CK20 mRNA在大肠癌患者外周血微转移中的表达

目的检测大肠癌患者外周血中细胞角蛋白20（CK20）mRNA的表达,探讨其能否作为判断大肠癌患者外周血微转移及预后的分子生物学指标。方法采用RT—PCR技术检测32例大肠癌患者、11例肠道良性病变患者和20例健康体检者外周血中CK20 mRNA定性和半定量表达。结果（1）CK20 mRNA在大肠癌患者中的阳性率为50．00％,相对系数为（0．89±0．17）;在肠道良性病变患者中阳性率为9．09％,相对系数为0．11;在健康体检者中阳性率及相对系数均为0。大肠癌患者与肠道良性病变患者、健康体检者相比,CK20 mRNA明显增高（P〈0．05）。（2）CK20 mRNA阳性率和相对系数在不同临床分期、远处转移中差异有统计学意义（P〈0．05）;其阳性率在浸润深度、淋巴结转移中无统计学意义,但相对系数有统计学意义（P〈0．05）。阳性者生存率低于阴性者（P〈0．05）。（3）CK20 mRNA与癌胚抗原（CEA）、糖链抗原199（CA199）表达呈正相关（P〈0．05）。结论CK20 mRNA的表达能预测大肠癌患者外周血微转移,可判断预后。     

CK20mRNA和hTERTmRNA表达与大肠癌患者外周血微转移的临床研究

目的：检测大肠癌患者外周血中细胞角蛋白20（CK20）mRNA和人端粒酶逆转录酶（hTERT）mRNA的表达,探讨其能否作为判断大肠癌患者外周血微转移及预后的分子生物学指标．方法：采用RT-PCR技术检测大肠癌32例、肠道良性病变11例和健康体检者20例的外周血中CK20mRNA和hTERTmRNA的定性和半定量表达．以人胃腺癌细胞株SGC-7901作阳性对照．实验数据采用SPSS13．0forWindows软件包统计分析．结果：①CK20mRNA和hTERTmRNA在大肠癌患者外周血中的阳性表达率分别为50．0％和56．2％,相对系数分别为0．89±0．17和0．88±0．17;在肠道良性病变患者外周血中阳性表达率分别为9．1％和0％,相对系数分别为0．11和0;在健康体检者外周血中阳性表达率及相对系数均为0．大肠癌患者与肠道良性病变患者、健康体检者相比,CK20mRNA和hTERTmRNA的表达均有统计学差异（P〈0．05）．②CK20mRNA和hTERTmRNA阳性表达率和相对系数与临床分期、远处转移均有关（P〈0．05）;其阳性表达率与浸润深度、淋巴结转移无关,但相对系数与之均有关（P〈0．05）．阳性表达者生存率低于阴性者（P〈0．05）．结论：大肠癌患者外周血中存在CK20mRNA和hTERTmRNA的表达,与临床分期及患者生存密切相关,提示CK20mRNA和hTERTmRNA的表达能预测大肠癌患者外周血微转移,可判断预后．     

反转录聚合酶链反应检测胃癌病人中心静脉血CK20mRNA表达及其临床意义

目的：运用巢式反转录聚合酶链反应（nest RT—PCR）技术，探讨细胞角蛋白20（CK20mRNA）在胃癌病人中心静脉血的表达及其临床意义。方法：nest RT—PCR检测胃癌病人中心静脉血及良性疾病病人中心静脉血CK20mRNA，表达情况与临床病理因素进行分析。结果：64例胃癌病人34例CK20mRNA阳性，阳性率为53．1％，良性病病人16例均阴性；胃癌病人血液CK20mRNA的阳性率与肿瘤大小、腹腔和肝转移、临床分期相关（P〈0．05），与病理组织学类型无相关性（P〉0．05）；8例早期胃癌病人中2例CK20mRNA阳性。结论：扩增CK20mRNA的nest RT—PCR方法是检测胃癌病人中心静脉血微转移敏感而特异的方法。     

分化抑制因子-1在胃癌的表达及临床意义

目的研究分化抑制因子-1（Id-1）在胃癌的表达，探讨其与胃癌临床病理特征之间的关系以及在胃癌侵袭和转移中的作用。方法应用半定量RT—PCR方法和免疫组织化学的方法，检测Id-1在胃癌及癌旁正常组织中的表达。结果RT—PCR检测35例胃癌及癌旁正常组织Id-1mRNA表达率分别为91．4％（32例）和71．4％（25例），两者比较有统计学意义（P〈0．05）；免疫组织化学检测65例胃癌标本Id-1蛋白表达明显高于正常组织（P〈0．05）。Id-1表达与年龄、Bormann分期、肿瘤远处转移无关（P〉0．05），与肿瘤浸润深度、分化程度、淋巴结转移、TNM分期相关（P〈0．05）。结论Id-1在胃癌组织中表达明显增高，并与胃癌侵袭转移及TNM临床分期相关，可作为判断胃癌预后的指标之一。     

