骨髓基质干细胞促进大鼠随机皮瓣存活的实验研究

目的 观察rMSCs体内促进大鼠随机皮瓣存活的作用并初步探讨其可能的机制。方法体外分离培养rMSCs。将SD大鼠随机分成rMSCs组和对照组，于其背部形成超长随意皮瓣。以4’，6二脒基-2-苯吲哚（DAPI）标记rMSCs，注射于皮下。观察皮瓣的存活情况并计算皮瓣坏死率。取皮瓣远端标本，行病理观察，免疫组化检测VEGF表达情况。结果rMSCs体外分离培养扩增5代。术后七天，在移植组皮下能检测到DAPI标记的细胞，移植组大鼠皮瓣坏死率明显小于对照组（P＜0．05），移植组的皮下血管数及VEGF的表达密度和面积明显高于对照组（P〈0．05）。结论在大鼠背部，局部移植rMSCs，能存活并增加皮瓣局部VEGF的表达，促进血管形成，减轻皮瓣的坏死。     

一氧化氮对延迟皮瓣微循环的影响

目的通过观察一氧化氮（NO）对延迟皮瓣微循环的影响来探讨皮瓣血管舒张的机制。方法采用CD-1白鼠为实验动物，在其背部形成1．0cm×3．0cm延迟皮瓣。通过体内视频显微法和激光多普勒血流仪，分别检测皮瓣血管直径和血流量，观察一氧化氮合成前体L-精氨酸（L-arg）对皮瓣微循环的影响。结果在延迟皮瓣前，血管的平均直径范围为（22．15±3．65）μm-（25．32±3．34）μm，平均血流量为（1．84±0．74）nl／s～（2．31±0．91）nl／s；延迟皮瓣后，对照组血管直径增加到（43．83±11．17）μm，血流量增加到（6．98±3．12）nl／s。三天后，随着L—Arg剂量的增加，治疗组与对照组相比，血管直径大小和血流量显著增加（P〈0．05）。结论一氧化氮在延迟皮瓣微循环中发挥了重要作用，它主要通过扩张血管和增加血流量来实现的。     

血清VEGF及TGF—β1在肝纤维化患者中的表达及其意义

目的：探讨血管内皮生长因子（VEGF）及转化生长因子13。（TGF．13．）在肝纤维化患者中的表达及其意义。方法：选择66例肝纤维化患者为观察组,另选择100名体检健康者为正常对照组,采用免疫组织化学方法检测两组血清VEGF及TGF．B,浓度。结果：观察组血清VEGF及TGF-13,浓度为（110．87±22．64）ng／L和（15．08±3．27）μg／L,显著高于对照组（15．98±4．75）ng／L和（7．17±1．86）μg／L（t值分别为20．166、11．066、P均〈0．001）;观察组s1、s2、s3、及S4期患者血清VEGF分别为（84．25±16．86）、（101．87±26．70）、（118．04±20．75）、（134．65±25．73）ng／L（F=15．689,P〈0．05）,TGF-β1分别为（10．87±2,64）、（13．06±2．74）、（17．87±3．28）、（22．76±4．75）μg／L（F=12．438,P〈0．05）;肝纤维化患者血清VEGF与TGF－β1水平呈正相关（r=0．532,P〈0．05）。结论：血清VEGF与TGF-13,水平与肝纤维化的发生发展密切相关,二者联检可作为诊断及判断病情的血清学指标。     

