胞膜的制备技术及通用O型去除血型抗体全血的可行性。方法将A型及B型红细胞膜经过冰冻干燥处理后,加入O型全血中,经反应后测定血浆中血型抗体效价,并检测红细胞结构及功能,检测血浆中凝血因子活性变化。结果经过冰冻干燥处理后,红细胞膜仍具有抗原性,可有效降低血浆中的血型抗体效价,而全血中红细胞的变形指数、ATP含量与反应前差异无显著性,反应前后均在正常参考范围内;全血血浆中各种凝血因子活性在吸附前后比较,差异无显著性。结论尽管红细胞膜在体内是否产生大量抗体及其清除过程等尚需进行动物实验确定,但使用冰冻干燥红细胞膜制备通用型血液过程简便易行,具有进一步的研究价值。     

去除血型抗体制备O型红细胞的研究

目的建立去除血浆中血型抗体的O型红细胞的制备工艺,为临床提供安全的O型红细胞制剂。方法使用处理后的冰冻干燥A型、B型红细胞膜,分别加入O型红细胞血浆中吸附血浆血型抗体物质,并检测吸附后红细胞的结构和功能。结果使用海藻糖冻干保存红细胞膜可保存其抗原性,吸附后,可去除血浆中抗A、抗B抗体80%—99%,同时红细胞变形指数、ATP、渗透脆性、上清游离Hb含量与吸附前(正常红细胞)比较差异无统计学意义(P>0.05),均在正常参考范围;流式结果显示,吸附后采用离心方法,红细胞膜去除率可达到77%。结论用冰冻干燥红细胞膜去除ABO血型抗体为O型红细胞的他型输注奠定了基础。     

微柱凝胶法检测ABO疑难血型的临床应用

目的 探讨微柱凝胶法(MGT)检测ABO疑难血型的敏感性及影响因素.方法 应用(MGT)法检测38 600例患者的ABO血型,同时用试管法进行复查对照,对正反定结果不一致的血标本,增加离心或37℃孵育时间去除血清中的纤维蛋白和冷凝集素,对血型抗原明显减弱或抗体效价降低者,采用增加定型血清或被检血清的剂量,预先将抗原抗体混合置37℃反应15-30 min,然后采用(MGT)法检测.结果 MGT法检测ABO血型抗原明显减弱或抗体效价降低者的敏感性高于试管法.MGT法检测ABO血型,对正反定结果不一致者35例,其中患者血浆含纤维蛋白9例、血清蛋白异常增高4例、高效价冷凝集素5例、血型抗原明显减弱8例、抗体效价降低9例.结论 纤维蛋白、高效价冷凝集素、血型抗原减弱或抗体效价降低均可干扰ABO血型鉴定结果.增加离心或37℃孵育时间去除定型血清或患者血浆剂量血清中的纤维蛋白和冷凝集素,增加定型血清或患者血浆的剂量,预先将抗原抗体混合置37℃反应15-30分钟,然后采用MGT法检测,可提高ABO血型鉴定的准确性和输血安全.     

微柱凝胶法检测ABO疑难血型的临床应用及方法学探讨

目的探讨微柱凝胶法（MGT）检测ABO疑难血型的敏感性及影响因素。方法应用（MGT）法检测38600例患者的ABO血型,同时用试管法进行复查对照,对正反定结果不一致的血标本,增加离心或37~C孵育时间去除血清中的纤维蛋白和冷凝集素,对血型抗原明显减弱或抗体效价降低者,采用增加定型血清或被检血清的剂量,预先将抗原抗体混合置37℃反应15—30min,然后采用（MGT）法检测。结果MGT法检测ABO血型抗原明显减弱或抗体效价降低者的敏感性高于试管法。MGT法检测ABO血型,对正反定结果不一致者35例,其中患者血浆含纤维蛋白9例、血清蛋白异常增高4例、高效价冷凝集素5例、血型抗原明显减弱8例、抗体效价降低9例。结论纤维蛋白、高效价冷凝集素、血型抗原减弱或抗体效价降低均可干扰ABO血型鉴定结果。增加离心或37℃孵育时间去除定型血清或患者血浆剂量血清中的纤维蛋白和冷凝集素,增加定型血清或患者血浆的剂量,预先将抗原抗体混合置37℃反应15—30分钟,然后采用MGT法检测,可提高ABO血型鉴定的准确性和输血安全。     

