颞叶内侧癫痫海马CA1区cytc、caspase-9、caspase-3蛋白的表达研究

大量动物实验证明癫痫发作可导致脑内神经元的凋亡和多种凋亡相关基因的表达,但在人类癫痫中的研究尚少。本文采用HE染色、原位末端标记（TUNEL）方法在光镜下观察颞叶内侧癫痫（mesial temporal lobe epilepsy,MTLE）患者致痫海马CAI区神经元凋亡的情况,采用免疫组化S—P法检测并对比MTLE海马CA1区和对照组正常海马组织神经元内凋亡相关蛋白cytc、caspase-9、caspase-3的表达。     

不同浓度七氟醚对老年大鼠认知功能的影响

目的:观察不同浓度七氟醚麻醉对老年大鼠认知功能的影响。方法:将80只老年SD大鼠,采用数字表法随机分为5组,每组各16只。分别吸入0%(C)、1%(S1)、2%(S2)、3%(S3)、4%(S4)七氟醚6 h。用Morris水迷宫检测大鼠的认知功能,同时检测β-淀粉样物质前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)、β淀粉样蛋白(β-amyloid peptide,Aβ)以及人BACE-1(beta-siteAPP-cleaving enzyme-1)的表达。结果:(1)Morris水迷宫进行定位航行实验和空间探索实验表明,S3、S4组的老年大鼠学习记忆与C组相比,潜伏期延长,穿越平台象限的次数减少(F=14.215,P<0.05);而S1、S2组潜伏期及平台穿越次数差异无统计学意义(P>0.05)。(2)大鼠海马内的APP、Aβ表达都随着吸入浓度的增加而增加(P<0.05)。(3)大鼠海马中BACE-1的表达与C组相比,S3、S4组的表达显著增高(F=14.215,P<0.05)。结论:七氟醚对老年大鼠术后认知功能的影响具有剂量依赖性,而高浓度七氟醚可能通过诱导APP、Aβ生成从而引起BACE-1表达上调而发挥作用。     

不同浓度七氟醚对老年大鼠认知功能的影响

目的：观察不同浓度七氟醚麻醉对老年大鼠认知功能的影响。方法：将80只老年SD大鼠,采用数字表法随机分为5组,每组各16只。分别吸入0%（C）、1%（S1）、2%（S2）、3%（S3）、4%（S4）七氟醚6 h。用Morris水迷宫检测大鼠的认知功能,同时检测β-淀粉样物质前体蛋白（amyloid precursor protein,APP）、β淀粉样蛋白（β-amyloid peptide,Aβ）以及人BACE-1（beta-site APP-cleaving enzyme-1）的表达。结果：（1）Morris水迷宫进行定位航行实验和空间探索实验表明,S3、S4组的老年大鼠学习记忆与C组相比,潜伏期延长,穿越平台象限的次数减少（Ｆ＝１４.215,P<0.05）;而S1、S2组潜伏期及平台穿越次数差异无统计学意义（P >0.05）。（2）大鼠海马内的APP、Aβ表达都随着吸入浓度的增加而增加（P<0.05）。（3）大鼠海马中BACE-1的表达与C组相比,S3、S4组的表达显著增高（F=14.215,P<0.05）。结论：七氟醚对老年大鼠术后认知功能的影响具有剂量依赖性,而高浓度七氟醚可能通过诱导APP、Aβ生成从而引起BACE-1表达上调而发挥作用。     

