肝靶向性纳米载体介导psiRNA对HepG2细胞HLA-E干扰效率的检测

目的：检测肝细胞靶向性Gal-PEG-PEI纳米基因载体介导psiRNA干扰HepG2细胞HLA-E表达的效率。方法：分别用Gal-PEG-PEI/psiRNA、裸psiRNA、PEG-PEI/psiRNA、Gal-PEG-PEI/NC-psiRNA、Lipofectamine 2000/psiRNA转染HepG2细胞,同时以未转染的HepG2细胞为空白对照组,以Gal-PEG/NC-psiRNA（无义siRNA质粒）转染为阴性对照组。48 h后,Real-time RT-PCR检测HLA-EmRNA表达水平,Western blot法检测HLA-E蛋白表达水平。结果：Gal-PEG-PEI组对HLA-E的干扰效率为55%（mRNA水平）和62%（蛋白水平）,显著高于Lipofectamine 2000组、PEG-PEI组、裸psiRNA组和阴性对照组（P〈0.01）。结论：Gal-PEG-PEI/psiRNA纳米粒具有良好的肝细胞靶向性,对HepG2细胞HLA-E有较高的干扰效率。     

聚酰胺-胺型树形分子脂质体对人结肠癌细胞摄入和细胞毒性的影响

目的 研究聚酰胺-胺型树形分子(PAMAM)脂质体对人结肠癌细胞摄入和细胞毒性的影响.方法 以1,2-二油烯氧基-3-三甲氨基丙烷(DOTAP)和二油酰基磷脂酰乙醇胺(DOPE)为材料制备脂质体,将质粒PEGFP-N1与脂质体和PAMAM混合分别制备PAMAM脂质体/DNA转染复合物和PAMAM/DNA转染复合物.透射电镜观察转染复合物的形态、粒径,zeta电位分析仪测定载质粒纳米粒子的zeta电位,离心法和紫外分光分度仪测定载质粒纳米粒子的包封率,将上述两种载质粒纳米粒子转染人结肠癌细胞SW620、人乳腺癌细胞MCF-7、血管内皮细胞ECV304,流式细胞仪测定增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的入胞量,MTT法对PAMAM脂质体/DNA复合物和PAMAM/DNA复合物的毒性进行评价.结果 PAMAM脂质体载质粒纳米粒子的粒径与PAMAM载质粒纳米粒子的粒径差异无统计学意义[(192±16)nm比(189±19)nm,P＞0.05],zeta电位前者高于后者[分别为(42±7)mV和(32±7)mV,P＜0.05],包封率两者之间差异无统计学意义[(82±7)%比(84±6)%,P＞0.05].PAMAM脂质体载质粒纳米粒子和PAMAM载质粒纳米粒子转染SW620、MCF-7、ECV304细胞后,PAMAM脂质体/DNA组细胞EGFP基因摄入量高于PAMAM/DNA组,差异有统计学意义(P＜0.05).前者细胞存活率高于后者,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 脂质体修饰聚酰胺-胺型树形分子可提高基因转染细胞的效率,降低细胞毒性.     

肝细胞肝癌靶向性r-Caspase-3重组腺病毒的构建与表达

目的 构建肝细胞肝癌特异性表达反向半胱氨酸蛋白酶3(r-Caspase-3)重组腺病毒,为肝细胞肝癌的基因治疗提供新策略.方法 构建甲胎蛋白(AFP)增强子和白蛋白 (ALB) 启动子腺病毒载体(pAdTrack-EAFP-PALB),然后将目的 基因r-Caspase-3亚克隆到载体pAdTrack-EAFP-PALB上, 获得重组腺病毒穿梭载体pAdTrack-EAFP-PALB /r-Caspase-3, 经PmeⅠ酶切线性化后与pAdEasy-1同源重组,获得重组腺病毒骨架pAdEasy-EAFP-PALB /r-Caspase-3; 鉴定正确的pAdEasy-EAFP-PALB /r-Caspase-3 经PacⅠ酶切线性化后脂质体转染AD293 细胞进行包装、扩增,获得病毒.绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)监测病毒滴度和感染效率; RT-PCR和Western blot 法检测r-Caspase-3在HepG2细胞中的表达; SRB染色法评估重组腺病毒对HepG2细胞的抑制作用,初步观察HepG2细胞凋亡状况.结果 穿梭载体pAdTrack-EAFP-PALB/r-Caspase-3酶切、测序正确.穿梭载体、pAdEasy-1载体同源重组后PCR 及PacⅠ酶切鉴定结果表明pAdEasy-EAFP-PALB/r-Caspase-3 重组成功; 经PacⅠ酶切线性化后,pAdEasy-EAFP-PALB/r-Caspase-3 转染AD293 细胞即可观察到GFP 的表达; 回收病毒可重复感染AD293 细胞,RT-PCR和Western blot 均可检测到r-Caspase-3的表达,证实Ad-EAFP-PALB/r-Caspase-3病毒颗粒包装成功; SRB染色检测发现Ad-EAFP-PALB/r-Caspase-3具有凋亡诱导特异性.结论 靶向性Ad-EAFP-PALB/r-Caspase-3重组腺病毒构建成功,并具有凋亡诱导靶向性,为进一步研究靶向性r-Caspase-3基因治疗肝细胞肝癌及其生物学功能奠定了基础.     