封闭负压吸引在腹部带蒂真皮下血管网皮瓣修复手部热压伤中的临床应用

目的探讨封闭负压吸引在腹部带蒂真皮下血管网皮瓣修复手热压伤的临床应用中,促进皮瓣与创面愈合的作用机制。方法选择42例手部严重热压伤患者行腹部带蒂真皮下血管网皮瓣修复创面,随机分成实验组和对照组,每组21例。实验组皮瓣转移后,在皮瓣下均匀放置3～6根硅胶管（直径0.2cm,带侧孔6～8个）,各管另一端穿出皮瓣两侧集中成一束,连接中心负压吸引（压力0.02～0.06MPa）,皮瓣边缘以医用粘贴手术巾封闭。对照组常规皮瓣转移缝合,皮瓣下放置1条橡皮引流条。两组术后,适当加压包扎创面,72小时拔出引流管（条）。术后第5天开始皮瓣蒂部阻断血运训练,皮瓣阻断1h以上无血运障碍后实施断蒂手术。观察两组皮瓣的成活率及断蒂时间,所获数据采用完全随机化设计法进行分析,组间比较分别采用χ2检验和t检验。结果实验组皮瓣100%成活率16例,98%～99%成活率5例,对照组皮瓣100%成活率8例,98%～99%成活率13例;实验组平均的断蒂时间为（10.4±2.4）天,对照组则为（15.0±5.3）天。实验组皮瓣成活率明显高于对照组（P〈0.05）,断蒂时间也较对照组缩短（P〈0.01）。结论封闭负压吸引在腹部带蒂真皮下血管网皮瓣修复手部热压伤的应用中,可促进皮瓣与创面愈合,提高皮瓣的成活率及缩短断蒂时间。     

mCD99L2基因沉默对小鼠B淋巴瘤细胞A20生物学特性的影响

的探究mCD99L2基因沉默对小鼠B淋巴瘤细胞系A20细胞生物学特性的影响。方法采用MTT法和流式细胞仪检测mCD99L2基因沉默前后干扰组A20-LV—mCD99L2和未干扰组A20细胞的增殖率和细胞周期;Transwell法测定两组细胞的体外侵袭能力;采用裸鼠与BALB／c鼠皮下成瘤实验观察比较两组细胞在体内的成瘤时间和成瘤率。结果MTT法显示干扰组A20．LV—mCD99L2增殖率为（0．61±0．12）．低于未干扰组增殖率（0．75±0．20）,差异有统计学意义（P=0．000）;干扰组A20-LV-mCD99L2处于G2期的细胞比例为（10．58±4．97）,高于未干扰组（3．33±1．31）,差异有统计学意义（P=0．009）;Transwell法显示干扰组A20-LV-mCD99L2运动能力较未干扰组下降。裸鼠皮下成瘤时间干扰组（13．33±4．63）d长于未干扰组（9．50±2．90）d。成瘤率均为100％;BALB／c鼠皮下成瘤时间干扰组（10d）长于未干扰组（7．0±0．82）d,成瘤率干扰组为14．3％。显著低于未干扰组（100％）,差异有统计学意义（P=0．000）。结论mCD99L2基因沉默可抑制小鼠B淋巴瘤细胞系A20细胞的生物学行为,降低其在体外的增殖能力和运动能力,显著降低其在BALB／c鼠体内的成瘤率。     

蒂部动脉位置对跨区穿支皮瓣成活的影响

目的 通过改变蒂部动脉的位置，探讨其对跨区穿支皮瓣成活的影响。 方法 将32只SD大鼠随机分成两组：对照组，保留右侧髂腰动、静脉；实验组，保留右侧髂腰静脉+左侧髂腰动脉。术后7 d，统计皮瓣成活率，血管造影观察choke动脉扩张情况，HE染色显微镜下测量choke动脉的腔内直径。 结果 术后7 d，实验组皮瓣成活率高于对照组，（85.5±2.9）% vs（68.9±2.6）%，P<0.001；两组choke1动脉扩张程度相当，（46.93±6.21）μm vs（46.79±6.69）μm，P>0.05，实验组choke2动脉扩张较对照组更明显，（66.08±6.78）μm vs（46.00±6.90）μm，P<0.001。 结论 蒂部动脉位置改变，可促进choke动脉扩张和皮瓣远端供血，从而提高跨区穿支皮瓣成活率。     

EGFL7基因沉默对裸鼠乳腺癌血管生成的影响

目的探讨类表皮生长因子域7（EGFL7）基因沉默对乳腺癌裸鼠模型瘤内血管生成的影响。方法构建EGFL7短发夹状RNA表达质粒并转染SGC-7901细胞（pshEGFL7组）,以空质粒转染为对照组。观察两组皮下种植瘤生长曲线及体积。免疫组织化学法检测抗-CD34、血管内皮生长因子（VEGF）、血小板反应蛋白（TSP1）表达;RT—PCR检测MMP-2和TIMP2表达。结果pshEGFL7组种植瘤体积为（1．86±0．65）cm^3,微血管密度（MVD）为20．84±6．38,分级为1～2级,对照组体积为（4．86±1．15）cm^3,MVD为39．48±9．01,分级为3～4级,两组种植瘤体积、MVD和分级的差异有统计学意义,P值均〈0．05。EGFL7组TSP1蛋白阳性表达,而VEGF蛋白为弱阳性或阴性表达,MMP-2mRNA表达下调,TIMP2mRNA表达上调,与对照组比较差异有统计学意义,P值均〈0．01。结论EGFL7基因沉默可降低乳腺痛种植瘤血管牛成．与调节MMP-2／TIMP2表汰和影响VEGF/TSP1平衡有关。     