反复吸入七氟醚对大鼠海马神经元p-cofilin及cofilin表达和远期认知功能的影响

目的 探讨反复吸入七氟醚对大鼠海马神经元磷酸化丝切蛋白（p cofilin）及丝切蛋白（cofilin）表达和远期认知功能的影响。 方法 将20只雄性SD大鼠随机分为七氟醚组（n=10）和对照组（n=10）,七氟醚组大鼠吸入2.4% 七氟醚,每日2 h,连续7 d,对照组不吸入七氟醚。通过Morris水迷宫定位航行实验及空间探索实验检测两组大鼠认知功能,采用TUNEL实验检测海马神经元凋亡情况,Western Blot检测海马内Bax、Bcl 2、p cofilin和cofilin表达情况。 结果 定位航行实验的第3、4、5d,七氟醚组逃避潜伏期长于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;两组大鼠空间探索实验结果发现,七氟醚组大鼠穿越平台次数明显少于对照组,平台象限停留时间明显短于对照组（均P＜0.05）;两组游泳速度无明显差异（P＞0.05）;与对照组比较,七氟醚组大鼠海马组织凋亡细胞数目明显增加（P＜0.05）;七氟醚组Bax表达明显高于对照组,而Bcl 2表达明显低于对照组（P＜0.05）;七氟醚组p cofilin表达明显低于对照组,而cofilin表达明显高于对照组（P＜0.05）。 结论 反复吸入七氟醚可降低大鼠认知功能,其机制可能与上调cofilin表达诱导的细胞凋亡有关。     

快速老化小鼠认知功能减退与海马 CA1区锥体细胞树突棘变化的相关性

目的：：探讨快速老化小鼠认知功能减退与海马 CA1区锥体细胞树突棘变化的关系。方法：选用6月龄雄性 SAM-P8和 SAM-R1小鼠各8只,分别作为实验组和对照组,通过 Morris 水迷宫实验检测小鼠认知状况,通过 Golgi 染色观察海马 CA1区树突棘的变化。结果：与 SAM-R1小鼠比较,SAM-P8小鼠逃避潜伏期明显延长,跨越平台次数明显减少,海马 CA1区树突棘密度明显减少,差异均具有统计学意义(P <0.01);Morris 水迷宫实验中第5天逃避潜伏期及跨越平台次数与海马 CA1区树突棘密度分别呈负、正相关(P <0.01)。结论：SAM-P8小鼠海马 CA1区树突棘密度的减少导致小鼠认知功能减退,可能与突触功能障碍和突触丢失相关。     

七氟醚对新生7d大鼠学习记忆功能的影响

目的:探讨新生7 d SD大鼠接受七氟醚麻醉后对其性成熟期时学习记忆功能的影响。方法:新生7 dSD大鼠24只,随机分为3组(n=8):A组吸入3%七氟醚6 h,B组吸入3%七氟烷2 h、C组为空白对照组。待大鼠生长至性成熟期时(出生后55～63 d)以Morris水迷宫实验和Y型迷宫试验这两种行为学测试方法来评价大鼠学习记忆能力。结果:与C组比较:Morris水迷宫实验中各实验组平均逃避潜伏期、原平台象限探索时间及穿越原平台次数差异均无统计学意义(P>0.05),Y型迷宫试验中各实验组全天总反应时间及错误次数差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:新生7 d大鼠接受3%浓度七氟醚2 h或6 h麻醉后不影响其性成熟期时的学习记忆能力。     

七氟醚对幼鼠获取空间学习记忆能力及海马pERK1/2表达的影响

目的探讨七氟醚对幼鼠获取空间学习记忆能力及海马p ERK1/2表达的影响。方法出生后14 d SD幼鼠54只,随机分为对照组(C组)、七氟醚5%组(Sevo组)、假手术组(Sham组)各18只。C组不做任何处理,Sevo组幼鼠暴露于5%的七氟醚4 h,Sham组幼鼠吸入氧气4 h,1周、3周、6周后于上午8:00~11:00应用Morris水迷宫对幼鼠进行7 d的行为学观察,记录逃避潜伏期,行为学结束后随即取出6只幼鼠用免疫组化法测定海马CA1区神经元p ERK1/2的表达。结果与Sham组比较,Sevo组逃避潜伏期和探索时间明显延长(P<0.01),Sevo组海马CA1区神经元p ERK1/2的表达明显减少(P<0.01);Sham组与C组逃避潜伏期时间差异无统计学意义,海马CA1区神经元p ERK1/2的表达之间差异无统计学意义。结论七氟醚对幼鼠获取空间学习记忆能力的影响与抑制海马p ERK1/2表达有关。     

七氟醚对幼鼠获取空间学习记忆能力的影响

目的 探讨七氟醚对幼鼠获取空间学习记忆能力的影响.方法出生后14d SD幼鼠18只,随机分为对照组(S)和七氟醚组(Sevo),各9只.S组不做任何处理,Sevo组幼鼠暴露于5%的七氟醚4h,1周、3周、6周后于每天上午8:00~11:00应用Morris水迷宫对S组和Sevo组的18只开始连续7d的行为学观察,记录逃避潜伏期.结果 与S组相比,Sevo组逃避潜伏期和探索时间明显延长(P<0.01).结论七氟醚对幼鼠认识获取学习记忆能力有一定的影响.     

