川芎嗪对血虚证小鼠骨髓细胞IL-4R和IL-7R基因表达的作用

目的：考察川芎嗪对辐射致血虚证小鼠骨髓细胞IL-4R和IL-7R基困表达的影响，为阐明川芎嗪的补血机制提供依据。方法：采用3.5Gy^60Coγ射线全身1次性照射制各小鼠血虚证模型；骨髓集落培养计数CFU-GM、CFU-E、BFU—E、CFU-mix；RT-PCR检测骨髓IL-4R和IL-7R基因表达。结果：川芎嗪显著升高放射线致血虚证小鼠骨髓CFU-GM、CFU-E、BFU-E、CFU-mix数量，上调骨髓细胞IL-4R和IL-7R基因表达。结论：川芎嗪促进骨髓细脆IL-4R和IL-7R基因表达明能是其升血和调节免疫功能的机制之一。     

益血胶囊对环磷酰胺致血虚证小鼠骨髓造血的影响

[目的]考察益血胶囊对环磷酰胺(cycloph osphamide,CTX)致血虚证小鼠骨髓造血和外周血象的影响.[方法]70只昆明小鼠随机分5组,分别为正常对照组、模型对照组、益血胶囊低、中、高剂量组.剂量分别设置为5 g·kg-1,10 g·kg-1,20 g·kg-1.采用ip CTX 250mg/(kg·d)腹腔注射制成血虚证模型小鼠,模型制作后立即口服灌胃,1次/d,连续10d,在0,1,3,5,7,10,14,17,21d检测外周血象,在第10d进行集落培养.[结果]益血胶囊对CTX 致血虚证小鼠骨髓中红系祖细胞(CFU-E、BFU-E)、粒系祖细胞(CFU-GM)数量的回升有明显促进作用(P＜0.05),益血胶囊对CTX致血虚证小鼠外周血白细胞和血小板的恢复有明显的促进作用(P＜0.05).[结论]益血胶囊可促进CTX致血虚证小鼠的骨髓造血,进而升高外周血中的白细胞和和血小板,这可能是益血胶囊用于临床肿瘤患者化疗的作用机制.     

~(60)COγ线照射后小鼠骨髓红系祖细胞的变化

通过骨髓细胞体外培养法观察了受次致死剂量~(60)C0γ线照射后小鼠骨髓红系造血祖细胞的变化规律。实验测得正常小鼠的每根股骨中BFU-E和CFU-E的总数分別为3.23×10~3和3.97×10~4,经6Gy~(60)C0γ线照后3天,两者分别下降到0.3%和0.5%,骨髓有核细胞数降到正常值的4.6%;照后5天,开始出现回升。发现CFU-GM、CFU-E、BFU-E和骨髓有核细胞数量的降落与增长规律是一致的。因此,用CFU-E和BFU-E同样能够反映机体的造血功能。     

儿童再生障碍性贫血骨髓祖细胞的测定和意义

目的通过对再生障碍性贫血(AA)患儿红系(BFU-E、CFU-E)、粒单核系(CFU-GM)及巨核系(CFU-Meg)祖细胞培养,了解骨髓祖细胞增殖情况.方法抽取47例AA患儿骨髓分别作四类祖细胞培养,在7、14 d测定其集落数.结果 47例AA患儿中,四类集落数均值与对照组比较均有显著下降(P<0.05,P<0.01),且四类集落数均值在AA三种类型中,基本上随病情加重均值逐步下降,其中四类集落数低于对照组下限的患儿分别为BFU-E 36.17%、CFU-E 85.11%、CFU-GM 74.47%、CFU-Meg 91.49%.BFU-E、CFU-GM和CFU-Meg随着患儿疾病的加重,低于对照组下限的患儿百分比同步上升,且三者的表现与外周血三系表现一致,而CFU-E却未见上述现象.结论在部分AA患儿中存在着四类祖细胞培养集落数的下降,且基本上与患儿病情成正比;BFU-E的变化较CFU-E更能代表患儿骨髓红系祖细胞的变化.     

