应用多重PCR方法快速鉴定结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌

目的 探讨应用多重PCR技术快速鉴定结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌的可靠性.方法 根据结核分枝杆菌种的MTP40基因序列(396bp),分枝杆菌属的32kD基因序列(506bp),结核分枝杆菌复合体群的IS6110序列(984bp),采用3对特异性引物(PT1,T2;MT1,T2;IS5,S6)在同一反应体系和条件下对92株结核杆菌临床分离株和5株非结核分枝杆菌临床分离株进行扩增,并与标准菌株进行比较.结果 92株结核分枝杆菌临床分离株中,0株扩增出与结核分枝杆菌H37RV标准株相同的396bp、506bp、984bp 3条DNA片段,敏感性达97.8%,特异性为100%;5株非结核分枝杆菌临床分离株均扩增出506bp DNA片段,敏感性达100%,特异性为100%.结论 应用多重PCR方法,对结核分枝杆菌及非结核分枝杆菌进行鉴定,结果快速、准确、可靠,为临床结核病与非结核分枝杆菌病的快速诊断提供了有效的手段,具有很好的临床应用价值.     

分枝杆菌噬菌体D29裂解酶基因的表达与鉴定

目的：在耻垢分枝杆菌中表达预测的噬菌体D29裂解酶基因片段,鉴定其细胞壁裂解活性。方法：在分析分枝杆菌噬菌体D29开放阅读框序列的基础上,用PCR法从噬菌体D29基因组DNA中扩增出与裂解酶同源性较高的序列gene10,将其克隆入大肠杆菌-分枝杆菌穿梭质粒后,在耻垢分枝杆菌中进行诱导表达。对表达产物进行SDS-PAGE检测,对诱导培养重组菌进行混浊度测定、透射电镜观察以鉴定其裂解活性。结果及结论：成功构建了重组穿梭质粒pUV-gene10并使gene10在耻垢分枝杆菌中获得表达,表达产物能有效降低宿主菌培养液混浊度,降解宿主菌细胞壁,证实gene10表达产物为噬菌体裂解酶,并推测其为非经典分泌蛋白。     

匡氏琼脂PNB培养基用于分枝杆菌直接鉴定效果调查

 目的 调查匡氏琼脂PNB培养基用于痰分枝杆菌直接鉴定的效果.方法 采用匡氏琼脂PNB培养基直接鉴定痰标本中的结核菌和非结核分枝杆菌;并采用琼脂PNB培养基和多重PCR技术对分离物重鉴定.结果 281例痰标本,110例培养阳性,经匡氏PNB培养基直接鉴定,非结核分枝杆菌感染3例(3/110,2.7%),结核菌和非结核分枝杆菌混合感染7例(7/110,6.4%),结核菌感染100例(100/110,90.9%).匡氏琼脂PNB培养基痰菌直接鉴定法对结核菌和非结核菌感染病例的灵敏度和特异性达100%.结论 匡氏琼脂PNB培养基痰菌直接鉴定法,能快速准确鉴定非结核菌感染和混合感染,操作简易,适合推广应用.     

胞内分枝杆菌肺病的CT表现

目的 探讨胞内分枝杆菌肺病的CT特点.方法 收集在本院经临床确诊的37例胞内分枝杆菌肺病患者,回顾性分析其影像学表现.结果 胞内分枝杆菌肺病主要的CT征象为小叶中心结节(97.3%)、支气管扩张(73.0%)和肺斑片状病灶(54.1%),其次为纤维条索灶(43.2%)、≥1 cm结节灶(35.1%)、薄壁空洞(29.7%),而厚壁空洞和胸腔积液却不常见.较为特征性的CT征象为发生于右中叶和(或)左舌叶支气管扩张伴周围小叶中心结节.结论 胞内分枝杆菌肺病的CT表现具有一定的特征性,CT检查对该病的诊断具有重要价值.     

PCR快速诊断结核性脑膜炎25例

ＰＣＲ快速诊断结核性脑膜炎２５例①７１００３２西安第四军医大学西京医院苏明权马越云祝道成穆士杰姚娟关键词结核分枝杆菌；聚合酶链反应；脑膜炎中国图书资料分类号Ｒ５１本研究根据人型结核杆菌特异性基因序列设计一对引物，用聚合酶链反应（ＰＣＲ）快速检测脑脊液...     

