广西、海南、云南微小按蚊3种同工酶谱比较研究

目的 探索我国微小按蚊复合体同工酶谱鉴别指标。方法选择广西微小按蚊（A.m.G）、海南微小按蚊（A.m.H）和云南微小按蚊（A.m.Y）的单雌线蚊匀浆，采用不连续性聚丙烯酰胺凝胶垂直板状电泳法分离，特异性底物染色，比较观察乳酸脱氢酶（LDH）、醇脱氢酶（ADH）和酯酶（EST）3种同工酶谱。结果三地微小按蚊的LDH同工酶谱相同，均具1条Rm14酶带；ADH酶谱中三地微小按蚊均显一条酶带，A.m.G与A.m.H具相同酶带Rm34，而A.m.Y则是1条Rm40酶带；EST的主带谱A.m.G与A.m.H基本相似，前者显示Rm18、35和61、后者显示Rm18、35、39和61。而A.m.Y明显不同于A.m.G和A.m.H显示Rm18、39、43、50、56和59六条主带。结论ADH和EST同工酶谱在不同种的微小按蚊中存在明显差别，可能在区别我国微小按蚊姐妹种中有较大的应用价值。     

微小按蚊种团酯酶同工酶比较研究

应用聚丙烯酰胺凝胶电泳 ( PAGE)技术比较分析了 3种 (微小按蚊、乌头按蚊、溪流按蚊 )雌按蚊酯酶 ( EST)酶谱 ,EST出现两组区带 ,微小按蚊 (含 2个不同地株 )存在遗传上的多态现象 ,乌头按蚊 EST酯酶相对简单。各自均有稳定的酶带 ,并可根据 Rm值结合各自特殊酶带区分成 3个不同的种     

广西10例人芽囊原虫基因型和同工酶谱的研究

目的分析广西10个人芽囊原虫(Blastocystis hominis)分离株基因型,及其乳酸脱氢酶(LDH)和酯酶(EST)的同工酶谱特征。方法从感染者粪便中分离到的10个人芽囊原虫(BhGX1～BhGX10),体外培养并提取基因组DNA。用已知的7对特异性序列标记位点(sequene tagged sites,STS)引物PCR扩增,来鉴定基因型。采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),分别进行乳酸脱氢酶和酯酶2种同工酶染色,比较分析10个分离株的酶谱。结果 10个人芽囊原虫分离株中有8个为基因Ⅰ型;另外2个分离株(BhGX4和BhGX7)经7对引物扩增均为阴性,为未知基因型。10个人芽囊原虫分离株在LDH谱中共出现10条酶带,常见酶带为Rm37、Rm49、Rm57、Rm68和Rm92;在EST谱中共出现12条酶带,其中Rm14、Rm18、Rm23、Rm27、Rm45、Rm50和Rm77酶带较常见。各分离株之间的LDH和EST同工酶谱均存在差异。结论广西10个人芽囊原虫分离株以基因Ⅰ型为主,但各分离株之间的LDH和EST同工酶谱存在差异。     

曼氏迭宫绦虫成虫与裂头蚴乳酸脱氢酶和酯酶同工酶的研究

本文应用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)法分析了曼氏迭宫绦虫成虫与裂头蚴乳酸脱氢酶(LDH)和酯酶(EST)同工酶谱。结果表明,成虫LDH同工酶带和裂头蚴一样,仅有一条带,其位置差异不显著;成虫EST显示5条带,主带有2条;裂头蚴EST显示10条带,主带有3条。     

长角血蜱、亚洲璃眼蜱和残缘璃眼蜱同工酶的研究

本文首次报道三种硬蜱不同发育期的同工酶酶谱研究。 长角血婢Haemaphysalis longtcornis Neumann雌虫和雄虫:苹果酸脱氢酶同工酶(MDH)分别显示6和5条酶带。其相对活性分别为2、7.6、21.5、18.8、21.8、28.3％和8.1、10.7、26.5、39.9、14.8％.酯酶同工酶(Esta)分别显示5和5条酶带。其相对活性分别为3.3、61.1、5.6、13.4、16.6％和5.1、66、0.6、4.2、24.1％。乳酸脱氢酶同工酶(LDH)分别显     

微小按蚊A、C的PCR和同工酶鉴别比较研究

目的?摇比较PCR和同工酶两种鉴别微小按蚊A、C亲缘种的方法。 方法 将现场采集后经形态初步鉴定为微小按蚊的样本，经PCR产物酶切片段长度多态性分析（PCR-RFLP）与乌头按蚊和杰普尔按蚊区分，等位基因特异扩增法（PCR-ASA）进一步鉴别微小按蚊A和C。再将用此方法鉴别后的微小按蚊羽化24 h内单只虫体样本，采用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳，加以辨别区分。 结果 经测序验证，PCR方法可以简单明确地将微小按蚊A、C加以鉴别。几种用于鉴别的同工酶中，只有酯酶（EST）同工酶对微小按蚊A、C具鉴别意义。 结论 对于微小按蚊A、C的鉴别，PCR方法明显优于同工酶方法。     