超声靶向微泡破裂介导EGFP质粒转染肝癌细胞的研究

目的探讨超声靶向微泡破裂(Ultrasound Targeted Microbubble Destruction,UTMD)介导EGFP质粒转染肝癌细胞株HepG2的有效性、安全性并优化超声辐照参数。方法体外培养HepG2细胞,在不同治疗超声的声强、占空比和辐照时间作用下,观察pEGFP-N3质粒在HepG2细胞中的转染。荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白在HepG2细胞中的表达,流式细胞仪检测细胞的转染率,MTT法检测细胞活性。结果在超声声强为2 w/cm2、占空比为20%、照射时间为60 s时,HepG2细胞的7转染率最高,达到11.53%±2.15%,且细胞生存率大于85%。结论 UTMD是一种有效的基因转染方法,不同的超声转染参数对细胞活力和基因传输效率有较大影响,对其进行优化后可减少细胞损伤,增强基因转染。     

The Research of EGFP Plasmid Transfection in Hepatoma Cells Mediated by Ultrasound Targeted Microbubble Destruction

目的 探讨超声靶向微泡破裂(Ultrasound Targeted Microbubble Destruction,UTMD)介导EGFP质粒转染肝癌细胞株HepG2的有效性、安全性并优化超声辐照参数.方法 体外培养HepG2细胞,在不同治疗超声的声强、占空比和辐照时间作用下,观察pEGFP-N3质粒在HepG2细胞中的转染.荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白在HepG2细胞中的表达,流式细胞仪检测细胞的转染率,MTT法检测细胞活性.结果 在超声声强为2 w/cm2、占空比为20％、照射时间为60s时,HepG2细胞的7转染率最高,达到11.53％±2.15％,且细胞生存率大于85％.结论 UTMD是一种有效的基因转染方法,不同的超声转染参数对细胞活力和基因传输效率有较大影响,对其进行优化后可减少细胞损伤,增强基因转染.     

端粒酶反义RNA影响人肝癌细胞系HepG2生长的初步报告

目的探讨抗端粒酶在肝细胞癌治疗中的意义。方法将反义hTR真核表达载体经脂质体介导转染人肝癌细胞系HepG2,体外培养及接种裸鼠观察其基因转染细胞的细胞周期、超微结构变化及致瘤性。结果形态学观察,转染后HepG2细胞出现典型的凋亡现象。FCM检测发现G1期前出现凋亡峰,凋亡率为4·2%。在裸鼠皮下的致瘤性明显降低。HepG2/pBBS212细胞的瘤体抑制率为2·4%,与HepG2/pBBS212-hTR细胞的25·6%相比,差异有显著性(P<0·05)。结论转染端粒酶反义RNA能抑制肝癌HepG2细胞的恶性表型,促进其凋亡。     

