曲拉西利联合免疫联合化疗治疗晚期食管癌1例及文献分析

免疫联合化疗已成为晚期食管癌一线治疗标准方案。骨髓抑制(CIM)是肿瘤化疗最常见的毒副作用，严重的骨髓抑制常导致化疗周期的延长和化疗剂量的减少，进而降低化疗强度和抗肿瘤疗效。目前，临床上使用粒细胞集落刺激因子(G-CSF)刺激骨髓造血祖细胞分化治疗化疗引起的骨髓抑制。曲拉西利是一种短效、可逆的细胞周期蛋白依赖性激酶4/6(CDK4/6)抑制剂，可从源头保护骨髓造血功能。曲拉西利已于2022年7月获批用于广泛期小细胞肺癌骨髓抑制的预防治疗。然而，曲拉西利尚未在临床上广泛应用于预防化疗引起的骨髓抑制。本文报道1例经治的晚期食管癌患者应用曲拉西利预防化疗引起的骨髓抑制的病例，以供同行参考。     

曲拉西利用于骨髓保护的作用机制及临床研究进展

骨髓抑制(chemotherapy-induced myelosupression, CIM)是化疗药物最常见的毒性反应，80%以上的化疗药物都会导致CIM。CIM通常表现为中性粒细胞、血小板及红细胞减少等。CIM会导致化疗药物减量、延迟给药，严重影响肿瘤患者的生活质量，降低化疗的整体抗肿瘤效果。作为全球首个具有全系骨髓保护作用的药物，曲拉西利是一种高效、选择性、可逆的细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependent kinase, CDK)4/6抑制剂，可将造血干细胞和祖细胞、免疫细胞等细胞周期短暂阻滞在DNA合成前期(G1期),以降低化疗引起的损伤，从而发挥骨髓保护及免疫调节的作用。2021年4月，曲拉西利在美国获批上市。2022年7月，曲拉西利在我国获批上市，首个获批适应证为“适用于既往未接受过系统性化疗的广泛期小细胞肺癌患者，在接受含铂类药物联合依托泊苷方案治疗前预防性给药，以降低化疗引起的CIM的发生率”。本文拟对曲拉西利的作用机制、药动学、药物相互作用机制、临床评价及安全性等相关研究进展进行系统阐述，以期为临床实践提供进一步的参考及依据。     

曲拉西利联合拓扑替康二线治疗广泛期小细胞肺癌1例及文献分析

小细胞肺癌(SCLC)恶性程度高、预后差，约2/3的患者在确诊时已发生远处转移，疾病进展迅速，复发率高。目前，以拓扑替康为主的化疗方案仍然是SCLC二线治疗的标准方案，但疾病缓解时间短，受益于其疗效的患者不足1/4。骨髓抑制(CIM)是肿瘤化疗中最常见的毒副反应，严重的骨髓抑制会降低化疗的剂量强度和抗肿瘤疗效。曲拉西利是一种短效、可逆的细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)4/6抑制剂，2022年7月已获批用于SCLC化疗所致骨髓抑制的预防治疗。已有研究表明，曲拉西利具有较好的骨髓保护作用，其抗肿瘤作用仍需进一步探讨。本文报道1例伴有多发转移的晚期SCLC患者采用“曲拉西利联合拓扑替康二线治疗方案”获得超过1年无进展生存时间的病例。     

曲拉西利联合免疫联合化疗一线治疗广泛期小细胞肺癌1例及文献分析

小细胞肺癌是肺癌中恶性程度最高的一种分型，病情进展迅速，预后差，是临床上最难治愈的疾病之一。目前，含铂化疗仍然是广泛期小细胞肺癌(ES-SCLC)的一线标准治疗方案。足剂量化疗是获得最佳疗效的保证，一线治疗有效率达60%～80%(足剂量情况下),但化疗带来的骨髓抑制仍然是阻碍化疗的主要原因。目前，粒细胞集落刺激因子(G-CSF)在临床上常用于预防性升白治疗，但这种传统治疗手段可能造成骨髓造血储备功能耗竭，对患者正常骨髓造血功能产生损害。目前，曲拉西利已获批用于ES-SCLC骨髓抑制的预防治疗，能够从源头上保护造血干细胞/祖细胞(HSPCs)而起到保护骨髓的作用。本文特报道1例我科经治的ES-SCLC患者应用曲拉西利联合化疗进行骨髓保护的病例，以期提供进一步临床参考及依据。     