两种培养基对结核分枝杆菌分离鉴定的比较

与世界总体水平相比 ,目前我国的结核病发病率仍然较高。为了选择检测效果好、成本低的培养基对结核分枝杆菌进行分离与鉴定 ,我们采用匡铁吉[1] 琼脂培养基与Ｌ ｗｅｎｓｔｅｉｎ[2 ] 培养基对痰标本中的结核分枝杆菌进行分离、鉴定 ,结果显示匡铁吉琼脂培养基临床效果较优。1　材料和方法1 1　痰标本与前处理　从我院住院肺结核患者中留取 12 7份痰标本 ,每份大约 10ｍｌ,收集在一个10 0ｍｌ的干净厂口玻璃瓶内。按痰标本量的 2 5倍体积加入 2 %氢氧化钠 (ＮａＯＨ)溶液 ,用玻璃棒反复搅拌 ,以使浓痰液化均匀 ;作用 2 0ｍｉｎ后即可用于…     

抗分枝杆菌纯蛋白衍生物抗体特征的研究

 目的 调查不同人群血清抗10种分枝杆菌纯蛋白衍生物(PPD)抗体的特征.方法 采用ABC-ELISA法检测结核患者、健康体检者与OT阴性、强阳性新兵血清抗10种PPD抗体水平.结果 结核患者血清抗BCG和抗胞内分枝杆菌PPD抗体水平显著高于抗人型结核菌PPD抗体水平(P＜0.01);OT强阳性新兵血清抗非结核分枝杆菌PPD抗体水平显著高于OT阴性新兵和健康查体者(P＜0.01).结论 个体环境分枝杆菌接触史对结核患者体液免疫应答有重要影响.胞内PPD和BCG-PPD可用于结核病血清学诊断.     

高频电灼联合乌体林斯治疗尖锐湿疣的临床效果

目的探讨尖锐湿疣(CA)电灼联合局部注射乌体林斯治疗的效果。方法将68例CA分为两组,每组34例。治疗组应用电灼大范围汽化疣体并在创面即疣体的基底部注射乌体林斯。对照组单纯采用高频电灼治疗。结果治愈后复发率治疗组与对照组分别为20.59%,58.82%,前者明显降低,两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论对CA的治疗在扩大电灼范围的同时配合免疫疗法,可降低CA复发率。     

大蒜素对结核分枝杆菌体外抑菌效果观察

近年来 ,大量的基础研究表明 ,大蒜制剂具有降血脂、扩张血管、抗动脉粥样硬化、抗血小板聚集、溶栓、抗菌、抗肿瘤[1] 等作用 ,但对结核分枝杆菌作用的研究报道尚少。 1998年 6月 1999年 6月 ,我们观察了大蒜素片对结核分枝杆菌的体外抑菌效果 ,报告如下。1　材料和方法1 1　大蒜素浸取液制备　取大蒜素片 (新疆天山制药工业有限公司提供 ) 2片 (每片 350ｍｇ)置无菌试管内 ,加入 1ｍｌ二甲酰胺溶解 ,静置过夜后加入 9ｍｌ无菌蒸馏水 ,充分混匀。1 2　含药培养基制备　在 4瓶 10 0ｍｌ土豆汤琼脂培养基中 ,分别加入大蒜素浸取液 0 8ｍｌ、…     

胰腺结核1例诊治分析

<正>1 临床资料患者男性,36岁,因纳差、乏力伴皮肤、巩膜黄染、尿黄5 d入院。发病以来,上腹部饱胀不适、恶心,无腹痛、发热、盗汗、咳嗽。既往无结核病史。查体:皮肤、巩膜中度黄染,浅表淋巴结未及,腹平软,无压痛、反跳痛,未触及包块,移动性浊音阴性,肠鸣音正常。化验:丙氨酸转氨酶253.0 U/L,谷草转氨酶171.0 U/L,总胆红素115.1 μmol/L,直接胆红素82.4 μmol/L;肝炎血型学阴性;肿瘤标志物均在正常范围,结核     

隐球菌保护性肽表位GMFDGLSGV多聚体的免疫原性研究

目的探讨纯化的隐球菌抗原肽GMFDGLSGV二聚体、四聚体、八聚体重组蛋白激发细胞毒性T淋巴细胞(Cytotoxic T lymphocyte,CTL)免疫应答的能力,为新型隐球菌疫苗的研制打下基础。方法通过细胞增殖和细胞毒性实验,研究纯化的GMFDGLSGV单体、二聚体、四聚体、八聚体重组蛋白刺激外周血单个核细胞(PBMC)产生的增殖反应和细胞毒活性,初步鉴定重组多聚体的免疫原性。结果10例HLA-A*0201阳性个体PBMC对八聚体的平均SI为37.4±3.07;增殖反应明显高于四聚体(平均SI为20.1±1.37)、二聚体(平均SI为14.1±1.06)、单体(平均SI为11.4±0.68)以及阴性对照(平均SI为1±0.10)引起的细胞增殖反应(P<0.01)。在抗原肽诱导的CTL细胞毒活性中,HLA-A*0201阳性个体PBMC对八聚体、四聚体、二聚体、单体及阴性对照组均表现不同程度的杀伤活性,平均活性分别为48.1±4.28、23.9±2.20、16.3±1.27、13.1±1.10、1.0±0.1(P<0.01)。结论本研究得到的重组优化八聚体具有较好的免疫原性,能有效刺激PBMC产生细胞增殖反应和细胞毒活性,为进一步开发有效的隐球菌疫苗打下了基础。     