ABO主侧不相容的骨髓移植患者输注供者型别的红细胞作为单独预备性治疗

同种骨髓移植对许多血液及非血液性疾病已是一种成熟的治疗方法。然而由于HLA基因复合体与ABO抗原在遗传上是相互独立的,因此受者与供者即使HLA相匹配,也可能ABO血型不相容。在这种情况下,要么去除受者的ABO抗体或者移植骨髓中的红细胞以防止在移植过程中发生严重的溶血反应。有两种方法可以减少患者的ABO抗体:一是血浆置换术,二是输注供者型别的红细胞。而血浆置换术费时,不仅去除ABO抗体,同时也把许多重要的抗体去除了,这样,会增加患者由于输注新鲜—冰冻血浆而造成感染的危     

病毒灭活血样对输血相容性检测的影响

目的探讨新冠肺炎流行形势下,血液样本经56℃ 30 min病毒灭活处理后对部分血型抗原性及抗体效价的影响。方法选取20例不同血型样本和6例含不规则抗体样本,在样本加热灭活处理前后,采用微柱凝集试验分别检测血液样本部分血型抗原性和抗体效价。根据反应凝集强度判断ABO血型抗原性,抗体效价以凝集强度1+为判定标准,比较热灭活前后样本红细胞ABO抗原性和血浆中抗体效价的变化。结果 56℃ 30 min灭活处理的血液样本溶血严重,对ABO血型抗原检测无影响,不规则抗体效价降低1～2个滴度,对效价≤4的抗体会漏检,对效价4的抗体检出无影响。结论血液样本热灭活,对ABO血型系统以外抗体效价有一定影响,但能有效降低操作者的职业暴露风险。     

类孟买血型OHmA1例的鉴定及输血安排

目的鉴定类孟买血型OHmA,为患者制定输血方案。方法对1例ABO正反定型不相符患者,用单克隆抗体检测红细胞ABH及Lewis抗原;用A、B、O型红细胞检测ABO血型抗体及不规则抗体;用吸收放散试验检测红细胞弱A、弱B抗原;用中和抑制试验检测唾液中ABH血型物质。采用自体输血,并准备37℃与患者血浆反应弱的A型异体红细胞。结果该患者为类孟买血型OHmA,手术中输入700ml自体全血即完成手术,未输异体血。结论ABO血型鉴定时坚持正、反定型可避免OHmA漏检,对OHmA的准确鉴定有赖于多种血型血清学技术;OHmA患者可采用自体输血。     

PK7300全自动血型分析仪测定ABO血型抗体效价的初步研究

目的：探索使用PK7300全自动血型分析仪测定ABO血型抗体效价的方法,探讨献血者血型检测中与ABO血型抗体效价相关的影响因素及注意事项。方法仪器微板法测定抽样标本的ABO血型抗体效价;仪器微板法及手工试管法测定各血型混合血浆的ABO血型抗体效价;统计分析该中心2013年5～7月检测出的ABO血型抗体效价降低的情况。结果A型献血者与B型献血者的ABO血型抗体效价比较,差异无统计学意义（P＞0．05）,O型献血者的ABO血型抗体效价明显高于A型或B型献血者（P＜0．05）;手工试管法的灵敏度明显优于仪器微板法,而手工试管法二的灵敏度又明显优于手工试管法一（P＜0．05）;ABO血型抗体效价降低的A型献血者明显多于B型或O型（均P＜0．01）,ABO血型抗体效价降低的男性献血者明显多于女性（P＜0．01）。结论仪器微板法测定ABO血型抗体效价操作简便、结果判读客观、重复性好,1∶1～1∶80的稀释比例范围能满足绝大多数标本的测定需要,采用梯度稀释有助于减小测定误差;血型、性别、年龄、亚型等因素可能与献血者ABO血型抗体效价降低相关。     