铝对大鼠海马CA3区诱发电位的影响

实验在２只乌拉坦麻醉的ＳＤ大鼠上进行。用细胞外记录方法引导海马ＣＡ３区诱发放电，探讨向ＣＡ３区内微量注射不同剂题名中对诱发的群体锋电位的影响。结果：１．不同剂量铝对ＰＳ波幅的影响不同，０．１和０．２５ｍｏｌ／Ｌ ＡｌＣｌ３对ＰＳ无明显作用；０．５，１．０和２．０ｍｏｌ／Ｌ的ＡｌＣｌ３均可使ＰＳ波幅显著减小，且呈剂量－产应关系。２．高渗盐水和不同ｐＨ值的等渗盐水分别注入ＣＡ３区诱发的ＰＳ幅度均无明显     

七氟醚对缺氧无糖损伤大鼠海马 NR1亚基mRNA表达的影响

目的探讨七氟醚对缺氧无糖(oxygen and glucose deprivation，OGD)损伤大鼠海马NMDA受体NR。亚基mRNA表达的影响。方法大鼠海马脑片随机分为3组(n=3)，用RT—PCR方法检测对照组、缺氧组及七氟醚组大鼠离体海马脑片OGD损伤14min恢复氧糖供应孵育1、2、4h后NMDA受体NR1亚基mRNA的表达。结果恢复氧糖供应1、2h后NR1亚基mRNA的表达3组无明显差异，而缺氧组4h后NR1亚基mRNA的表达增高，七氟醚组恢复氧糖供应后4hNR1亚基mRNA的表达明显降低。结论七氟醚可通过下调OGD损伤引起的NR1亚基mRNA的表达发挥脑保护作用。     

异氟醚和七氟醚对新生大鼠脑皮质Caspase-3及微管相关蛋白1B表达的影响

目的 研究同等剂量的异氟醚和七氟醚对新生SD大鼠第一躯体感觉皮质(Primary Somatosensory cortex,SI)Caspase-3表达以及皮质微管相关蛋白1B(microtubule associated protein 1B,MAP1B)表达的不同影响.方法 出生后7d(P7)的新生SD大鼠5窝,每窝取11只,随机均分为异氟醚组(I组),七氟醚组(S组)和对照组(C组).各组分别吸入1.1%异氟醚或1.8%七氟醚或空气4h,在麻醉结束后2h每窝各取1只幼鼠灌注取脑,免疫组织化学法检测皮质SI区Caspase-3表达;另外,C组在麻醉处理0h,I组和S组分别在麻醉2h,4h每窝各取1只幼鼠取新鲜脑皮质,Western Blot检测MAPIB表达量的变化.结果 I组和S组SI区Caspase-3表达分别较对照组增加561.23%(t=4.45,P<0.01)和194.46%(t=5.17,P<0.001).I组比s组增加124.45%(P<0.05);I组皮质MAPIB在麻醉2h和4h分别较对照组增加了557.15%(t=16.54 P<0.01)和475.21%(t=32.97,P<0.01),MAPlB表达量2h与4h相比无统计学差异(P>0.05);S组皮质MAP1B在麻醉2h和4h分别较对照组增加了693.11%(t=9.45,P<0.01)和268.15%(t=2.79,P=0.049),4 h组表达量较2h降低了53.65%(P<0.01).结论 0.5MAC异氟醚比七氟醚诱导更多新生大鼠大脑皮质神经细胞表达Caspase-3,两者均可诱导幼鼠上调大脑皮质MAP1B的表达来启动机体自我修复功能.

