排毒养颜胶囊对非酶体系产生的·OH及的清除作用

目的 :通过对活性氧自由基的清除作用研究排毒养颜胶囊排毒养颜的部分作用机理。方法 :用化学发光法测定该中药方剂水浸提液对非酶体系产生的超氧阴离子自由基 (O ·2 )和羟自由基 (·OH)的清除作用。结果 :该浸提液清除O ·2 的SC5 0 为 2 7× 1 0 5 g·ml 1 ,相当于 1 0ng·ml 1 SOD的活性 ;清除·OH的SC5 0 为 6 5× 1 0 5 g·ml 1 ,相当于 1× 1 0 5 mol·L 1 硫脲的活性。当浸提液浓度较高时 ,它对O ·2 和·OH的清除率均可达 90 %以上。结论 :这种较强的抗自由基活性可能是该中药方剂排毒养颜的部分作用机理     

6-苯硫基-2-乙基-3-羟基-4(1H)-吡啶酮的抗氧化作用

目的　以正常大鼠组织匀浆、肝亚细胞及给药小鼠肝匀浆、血清等为材料研究 6 苯硫基 2 乙基 3 羟基 4(1H) 吡啶酮 (HDP)的抗氧化作用。方法　组织匀浆或肝亚细胞悬液与 6 苯硫基 2 乙基 3 羟基 4(1H) 吡啶酮共浴 ,以VitC/FeSO4 激发脂质过氧化反应 ,以丙二醛 (MDA)产生、还原型谷胱甘肽耗竭、线粒体膨胀作为评价脂质过氧化程度指标。小鼠ipHDP每天一次 ,连续 2 0d后摘眼球取血 ,分离血清 ,测定MDA含量 ,取肝制成匀浆 ,测定MDA含量。结果　 6 苯硫基 2 乙基 3 羟基 4(1H) 吡啶酮可抑制VitC/FeSO4 激发的MDA的产生 ;抑制肝组织匀浆还原型谷胱甘肽耗竭及线粒体膨胀 ;降低给药小鼠肝匀浆及血清中的脂质过氧化物水平。结论　 6 苯硫基 2 乙基 3 羟基 4(1H) 吡啶酮具有抗氧化作用。     

茶多酚对脑缺血再灌注损伤的保护作用及在体外抗脂质过氧化和清除自由基作用

目的 :研究茶多酚对脑缺血再灌注损伤的保护作用及抗脂质过氧化和清除自由基的作用。方法 :结扎大鼠双侧颈总动脉及迷走神经后 ,再灌注 4 5min ,建立脑缺血再灌注模型。由自由基诱导的脑线粒体脂质过氧化 ,用硫代巴比妥酸法测定。由Xan XO诱导的O 2 and由Fe2 + H2 O2 诱导的·OH ,用紫外分光光度仪测定。结果 :在脑缺血再灌注损伤时 ,茶多酚能改善SOD、GSH Px、CAT活性 (P <0 0 1) ,同时降低脑水肿和MDA含量 (P <0 0 1和P <0 0 5 )。茶多酚具有明显的清除·OH和O 2 的作用 (IC50 分别为 2 2mmol·L-1和 1 9mmol·L-1) ,茶多酚明显抑制由·OH诱导脑线粒体脂质过氧化 ,并呈浓度依赖性。结论 :结果提示茶多酚能保护脑缺血再灌注损伤 ,与其清除自由基和抗脂质过氧化作用有关     

龙眼参对机体氧自由基清除作用的研究

目的 :研究龙眼参对机体氧自由基的清除作用。方法 :采用分光光度法检测龙眼参对超氧阴离子自由基 (O2· -)和羟自由基(·OH)的清除及抑制作用。结果 :龙眼参3 0g/ml在体外对·OH的清除率为28 4 % ;龙眼参1 5g、3 0g、6 0g/ml对O2· -的清除率分别为44 1 %、63 0 %和47 9 % ,对O2· -的抑制率分别为48 9 %、58 9 %和67 5 %。结论 :龙眼参对O2· -具有显著的清除及抑制作用 (P<0.01) ,对·OH也有一定的清除作用 (P<0.05)。     