RhoA基因沉默对肝癌HepG2细胞增殖和迁移能力的影响

目的 构建RhoA-siRNA表达载体,研究其对肝癌HepG2细胞肿瘤生物学行为的影响.方法 利用pGenesil-1 质粒构建RhoA-siRNA表达载体,以脂质体法转染至肝癌HepG2细胞中建立稳定细胞系,并分为3组.转染 pGenesil-1-RhoA-siRNA 载体者为HepG2/RhoA-siRNA组,转染随机对照载体者为HepG2/control组,未转染的肝癌HepG2细胞作为HepG2组.Western blot检测RhoA-siRNA对其蛋白表达的抑制情况.分别采用MTT法、细胞划痕损伤和平板克隆形成实验检测转染细胞的增殖、迁移和生长潜能,流式细胞仪检测细胞周期变化.采用单凶素方差分析、x2检验比较各组差异.结果 3组细胞蛋白表达水平比较,HepG2/RhoA-siRNA组RhoA蛋白的表达明显下调(F=178.19,P<0.05).HepG2/control组和HepG2组细胞划痕损伤在48 h内愈合,而HepG2/RhoA-siRNA组则不能愈合.HepG2/RhoA-siRNA组克隆形成率低于HepG2组和HepG2/control组,分别为39%±3%、67%±5%、70%±6%,其差异有统计学意义(χ2=33.34,38.69,P<0.05).RhoA基因沉默显著抑制肝癌HepG2细胞的增殖,细胞周期中G0/G1期细胞数量增多而S期细胞数量减少(F=70.46,76.57,P<0.05).结论 RhoA-siRNA表达载体能抑制肝癌HepG2细胞的增殖和迁移,可为肝癌的基因治疗提供新的方法.     

自制纳米级超声微泡造影剂与脂质体基因转染效率的比较

目的 以GFP为目的 基因,比较自制纳米级超声微泡造影剂和脂质体的转染效率,探讨自制纳米级超声微泡造影剂作为基因载体的可行性.方法 噻唑蓝(MTT)比色法检测超声微泡浓度对HepG2的细胞毒性;取安全浓度的超声微泡造影剂和脂质体分别与4、8、16μg的PShut-tle-IRES-hrGFP-1质粒结合后转染HepG2细胞,24 h后利用荧光显微镜和流式细胞术检测并比较两者的GFP转染效率.结果 MTT法显示超声微泡造影剂浓度≤5%时对HepG2细胞生长无明显影响(P＜0.05);超声微泡造影剂能将GFP基因成功转运到HepG2细胞内并高效表达,微泡造影剂+8μg质粒组转染效率达(32.61±3.42)%;脂质体+4 μg质粒组的转染效率为(34.12±8.06)%,两组差异无统计学意义(P＞0.05).结论 自制纳米级超声微泡造影剂能成功转运外源DNA进入细胞内,其转染效率与脂质体无明显差异.     

透明质酸／壳聚糖/pEGFP纳米粒介导体外基因转染关节软骨细胞与滑膜细胞的比较

[目的]以透明质酸(HA)修饰的壳聚糖(CS)／质粒DNA(pDNA)纳米粒介导体外基因转染关节软骨细胞与滑膜细胞,以明确其作为非病毒基因载体治疗关节疾病的潜能.[方法]将HA修饰的CS与负载增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)的pDNA以复凝聚法制成纳米粒,以扫描电镜检测纳米粒形态;激光粒度仪测定其粒径、Ze-ta电位及分散度(PDl);凝胶电泳阻滞试验榆测HA/CS和pDNA的结合力及pDNA的释放;体外转染兔关节软骨细胞与滑膜细胞,以流式细胞仪及荧光显微镜检测转染效率.[结果]HA/CS/pDNA纳米粒多呈球形,粒径平均为(142.5±20.3)nm,表面Zeta电位平均为(25.99±8.48)mV,分散度平均为(0.283±0.089),可有效保护pDNA免受核酸酶的降解;通过调节pH值至7.5以上或加入壳聚糖酶可促使纳米粒中的pDNA释放;体外转染实验证明HA/CS/pDNA纳米粒能介导pEGFP转染软骨细胞和滑膜细胞并在细胞内表达绿色荧光蛋白,其对软骨细胞的转染能力较强,比裸pEGFP和CS/pEGFP纳米粒有更高的转染效率(P＜0.05);但对滑膜细胞的基因转染效率较低,与CS/pEGFP纳米粒无明显差别(P＞0.05).[结论]复凝聚法制备的HA/CS/pDNA纳米粒是一种有效的新型非病毒基因转染载体,在体外可介导基因转染关节软骨细胞和滑膜细胞,其转染效率具有明显的细胞依赖性.     