血浆与红细胞悬液上清液中抗体效价及血浆蛋白的含量分析

目的了解血浆与红细胞悬液上清液中血型抗体效价和血浆蛋白含量。方法选取无偿献血者162名(A型53例,B型52例,O型57例)制备的血浆和红细胞悬液,对后者混匀后离心取上清液,抗-A、抗-B效价和血浆蛋白的含量检测并进行比较。结果血浆与红细胞悬液上清液中血型抗体效价比较,A型血浆抗-B效价(30.76±23.28),A型红细胞悬液抗体效价(5.00±3.37);B型血浆抗-A效价(20.08±20.62),B型红细胞悬液抗体效价(2.75±2.15);O型血浆抗-A效价(33.54±21.03),红细胞悬液抗体效价(5.33±3.09),血浆抗-B效价(31.37±20.75),细胞胞悬液抗体效价(4.98±2.97)。血浆各类蛋白与红细胞悬液上清液中A型比较均有统计学意义(P<0.01)。血浆抗体效价均数约为红细胞悬液上清液的6倍;血浆各类蛋白约为红细胞悬液上清液的7～8倍。结论悬浮红细胞中抗体效价低且蛋白含量少,可以在交叉配血时只做主侧配血即可。     

ABO血型不合异基因造血干细胞移植对红系造血恢复的影响

本研究探讨ABO血型不合异基因造血干细胞移植对红系造血的影响。对16例ABO血型不合的造血干移植患者的ABO血型,IgM和IgG抗体进行监测。结果显示,16例ABO血型不合的造血干细胞移植患者均恢复造血功能,与ABO血型相合组比较,ABO血型不合组在粒细胞植活时间、血小板植活时间无差异,但红系重建时间明显延长;ABO主侧不合与双侧不合受者抗供者凝集素消失时间与红系恢复时间有相关性。结论 :ABO血型不合的异基因造血干细胞移植会导致红系造血迟缓。移植前用供型血浆置换法或输注供者红细胞来中和受者体内抗供者红细胞的凝集素能缩短红细胞植入时间,减少红细胞的输注。     

Severe haemolysis after an ABO unmatched kidney transplant - a nonsecretor transplanted from a donor with high anti-A titre

A case of severe haemolysis following an ABO unmatched renal transplant is reported in a group A nonsecretor who received a kidney from a group O living related donor. Following the haemolytic episode, group A donor units were incompatible and the patient was transfused with group O blood. Serological investigation of the recipient revealed anti-A present in the serum and on the red cells. Investigation of the donor revealed the presence of high-titre anti-A. The association of such high-titre donor antibody with haemolysis in ABO unmatched grafts has not been reported before. We discuss the risk factors for developing haemolysis in an ABO unmatched organ transplant and explore the possible relevance of such high donor antibody titre to recipients who are nonsecretors.     

天然ABO抗体缺失的分子机制研究

目的 从ABO基因水平探讨正常人群血型鉴定中出现天然抗体缺失的机制.方法 部分或全部缺失抗体导致ABO血型正反定型不一致的15个正常健康个体运用检验红细胞表面血型抗原最为敏感的方法-吸收放散试验未能检测出其抗原性.PCR扩增后直接序列分析ABO基因全长编码区及5'端调控(CBF/NF-Y)增强子区域多态性.结果 在常规的血清学反向定型实验中,这15个标本的血清中部分或全部缺失抗体,吸收放散实验与A或B型红细胞反应均为阴性.12个标本的ABO基因分析定型、增强子区域多态性与血清学结果相符合,1个O表型的标本中存在B101等位基因,2个B表型标本中检测出A102等位基因.结论 天然ABO抗体缺失的分子机制可能部分被揭示:ABO基因编码少量表达抗原,按照天然抗体产生规律,导致不能产生相应的ABO抗体.ABO基因分型在正反定型不符的疑难血液标本鉴定中,是血清学方法 非常有益的补充手段,是正确鉴定血型的有效方法.     