银耳碱提多糖抗氧化活性的研究

目的对从银耳孢子发酵物中用碱液提取得到的4个多糖组分TFFB-A、TFFB-B、TFFB-C、TFFB-D的抗氧化活性进行研究。方法采用清除羟基自由基(·OH)、清除超氧阴离子自由基(O2)、抗H2O2诱导的红细胞氧化溶血试验,考察4个多糖组分的抗氧化活性。结果TFFB-A、TFFB-B、TFFB-C、TFFB-D的溶血率分别为21.4%,31.2%,28.5%,25.6%;最大清除率分别为21.4%,28.4%,36.6%,53.0%;EC50分别为233.6,603,191,195mg/L。结论4个多糖组分均具有一定的清除·OH、O2和抑制红细胞溶血的活性。     

吡咯啉氮氧自由基及衍生物抗大鼠不同组织脂质过氧化损伤

目的　在体外研究新合成吡咯啉氮氧自由基及衍生物对大鼠肝细胞膜、线粒体、红细胞及卵黄磷脂脂质过氧化的保护作用 ,并探讨其作用机制。方法　采用Fenton反应法诱导大鼠肝细胞膜、肝线粒体、卵黄磷脂脂质过氧化 ,通过硫代巴比妥酸 (TBA)法测定丙二醛 (MDA)含量 ;415nm处测定H2 O2 诱导的红细胞溶血作用 ;邻苯三酚自氧化法检测其对超氧阴离子 (O·2 )清除作用。结果　带一个活性基团 (NO·)的化合物A、B可明显地抑制MDA的产生 (P <0 0 1) ,抗H2 O2 诱导的红细胞溶血作用 ,但并不影响O·2 的产生 ;具有两个活性基团 (NO·)的化合物C作用略为明显 ,IC50 <31 2 5mg·L-1;而不带活性基团 (NO·)的化合物D无抗氧化能力。结论　稳定性氮氧自由基化合物通过清除生物体系中羟基自由基 (·OH)发挥其抗脂质过氧化作用 ,而对·OH的捕捉可能是通过活性基团NO·实现的     

扇贝边酶解物抗氧化作用研究

目的探讨不同蛋白酶酶解扇贝边所得酶解物对羟自由基(·OH)的清除效果及酶解物的体内抗氧化作用。方法通过胰蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、复合风味酶、枯草杆菌蛋白酶的扇贝边酶解物对·OH的清除活性筛选酶种,并优化其酶解条件。用酶解物灌胃小鼠,测定小鼠血液中的谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力、超氧化物歧化酶(SOD)活力和肝脏中的丙二醛(MDA)含量。结果枯草杆菌蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解扇贝边所得酶解物具有较好的·OH清除效果,其清除率分别为84 .37%和79.93% ,这两种酶解物均可提高小鼠血液中GSH-PX活力和SOD活力,并降低小鼠肝脏中的MDA含量。结论扇贝边酶解物具有不同程度的体内抗氧化活性作用     

2-乙基-3-羟基-6-苯硫基-4(1H)-吡啶酮的抗氧化作用

目的研究2-乙基-3-羟基6-苯硫基-4(1H)-吡啶酮(HPP)的抗氧化作用。方法用电子自旋共振(ESR)法测定HPP对羟自由基的清除作用,用荧光法测定大鼠线粒体膜的流动性,用比色法测定给药后小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)及肝线粒体中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力。结果HPP对羟自由基有较强的清除作用,显著促进线粒体膜的流动性,明显提高给药小鼠血清中SOD和线粒体中GSH-Px的活力。结论HPP有显著的抗氧化作用。     

2种西番莲叶中黄酮的抗氧化活性研究

目的:研究紫果和黄果西番莲叶中黄酮提取物的抗氧化作用。方法:以芦丁、Vc为对照,测定紫果和黄果西番莲叶中黄酮提取物对超氧阴离子自由基(O2-·)、羟自由基(·OH)及二苯代苦味酰基苯肼(DPPH·)自由基的清除率。结果:2种西番莲叶中黄酮提取物均具有不同程度的清除自由基能力,其中黄果西番莲提取物对·OH的清除率优于Vc和紫果西番莲提取物;2种西番莲提取物对O2-·和DPPH·自由基有清除效果,但总体偏低。结论:2种西番莲叶中黄酮均具有不同程度的抗氧化能力。     