曲拉西利预防化疗相关骨髓抑制的药物经济学探讨

目前，化疗仍然在肿瘤综合治疗中占据着举足轻重的地位。化疗导致的骨髓抑制(chemotherapy-induced myelosuppression, CIM)是化疗最常见的不良反应，严重影响化疗质量及患者的生活质量，严重增加患者的治疗负担，同时消耗更多的医疗资源。曲拉西利是一种高效、选择性、可逆的细胞周期蛋白依赖性激酶4/6(cyclin-dependent kinase 4/6,CDK4/6)抑制剂。临床数据显示，曲拉西利可将骨髓细胞暂时停滞在G1期降低CIM发生率，减少化疗剂量调整和延迟的比例，增加化疗的耐受性以及减轻患者经济负担。本文就目前CIM带来的危害、CIM的临床预防、CIM治疗现状以及曲拉西利预防CIM及其药物经济价值进行系统阐述及探讨，为患者选择合理的CIM预防以及治疗方案提供科学参考。     

鱼藤素诱导肺癌细胞凋亡和细胞周期阻滞的分子机制

目的探究鱼藤素是否能够阻滞细胞周期和细胞迁移,抑制非小细胞肺癌细胞的增殖。方法鱼藤素(1. 5625、3. 125、6. 25、12. 5、25、50μmol·L~(-1))处理H1299细胞不同时间后,CCK-8法检测细胞存活率,划痕实验测定划痕宽度及愈合率;鱼藤素(1. 5、3、6μmol·L~(-1))处理24 h,PI单染测定细胞周期,Annexin V-FITC/PI双染检测凋亡率,q PCR检测药物处理后的H1299细胞中CDK4、CDK6和CCND1的基因表达情况。结果鱼藤素能够降低H1299细胞的存活率,作用24、48、72 h的IC50值分别为(5. 47±0. 97)、(4. 01±0. 45)、(2. 86±0. 19)μmol·L~(-1),并抑制细胞的迁移与愈合能力。PI单染流式细胞术检测到其能阻滞细胞周期,使细胞阻滞在G0/G1期,流式双染实验测得其可诱导细胞的凋亡,q PCR发现鱼藤素可下调CDK4、CDK6和CCND1的基因表达。结论鱼藤素可抑制H1299细胞的增殖,抑制细胞的运动迁移能力,阻滞细胞周期,诱导细胞凋亡,且鱼藤素可通过下调细胞周期调控系统中的CDK4、CDK6、CCND1基因表达来调控细胞周期,达到抗肿瘤作用。     

细胞周期蛋白依赖性激酶4/6抑制剂ribociclib

全球乳腺癌发病率呈逐年上升趋势,已经成为当前社会的重大公共卫生问题。细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)4/6抑制剂将细胞周期阻滞于G₁期,从而起到抑制肿瘤增殖的作用。ribociclib属于高度特异性CDK4/6双重抑制剂,可靶向抑制D1/CDK4、D3/CDK6细胞周期,具有潜在的抗肿瘤活性。临床试验结果表明ribociclib可用于乳腺癌、黑色素瘤、非小细胞肺癌、畸胎瘤、脂肪肉瘤和胶质母细胞瘤的治疗。     

shRNA介导的Iduna沉默对肺癌A549细胞系细胞周期及其相关蛋白表达的影响

目的利用shRNA沉默E3泛素连接酶Iduna基因,观察Iduna对非小细胞肺癌细胞系A549细胞周期及其相关蛋白表达的影响。方法采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹法筛选Iduna高表达细胞系。构建shRNA-Iduna真核表达载体,瞬时转染A549细胞,蛋白印迹法检测转染效率。流式细胞仪检测细胞周期变化。蛋白印迹法检测细胞周期相关蛋白的表达。结果蛋白印迹法筛选Iduna高表达细胞系显示A549和SPC细胞中Iduna mRNA和蛋白水平高于其他细胞系。shRNA-Iduna转染A549细胞系后,流式细胞仪检测细胞周期显示干扰组G0/G1期比例增加,S期比例相对减少(P<0.05)。蛋白印迹法检测与细胞周期相关的G1/S期调控蛋白[细胞周期蛋白(cyclin)A、cyclin D1、cyclin E、CDK2、CDK4、CDK6、P21、P27、P53等]的表达情况,结果显示干扰组cyclin D1、cyclin E和CDK4蛋白表达减少(P<0.05)。结论 Iduna可能通过调控cyclin D1、cyclin E和CDK4蛋白的表达,使细胞阻滞于G0/G1期,从而调节肺癌细胞周期进程。     

