用高浓双缩脲试剂直接测定脑脊液总蛋白

脑脊液总蛋白测定的方法虽有多种但各有其缺点.如比浊法灵敏度低,并在高浓度(1g/L 以上)时蛋白沉淀极易聚合不稳定.染料结合法都有与白、球蛋白呈色不一致及比色皿难洗净的缺点。免疫学方法虽灵敏高度、特异性强、但不适用于常规工作.我们配制的高浓双缩脲试剂可直接测定脑脊液中总蛋白,适用于手工及自动分折仪法,现报道如下.     

血清总蛋白测定不同双缩脲试剂及标准化评价

在１２家医院考察了国内三种高ＮａＯＨ浓度的双缩脲试剂的应用效果。用这些双缩脲试剂测定的血清总蛋白结果偏高，精密度不如Ｄｏｕｍａｓ配方。用Ｄｏｕｍａｓ双缩脲试剂测得蛋白原始标准（ＳＲＭ９２７ａ）和二份蛋白次级标准的吸光系数均为０．２９８２±０．００１６Ｌｇ￣（－１）（５４０ｎｍ），２５Ｃ时呈色曲线在６０分钟达到平衡。用吸光系数法测定三份定值冻干质控血清的总蛋白值，均较厂方标定值略高。表明有必要统一双缩脲试剂配方和方法，吸光系数法可作为蛋白次级标准的定标方法。     

双试剂双缩脲法测定血清总蛋白的探讨

目的将双缩脲单试剂改为双试剂法,观察高脂、高胆红素、溶血标本对血清总蛋白测定的干扰.方法用二种不同试剂对高脂,高胆红素,溶血及外观正常标本用原法及本法同在全自动生化分析仪上测定血清总蛋白.结果脂血标本对原法干扰十分明显.本法可完全消除脂血的干扰;总胆红素每增加50μ mol/L,原法总蛋白增加0.4g/L,本法不受影响;溶血标本中血红蛋白对原法结果明显影响,1g/L血红蛋白对原法总蛋白增加2.85g/L,对本法总蛋白增加0.93g/L;外观正常标本二种方法无显著差异.结论双试剂法在保持原法的反应原理的基础上,消除了脂血、黄疸的干扰,明显减少溶血的影响,有利于自动生化仪的分析.     

双试剂双缩脲法测定血清总蛋白的探讨

目的 将双缩脲单试剂改为双试剂法，观察高脂、高胆红素、溶血标本对血清总蛋白测定的干扰。方法用二种不同试剂对高脂,高胆红素．溶血及外观正常标本用原法及本法同在全自动生化分析仪上测定血清总蛋白。结果脂血标本对原法干扰十分明显，本法可完全消除脂血的干扰；总胆红素每增加50μmol／L，原法总蛋白增加0．4g／L，本法不受影响；溶血标本中血红蛋白对原法结果明显影响，1g／L血红蛋白对原法总蛋白增加2．85g／L。对本法总蛋白增加0．93g／L；外观正常标本二种方法无显著差异。结论双试剂法在保持原法的反应原理的基础上，消除了脂血、黄疸的干扰，明显减少溶血的影响，有利于自动生化仪的分析。     

血清总蛋白测定下不同双缩脲试剂及标准化评价

在１２家医院考察了国内三种高ＮａＯＨ浓度的双缩脲试剂的应用效果。用这些双缩脲试剂测定的血清总蛋白结果偏高，精密度不如Ｄｏｕｍａｓ配方。     

用双缩脲法测定脑脊液总蛋白含量的方法评价

脑脊液（CSF）总蛋白含量的测定常用来检测血脑屏障对血浆蛋白的通透性增加或鞘内免疫球蛋白的分泌增加．这需要一种快速而相当精确的方法。双缩脲法是生物液体总蛋白含量测定的一种可用的参考方法。为了获得足够的灵敏度,此法已作多种修改,但大部分修改都降低了这种简单方法的适用性,并需大量CSF。还有一些别的技术可供采用,但每一种方法都有一些缺陷。本文的目的就在于评价一步双结历法测CSF总蛋白含量的能力,并把它与苄索氯铵浊度法进行比较。该实验采用BM／Hitachigll分析仪。苄索氯铵浊度法按厂商的方法进行,并使用配套的定标液。标准曲线最高点为2．00g／L,高于此浓度者在分析首先用154mmol／L的NaCl稀释。作者采用宝灵曼公司介绍的双绩脲终点法测定。通过增加样品体积以提高灵敏度,用1．50g／L的蛋白作标准。157例患者CSF离心后,于几分钟内用两种方法分析。批内精确应通过连续测定3种浓度（0．30,0．60,2．00g／L）的质控物各20次。批同治确度则在16天内每天对一次,每次作新的标准。作者通过分析Precimat蛋白和血浆样品的系列稀释浓度,确定了理论浓度与实际浓度的线性范围。双缩脱法的精确度虽比等索氯铁法低．但在浓度为0．30g／L时是可接受的．而在0．60g／L和2．00g／L时则相当     