ABO血型不合供者外周血造血干细胞的采集

目的研究ABO血型不合供者外周血造血干细胞的采集方法,探讨不去除红细胞和/或血浆进行造血干细胞移植的安全性。方法 29例异基因外周血干细胞移植供者与受者HLA配型为全相合或1～3位点不合,其中ABO主要不合13例,次要不合7例,ABO血型相合9例。采用CS-3000Plus血细胞分离机的干细胞采集程序对ABO血型不合供者的外周血造血干细胞进行采集,不去除红细胞和/或血浆,直接回输给受者。结果 ABO血型主要不合、次要不合及血型相合的供者每次采集的外周血干细胞(PBSC)产品终体积为(59.11±1.19)ml,单个核细胞(MNC)采集物、MNC比例、CD34+细胞、RBC含量三组间的差异无统计学意义。结论应用CS-3000Plus血细胞分离机采集ABO血型不合供者外周血造血干细胞,不仅对供者安全,而且采集产品中造血干细胞浓度较高,血型不合的红细胞污染较少,不需要去除红细胞和血浆,可安全地用于ABO血型不合的受者。     

天然ABO抗体缺失的分子机制研究

目的 从ABO基因水平探讨正常人群血型鉴定中出现天然抗体缺失的机制.方法 部分或全部缺失抗体导致ABO血型正反定型不一致的15个正常健康个体运用检验红细胞表面血型抗原最为敏感的方法-吸收放散试验未能检测出其抗原性.PCR扩增后直接序列分析ABO基因全长编码区及5'端调控(CBF/NF-Y)增强子区域多态性.结果 在常规的血清学反向定型实验中,这15个标本的血清中部分或全部缺失抗体,吸收放散实验与A或B型红细胞反应均为阴性.12个标本的ABO基因分析定型、增强子区域多态性与血清学结果相符合,1个O表型的标本中存在B101等位基因,2个B表型标本中检测出A102等位基因.结论 天然ABO抗体缺失的分子机制可能部分被揭示:ABO基因编码少量表达抗原,按照天然抗体产生规律,导致不能产生相应的ABO抗体.ABO基因分型在正反定型不符的疑难血液标本鉴定中,是血清学方法 非常有益的补充手段,是正确鉴定血型的有效方法.     

Basic principles of the ABO and Rh blood group systems for hemapheresis practitioners

Since 1901, more than 20 distinct blood group systems have been identified and characterized. Yet, the ABO System, the first described, remains the most clinically significant in blood transfusion and organ transplantation medicine. The ABO antigens are the only cellular antigens which consistently produce a potent, naturally occurring antithetical antibody which circulates in the plasma of healthy individuals. ABO antigens are expressed on most blood cells, organs, and tissues and in most body fluids. Expression of the antigens results from the interaction of several separate, but closely related genes: ABO. H. and Secretor (Se). Blood group specificity depends upon the inheritance of the ABO and H genes, and the subsequent expression of these antigens on the red blood cells. The “D” or Rh₀ antigen is the most clinically significant blood group antigen next to the ABO antigens. The D antigen belongs to the Rh System, which consists of a trio of genes that are so closely linked that they are inherited as a package. The antigens are an integral part of the red blood cell membrane. They lend stability to the membrane structure when they are normal, but result in decreased red cell survival when absent. Rh antibodies are immune antibodies requiring a stimulus and can cause significant transfusion and childbearing complications if present. © 1992 Wiley-Liss, Inc.     