血脂和纤维蛋白原对红细胞电泳时间的影响

为探讨血脂和纤维蛋白原对红细胞电泳时间的影响，我们对正常成年人和高血脂、高纤维蛋白原血症患者的红细胞电泳时间进行了实验观察，现报道如下。对象与方法1、观察对象：（1）健康对照组55例，为我院健康查体者，平均年龄45．2±9．3岁（35～58岁）。其中男28例，女27例。经体检排除心、脑血管病及其它疾病。（2）高脂血症组43例。平均年龄40．1±7．2岁（36～52岁），其中男23例，女20例。血清总胆固醇650mmol／L以上（平均7．61±1．08mmol／L），甘油三酯2．26mmol／L以上（平均3．0±0．80mmol／L）。病例选择均符合我国修订的高脂…     

小腿皮神经营养血管筋膜皮瓣的临床应用

目的：报道小腿皮神经营养血管筋膜皮瓣修复下肢软组织缺损的临床效果。方法：自1997年1月～2007年3月应用小腿皮神经营养血管筋膜皮瓣修复组织缺损108例。其中腓肠神经营养血管皮瓣共70例，腓浅神经营养血管皮瓣共20例，隐神经营养血管皮瓣18例。结果：移位皮瓣成活95．4％（103例），完全坏死1．9％（2例），部分坏死2．7％（3例）。结论：小腿皮神经营养血管筋膜皮瓣是一种新型、简便、实用的软组织缺损修复方法，利于临床推广应用。     

乳腺癌术后皮瓣坏死原因分析

目的：分析乳腺癌术后皮瓣坏死原因及预防措施。方法：手术治疗乳腺癌152例，其中根治术30例。改良根治术122例，统计分析其术后皮瓣坏死率和术后皮瓣坏死原因。结果：152例患者中36例皮瓣坏死（23．7％），皮瓣坏死与皮缘的对称性、真皮下血管网的完整性、伤口与腋窝的加压与否明显相关（P〈0．01），与基础病、手术方式、游离皮瓣的工具、止血剂的应用无关（P〉0．05）。结论：真皮下血管网的完整性的破坏是术后皮瓣坏死的主要原因之一，提高其解剖认识对乳腺癌术后皮瓣坏死的预防有一定的临床价值。     

复制缺陷型腺病毒载体介导人血管内皮细胞生长因子cDNA促进静脉分叶皮瓣的成活

背景：静脉分叶皮瓣可修复多个手指皮肤软组织缺损,但静脉皮瓣普遍存在成活率不稳定,限制了其在临床上的应用。 目的：观察以复制缺陷型腺病毒介导血管内皮细胞生长因子165基因(cDNA)局部应用对兔静脉分叶皮瓣成活的影响。 方法：用新西兰大白兔制作侧腹壁双蒂轴型静脉分叶皮瓣,分别皮下注射介导血管内皮细胞生长因子165基因(Ad-VEGF)的复制缺陷型腺病毒、携带β半乳糖苷酶基因的腺病毒(Ad-Gal)和生理盐水。术后7 d对3组兔进行皮瓣存活率、免疫组织化学、新生血管计数和常规组织切片的检测。 结果与结论：术后7 d,Ad-VEGF165组皮瓣成活率和平均血管数目显著高于Ad-Gal组和生理盐水组(P < 0.01),皮瓣中血管内皮细胞及毛囊旁细胞中有大量VEGF蛋白阳性表达细胞,皮瓣中出现肉芽组织增生,新生血管大量形成。结果证实,以复制缺陷型腺病毒为载体介导的人VEGF cDNA能促进新生血管的形成并提高静脉分叶皮瓣的成活率。     