Abstract：

Objective To investigate the effects of isoflurane and sevoflurane at the same dose on expression of Caspase-3 of primary somatosensory cortex (SI) and expression of micmmbule associated protein 1B (MAP1B)in cortical neuronsin neonatal SD rats.Methods Fifty-five neonatal SD rats at postnatal day 7 (eleven rats each litter,altogether 5 litters)were assigned randomly into control group(C group),isoflurane group (I group)and sevoflursne group(S group)in average.The rats in I group,S group or C group were exposed to 1.1% isoflurane or 1.8% sevoflurane (equivalent to 0.5MAC)or air 4h.The brain of neonatal rats were perfused and embedded by paraffin,Caspase-3 positive expression in the SI cortex of brain was detected by immunohistochemistry staining.Besides,the fresh cortex was dissected at O h in C group and at 2h,4h in I group and S group,microtubule associated protein 1 B expression was detected by West blot staining.Results Caspase-3 positive cells in the SI cortex were increased by 561.23%in I group(t=4.45,P<0.01)and 194.46% in S group(t=5.17,P<0.01)when compared with C group,and increased by 124.45% in I group(P<0.05)when compared with S group.The MAP1B protein was increased by 557.15%at 2h(t=16.54 P<0.01)and 475.21% at 4h(t=32.97,P<0.01)in I group while increased by 693.11%at 2h(t=9.45,P<0.001)and 268.15% at 4h(t=2.79,P=0.049) in S group when compared with C group.In S group,MAP1B protein at 4h reduced by 53.65%(P<0.01) when compared with that at 2h.Conclusion 0.5 MAC isoflurane can induce more apoptosis in the cortex in the neonatal rats'brain at postnatal day 7 than sevoflurane.They can both significantly promote the expression of MAP1B in the cortex to start the self-reparation.     

急性低压缺氧对大鼠海马CA1区nNOS表达的影响

目的：研究急性低压缺氧对大鼠海马CA1区nNOS表达的影响。方法：用免疫组化ABC法检测在低压舱模拟升空6．5km停留1h和2h后，大鼠海马CA1区内nNOS的表达的变化，并通过计算机图像分析系统进行定量分析。结果：缺氧2h组的nNOS阳性反应细胞面数密度（numerical density on area,NA)和积分光密度值（IOD）均显低于缺氧1h组的和对照组（P＜0．01）；缺氧1h组的NA与对照组无显差异（P＞0．05），但其IOD值显低于对照组（P＜0．01）。结论：急性缺氧条件下，大鼠海马CA1区nNOS表达下降。     

异氟醚对乳鼠海马细胞STAT3表达的影响

目的 观察异氟醚对新生大鼠海马中信号转导及转录活化因子3(signal transducers and activators of transduction 3,STAT3)的影响,探讨其对发育神经元不利影响的机制.方法 新生7日龄SD大鼠12只,雌雄不限.随机分为实验组(I组)和对照组(C组),每组6只.C组吸入氧浓...     

卵巢切除后脑缺血再灌海马CA1区ET-3的表达

OBJECTIVE: To detect the expression of endothelins-3 (ET-3) immunoactivity in hippocampal CA1 of ovariectomied (OVX) mice after ischemia/reperfusion (IR), and to further explore the relationship between estrogen and ET-3. METHODS: Fifty-four adult female mice were randomly divided into 3 groups. 1. IR group: the bilateral common carotid occlusion (BCCO) was carried out for 7 min on the 1st, 3rd, 5th and 14th day of reperfusion. 2. OVX/IR group: firstly the ovariectomy was performed, and after a week, BCCO was carried out for 7 min on the 1st, 3rd, 5th and 14th day of reperfusion (each time spot, n = 6). 3. sham-operated group (n = 6). RESULTS: Few ET-3 positive cells were diffusely distributed in the hippocampal CA1 region in the control group, whereas the expression of ET-3 increased in the experimental groups. The number of ET-3 positive cells significantly increased in the OVX/IR group compared with that of the IR group 1 d after the reperfusion (P < 0.01). It reached the maximum in both the OVX/IR and IR group on the 5th day of the reperfusion. CONCLUSION: Estrogen is involved in the regulation of ET-3 in the early stage of the reperfusion, and probably plays a protective role in the survival of neurons.     