三羟异黄酮对小鼠辐射损伤后造血功能的影响

目的 探讨三羟异黄酮(genistein, GEN)对辐射损伤造血功能的影响.方法 6.0 Gy γ射线一次全身照射BALB/c雄性小鼠复制出造血损伤模型.照射前24 h给予GEN灌胃(160 mg/kg体质量),分别观察照射后1、3、7、14、21、30 d不同时相点小鼠血清对粒单系集落形成单位(colony-forming unit-granulocyte/macrophage, CFU-GM)和红系集落形成单位(colony forming unit-erythroid, CFU-E)的支持或抑制活性.结果 辐射前24 h给予GEN,辐射后该组小鼠血清造血刺激活性显著增加,使正常小鼠骨髓有核细胞CFU-GM、CFU-E形成数量明显增多,而且对CFU-GM的刺激活性较CFU-E强.同时,该组小鼠照后血清对CFU-GM、CFU-E的抑制活性明显降低,但对CFU-E和CFU-GM的抑制活性差异不明显.结论 提高辐射损伤后小鼠血清刺激活性可能是GEN防护放射性造血损伤、促进受损造血系统重建的分子机制之一.     

再生障碍性贫血发病机制的初步研究

目的:探讨再生障碍性贫血(再障)的发病机制.方法:采用甲基纤维素半固体培养法及胶原半固体培养法对56例再障患者的骨髓CFU-GM、CFU-E、BFU-E及CFU-MK、BFU-MK进行培养;采用APAAP法及双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)对再障患者外周血T细胞亚群、血清sIL-2R进行检测.结果:再障患者CFU-GM、CFU-E、BFU-E及CFU-MK、BFU-MK集落数均明显低于对照组(P＜0.01),且严重型再障CFU-GM、CFU-E、BFU-E及CFU-MK、BFU-MK集落数减少程度较慢性再障更明显;再障患者CD3亚群细胞无变化,CD4亚群细胞减低,CD8亚群细胞增高,CD4/CD8降低,重型再障患者血清sIL-2R中水平明显高于对照组(均P＜0.01). 结论:骨髓造血祖细胞数量减少是再障发病的重要因素,其减少程度与再障的病情有关;细胞免疫功能异常及造血负调控因子可能在再障发病中起一定的作用.     

放射损伤小鼠骨髓VEGF、CFU-GM、CFU-F的变化及川芎嗪对其影响的研究

目的:探讨放射损伤小鼠骨髓血管内皮细胞生长因子(VEGF)、骨髓粒巨噬细胞集落形成单位(GFU-GM)数和骨髓成纤维细胞集落成单位(CFU-F)的变化意义及川芎嗪对其的影响。方法:健康昆明小鼠经6.0Gy60Coγ照射后,立即喂饲川芎嗪并设对照组和正常组,分别于第3、7、14、21天检测其骨髓VEGF、CFU-GM和CFU-F的变化。结果:照射后第3、7、14 d骨髓VEGF表达水平显著降低,但川芎嗪组高于对照组;随着时间推移骨髓VEGF表达水平逐渐恢复,照射后第21 d川芎嗪组已恢复正常(P>0.05),而照射组仍低于正常组。照射后骨髓CFU-GM和CFU-F明显受到抑制,但川芎嗪组显示了良好的保护作用。结论:放射损伤后小鼠骨髓VEGF的表达变化在造血功能的恢复过程中起重要作用;川芎嗪具有改善骨髓造血功能的作用。     

电离辐射对胎鼠皮肤间充质干细胞支持骨髓粒系造血作用的影响

目的：观察不同剂量的X射线照射对体外培养的胎鼠皮肤间充质干细胞(MSCs)支持造血细胞增殖作用的影响,为提高造血干细胞体外扩增效率提供一种更为有效的方法,进而为造血干细胞移植提供一个新的途径。 方法：分别用不同剂量的X射线照射培养的胎鼠皮肤MSCs层,然后将骨髓细胞种植于该细胞层上,扩增后不同时间(0~12 d)进行骨髓CFU-GM集落培养,同时取经X射线照射的皮肤MSCs的上清液进行骨髓CFU-GM、CFU-E及BFU-E培养,观察射线对胎鼠皮肤MSCs造血支持作用的影响。 结果：6、8和10 Gy剂量X射线照射胎鼠皮肤MSCs与骨髓细胞共同作用7 d时,骨髓祖细胞集落显著增加,其中6 Gy组增加最为明显,CFU-GM是0 Gy组的2.17倍。6、8和10 Gy剂量X射线照射培养皮肤的上清液体外亦可刺激骨髓CFU-GM、CFU-E、BFU-E的生长,与0 Gy组比较差异均有显著性(P<0.05)。其中6 Gy组增加最为明显,分别达0 Gy组的1.81倍、3.94倍和3.51倍,集落亦明显加大。 结论：一定剂量X射线照射胎鼠皮肤MSCs,其体外支持造血的作用增强,无论照射后的单纯MSCs细胞层还是上清液都可使骨髓细胞集落数增多。     

不同部位的巨噬细胞培养上清液对小鼠红系血细胞发生的影响

目的:探讨腹腔、肺泡和肝脏的巨噬细胞培养上清液对小鼠早期红系造血祖细胞[用红系爆式集落形成单位(BFU-E)表示]和晚期红系造血祖细胞[用晚期红系集落形成单位(CFU-E)表示]发生的影响.方法:采用造血祖细胞体外培养技术观察3种不同部位的巨噬细胞培养上清液对BFU-E和CFU-E集落数的影响.结果与结论:3种培养上清液均能促进BFU-E和CFU-E的分化与增殖,而肺泡巨噬细胞培养上清液的上述作用更明显.     