大肠癌患者外周血微转移的诊断研究

目的:检测大肠癌患者外周血中CK20mRNA和hTERT mRNA的表达,探讨其能否作为诊断外周血微转移的生物学指标。方法:采用RT-PCR法检测60例大肠癌患者、21例肠道良性病变患者和20例健康体检者外周血中两项指标的表达。结果:1CK20mRNA和hTERT mRNA在大肠癌患者外周血中的阳性表达率分别为51.67%和56.67%,相对系数分别为0.88±0.14和0.89±0.17;肠道良性病变患者中阳性表达率分别为4.76%和0%,相对系数分别为0.11和0;健康体检者阳性表达率及相对系数均为0。大肠癌患者与肠道良性病变患者、健康体检者相比,二者的表达均有统计学差异。2RT-PCR法检测大肠癌患者外周血中两项指标诊断微转移的灵敏度为77.78%～88.89%,特异度为59.38%～93.75%。3两指标阳性者根治术后复发转移率高于阴性者,生存率低于阴性者。4两指标与CEA、CA19-9的表达呈正相关;hTERTmRNA阳性率高于CA199。结论:大肠癌患者外周血中存在CK20mRNA和hTERT mRNA的表达,可作为诊断大肠癌患者外周血微转移的分子生物学指标。     

胃癌患者外周血中CK-19的表达及其临床意义

目的检测胃癌患者外周血中CK－19和MUC－1的表达,确定其作为早期胃癌微转移分子标志物的可能性;讨论CK—19mRNA对早期胃癌微转移的临床诊断意义。方法研究对象共分为三组,其中2009年3月～2012年3月期间于陕西省安康市中心医院住院的96例初治胃癌患者作为实验组．30例胃良性疾病患者和30例健康人的外周血分别作为对照组。采用RT—PCR法检测实验组及对照组的外周血中CK－19tuRNA及MUC～1mRNA的表达情况并评估目的基闪的表达与临床特征的相关性,对结果进行统计学分析．选取也合适的标本进行PT－QPCR实验。RT—QPCR法检测44例早期胃癌患者外周血中CK－19mRNA的表达量,通过绘制ROC曲线．探索诊断效果最好的临界值并计算AUC。结果①实验组和埘照组中CK－19mRNA阳性表达牢分别为53．13％（51／96）、1．67％（1／60）．差异有高度统计学意义（P〈0．01）,且胃癌组中CK－19mRNA的阳件表达与肿瘤分期和和分化程度有关;胃癌组和对照组中MUC－1mRNA阳性表达率分别为61．46％（59／96）、51．67％（31／60）,差异无统计‘学意义（P〉0．05）。②本实验结果统计的临界值为0．2358,灵敏度为95．45％,准确度为77．37％;AUC为0．897。结论RT—QPCR法检测外周血中的CK－19mRNA,适合作为诊断早期胃癌微转移的重要参考指标。     

RT-PCR检测乳腺癌患者外周血HMGA2 mRNA表达的意义

目的探讨乳腺癌患者外周血中HMGA2 mRNA的表达，建立检测外周血早期诊断乳腺癌微转移的方法。方法采取72例乳腺癌和41例乳腺良性疾病患者的外周血，运用RT—PCR技术进行mRNA的检测。结果72例乳腺癌患者HMGA2 mRNA有27例表达，总阳性率为37．50％。41例乳腺良性疾病者HMGA2 mRNA无1例表达。两组有统计学意义（x^2=7．35，P〈0．001）。结论HMGA2可以用于临床检测乳腺癌患者外周血中微转移，有可能成为判断预后和指导治疗的指标。     