广西人芽囊原虫分离株同工酶谱的初步分析

目的观察广西人芽囊原虫分离株的苹果酸脱氢酶(MDH)和碱性磷酸酶(ALP)同工酶谱特征。方法从感染者粪便中分离人芽囊原虫,体外培养,收集虫体,制备电泳样品。采取不连续性聚丙烯酰胺凝胶垂直板状电泳分离同工酶的不同区带,以苹果酸钠和1-萘磷酸钠盐为特异性底物,氯化硝基四氮唑蓝(NBT)和固蓝RR盐为染色剂,分别对MDH和ALP染色,以相对迁移率标记酶带。结果人芽囊原虫10个分离株在MDH酶谱中,共出现7条酶带,常见的酶带有Rm34、Rm47、Rm51、Rm55和Rm59,10个分离株完全一致的酶带有Rm34和Rm51;在ALP酶谱中共出现5条酶带,Rm22、Rm25、Rm28、Rm35和Rm38。各分离株之间的MDH和ALP同工酶谱均存在差异。结论MDH和ALP同工酶谱能反映人芽囊原虫各分离株之间的遗传差异。     

广西和云南两地微小按蚊的杂交试验

对广西和云南两地微小按蚊进行杂交试验。结果杂种F_1雌蚊都能育,卵巢发育正常。(Y×G)F_1雄蚊均不能育,其睾丸畸形胀大。(G×Y)F_1雄蚊虽能育,但睾丸略显萎缩,与亲本回交所产的卵孵化率均极低。杂种雌蚊卵巢营养细胞多线染色体的X染色体和常染色体均有不联会区段,以38区的不联会最为恒定。上述结果表明两地微小按蚊已出现不完全生殖隔离现象,有可能是微小按蚊复合体的两个亲缘蚊种。     

三种蚤酯酶同工酶的比较分析

应用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳(PAGE)对印鼠客蚤、猫栉首蚤指名亚种和秃病蚤蒙冀亚种进行了酯酶同工酶的比较分析,结果发现蚤类酶谱存在差异,3种蚤约有20—22条迁移率不同的酶带。印鼠客蚤约显示14条带,主带5-6条;猫蚤显示9条带,主带4条:秃病蚤亦显示9条带;主带4—5条带。3种蚤间有共同的主带和次级酶带,亦有各自特异的标志酶带。吸血前后的雌、雄成虫酶谱基本一致,而成虫与幼虫间略有差异。所以酯酶同工酶酶谱的差异和特异性,是蚤类分类鉴定的一个分子遗传学指标。     

斯氏狸殖和丰宫并殖吸虫成虫乳酸脱氢酶同工酶等电聚焦电泳的比较研究

目的通过对云南省斯氏狸殖吸虫(Pagomogonimus skrjabini Chen.1959)和丰宫并殖吸虫(Paragonimus proliferus.1964)成虫乳酸脱氢酶(LDH)的比较研究,为吸虫的分类及定种提供科学依据方法采用丙烯酰胺凝胶圆盘等电聚焦电泳,对乳酸脱氨酶同工酶进行分离,并采用底物特一性染色法进行确定电泳结果。结果两虫种成虫乳酸脱氢酶同工酶谱分析,结果发现二者均显示5条酶带,其中斯氏狸殖吸虫的LDH有3条优势酶带(LDD_1、LDH_2、LDH_3)而丰宫并殖吸虫的LDH仅有2条优势酶带(LDH_1、LDH_2);对各成分的等电点及相对迂移率进行计算,发现丰宫并殖吸虫与斯氏狸殖吸虫间存在生化指标的差异,同时也发现两虫种间具有一共同性质的LDH_4。结论通过对两虫种同工酶谱的分析可知,它们之间具有一定的亲源性,但二者间又有同工酶谱的差异性,因此乳酸脱氢酶同工酶谱的分析可为并殖吸虫的分类提供生化依据和指标。     

Population genetic studies on the Anopheles minimus complex in Thailand

The population genetic studies on the Anopheles minimus complex revealed that An. minimus is a species complex evident by IK value were less than 0.0534 and 0.4163 for the morphotaxonomy and isozyme studies. There are two sibling species in the An. minimus species complex. The first is the typical minimus and its variations described by Harrison. Esterase-2 alleles 100 and 102 are predominant with a few other alleles of 96 and 104. It is exophagic and zoophilic. It is widely distributed in all provinces where minimus breeds. The second of the two sibling species is An. minimus species C, with 2 pale spots on the humeral dark band and Est-2 allele 98. It is found most frequently in Pu Toei District of Kanchanaburi Province, Thailand. An. minimus probably species B showing M1 + 2 wing vein entirely dark is found in China.     