制首乌总多糖对贫血小鼠造血祖细胞增殖的影响

目的观察制首乌总多糖(PPS)对放化疗所致骨髓抑制贫血小鼠造血祖细胞增殖的影响。方法建立骨髓抑制贫血小鼠模型,采用造血祖细胞培养技术,观察PPS体内ip给药和细胞培养直接用药对造血祖细胞增殖和骨髓有核细胞(BMC)数目的影响。结果体内用药能显著增加BMC数目,提高BFU-E、CFU-E和CFU-Meg集落数产率(P<0.01),能增加CFU-GM集落数产率(P<0.05);在一定浓度下,体外直接用药,能增加CFU-Meg集落数产率(P<0.01)。结论PPS能通过间接作用促进红系和粒系祖细胞的增殖,能通过间接和直接作用刺激巨核系祖细胞的增殖。     

芍药苷对放射线致血虚证小鼠骨髓Epo和G-CSF基因表达的影响

目的:考察芍药苷对放射线致血虚证小鼠的生血作用及对骨髓Epo、G CSF基因表达的影响,为阐明芍药苷补血作用的分子机制提供依据。方法:采用3.5Gy60 Coγ射线全身1次性照射,制备小鼠血虚证模型,检测外周血象,骨髓集落培养观察并计数CFU GM、BFU E、CFU E、CFU mix ,RT PCR观察并检测骨髓Epo和G CSF基因表达。结果:芍药苷显著升高放射线致血虚证小鼠外周血白细胞数量和骨髓CFU GM、BFU E、CFU E、CFU mix数量,上调骨髓Epo和G CSF基因表达。结论:芍药苷具有生血作用,促进骨髓Epo和G CSF基因的表达可能是其生血作用的机制之一。     

Effects of Weiganfi on the Hemopoietic Function of the Myelosuppressed Anemic Mice

To study the effect of Weiganli （维肝力） on bone marrow hemopoiesis. Methods： The effects of Weiganli on the peripheral blood picture and the number of bone marrow nucleated cells （BMCs） were observed in myelosuppressed anemic model mice, and the effects of Weiganli on the growth of colony forming unit-granulocyte macrophage （CFU-GM）, colony forming unit-erythroid （CFU-E）, burst forming unit-erythroid （BFU-E）, colony forming unit-megkaryocyte （CFU-Meg） were investigated by in vitro cell culture technique. The hemopoietic stem cells （HSCs, c-kit＋） in bone marrow were double stained with fluorescent antibody PE-C-Kit and FITC-CD45, and the HSCs （c-kit＋） were counted by flow cytometer with CD45/SSC （side scatter） gating. Results： Peripheral blood cell counts and the number of BMCs were significantly improved after Weiganli administration; and bone marrow hemopoietic stem/progenitor cells were significantly increased. Conclusion： Weiganli can effectively promote the recovery of hemopoietic function in the mvelosuooressed anemic mice.     

重组人白细胞介素-1β对人红系、粒系造血祖细胞集落形成的影响

为探讨重组人白细胞介素-1β(rhIL-1β)对人红系、粒系造血祖细胞的作用,采用96孔板微量培养法在体外进行培养。在培养中加入不同浓度的rhIL-β1(0～5ug/mL)后,观察BFU-E、CFU-E及CFU-GM的集落形成。结果加入不同浓度的IL-1β后,BFU-E、CFU-E的集落形成均受到抑制,且呈剂量依赖性,在IL-1β剂量为0.1和0.5μg/mL时,抑制作用更明显(JP<0.005,0.05),而IL-1β对CFU-GM的集落形成无明显影响。结果表明,IL-1β对红系造血祖细胞(BFU-E和CFU-E)影响的研究有助于解释某些慢性疾病性贫血(如类风湿性关节炎伴贫血等)的发生机制,提示IL-1β单克隆抗体有可能用于治疗慢性疾病性贫血。     