聚酰胺树形分子递送Survivin反义寡核苷酸诱导结肠癌细胞凋亡的研究

目的 观察聚酰胺(PAMAM)树形分子高聚合物介导Survivin反义寡核苷酸(Sur-vivin-asODN)转染结直肠癌SW620细胞的可行性以及对结直肠癌SW620细胞凋亡的影响.方法 制备PAMAM反义基因复合物和阳离子脂质体反义基因复合物,透射电镜观察复合物的形态,激光散射粒径分析仪测定粒径,zeta电位分析仪测定zeta电位,离心法和紫外分光分度仪测定复合物的的包封率、载药率和体外DNA释放速度.将上述两种基因转染复合物转染结直肠癌细胞,测定其转染效率;检测转染后细胞中Survivin蛋白的表达和细胞的凋亡率.结果 PAMAM-Survivin-asODN复合物的粒径小于脂质体-Survivin-asODN复合物的粒径(P<0.01),但zeta电位高于后者(P<0.05);基因载药率、包封率两组差异无统计学意义;PAMAM对DNA持续释放14 d,但脂质体只持续5 d.PAMAM.Survivin-asODN转染结直肠癌细胞的效果强于脂质体-SurvivinasODN(P<0.05).转染后结直肠癌细胞Survivin蛋白的表达低于脂质体复合物(P<0.05),细胞的凋亡率高于脂质体复合物(P<0.05).结论 PAMAM能将Survivin-asODN高效递送到结直肠癌SW620细胞,降低Survivin蛋白表达并诱导结直肠癌细胞凋亡.     

不同方法HBx基因表达质粒转染肝癌HepG2细胞的效果比较

目的：比较Lipo2000、磷酸钙法和Lonza电转法转染乙型肝炎病毒X（HBx）基因的表达质粒pHA-HBx至HepG2肝癌细胞的转染效率及其细胞毒性。 方法：分别用Lipo2000、磷酸钙法和Lonza电转法将绿色荧光蛋白（GFP）标记的pHA-HBx转染至HepG2肝癌细胞，以荧光显微镜及流式细胞仪检测转染效率，RT-PCR鉴定HBx基因在HepG2细胞基因组的整合，Annexin V/PI法检测细胞的存活情况。 结果：RT-PCR结果显示，外源性HBx基因通过3种转染方法均可导入HepG2细胞并表达；Lipo2000和Lonza电转法的转染效率均高于磷酸钙法（均P<0.05），而Lipo2000和Lonza电转法的转染效率间差异无统计学意义（P>0.05）；细胞存活率从高到低依次为Lonza电转法、Lipo2000、磷酸钙法（均P<0.05）。 结论：Lonza电转法转染pHA-HBx至HepG2肝癌细胞转染效率高，且细胞毒性小，是较好的转染方法。     

超声微泡介导HSV1-TK/GCV自杀基因系统对人肝癌细胞株HepG2的杀伤作用

目的 观察超声微泡(UM)介导HSV1-TK/GCV自杀基因系统对人肝癌细胞株HepG2的杀伤效率.方法 将HepG2接种在培养板中,随机分为以下5组:(A)空白对照组;(B)单纯质粒组;(C)超声微泡+质粒组;(D)超声+质粒组;(E)超声+超声微泡+质粒组.转染后24 h,荧光显微镜观察各组细胞绿色荧光的表达,流式细胞仪检测各组细胞的转染效率,噻唑蓝(MTT)比色法检测转染方法对HepG2活性的影响,Western blot法检测各组细胞的TK蛋白表达;转染后24h,各组细胞加入0、0.1、1.0、10.0、50.0、100.0、500.0、1000.0 mg/L共8个浓度梯度的前药更昔洛韦(GCV),72 h后MTr法检测各组细胞的存活率.结果 荧光显微镜下E组的绿色荧光强度明显高于其他各组;流式细胞仪检测基因转染率分别为0％、0.39％、0.61％、1.10％、36.00％,荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测提示E组tk mRNA相对表达量为1.13,是其余各组的7～9倍,Western blot 条带灰度分析显示E组TK蛋白的明显高于其他各组(P＜0.05);转染方法对HepG2细胞活性无明显影响(P＞0.05);GCV浓度在50 mg/L以上培养72 h后,低频超声+超声微泡+质粒组细胞几乎全部被杀灭,存活率为0,杀伤效应最强(P＜0.05),其余各组几乎无杀伤作用.结论 超声破坏微泡造影剂可提高HSV1-TK基因在HepG2中的转染和表达,增强HSV1-TK/GCV自杀基因系统对肝癌细胞的杀伤效应,而超声辐照和微泡造影剂在转染过程中对细胞的活性无影响.     