β-环糊精修饰超氧化物歧化酶的代谢动力学研究

牛血铜，锌-超氧化物歧化酶（Cu，Zn－SOD）用高碘酸钠活化的β-环糊精（β-Cyclodextrin，β-CD）修饰。对修饰酶静脉注射兔体进行药代动力学研究，结果表明β－CD修饰的SOD在兔体内基本符合二室模型，其特征方程为C＝236e－7.0937t＋60e-0.4473t，修饰SOD的T为0．11±0．04h和1．66±0．48h，体内CLB为53±11．10L／（kg·h），曲线下面积AUC为176．5±35．40U（L·h）。     

褪黑素对高糖条件下牛主动脉内皮细胞NOS活性和iNOS mRNA表达的影响

目的 观察褪黑素(Melatonin, Mel)对高糖条件下牛主动脉内皮细胞一氧化氮合酶(nitric oxidase,NOS)活性及表达诱生型一氧化氮合酶(iNOS)基因的影响,以探讨Mel的血管内皮保护作用.方法 原代培养牛胸主动脉内皮细胞,取3～5代用于实验.实验分5组:A组为低糖对照组,培养液中葡萄糖浓度为5.5mmol/L;B组为高糖(33mmol/L)对照组;C组为高糖(33mmol/L)、亚生理浓度Mel组(10-13mol/L):D组为高糖(33mmol/L)、生理浓度Mel(10-9mol/L)组;E组为高糖、药理浓度Mel(10-5mol/L)组.体外孵育24h后, 比色法检测培养液中NOS活性,逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)法检测内皮细胞iNOS mRNA表达.结果 A组NOS活性及iNOS mRNA表达均显著低于B组(均P＜0.01);B组与C组比较两者均无显著性差异(均P＞0.05);D组、E组NOS活性均显著低于B组(均P＜0.05);D组、E组iNOS mRNA表达均显著低于B组(均P＜0.01).结论 生理及药理浓度Mel对高糖条件下牛主动脉内皮细胞有一定的保护作用.     

糖耐量受损Wistar大鼠模型的实验研究

目的建立糖耐量受损的动物模型。方法60只Wistar雄性大鼠随机分为对照组(30只)和高脂组(30只)。每周记录体重变化,每2周作一次糖耐量实验,12周成模时测定血脂、胰岛素,用HOMA胰岛素抵抗(HOMA-IR)指数评价胰岛素抵抗程度。结果①12周时高脂组有22只大鼠成模,其2 h血糖均值达到了糖耐量受损的诊断标准,空腹血糖高于对照组[(4.38±0.69)mmol/L vs(3.03±0.19)mmol/L,P<0.05],但未达到空腹血糖受损的诊断标准;②成模组大鼠的体重、腹内脂肪量与体重的比值明显高于对照组[(556±25)g vs(373±11)g,(6.72±0.41)%vs(2.86±0.10)%,P均<0.01];胰岛素和HOMA-IR指数明显高于对照组[(32.2±4.2)mU/L vs(11.4±0.9)mU/L,(1.82±0.29)mmol.mU/L2 vs(0.42±0.03)mmol.mU/L2,P均<0.01];血脂谱:总胆固醇高于对照组[(1.75±0.53)mmol/L vs(0.87±0.01)mmol/L,P<0.05],甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇明显高于对照组[(1.70±0.41)mmol/Lvs(0.62±0.05)mmol/L,(0.93±0.23)mmol/L vs(0.20±0.29)mmol/L,P均<0.01],高密度脂蛋白胆固醇明显低于对照组[(0.87±0.04)mmol/L vs(1.13±0.14)mmol/L,P<0.01]。结论通过12周的高脂饲养成功建立了伴有胰岛素抵抗的Wistar大鼠糖耐量受损动物模型,其成模率为73.3%。     

柞蚕幼虫铜锌超氧化物歧化酶的纯化及部分性质研究

目的从柞蚕幼虫分离铜锌超氧化物歧化酶 (Cu ,Zn SOD) ,并对其部分性质进行研究。方法用氯仿 乙醇除杂蛋白质、丙酮沉淀、热变性、DE 32柱色谱等方法 ,对柞蚕幼虫Cu ,Zn SOD进行分离纯化。结果得Cu ,Zn SOD干粉 9.5 3mg ;比活 10 116 .5 8u/mgpro ;活力回收 5 5 .87% ;纯化倍数为 36 0 .6 7。该酶相对分子质量 (Mr)约为 310 0 0 ;亚基Mr 约为 15 5 0 0 ;最大吸收波长 2 5 8nm ;pH在 5～ 9范围内基本稳定 ;在 4 0℃～ 6 0℃内保温 30min酶活基本不变 ;2mmol/L十二烷基硫酸钠对此酶没有明显的抑制 ;该酶对KCN和H2 O2 敏感。结论柞蚕幼虫含有丰富的Cu ,Zn SOD。     