胃癌患者外周血CEA mRNA的检测及意义

目的 探讨胃癌患者外周血中CEA mRNA的表达及临床意义。方法 采用巢式RT-PCR技术检测70例胃癌患者手术前、后外周血CEA mRNA的表达情况，并以20例健康志愿者为阴性对照组，以10例新鲜胃癌组织作阳性对照。结果 CEAmRNA术前阳性表达率为51．4％，阳性表达率与组织学类型、TNM分期具有显著相关性（P〈0．05），而与肿瘤的部位、患者性别无相关性（P〉0．05）；20例健康志愿者无1例阳性表达，10例胃癌组织均为阳性表达。结论 CEA mRNA作为标志物检测胃癌血循环微转移是可靠的，对于指导临床诊断、治疗及判断预后具有重要意义。     

胃黏膜病变组织中hTERT的表达及其与幽门螺杆菌感染的关系

目的探讨胃癌前病变组织及胃癌中人端粒酶逆转录酶（hTERT）的表达状况及其与幽门螺杆菌（Hp）感染的关系。方法应用免疫组织化学技术检测130例胃黏膜多阶段病变组织中hTERT的表达,用快速尿素酶法和Warthin—Starry银染色法检测Hp。结果hTERT阳性率及Hp感染率慢性浅表性胃炎为0％（0／25）、20．0％（5／25）,萎缩性胃炎为15．6％（7／45）、44．4％（20／45）,轻-中度异型增生为500％（6／12）、58．3％（7／12）,重度异型增生为55．6％（5／9）、6617％（6／9）,胃癌为692％（27／39）、74．4％（29／39）。被检标本hTERT阳性率及Hp感染率均随病变加重而增高（均P〈0．01）。Hp阳性患者hTERT阳性率为55.2％,Hp阴性患者hTERT阳性率为14．3％,两者之间的差异有统计学意义（P〈0．01）;不同肿瘤大小、浸润深度、临床分期及有无淋巴结转移,胃癌患者hTERT阳性率的差异均无统计学意义（均P〉0．05）。结论在胃癌和胃癌前病变阶段,Hp感染可能通过激活胃黏膜上皮细胞端粒酶,使hTERT高表达,胃黏膜上皮细胞增生,从而促进了胃癌的发生和发展。     

Bmi-1和hTERT在胃癌组织中表达及其相关性

目的 探讨细胞特异性莫洛鼠白血病病毒插入位点-1(Bmi-1)和人端粒酶逆转录酶(hTERT)蛋白在胃癌组织表达及其与临床病理特征的关系,探讨二者在胃癌发生发展中的作用及其相关性.方法 采用免疫组化PV-9000法分别检测70例胃癌、20例慢性萎缩性胃炎及10例癌旁正常胃黏膜组织标本中Bmi-1和hTERT蛋白的表达....     

COX-2、VEGF、cyclinD1在胃癌及慢性萎缩性胃炎的表达及其意义

目的: 探讨COX-2、VEGF、cyclinD1蛋白在胃癌及慢性萎缩性胃炎组织中的表达及其意义。方法: 采用免疫组化法检测COX-2、VEGF、cyclinD1蛋白在60例胃癌组织和20例慢性萎缩性胃炎组织中的表达。结果: COX-2、VEGF、cyclinD1在胃癌和慢性萎缩性胃炎组织中的阳性表达率分别为66.67%、76.67%、61.67%和40.00%、35.00%、15.00%,差异均有统计学意义(P<0.005~P<0.05)。结论: COX-2、VEGF、cyclinD1蛋白的阳性表达与慢性萎缩性胃炎癌变有一定关系。     

胃癌前病变组织中人端粒酶逆转录酶、p53蛋白的表达与幽门螺杆菌的关系

目的：探讨胃癌前病变组织中人端粒酶逆转录酶（hTERT）和p53蛋白的表达状况及其与幽门螺杆菌（Hp）根除前后的关系。方法：采用实时定量荧光RT-PCR方法检测胃粘膜中hTERT,将hTERT与GAPDH（甘油醛-3-磷酸脱氢酶）拷贝数之比的100倍作为标准化hTERT（NhTERT）,用快速尿素酶法和Warthin-Starry银染色法检测Hp,同时用免疫组化检测p53蛋白的表达。结果：Hp阳性组hTERTmRNA和p53蛋白的表达率均显著高于Hp阴性亚组的表达率（均P〈0.05）。Hp根除组hTERTmRNA的表达率显著低于未根除组（P〈0.05）,未根除组与阴性对照组之间无显著性差异。结论：在胃癌前病变阶段,Hp感染与端粒酶表达水平及p53蛋白之间有直接关系,提示端粒酶、Hp感染、p53蛋白在胃癌的发生、发展中起重要作用及Hp根除的必要性。     