异基因造血干细胞移植后并发自身免疫性溶血性贫血患者产生类抗体血清学检测方法及输血策略

目的探讨异基因造血干细胞移植（AHSCT）后免疫介导的自身免疫性溶血性贫血（AIHA）患者交叉配血不合的原因,血浆中不规则抗体筛选试验阳性时,不规则抗体鉴定的血清学检测方法的选择,处理措施及输血策略。 方法一例AHSCT后的3岁男性患儿因重度贫血为改善贫血症状需输注红细胞入住四川省人民医院。通过盐水试管法确定了患儿ABO、Rh血型后进行交叉配血试验发现患儿与多个同型供者血液不相合,考虑到患儿贫血严重,于是采用直接抗球蛋白试验来判断红细胞是否被致敏;通过盐水介质试管法、微柱抗球蛋白法和聚凝胺法进行ABO血型系统以外的不规则抗体筛选试验以确定血浆中有无不规则抗体;根据不规则抗体筛选试验结果选择聚凝胺法来确定抗体的特异性;通过盐水介质试管法、经典抗球蛋白法和聚凝胺法进行交叉配血实验,结合抗体鉴定的结果,综合分析选择合适的供者红细胞输注。 结果本例患儿ABO血型为AB型,Rh分型为CCDee,ABO血型已转变为供者血型。直接抗球蛋白试验强阳性,红细胞被抗体致敏。血浆中检出了不规则抗体,红细胞上放散下来的致敏抗体与血清中检出的不规则抗体均为类抗-Ce自身抗体。选择了避开类抗-Ce抗体的Ce抗原阴性的AB型红细胞输注后血色素升高,3 d后复查血常规Hb为79 g/L,输血有效。 结论任何类型的AHSCT后都有可能发展成AIHA,也就是血浆中可能存在某种自身抗体（类抗体）而破坏自身红细胞,若能够明确患者血清中存在的类抗体,即可避开这种抗体而筛选红细胞无相应抗原的供者,也就避免发生溶血性输血反应以安全输血。     

婴儿ABO血型的鉴定及应用于临床输血

为了研究6个月内婴儿ABO血型正确定型方法及影响因素，采用常规血清学法、凝胶柱法及PCR-SSP3种方法对6个月以内的婴儿进行血型鉴定。结果表明：在使用不同方法检测婴儿ABO血型结果不符的33例中，常规血清学方法32例红细胞定型与血清定型不符，1例是由细菌感染产生类B抗原所致的假相合。凝胶柱法可正确定型27例，正确率84.4%。PCR-SSP法可对所有标本做出正确定型。凝胶柱法与PCR-SSP法有显性差异。结论：对6个月以内的婴儿进行ABO血型鉴定，推荐采用凝胶柱技术。凝胶柱法红细胞定型与血清定型相符的婴儿输血采用同型输注，但若婴儿患有感染性疾病时，应考虑到类B抗原引起的假相合。凝胶柱法红细胞定型与血清定型不符的婴儿输血时使用O型洗涤红细胞等成分血，待PCR-SSP法分型结果做出后，改为同型输血。     

罕见的B(A)表型血清学及基因检测

目的对1例B(A)表现型用血清学及基因检测进行鉴定。方法使用2个厂家的单克隆抗-A、抗-B血型定型试剂;进口单克隆抗-A、抗-B血型定型试剂;Diamed凝胶系统;人源抗-A、抗-B、抗-H血型试剂和试剂红细胞,用常规血清学方法对被检血样进行ABO血型定型。采用吸收放散方法;分子生物学PCR-RFLP方法;ABO基因第6、7外显子的PCR产物正反向测序方法进一步分析。结果被检血样红细胞及血清经2种单克隆抗-A、抗-B和试剂红细胞进行抗原抗体鉴定:正定型结果不一致;正反定型结果不符合。用吸收放散方法,人源抗-A、抗-B、抗-H;进口单克隆抗-A、抗-B血型定型试剂和Diamed凝胶系统检测:有弱A抗原、强H抗原检出;PCR-RFLP基因分型:检出B/O基因;基因克隆测序证实为:B(A)700/O*02。结论证实该例为B(A)700/O*02。     

稀有B(A)02亚型标本的血型基因鉴定

目的 对1例ABO定型正反不符[血清学初定为B(A)]的标本进行PCR分型和测序分析,拟阐明其血清学的分子机制.方法 采用试管法进行血清学鉴定;用PCR-SSP方法对标本ABO基因亚型进行初筛,并测序分析标本ABO基因的第6和第7外显子.结果 血清学表现为AxB,且H抗原明显增强,反定与A1细胞和A2细胞皆有反应,初定为B(A)型;PCR-SSP分型定为B(A)02型.测序表明:标本的第6外显子存在261delG突变;第7外显子在B101序列的基础上,出现了B(A)02型700C/G的典型突变.结论 该标本的基因型为B(A)02型与O01型杂合.