LIGHT／INF—γ基因配比转染HepG2细胞对其凋亡及Fas／FasL系统表达的影响

目的：观察脂质体介导的LIGHT和IFN—γ配比转染HepG2细胞后对其凋亡及Fas和FasL表达的影响。方法：将HepG2细胞分为LIGHT单独转染组、LIGHT和IFN—γ联合转染组和空白对照组，以脂质体为中介转染HepG2细胞；分别于转染后12、24和48h收集HepG2细胞，流式细胞术检测转染后HepG2细胞的凋亡率及Fas和FasL的表达。结果：LIGHT基因转染HepG2细胞能明显促进其凋亡，随时间延长凋亡率增加；Fas和FasL在HepG2细胞高表达，以Fas升高程度显著。结论：LIGHT和IFN—γ联合转染HepG2，其凋亡效果优于LIGHT单独转染，主要是通过上调Fas的表达来促进HepG2细胞凋亡。     

转染RECK基因对肝癌细胞生物学行为的影响

目的 探讨RECK基因对HepG2肝癌细胞生物学活性的影响。方法 构建真核表达载体pcDNA3-RECK，采用脂质体介导将重组质粒导人体外培养的HepG2细胞，Westernblot法检测转染前、后HepG2细胞中RECK蛋白的表达。明胶酶谱试验检测转染前、后MMP-9的表达。观察稳定转染RECK基因对HepG2细胞生物学行为的影响。结果 成功构建了RECK基因真核表达载体并建立了稳定表达的细胞株。转染后RECK基因稳定高表达，具有生物活性的MMP-9的表达显著降低。转染前、后HepG2细胞的增殖能力无明显改变，但其侵袭能力明显下降。结论 外源性的RECK基因能通过脂质体有效转染肝癌细胞，抑制MMP-9的活性，降低肝癌细胞HepG2的体外侵袭能力。     

线粒体融合素基因2对肝癌细胞的增殖及对化疗敏感性的影响

目的：探讨线粒体融合素基因2(mfn2)对肝癌细胞的增殖及对化疗敏感性的影响。 方法：实验分3组：重组质粒pEGFPmfn2转染HepG2细胞为实验组,空质粒pEGFP–N2转染HepG2细胞为阴性对照组,HepG2细胞为空白对照组。RT-PCR和Western Blot 分别检测转染后各组细胞mfn2 mRNA和蛋白水平的表达。采用细胞计数法和MTT法检测mfn2基因对肝癌细胞增殖的影响;流式细胞术检测转染后细胞周期的分布情况;MTT法检测转染mfn2基因对化疗敏感性的影响。 结果：转染48 h 后,转染mfn2组细胞生长开始受到明显抑制,明显低于空白对照组和转染空载体组,差异均有显著性(P< 0.05);转染pEGFPmfn2组G0/G1期所占比例为(83.2±1.5)%,明显高于转染空质粒pEGFP组与空白对照组G0/G1期所占比例,差异均有显著性 (P<0.05)。实验组HepG2细胞对化疗药物5-氟尿嘧啶的敏感性增强。 结论：mfn2对肝癌细胞具有增殖抑制作用,其机制可能与细胞周期阻滞有关;mfn2可增强化疗药物的敏感性。     