双剂型双缩脲法测定血清总蛋白

目的为克服乳浊、黄疸、溶血对血清总蛋白测定的影响，将双缩脲法改为双剂型方法。方法第一试剂为不含硫酸铜的双缩脲空白试剂，第二试剂系将原双缩脲试剂中的硫酸铜增加一倍，二者等量混合即成原法试剂。选取乳浊、黄疸、溶血及外观正常标本用新法与原法同时在日立7060自动生化分析仪上测定总蛋白含量。结果血清总胆红素每增加100μmol／L，原法总蛋白增加0．7g／L，新法不受干扰；乳浊血清对原法结果影响十分明显，新法完全可排除乳浊干扰；标本溶血时，血红蛋白中的血红素与珠蛋白均对总蛋白测定结果造成明显影响，每1g／L血红蛋白可使原法总蛋白结果增加2．2g／L，可使新法增加0．8g／L；外观基本正常标本二法结果无显著差别。结论双剂型双缩脲法在不改变原法反应原理，保留原法优点的基础上，能克服黄疸、乳浊的干扰，明显减少溶血的干扰，而且适合于自动分析。     

双缩脲反应测定血清总蛋白方法的标准化

双缩脲法定量测血清总蛋白已有70余年的历史.1974年,美国临床化学协会(AACC)标准化委员会的总蛋白研究组,用双缩脲法进行了血清总蛋白的室间研究.1978年,国际临床化学协会(IFCC)标准委员会在提出人血清蛋白标准74/1的暂     

改良双缩脲法测定血清总蛋白

目的研究建立改良双缩脲试剂二点速率法测定血清总蛋白的方法,以消除标本溶血、黄疸、脂浊、含葡聚糖的干扰。方法进行方法参数选择试验、方法学评价试验和方法间比较试验。结果改良试剂反应液吸收峰530～560nm,最大峰值540nm。在反应进行的初期,吸光度变化率与蛋白质浓度成正比,可用速率法测定,线性范围142g/L。高、低值血清的批内、批间、日间和总CV均<5%。回收率为98.6%～100%,平均99.3%。检测限0.4g/L。血红蛋白9.5g/L以下、胆红素370μmol/L以下、三酰甘油200.0mmol/L以下、葡聚糖30g/L以下无显著性干扰。改良法与Doumas法测定外观正常标本结果高度相关,回归方程:y=2.7147+0.9658x,r=0.9633,P=0.000。配对t检验:t=0.907,P=0.370。测定高脂、黄疸、含葡聚糖标本两种方法间有非常显著性差异。结论采用改良法单试剂二点速率法测定血清总蛋白,能有效消除溶血、黄疸、高脂和葡聚糖的干扰。     

改良双缩脲双试剂与单试剂法测定脂浊标本血清总蛋白对比分析

目的 探讨改良双缩脲双试剂法在全自动生化分析仪中直接测定脂浊标本血清总蛋白.方法 用酒石酸作为络合剂防止形成氢氧化铜沉淀,血清空白增加方法的敏感性而同时使脂血症对光普的最小干扰.结果 改良双缩脲双试剂法测定脂浊标本血清总蛋白与单试剂法测定结果差异有统计学意义(P<0.001).结论 改良双缩脲双试剂法能有效的清除脂肪的干扰,具有很好的准确度和精密度,适合于自动分析,提高工作效率.     

应用双缩脲反应测定血清总蛋白的若干问题

双缩脲反应测定血清总蛋白是一种准确而简便的方法,1969年被美国临床化学家协会列为临床化学的标准方法,1978年被世界卫生组织定为中等临床化验室测定血清总蛋白的常规方法,嗣后又被列为测定血清总蛋白的参考方法。双缩脲反应的发现已经100多年,应用双缩脲反应测定血清蛋白也有近50年的历史。虽然具体操作技术早已为各个临     

血清总蛋白双试剂双缩脲法消除脂浊和胆红素的干扰

建立血清总蛋白双试剂双缩脲自动分析法。以氢氧化钠和硫酸钠溶液作第一试剂 ,浓缩双缩脲试剂作第二试剂 ,在自动分析仪上用两点终点法测定。结果 ,在 0 6mol/L氢氧化钠中加入 7mmol/L的硫酸钠使脂浊血清的空白吸光度稳定 ,蛋白质与双缩脲双试剂的反应在 7分钟内完成 ;线性范围 0～ 140g/L ,平均回收率 99 8% ,低蛋白含量和正常蛋白含量的批内CV为 0 5 2 %和 0 40 % ,批间CV为 0 80 %和 0 77% ;双试剂法与参考方法比较 ,r =0 9984,Y=0 982 5X 0 783,t =0 5 2 2 ,P>0 5 ,n=90 ;脂肪乳糜、高胆红素、血红蛋白颜色对测定无干扰。结果表明 :双试剂法能去除样品中脂浊、高胆红素及血红蛋白的干扰 ,具有很好的准确度和精密度 ,适合在自动分析仪上使用。     