Morphological variations of Anopheles minimus A in Tak Province, Thailand

Anopheles minimus Theobald is one of the major vectors of malaria throughout the Oriental Region, and it's complex consists of at least 2 sibling species (A and C) in Thailand. This study aimed to determine the morphological variations of wings of An. minimus A and to clarify the specific status of An. minimus in Ban Khun Huay, Ban Pa Dae, and Ban Tham Seau, Mae Sot district, Tak Province, Thailand. Anopheline larvae were collected from the fields between October 2002 and September 2003, allowed to emerge into adults in the laboratory and identified by morphological and molecular characterization. About 1,715 of female An. minimus A were separated into 8 groups based on their wing scale patterns. Polymerase Chain Reaction Restriction Fragment Length Polymorphism (PCR-RFLP) assay (ribosomal DNA ITS2) confirmed the identification of An. minimus A in all 8 groups.     

五个地理株周期型马来丝虫成虫蛋白和同工酶电泳分析

本文应用圆盘电泳对五个地理株——福建建阳株、安徽泾县株、四川乐山株、贵州独山株和贵州荔波株周期型马来丝虫成虫的蛋白和七种酶进行了区带分析和比较。结果显示五个虫株的蛋白、PGM和PO同工酶电泳型没有差异;而MDH和GPI的同工酶电泳型出现了两种类型,即贵州省内的两个株与另外三个株不同;G6PD、EsT和LDH没有区带出现。     

Review of the Minimus Complex of Anopheles, main malaria vector in Southeast Asia: from taxonomic issues to vector control strategies

BACKGROUND: The Minimus Complex of Anopheles subgenus Cellia is composed of two sibling species, A and C, on the Southeast Asian mainland, and a third allopatric species E that occurs in the Ryukyu Archipelago (Japan), a malaria-free region. Anopheles minimus s.l. is considered to be one of the main malaria vector in the hilly forested regions of Southeast Asia. Despite a large number of studies over its range of distribution, it is difficult to have a global view of the ecological and bionomical characteristics of the individual species as different identification methods were used, generally without specific identification of the sibling species. OBJECTIVES: (1) To review the main malaria studies on An. minimus s.l.; (2) to discuss recently published data on the biology and ecology of each sibling species; and (3) to identify gaps in our understanding of the Minimus Complex. REVIEW RESULTS: Major biological and ecological trends are addressed, such as the high plasticity of trophic behaviour and the sympatry of species A and C over the Southeast Asian mainland. Despite the availability of rapid molecular identification methods, we still lack important information concerning the biological characteristics of each sibling species. These gaps must be filled in the future because An. minimus species A and C may exhibit different abilities to transmit malaria. CONCLUSION: We expect that entomological surveys will employ molecular methods to clearly identify these two species, and thus elucidate the biological characteristics of each species. As a consequence, current vector control strategies will be improved by targeting the most efficient vectors.     

海南省与云南省两地微小按蚊杂交试验

目的： 观察海南省与云南省两地微小按蚊之间是否存在种间差异。方法： 在两地牛房采集微小按蚊,单雌驯养繁殖, 用强迫交配方法进行杂交试验, 观察 Ｆ１ 代的可育性。制作杂种 Ｆ１ 卵巢营养细胞多线染色体标本, 观察染色体各区域的联会情况。结果： 云南省微小按蚊（ Ｙ） ♀×海南省微小按蚊（ Ｈ） ♂杂交组卵孵化率为０ , 卵内无胚胎形成。（ Ｈ♀× Ｙ♂） Ｆ１ 各回交组中, 大多数卵孵化率显著低于亲本。（ Ｈ♀× Ｙ♂） Ｆ１ 雌蚊卵巢营养细胞多线染色体３ Ｒ 的２９ 区、３６ 区及３７ 区, Ｘ 性染色体的４ 区和６ 区出现恒定不联会。结论： 海南省与云南省两地微小按蚊已出现明显生殖隔离, 系两个不同的亲缘种。     

中国大陆不同自然隔离群钉螺的同工酶谱分析

本文对中国大陆的福建、湖北、云南、四川４个自然隔离群的１３个县钉螺进行酯酶同工酶（ＥＳＴ）和苹果酸脱氢酶（ＭＤＨ）电泳酶谱比较,ＥＳＴ共出现１０～１４条酶带,ＭＤＨ共出现３～４条酶带。比较它们的酶谱特征可见：（１）同一省内不同地区间钉螺的酶谱非常相似,具有较密切的亲缘关系;（２）四川、云南２省钉螺的酶谱特征差异较小,而与福建、湖北２省的酶谱比较,差异明显;（３）４个自然隔离群钉螺呈现为３个地理分布种群,分别分布于福建、湖北和滇川３个区域,各群体共有的ＥＳＴ酶带有３条,ＭＤＨ酶带仅１条,其它酶带数目和电泳迁移率均呈现明显差异,提示它们在进化过程中已出现明显的分化