胃癌相关抗原MG7Ag在胃癌中的表达及其临床意义

目的研究胃癌相关抗原MG7Ag在胃癌中的表达及其意义。方法采用流式细胞仪检测143例胃癌组织中MG7Ag的表达,同时随机选取30例慢性浅表性胃炎,30例慢性萎缩性胃炎,作为对照研究。结果MG7Ag阳性表达在胃癌、慢性浅表眭胃炎、慢性萎缩性胃炎中分别为91．3％、14．9％、30．0％。胃癌MG7Ag阳性表达与胃癌有无淋巴结转移无相关性（P〉0．05）,胃癌MG7Ag阳性表达与胃癌分化程度亦无相关性（P〉0．05）。结论从慢性浅表性胃炎→慢性萎缩性胃炎→胃癌,MG7Ag阳性表达率显著递增,与胃癌的浸润转移无明显相关性,MG7Ag有望成为临床上诊断胃癌可靠的肿瘤标记物。     

胃癌患者外周血细胞角蛋白20mRNA的检测及临床意义

目的　采用逆转录聚合酶链反应检测进展期胃癌患者外周血中细胞角蛋白 2 0 (cytokeratin 2 0 ,CK2 0 )mRNA的表达 ,以检测胃癌外周血循环中微转移的情况 ,并比较CK2 0mRNA的阳性检出率与胃癌患者的性别、年龄、肿瘤部位和胃癌组织的分化程度的关系。方法　 6 0例胃癌患者和 2 0例慢性胃炎患者分别作为试验组和对照组。采用密度梯度离心法分离获取全部病例外周静脉血中的单个核细胞 ,随后应用逆转录聚合酶链反应的方法检测其中的CK2 0mRNA表达情况。结果　试验组中有 32例患者外周血循环中有阳性表达 ,阳性率为 5 3.3% ;而在对照组患者外周血中无 1例标本检出细胞角蛋白 2 0mRNA ;两组间的阳性率差异具有显著性 (P <0 .0 0 5 ) ;癌细胞的检出率与胃癌组织的分化程度呈正相关 (P <0 .0 5 ) ,而与胃癌患者的性别、年龄和肿瘤部位等因素无明显相关 (P >0 .0 5 )。结论　CK2 0mRNA可作为标志物用于检测胃癌的血行转移 ;CK2 0mRNA的阳性检出率与胃癌组织的分化程度具有相关性。     

胃癌组织中HpcagA基因表达

目的　了解胃癌组织 Hpcag A基因感染状况 ,探讨Hpcag A基因与胃癌的关系 .方法　采用 Warthin- Starry银染和原位 PCR方法 ,检测慢性浅表性胃炎 (CSG) 35例、慢性萎缩性胃炎 (CAG) 4 0例和胃癌 (CG) 35例的胃粘膜 Hp及cag A基因感染状况 .观察非癌患者胃粘膜炎症反应程度 .结果　慢性浅表性胃炎、萎缩性胃炎、癌组织、癌旁胃粘膜组织 Hp检出率分别为 5 7% ,6 2 % ,0 %和 5 4 % ;cag A基因检出率分别为 2 0 % ,5 0 % ,2 9%和 4 6 % ,萎缩性胃炎、癌旁组 cag A基因检出率显著高于浅表性胃炎组 (P<0 .0 1) .非癌患者胃粘膜单个核细胞、分叶核细胞浸润程度 cag A+组较 cag A-组、Hp+组较 Hp-组显著增多 (P<0 .0 1) ,且 cag A+组还较 Hp+组明显增多 (P<0 .0 5 ) .结论　萎缩性胃炎、胃癌患者 cag A菌株感染率显著高于慢性浅表性胃炎组 . cag A菌株引起更严重的炎症反应 .说明 Hpcag A菌株感染与萎缩性胃炎、胃癌关糸密切     

The study on quantitative expression of CD44v6mRNA by real-time RT-PCR with the micro-metastases of gastric cancer

JNANJINGMEDUNIV2005;19(6):30330INTRODUCTION CD44isanintegralmembraneglycoprofeinwithanapparentmolecularmassthatrangesfrom85kDto250kd.Itwasoriginallydescribedasalymphocyto homingreceptoroncirculatinglymphocytes[4],cellad hesion,activationofleukocytes,andmigrationofcells.Atleast20variants(v)ofCD44havebeenreported[57]duetothealternativesplicingof10exons(v1v10)thatencodethemembranesproximalportionoftheextracellu lardomain.Guntherwasthefirsttoshowthattheex pressionofvariantsofCD44endow…