改良双缩脲双试剂二点终点法测定血清总蛋白的研究与应用

目的研究建立改良双缩脲双试剂二点终点法测定血清总蛋白的方法，以消除标本溶血、黄疸、脂浊、含葡聚糖的干扰。方法采用改良试剂，测定方法的精密度、回收率、检测限、线性范围、干扰试验，以确定所建立方法的基本性能；与Doumas法比较以确定方法的可靠性与消除干扰的效果。结果样品与试剂比例为5：220μl，线性范围达140g／L。回归方程：Y=484．0＋48．06X，r=0．9993。批内CV（20次）0．24％，日间CV（20d）1．07％。回收率95．6％～103％，平均99．5％。检测限2．36g／L。血红蛋白（Hb）2．1g／L以下，胆红素（Bil）148μmol／L以下，三酰甘油（TG）aS．2mmol／L以下，葡聚糖30g／L以下干扰不显著。改良法与Doumas法测定外观正常标本结果高度相关，回归方程：Y=-2．4354＋1．0374X，r=0．9882。结果间差异无统计学意义，t=0．156，P=0．877。测定溶血、高脂、黄疸、含葡聚糖标本二种方法间差异有统计学意义。结论采用改良双缩脲双试剂二点终点法测定血清总蛋白，能有效消除溶血、黄疸、高脂和葡聚糖的干扰，提高结果准确性。     

日立7150型生化仪双缩脲法测定脑脊液蛋白

随着自动生化分析仪的广泛使用,越来越多的生化检验项目可以用仪器测定,大大提高了工作效率和检验质量.脑脊液中蛋白质由于其含量低,目前大多只能使用传统的硫酸钠－磺基水杨酸比浊法1测定,此法不便于自动分析.笔者通过修改参数,在日立7150型生化分析仪上用测定血清总蛋白的双缩脲试剂测定脑脊液中蛋白质,实现了此项目的自动分析,现报道如下： 1 材料与方法 1．1 仪器：日本产日立7150型全自动生化分析仪. 1．2 试剂：北京中生生物工程高技术公司产总蛋白试剂(双缩脲法),批号：000401. 1．3 标准液：德国宝灵曼公司生产多项校正液cfas,…     

日立7150型生化仪双缩脲法测定脑脊液蛋白

随着自动生化分析仪的广泛使用,越来越多的生化检验项目可以用仪器测定,大大提高了工作效率和检验质量.脑脊液中蛋白质由于其含量低,目前大多只能使用传统的硫酸钠-磺基水杨酸比浊法[1]测定,此法不便于自动分析.笔者通过修改参数,在日立7150型生化分析仪上用测定血清总蛋白的双缩脲试剂测定脑脊液中蛋白质,实现了此项目的自动分析,现报道如下:     

用固体标准双缩脲法测定血清总蛋白

国产λ—A固体标准的研制成功,填补了我国光学计量中的一项空白。固体标准具有携带安全方便,准确可靠,线性优良,不受物理化学因素干扰,经一次严格标定,长其稳定等特点。对于规范化和稳定性较好的双缩脲法测定血清总蛋白,完全可以采用国产固体标准。 1 仪器和试     

双缩脲试剂对血清铜测定有携带污染

Ｈｉｔａｃｈ 70 60全自动分析仪的工作方式是先测试一个标本的所有实验项目 ,再测试下一个标本 ;在同一个标本内哪个实验项目先做 ,哪个后做 ,可自行安排。我们在检测血清铜的过程中偶尔发现离群值 ,根据拉依达 (ＰａИＴａ)检验法 ,确定此离群值属异常值。通过查找发现测定总蛋白的双缩脲试剂中含有 18ｍｍｏｌ/Ｌ硫酸铜 ,双缩脲试剂对铜试剂存在试剂针携带污染 ,当改变仪器的分析顺序 ,先测铜再测总蛋白 ,可避免双缩脲试剂对铜测定的携带污染。1　材料Ｈｉｔａｃｈ 70 60全自动分析仪。双缩脲试剂为德国Ｈｕｍａｎ公司生产 ,主要成份为 :…     

介绍一种新的双缩脲试剂

目前双缩脲试剂法测定血清蛋白质存在在两点不足之处,一是需要桶当长的反应时间(25—45分钟)才能使之充分显色,二是受脂血症的干扰.Hippo-crates Yatzidis(Clin Chem 1977;23:908)推