天然、重组水蛭素对随意皮瓣淤血模型血管内皮细胞生长因子的影响

背景：随意皮瓣移植后易发生皮瓣静脉淤血,甚至坏死,临床与动物实验证明水蛭素能够提高淤血皮瓣的成活率。 目的：观察水蛭素对大鼠随意皮瓣淤血模型成活保护作用。 方法：Wistar大鼠30只背部设计随意皮瓣10 cm×3 cm制成淤血模型,随机分为天然水蛭素组、重组水蛭素组和对照组,分别于皮下注射5 U天然水蛭素、5 U重组水蛭素和生理盐水。术后测定血管内皮细胞生长因子含量及血管内皮细胞生长因子mRNA表达量,计算皮瓣成活率。 结果与结论：天然水蛭素组与重组水蛭素组皮瓣成活率比对照组高(P< 0.05)。天然水蛭素组与重组水蛭素组比对照组新生毛细血管血管内皮细胞生长因子表达多(P < 0.05),且天然水蛭素组最多。提示天然、重组水蛭素均能够促进随意皮瓣血管内皮细胞生长因子表达,有利于新生血管的生成,能够提高随意皮瓣的成活率,且天然水蛭素效果优于重组水蛭素。     

羊膜上皮细胞胶原海绵复合体促大鼠预构皮瓣成活及其再血管化

目的　移植羊膜上皮细胞(AECs) 胶原海绵复合体促进预构皮瓣成活。 方法　第3代SD大鼠AECs、软骨细胞株分别植于胶原蛋白海绵支架,并提取AECs组上清液行促血管形成因子VEGF、TGFβ1、bFGF的ELISA检测。SD大鼠分正常对照组、空白对照组、软骨细胞组和AECs组。一期手术后第7、14 d取皮瓣组织行促血管形成因子的ELISA检测。二期手术后第7 d用计算机图像分析系统测定皮瓣存活率,取存活部位组织行HE染色、vWF免疫组织化学染色以分析微血管密度。 结果　AECs复合体上清液中的促血管形成因子分泌逐渐增多;组织内各因子含量以AECs组最高,AECs组皮瓣存活率明显高于空白对照组和软骨细胞组。AECs组皮肤微血管面积比、vWF因子阳性区面积比明显高于其他组。 结论　植入AECs胶原海绵复合体可促进预构皮瓣的存活,与其分泌的一些促血管形成因子促进预构皮瓣再血管化有关。     

高压氧预处理超长皮瓣组织血管内皮生长因子、转化生长因子β的表达

BACKGROUND: Hyperbaric oxygen (HBO) therapy can alleviate the skin flap congestion by improving the angiogenesis and increasing the oxygen content of blood in skin flaps. Although the HBO therapy ability to increase flap survival has been well described, the research on the application of HBO pretreatment in skin flap transplantation does not arouse adequate concern. OBJECTIVE: To investigate the effect of HBO pretreatment on early-stage flap congestion in the rat model of over-length dorsal random skin flaps. METHODS: Thirty-six SD rats were randomly divided into control group (n=12), HBO pretreatment group (n=12) and HBO treatment group (n=12). Rats in the HBO pretreatment group received 4 days of HBO therapy prior to transplantation, once a day. Rats in the HBO treatment group received 4 days of HBO therapy after transplantation. Rats in the control group were raised in the normal conditions after flap transplantation. At postoperative days 3 and 5, rats were sacrificed and the samples were collected. The inflammation of flap tissues was detected using hematoxylin-eosin staining. The expression of vascular endothelial growth factor and transforming growth factor-β was analyzed by immunohistochemistry staining. The flap survival rate was calculated at postoperative day 5. RESULTS AND CONCLUSION: The flap survival area of the HBO pretreatment group and HBO treatment group was larger than that of the control group (P < 0.05). At postoperative days 3 and 5, the expression levels of vascular endothelial growth factor and transforming growth factor-β in the flap tissue were higher in the HBO pretreatment group and HBO treatment group than the control group (P < 0.05). However, there was no significant difference in the flap survival area and the expression of vascular endothelial growth factor and transforming growth factor-β between HBO pretreatment and HBO treatment groups  (P > 0.05). HBO pretreatment can increase the expression of vascular endothelial growth factor and transforming growth factor-β and promotes angiogenesis in random pattern flaps, thereby improving skin flap survival.      