环孢素治疗狼疮性肾炎

目的 :观察环孢素治疗狼疮性肾炎的疗效。方法 :采用环孢素 5mg·kg- 1·d- 1,分 2～ 3次口服治疗 30例狼疮性肾炎 ,疗程 12wk。治疗前后观察病人临床表现 ,尿蛋白定量 ,肾功能及血清C3 ,C4 ,T细胞亚群 (CD4 + ,CD8+ ,CD4 + /CD8+ )等指标。结果 :环孢素治疗 12wk后 ,病人临床症状明显改善 ,尿蛋白为 0 .4 g·2 4h- 1±s0 .9g·2 4h- 1,较治疗前明显减少 (P <0 .0 1) ,肾功能 (BUN为 6 .4mmol·L- 1± 1.2mmol·L- 1,Scr为 136 μmol·L- 1± 91μmol·L- 1) ,较治疗前明显改善 (P <0 .0 1) ,血清C3 ,C4 及T细胞亚群 (CD4 + ,CD8+ ,CD4 + /CD8+ )与治疗前比较差异均有显著意义。结论 :环孢素对狼疮性肾炎治疗有效     

Inhibitory effect of reactive oxygen species on angiotensin I-converting enzyme (kininase II)

1. Somatic angiotensin I-converting enzyme (ACE) is a protein that contains two similar domains (N- and C-terminal), each possessing an active site. We have examined the effects of a generator of hydroxyl radicals (g*OH: 2,2'-azo-bis(2-amidinopropane)) and hydrogen peroxide (H2O2) on ACE using an in vitro approach. 2. The generator of hydroxyl radicals inactivated ACE in a time (2-6 h)- and concentration (0.3-3 mmol/L)-dependent manner at 37 degrees C. When ACE was coincubated for 4 h with g*OH (3 mmol/L), its activity decreased by 70%. Addition of dimethylthiourea or mannitol + methionine, two *OH scavengers, resulted in a significant protection of ACE activity. Mercaptoethanol and dithiotreitol, two thiol-reducing agents, also efficiently protected ACE activity. 3. The hydrolysis of two natural and domain-specific substrates was explored. The hydrolysis of angiotensin I, preferentially cleaved by the C-domain, was significantly inhibited (57-58%) after 4 h exposure to g*OH (0.3-1 mmol/L). Under the same conditions of exposure, the hydrolysis of N-acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro, a specific substrate for the N-domain, was only slightly inhibited by 1 mmol/L g*OH. 4. Hydrogen peroxide, another source of *OH, was used. After exposure to H2O2 (3 mmol/L; 4 h), an 89% decrease in ACE activity was observed. Pretreatment with the iron chelator deferoxamine (1 mmol/L) attenuated H2O2-mediated ACE inactivation, demonstrating that the effect of H2O2 was partly due to its conversion into *OH (Fenton reaction). 5. In summary, our findings demonstrate that g*OH and H2O2 inhibit ACE activity and suggest a preferential action of g*OH on the C-domain of the enzyme.     

藏族青少年血清钙、无机磷水平测定分析

目的:探讨在不同海拔的高原环境下,拉萨与那曲地区藏族青少年血清钙(Ca)和无机磷(P)的特点及其差异。方法:采用分层整群抽样的方法,选取拉萨和那曲地区的12~18岁健康藏族青少年共1458人,测定身高及血清钙(偶氮胂III法)、无机磷(磷钼酸比色法)的含量。结果:①拉萨藏族青少年血清钙为(2.86±0.17)mmol/L,磷为(1.61±0.29)mmol/L,其水平均显著高于那曲地区(P<0.01),即血清钙为(2.24±0.18)mmol/L,磷为(1.31±0.20)mmol/L;②两个地区血清Ca无年龄差异(P>0.05),血清P与[Ca].[P]随年龄增长水平降低(P<0.05),那曲男性在16岁以后,女性在17岁以后,[Ca].[P]低于2.82;③血清[Ca].[P]水平均与身高密切相关(P<0.01)。结论:拉萨与那曲地区藏族青少年血清钙比较稳定,无机磷水平与年龄显著相关,两个海拔地区其规律有一定的差异。     