The effects of total saponins of panax ginseng on hematopoietic progenitor cells in healthy humans and aplastic anemia patients

Ginseng is said to have beneficial effects on anemia. The proliferation effects of total saponins of Panax ginseng (TSPG) on hematopoietic progenitor cell in healthy individuals and 29 patients with aplastic anemia (AA) were observed through bone marrow cultures of burst forming unit-erythroid (BFU-E), colony forming unit-erythroid (CFU-E) and colony forming unit-granulocyte/macrophage (CFU-GM) in vitro compared with methyltestosterone (MT). The results suggest TSPG might prompt the proliferation of normal progenitor cells at a concentration of 20 μg/ml. The numbers of BFU-E,CFU-E and CFU-GM increased by 37.8±2.9%, 31.4±2.9% and 33.3±4.0% respectively overthe controls; furthermore TSPG was still useful to BFU-E, CFU-E growth without Epo in vitro, although the colony numbers were much lower. Otherwise MT was useless to CFU-GM. Of the 29 patients with AA, 14 who responded to MT showed sensitivity to TSPG in marrow culture (the rising rate of colony formation exceeded 30%), but immune-mediated AA (patient’s peripheral blood mononucleated cell suppressed normal hematopoiesis) and stem cell decreased AA (few of colonies were formed) showed almost no expression for TSPG activity because of the immunological suppression system and the absence of progenitors.     

Myeloid and erythroid hemopoiesis supported by human bone marrow fibroblasts in vitro.

The passages 0 and 3 purified human bone marrow fibroblast layers (FLs) were established by long-term liquid cultures. After 12-day coculture of stromal. cell-depleted marrow cell suspensions with passage 0 FLs, 68.33 +/- 4.04% of the hemopoietic colonies adhered to FLs was myeloid in nature and the other 31.67 +/- 4.04% was erythroid. There were still CFU-E (colony forming unit-erythroid), BFU-E (burst forming unit- erythroid), and CFU-GM (colony forming unit-granulocyte/macrophage) among the nonadherent cells. The media conditioned by passage 0 (F0-CM) and passage 3(F3-CM) FLs stimulated the growth of myeloid and erythroid (BFU-E) colonies. From these data, it is concluded that both FLs and the media conditioned by fibroblasts can stimulate myeloid and erythroid hemopoiesis.

     

巴桑母酥油丸对放射线-化学复合损伤小鼠造血干细胞移植后重建造血能力的影响简

目的 研究藏药巴桑母酥油丸对放射线-化学复合损伤后机体骨髓造血干细胞功能的影响,探究其“补益”作用机制.方法 将经60Co γ射线照射＋环磷酰胺腹腔注射方法得到的放射线-化学复合损伤小鼠分为巴桑母酥油丸组、生理盐水组、空白组,分别灌胃巴桑母酥油丸、生理盐水及自然恢复14d后,将其骨髓作为供体移植给受致死剂量γ射线照射的同种受体小鼠,再检测受体小鼠外源性脾集落、骨髓造血祖细胞集落产率、骨髓细胞造血干细胞抗原-1（Sca-1）阳性细胞率,并与灌胃.结果 巴桑母酥油丸组的外源性脾集落、骨髓早期红系祖细胞集落（BFU-E）、粒-巨噬系祖细胞集落（CFU-GM）产率均显著高于空白组和生理盐水组（P＜0.05）,而晚期红系祖细胞集落（CFU-E）、巨核系祖细胞集落（CFU-Meg）、骨髓细胞Sca-1＋细胞率并不离于自然恢复的空白组（P＞0.05）.结论 巴桑母酥油丸可以提高放射线-化学复合损伤小鼠骨髓造血干细胞移植后造血重建能力,提示巴桑母酥油丸可经改善骨髓造血干细胞功能发挥其对放射线-化学复合损伤机体“补益”作用.     

川芎嗪对人骨髓成纤维样基质细胞蛋白质表达的影响

目的:研究川芎嗪对人骨髓成纤维样基质细胞增殖及蛋白质表达的影响,探讨川芎嗪补血作用的分子机制。方法:分别采用流式细胞术和蛋白质组学方法测定川芎嗪对人骨髓成纤维样基质细胞周期及蛋白质表达的影响。结果:川芎嗪能促进人骨髓成纤维样基质细胞由G0/G1期进入S期,并使该细胞的9种蛋白质表达上调,6种下调。结论:川芎嗪能促进人骨髓成纤维样基质细胞增殖,作用于多个蛋白质靶点,间接发挥补血作用。