黄连碱对人乳腺癌MDA-MB-231细胞周期和增殖的作用及其机制

目的 探讨黄连碱对人乳腺癌细胞株MDA-MB231细胞周期和增殖的作用及相关机制.方法 MTT法和瑞-姬氏染色法分别检测黄连碱对MDA-MB-231细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞周期分布,RT-PCR检测细胞周期相关基因包括细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)、CDK6、p21及p27mRNA的表达变化.结果 黄连碱可明显抑制MDA-MB-231细胞的增殖;黄连碱处理细胞后G0/G1期细胞比例减少,而S期和G2/M期细胞比例增高(P＜0.05或P＜0.01);黄连碱可上调p21 mRNA的表达、下调CDK4 mRNA和CDK6 mRNA的表达(P＜0.01),而对p27 mRNA水平无显著影响.结论 黄连碱在体外能通过诱导S期及G2/M期周期阻滞来抑制MDA-MB-231细胞的增殖;其机制可能与p21mRNA表达上调导致CDK4 mRNA及CDK6 mRNA减少有关.     

小细胞肺癌化疗相关骨髓抑制的研究进展

肺癌是全球最常见的癌症之一。2020年研究数据表明，全球新发肺癌病例约220万，占所有新发恶性肿瘤的11.4%。2020年，全球肺癌死亡人数约180万，约占恶性肿瘤相关死亡的18%。在中国，肺癌仍是发病率和死亡率第一的癌症。尽管免疫治疗及靶向治疗日益普及，化疗目前仍然是肺癌(特别是小细胞肺癌)最主要的治疗方式之一。然而，目前临床常用的化疗药物缺乏特异性，在杀死肿瘤细胞的同时也会杀伤正常细胞，特别是对增殖或代谢比较活跃的细胞。化疗引起的骨髓抑制是最常见的化疗非特异性毒性，也是影响化疗疗程及剂量的关键因素，接近90%的化疗药物可出现骨髓抑制情况。骨髓抑制是肿瘤化疗的最大障碍，骨髓抑制严重影响了肿瘤患者的生活质量，降低患者的依从性，延迟治疗，甚至会威胁患者的生命，应得到临床充分的重视。目前，针对化疗后骨髓抑制的治疗方法主要有促进中性粒细胞、红细胞、血小板生成药物及输血等。作为全球首个获批的具有全系骨髓保护作用的细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)4/6抑制剂，化疗前使用曲拉西利可从源头上有效降低化疗引起的骨髓抑制发生率。本综述拟通过探讨骨髓抑制相关机制、肺癌化疗后骨髓抑制的相关治疗措施等总结近年...     

CDK4/6抑制剂抗肿瘤作用研究进展

周期蛋白依赖性激酶4/6 (cyclin-dependent kinase4/6,CDK4/6)是一类丝/苏氨酸激酶,与细胞周期素D(cyclinD)结合,调节细胞由G1期向S期转换.在很多肿瘤中,都存在“cyclinD-CDK4/6-INK4-Rb通路”异常.这条通路的改变,加速了G1期进程,使得肿瘤细胞增殖加快而获得生存优势.因此,对其的干预成为一种治疗策略,CDK4/6因此成为抗肿瘤的靶点之一.本文总结了包括辉瑞PD0332991在内的一系列选择性较好的CDK4/6抑制剂的研发现状.     

二烯丙基二硫下调cyclin D1和CDK4的表达诱导人鼻咽癌CNE2细胞G_1期阻滞

目的研究二烯丙基二硫(DADS)对人鼻咽癌CNE2细胞的影响及其分子机制。方法采用MTT法检测DADS对CNE2细胞增殖抑制作用;流式细胞术分析DADS对CNE2细胞周期分布的影响;运用RT-PCR和Western blot方法分析DADS作用CNE2细胞后,cyclin D1和CDK4的表达变化。结果 MTT结果显示,不同浓度DADS(90、140、240、400μmol·L-1)处理CNE2细胞48h后,生长抑制率分别为4.0%、13.8%、25.8%、51.2%;流式细胞术分析显示,DADS阻滞CNE2细胞于G1期,并呈浓度依赖性;RT-PCR和Western blot结果表明,细胞周期调控基因cyclinD1、CDK4表达下调。结论 DADS对CNE2细胞的增殖抑制作用与其阻滞细胞G1期有关,并且可能是通过抑制cyclin D1、CDK4的表达使CNE2细胞阻滞于G1期。     