巴曲酶的扩血管作用及其机制探讨

目的研究巴曲酶对血管张力的影响及其可能机制。方法离体大鼠主动脉环测定张力，主动脉薄片孵育测定ＮＯ生成、血管一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性与Ｌ－精氨酸（Ｌ－Ａｒｇ）转运。结果巴曲酶（０．１～２０Ｂｕ·Ｌ－１）浓度依赖性扩张大鼠离体主动脉环，去内皮血管对巴曲酶的舒张反应明显低于内皮完整血管（Ｐ＜０．０１），最大舒张反应分别为４０．１％±２１．９％和８８．１％±４．２％（Ｐ＜０．０１）。巴曲酶（１０Ｂｕ·Ｌ－１）刺激孵育主动脉产生ＮＯ－２增加１２８％（Ｐ＜０．０１），固有型ＮＯＳ（ｃＮＯＳ）和总ＮＯＳ（ｔＮＯＳ）活性分别增加２．０倍和４０．０％（Ｐ值均小于０．０１），诱导型ＮＯＳ（ｉＮＯＳ）活性无显著变化（Ｐ＞０．０５）。血管壁对Ｌ－Ａｒｇ的转运呈高和低亲和两种方式，巴曲酶（１０Ｂｕ·Ｌ－１）可使其最大转运速率Ｖｍａｘ分别增加８３．８％和４７．４％（Ｐ＜０．０１）。结论巴曲酶的内皮依赖的扩血管作用通过Ｌ－Ａｒｇ／ＮＯ途径，巴曲酶增加血管壁Ｌ－Ａｒｇ的转运和激活ＮＯＳ，使ＮＯ生成增加     

海绵polymistia spongia提取物aldisin的抗脂质过氧化及清除自由基作用研究

目的研究海绵ｐｏｌｙｍｉｓｔｉａｓｐｏｎｇｉａ提取物ａｌｄｉｓｉｎ的抗脂质过氧化及清除自由基作用。方法采用ＭＤＡ－ＴＢＡ比色法测定组织匀浆中过氧化脂质（ＬＰＯ）含量；采用邻苯三酚自氧化法测定ａｌｄｉｓｉｎ对Ｏ·２自由基的清除作用；采用分光光度法测定ａｌｄｉｓｉｎ对Ｃｕ２＋－ＶｉｔＣ体系产生的·ＯＨ自由基的清除作用；采用ＥＳＲ法测定ａｌｄｉｓｉｎ对ＤＰＰＨ自由基的清除作用。结果ａｌｄｉｓｉｎ具有显著的抗脂质过氧化作用，并能有效地清除Ｏ·２、·ＯＨ和ＤＰＰＨ自由基，在０．４２６μｍｏｌ·Ｌ－１～１８．５ｍｍｏｌ·Ｌ－１浓度范围内有明显的量效关系。结论ａｌｄｉｓｉｎ是自由基清除剂。     

Effect of hydrogen peroxide on persistent sodium current in guinea pig ventricular myocytes

AIM: To study the effect of hydrogen peroxide (H2O2) on persistent sodium current (I(Na.P)) in guinea pig ventricular myocytes. METHODS: The whole-cell, cell-attached, and inside-out patch-clamp techniques were applied on isolated ventricular myocytes from guinea pig. RESULTS: H2O2 (0.1 mmol/L, 0.5 mmol/L and 1.0 mmol/L) increased the amplitude of whole-cell I(Na.P) in a concentration-dependent manner, and glutathione (GSH 1 mmol/L) reversed the increased I(Na.P). H2O2 (1 mmol/L) increased persistent sodium channel activity in cell-attached and inside-out patches. The mean open probability was increased from control values of 0.015+/-0.004 and 0.012+/-0.003 to 0.106+/-0.011 and 0.136+/-0.010, respectively (P< 0.01 vs control). They were then decreased to 0.039+/-0.024 and 0.027+/-0.006, respectively, after the addition of 1 mmol/L GSH (P<0.01 vs H2O2). The time when open probability began to increase and reached a maximum was shorter in inside-out patches than that in cell-attached patches (4.8+/-1.0 min vs 11.5+/-3.9 min, P<0.01; 9.6+/-1.6 min vs 18.7+/-4.7 min, P<0.01). CONCLUSION: H2O2 increased the I(Na.P) of guinea pig ventricular myocytes in a concentration-dependent manner, possibly by directly oxidating the cell membrane.