小干扰RNA逆转Wnt/β-catenin通路对肝癌耐药细胞株HepG2/ADM的影响研究

目的 了解沉默β-catenin基因对肝癌耐药细胞HepG2的影响。方法 实验分为5组：正常肝细胞（LO2）组、HepG2组、HepG2/ADM组、SiNC-HepG2/ADM阴性转染组和Siβ-catenin-HepG2/ADM转染组;细胞免疫荧光技术检测各组β-catenin的表达情况;设计并筛选出抑制效率最高的Siβ-catenin;Western-blot及RT-PCR技术检测各组β-catenin、P-gp、MRP1的mRNA和蛋白的表达水平;MTT法观察各组对阿霉素（ADM）、氟尿嘧啶（5-FU）、环磷腺苷（VCR）和奥沙利铂（OHP）的敏感性;流式细胞仪检测各组细胞凋亡。结果 50 mol/L的ctnnb1-001在HepG2/ADM中抑制效率最高：78.86%（P<0.05）,选其为Si-β-catenin;细胞免疫荧光显示HepG2/ADM中β-catenin荧光最强,转染Si-β-catenin后荧光显著减弱;β-catenin、P-gp和MRP1 mRNA和蛋白在HepG2/ADM组表达较高,mRNA表达分别为：0.92±0.03、7.98±0.43和4.56±0.12（P<0.05）,蛋白表达分别为：1.128±0.214、1.678±0.344和1.405±0.212（P<0.05）;转染Siβ-catenin至HepG2/ADM中,β-catenin、P-gp和MRP1在mRNA及蛋白水平均不同程度表达减少,mRNA表达分别为：0.47±0.03、0.66±0.054和0.74±0.03（P<0.05）,蛋白表达分别为：0.787±0.032、0.797±0.055和1.390±0.050（P<0.05）;Siβ-catenin-HepG2/ADM转染组较HepG2/ADM组对ADM、5-FU、VCR和OHP的耐药系数（RI）分别为0.61、0.55、0.30、0.55,对化疗药物敏感性显著增强（P<0.05）;Siβ-catenin-HepG2/ADM转染组凋亡率（28.05±0.35）%,较其他组明显增加（P<0.05）。结论 Wnt/β-catenin通路在HepG2中异常激活,其中β-catenin可能正性调控肝癌耐药基因P-gp和MRP1,Si-β-catenin能一定程度阻断Wnt通路,并能一定程度逆转肝癌细胞株HepG2的耐药性和增强化疗敏感性,增加凋亡。     

小干扰RNA逆转Wnt/β-catenin通路对肝癌耐药细胞株HepG2/ADM的影响研究

目的 了解沉默β-catenin基因对肝癌耐药细胞HepG2的影响。方法 实验分为5组：正常肝细胞（LO2）组、HepG2组、HepG2/ADM组、SiNC-HepG2/ADM阴性转染组和Siβ-catenin-HepG2/ADM转染组；细胞免疫荧光技术检测各组β-catenin的表达情况；设计并筛选出抑制效率最高的Siβ-catenin；Western-blot及RT-PCR技术检测各组β-catenin、P-gp、MRP1的mRNA和蛋白的表达水平；MTT法观察各组对阿霉素（ADM）、氟尿嘧啶（5-FU）、环磷腺苷（VCR）和奥沙利铂（OHP）的敏感性；流式细胞仪检测各组细胞凋亡。结果 50 mol/L的ctnnb1-001在HepG2/ADM中抑制效率最高：78.86%（P<0.05），选其为Si-β-catenin；细胞免疫荧光显示HepG2/ADM中β-catenin荧光最强，转染Si-β-catenin后荧光显著减弱；β-catenin、P-gp和MRP1 mRNA和蛋白在HepG2/ADM组表达较高，mRNA表达分别为：0.92±0.03、7.98±0.43和4.56±0.12（P<0.05），蛋白表达分别为：1.128±0.214、1.678±0.344和1.405±0.212（P<0.05）；转染Siβ-catenin至HepG2/ADM中，β-catenin、P-gp和MRP1在mRNA及蛋白水平均不同程度表达减少，mRNA表达分别为：0.47±0.03、0.66±0.054和0.74±0.03（P<0.05），蛋白表达分别为：0.787±0.032、0.797±0.055和1.390±0.050（P<0.05）；Siβ-catenin-HepG2/ADM转染组较HepG2/ADM组对ADM、5-FU、VCR和OHP的耐药系数（RI）分别为0.61、0.55、0.30、0.55，对化疗药物敏感性显著增强（P<0.05）；Siβ-catenin-HepG2/ADM转染组凋亡率（28.05±0.35）%，较其他组明显增加（P<0.05）。结论 Wnt/β-catenin通路在HepG2中异常激活，其中β-catenin可能正性调控肝癌耐药基因P-gp和MRP1，Si-β-catenin能一定程度阻断Wnt通路，并能一定程度逆转肝癌细胞株HepG2的耐药性和增强化疗敏感性，增加凋亡。