蟛蜞菊内酯对人肾癌细胞的体外生长抑制作用

目的　探讨蟛蜞菊内酯对人肾癌细胞的生长抑制作用及相关机制。 方法　采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法观察蟛蜞菊内酯对肾癌细胞活力的影响;通过流式细胞分析检测蟛蜞菊内酯对肾癌细胞凋亡和细胞周期的影响;通过免疫印迹法检测细胞凋亡和细胞周期相关蛋白的表达水平。 结果　蟛蜞菊内酯能够以剂量依赖的方式抑制肾癌细胞 ACHN 和 786-O 的生长;蟛蜞菊内酯能显著诱导肾癌细胞发生凋亡和 G0/G1 期阻滞。蟛蜞菊内酯能明显上调促凋亡蛋白 Bax 的表达,抑制抗凋亡蛋白 Bcl-2 和 Bcl-xL 的表达。此外,蟛蜞菊内酯还可抑制细胞周期相关蛋白 cyclin D1、CDK4 及 CDK6 的表达。 结论　蟛蜞菊内酯可诱导肾癌细胞凋亡并发生细胞周期阻滞,从而影响细胞活力,抑制其生长,可作为肾癌治疗的潜在药物。     

细胞周期素E与子宫内膜癌

细胞周期是由一系列高度有序并循精确时相的G1-S-G2-M期构成。细胞通过调控Cyclin,CDK,CKI及Rb,P53来实现对细胞周期进展速度的调控。肿瘤发生的根本原因就是本应停止增殖或生理性调亡的细胞不停地进入细胞周期,从而导致细胞的恶性增殖。细胞周期素E(Cyclin E)正是一种细胞周期调节蛋白,其高表达标志着细胞周期的启动和DNA合成即将开始。     

木栓酮调控K562细胞增殖和细胞周期机制的初步研究

目的观察木栓酮对人慢性髓系白血病(CML)细胞株K562增殖和细胞周期的影响和机制。方法将K562细胞分为对照组和木栓酮组,木栓酮组包括10、20、50、100μmol/L组,培养24、48、72h。采用四甲基固氮唑盐(MTT)法测定木栓酮对K562细胞增殖的影响,流式细胞仪检测木栓酮对K562细胞细胞周期的影响。实时定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞中细胞周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)mRNA表达水平。蛋白印迹法检测细胞中CDK1蛋白表达水平。结果 50μmol/L木栓酮组和100μmol/L木栓酮组K562细胞的增殖抑制率明显高于对照组,并具有一定的时间和剂量依赖性。进一步研究发现,50μmol/L和100μmol/L木栓酮可以阻滞细胞周期于G0/G1期。高浓度木栓酮作用后,CDK1mRNA及蛋白表达均明显低于对照组。结论木栓酮能够抑制K562细胞的增殖,并使K562细胞周期阻滞在G2期,其机制可能与下调CDK1的表达有关。     

降钙素基因相关肽对大鼠血管平滑肌细胞CDK2和Cyclin E的影响

目的:研究降钙素基因相关肽(CGRP)对大鼠血管平滑肌细胞中细胞周期蛋白依赖性激酶2(cyclin-dependent kinase 2,CDK2)和细胞周期蛋白E(Cyclin E)的影响,为阐明CGRP抑制血管平滑肌细胞增殖的细胞周期机制提供实验依据。方法:培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞,分别用CGRP或/和10%FBS处理细胞。噻唑蓝比色法(MTT)观察CGRP对10%FBS诱导大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响;流式细胞术分析细胞周期;Western blot检测CDK2和Cyclin E的表达。结果:CGRP能抑制10%FBS诱导的血管平滑肌细胞增殖,升高G0/G1期细胞百分比,降低S+G2+M期细胞百分比,抑制细胞内CDK2和Cyclin E表达。结论:CGRP能通过阻滞细胞周期由G0/G1期进入S期而抑制血管平滑肌细胞增殖,其作用机制可能与降低CDK2和Cyclin E表达有关。     

丁酸钠诱导结肠癌HT-29细胞凋亡的信号通路及对AQP3基因表达影响的研究

目的：探讨丁酸钠诱导结肠癌HT-29细胞凋亡过程的分子机理及其对水通道蛋白AQP3基因表达的影响。方法：MTT法检测不同浓度的丁酸钠对结肠癌HT-29细胞生长的影响;RT-PCR检测不同浓度的丁酸钠对细胞周期蛋白Cyclin D1、CDK4、p16和AQP3的基因表达水平,同时使用流式细胞仪检测细胞周期。结果：加入浓度超过2.5mmol/L的丁酸钠后,结肠癌HT-29细胞生长受到抑制,Cyclin D1、CDK4和AQP3的表达水平下降,p16的表达水平上调,细胞阻滞于G1/S期。结论：浓度超过2.5mmol/L的丁酸钠可以诱导结肠癌HT-29细胞凋亡,使其细胞周期阻滞于G1/S期,且这种诱导作用是剂量依赖型的,其分子通路可能是通过p16-Cyclin D1/CDK4这条信号途径,在此过程中,伴随着AQP3的基因表达水平降低。     