海洋生物刺伤致手部慢性感染的治疗

目的探讨海洋生物刺伤致手部慢性感染的发病机制及治疗效果。方法对38例手部慢性感染患者依据症状的轻重不同采取药物治疗、局部理疗等非手术治疗以及以手术为主的彻底清创,配合局部理疗、药物及高压氧等综合治疗。结果 17例症状较轻病例行非手术治疗,15例获得6～12月随访,均获痊愈,手部功能无明显障碍。21例手术病例经随访5～16个月,其中2例于术后3、5月局灶性复发,行二次手术治疗获痊愈。伤手按TAM评定:优11例,良5例,可3例,差2例。结论海洋生物刺伤致手部感染是一种特殊性的感染,其发病与分枝杆菌感染关系密切,根据症状不同,可以采取非手术及手术治疗等综合措施,选用克拉霉素或罗红霉素+利福平+乙胺丁醇,连续治疗3～6月化疗方案可取得良好的疗效。     

目前结核分枝杆菌感染中重要免疫细胞和细胞因子作用的研究进展

清楚认识结核分枝杆菌感染引起的免疫反应机制十分重要,因此近年来有关这方面的研究较多。本文主要对参与结核分枝杆菌感染自然免疫的巨噬细胞、自然杀伤细胞、中性粒细胞;获得性免疫反应的T淋巴细胞(CD4,CD8);以及-γ干扰素、白介素4,12,10,12,肿瘤坏死因子等细胞因子进行了介绍。     

耐多药结核病例不同年龄组耐药性分析

 目的 探讨耐多药结核(Multidrug resistance-TB,MDR-TB)病例不同年龄组的耐药状况,分析相关因素.方法 采用匡氏琼脂培养基法进行结核杆菌分离培养及药敏试验,筛选出107例耐多药性肺结核病例,按年龄分为青年组(20～39岁)、中年组(40～59岁)、老年组(＞60岁),分析其耐药种类及耐药形成原因.结果 原发性耐多药病例中,老年组比例最高(50.0%),其次为青年组(33.3%),中年组最低(16.7%);获得性耐多药病例中以青年组所占比例最大( 67.4%),中年组次之(24.2%),老年组占8.4%,青年组和中年组比例明显高于老年组(P＜0.01);不同年龄组耐多药种类相比差异无统计学意义(P＞0.05),且各个年龄组均以耐HRS和HRSE为主.耐药形成原因中,初治期间不规则用药和不满规定疗程自行停药共占72.6%,是MDR产生的主要原因.经统计学处理各个年龄组化疗情况比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 不同年龄组原发和获得性耐多药情况有所不同,建议重视不同年龄组的耐多药率的检测,合理化疗和贯彻全程督导治疗原则对于减少耐多药现象至关重要.     

链霉素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒小鼠体内抗结核菌活性的研究

目的观察链霉素纳米粒的小鼠体内抗结核作用。方法以被结核分枝杆菌感染的小鼠为实验动物,以小鼠的体重变化、死亡率、心、肝、脾、肺等重要脏器的重量指数变化及病理改变为评判指标,对链霉素纳米粒的体内抗结核作用进行了观察,并与非纳米化的普通链霉素进行了对比。结果链霉素纳米粒在降低结核感染模型动物死亡率及减轻肺脏病变程度的作用方面均较普通链霉素有较大的增强。结论链霉素纳米化后抗结核作用增强。     

结核分枝杆菌耐药机制研究进展

结核病是严重危害人民身体健康的传染性疾病。耐药结核杆菌尤其是耐多药结核杆菌（MDR—TB）的出现和传播是导致结核病发病率升高的重要原因。结核杆菌无法通过质粒的介导从其他细菌获得耐药性，因此染色体介导的耐药是结核杆菌产生耐药的分子基础。目前对结核杆菌耐药机制的研究主要集中在药物作用靶位及相关基因的突变上。     

分枝杆菌菌型快速鉴定方法的应用研究

1　材料与方法1 1　材料　标准株 :人型结核杆菌Ｈ37ＲＶ、牛型结核杆菌、鸟分枝杆菌、胞内分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌、淋巴分枝杆菌、偶发分枝杆菌和耻垢分枝杆菌标准株均购自北京结核病研究所。临床分离株 :收集 1996年 6月～ 1999年 3月从本院结核科住院结核病患者痰、胸腔积液和脑积液中分离到的抗酸杆菌分离物 376株 ,经琼脂斜面传代 ,取生长良好的35 8株做分型鉴别试验。1 2方法　传统分型鉴别试验 :按常规制备对硝基苯甲酸培养基 (ＰＮＢ)和 2 羧酸肼噻吩培养基 (ＴＣＨ)。取试验菌株菌悬液 (0 .0 1ｍｇ/ｍｌ) 0 .1ｍｌ接种 ,37℃培…