改良双干静脉动脉化皮瓣的实验研究

目的　观察双干静脉动脉化皮瓣与改良双干动脉化静脉皮瓣存活过程,对比成活率及探讨其成活机制。 方法　将 20只新西兰大白兔40侧后肢制成包含2根纵行的浅静脉2.5cm×3.5cm皮瓣,将其随机分成对照组和实验组各20侧。对照组：将皮瓣直接移植同侧耳背2.0cm×3.0cm创面,制作双干动脉化静脉皮瓣模型。实验组：在对照组基础上将皮瓣进行改良。观察皮瓣的成活过程,并进行比较。 结果　实验组皮瓣存活70%（14个）,部分存活20% （4个）,坏死10%（2个）。对照组皮瓣存活20%（4个）,部分存活25%（5个）,坏死55%（11个）。两组差异有统计学意义(P＜0.05)。 结论　双干静脉动脉化皮瓣经改良后有利于皮瓣内血液进入微循环,改善动脉血灌注量与静脉回流量平衡,提高皮瓣的成活率。     

天然与重组水蛭素对大鼠随意皮瓣淤血模型超氧化物歧化酶、丙二醛、内皮素变化的影响

背景：一般认为天然水蛭素能够提高淤血皮瓣的成活率与其抗血栓、抗凝血酶有关,但其抗炎、抗氧化作用的具体机制尚不清晰。重组水蛭素效果与天然水蛭素的差异也未有深入研究。 目的：探索天然、重组水蛭素对大鼠随意皮瓣淤血模型存活保护机制。 方法：Wistar大鼠30只,背部设计随意皮瓣10 cm×3 cm制成淤血模型。皮瓣随机分为天然水蛭素组、重组水蛭素组和对照组,均于术后即刻、第3,5天注射在距皮瓣末端1.5 cm和3.0 cm处分别注射5 U天然水蛭素、5 U重组水蛭素和相同剂量生理盐水。观察术后第7天的皮瓣成活率、皮瓣组织细胞形态学改变以及超氧化物歧化酶、丙二醛、内皮素水平。 结果与结论：与对照组相比,天然、重组水蛭素组皮瓣成活率高,皮瓣超氧化物歧化酶水平明显增多,内皮素、丙二醛水平减少。且天然水蛭素效果优于重组水蛭素。说明水蛭素能够提高随意皮瓣的成活率、超氧化物歧化酶的含量;减低皮瓣的坏死率、丙二醛、内皮素的含量。     

碱性成纤维细胞生长因子促进大鼠随意皮瓣成活的实验研究

目的 :研究碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对促进大比例超长随意皮瓣成活的作用。方法 :采用大鼠背部随意皮瓣动物模型 ,自身对照 ,于术后第一天实验组一次性局部应用bFGF 40 0IU。应用BPM2 镭射多普勒血流仪数字温度计对随意皮瓣的成活进行动态监测 ,并结合墨汁灌注制作透明标本进行形态学观察。结果 :实验组皮瓣成活率明显高于对照组 (P <0 .0 5 ) ;血流值从术后第二天实验组皮瓣末端显著高于对照组 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ,皮温的变化规律与血流值相同。光镜观察透明标本 ,发现实验组皮瓣血管的再生明显多于对照组。结论 :bFGF能促进皮瓣血管的再通与增生 ,加速血液循环的重建 ,提高随意皮瓣的成活长度 ,并可达到早期断蒂的目的。     

rhVEGF and experimental rat skin flaps: systemic or local administration and morphological characteristics

Skin flap survival is a significant problem in skin surgery; in particular, inadequate arterial or venous blood supply results in necrosis of the distalmost portion. The aim of this study was to evaluate the ability of Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF) of modifying the morphological features of skin flaps. Bilateral epigastric skin flaps were raised in 16 Wistar male rats. The epigastric artery and vein of the left flaps were clamped and then injected with rhVEGF (8 rats) or saline (8 rats). The right flaps were not clamped and received rhVEGF or saline systemically. The rats were euthanized on the seventh day and flap skin samples collected. Tissue fragments were subject to immunohistochemical (rhVEGF, VEGFr, VIII factor, CD34 antibodies), ultrastructural and morphostructural investigations. The results showed that rhVEGF improved the condition of flaps and that systemic administration was effective in promoting the development of an adequate vascular network.