曲古抑菌素A对结肠癌细胞细胞周期影响的机制研究

目的 研究组蛋白去乙酰化酶（HDAC）的抑制剂曲古抑菌素A（TSA）对结肠癌细胞株SW480细胞周期、凋亡的影响,初步探讨TSA作用细胞周期的可能机制,为HDAC抑制剂用于结肠癌治疗提供理论依据.方法 培养人结肠癌细胞系SW480,采用HDAC抑制刺TSA干预细胞,运用流式细胞术检测细胞周期、凋亡以及细胞周期素的变化,最后采用Western blot对细胞周期相关的基因进行检测.结果 TSA处理细胞后,流式细胞计数分析显示,TSA能够延缓细胞周期G1-S进程,阻滞细胞于G1期,并且影响细胞周期素cyelinE、cyclinA聚集,而对凋亡无明显的影响.Western blot显示,TSA能够上调p21wafl/Cipl、p27Kipl的表达,下调CDK2、cyclinE以及cyclinA的表达.结论 在结肠癌细胞中,TSA能够通过上调p21Wafl/Cip1、p27Kip1的表达以及下调CDK2、cyclinE、cyclinA的表达,从而阻滞细胞周期于G1期,最终影响肿瘤细胞的生长.     

氯化两面针碱通过Rb/E2F途径抑制肝癌细胞SMMC-7721增殖作用机制研究

氯化两面针碱(Nitidine chloride,NC)是从芸香科植物两面针根部提取的一种天然生物碱,具有很好的抗肿瘤活性,在体外能抑制鼻咽癌,肺癌等细胞的增殖。研究表明NC可导致细胞周期G2/M期阻滞,并诱导细胞凋亡。E2F/RB在细胞周期调控中起重要作用,它们与CyclinD1、CDK4、CyclinE、CDK2构成复杂的反馈调控网路,调节细胞从G1期到S期的过渡,推动了细胞周期的转变。另外,研究表明E2F是重要的转录因子,参与了基因的转录调控。研究肝癌细胞SMMC-7721经两面针碱处理后RB/E2F通路的相关分子水平变化,以及氯化两面针碱在RB/E2F途径抑制肝癌细胞增殖,参与细胞凋亡作用的机制。应用CCK8方法测定NC对SMMC-7721细胞存活率的影响;Annexin-V和碘化丙碇(propidium i-odide,PI)双染法检测细胞凋亡和坏死情况;RT-PCR检测不同剂量NC对E2F、RB mRNA表达影响;WB检测E2F蛋白含量的变化。结果显示NC可抑制肝癌细胞增殖,降低细胞存活率,促进细胞凋亡,明显降低细胞中E2F、RB mRNA和E2F蛋白的表达,并呈浓度依赖性。NC通过作用于E2F/RB调控通路,抑制了E2F/RB的表达,参与了细胞的增殖抑制和诱导了细胞凋亡。     

4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯对K562细胞分化和细胞周期的影响

目的本研究探讨新型维甲酸衍生物4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯(4-amino-2-trifluoromethyl-phenyl retinate,ATPR)对K562细胞株的抑制增殖和诱导分化活性并对其机制进行研究。方法ATPR作用于K562细胞3d后,通过MTT法检测细胞的增殖,NBT还原实验法分析细胞的分化指标,瑞氏染色法在油镜下观察加药前后细胞形态学变化,FCM检测分析细胞周期,RT-PCR法检测cyclinE、cyclinD1、CDK2、CDK4、CDK6、p21cip1、p27kip1、p57kip2和PCNA mRNA的变化情况。Western blot法检测cyclin D1和CDK4蛋白表达的改变。结果ATPR呈浓度依赖性抑制K562细胞增殖的作用。ATPR诱导分化活性表现为NBT阳性细胞率增加,油镜下观察K562细胞有分化成熟的改变,G0/G1期细胞表达量增加,S期细胞表达量减少,呈G1期阻滞。RT-PCR检测发现cyclin E、cyclin D1、CDK2、CDK4、CDK6表达减少,PC-NA、P21cip1、P27kip1改变不明显,P57kip2表达增加。Western blot检测cyclin D1和CDK4蛋白表达减少。结论ATPR有较强的抑制K562细胞增殖并诱导其分化的活性,并通过上调P57kip2的表达,抑制Cyclin-CDK激酶复合物,发挥细胞周期阻滞的作用。