七氟醚对大鼠认知功能的影响

目的:探讨七氟醚麻醉对大鼠认知功能的影响。方法:随机将雌性和雄性鼠平均分成3组,对照组(n=16,S0组)、2%七氟醚组(n=16,S1组)、3%七氟醚组(n=16,S2组),饲养于适宜的环境中。S1组及S2组分别吸入2%、3%七氟醚,2h/d,连续5d;对照组则不吸入七氟醚。停止吸入七氟醚后第1天开始采用Morris水迷宫实验测定大鼠认知功能,4次/d,连续测定5d(T1～5),记录潜伏期、平台象限活动时间与总游泳时间的百分比(Tp/T)及撤去平台后2min内的游泳轨迹。结果:与S0组相比,T1时S2组大鼠训练达标时间长、学习次数多(P<0.05),T2时S1组和S2组大鼠训练达标时间、学习次数差异无统计学意义(P>0.05)。结论:吸入2%七氟烷后大鼠认知功能无明显变化;吸入3%七氟烷后大鼠认知功能障碍。     

铝对大鼠海马CA3区诱发电位的影响

实验在42只乌拉坦麻醉的SD大鼠上进行。用细胞外记录方法引导海马CA3区诱发放电,探讨向CA3区内微量注射不同剂量铝对诱发的群体锋电位(PS)的影响。结果:①不同剂量铝对PS波幅的影响不同,0.1和0.25mol/L AICI_3对PS无明显作用;0.5、1.0和2.0mol/L的AICI_3均可使PS波幅显著减小,且呈剂量-效应关系。②高渗盐水(2.0mol/L)和不同pH值(分别为6.4、3～4和7～8)的等渗盐水分别注入CA3区(均为1μl),诱发的PS幅度均无明显的改变。表明一定剂量的铝具有抑制CA3区PS波幅的作用,铝可能是抑制CA3区的突触传递过程。     

大鼠发育过程中海马CA1区nNOS的表达

目的 :研究出生后不同发育阶段大鼠海马CA1区nNOS的表达及形态学变化 ,分析nNOS的表达与海马神经元的发育、突触的形成及海马学习记忆功能的关系 .方法 :用免疫组织化学方法和图像分析对生后 1,2 ,3,4wk和 3mo龄及老龄 (2 4～ 2 8mo)大鼠海马CA1区nNOS的表达进行定位和定量分析 ,并进行光、电镜形态学检查 .结果 :大鼠海马CA1区nNOS免疫阳性细胞面数密度 :2wk (36 .2± 4 .2 )mm-2 和 3wk (33.1± 4 .1)mm-2 组高于 1wk (2 4 .9± 4 .8)mm-2 ,4wk(2 4 .6± 5 .9)mm-2 ,3mo (2 5 .4± 5 .6 )mm-2 和老龄组 (2 4 .3± 8.3)mm-2 (P <0 .0 1) ,而前两组之间及后 4组之间均无显著差异 (P >0 .0 5 ) .nNOS免疫阳性细胞积分吸光度值 :以 2wk(8.5± 2 .2 )和 3wk (8.1± 1.9)组为最高 ,其次为 4wk (4.9± 0 .5 )和 3mo (5 .2± 0 .9)组 ,1wk(3.3±0 .8)和老龄组 (3.2± 0 .7)最低 (P <0 .0 1) ;2wk和 3wk组之间、4wk与 3mo组之间、1wk和老龄组之间均无显著差异(P >0 .0 5 ) .结论 :NO与海马的发育、突触的形成和成熟以及学习记忆具有密切关系 .     

七氟醚对小鼠空间学习和记忆能力的影响

目的通过Morris水迷宫实验,评价七氟醚麻醉对小鼠空间学习和记忆能力的影响。方法将24只C57BL/6品系小鼠分为麻醉组(n=12)和对照组(n=12),两组小鼠分别给予七氟醚麻醉120 min和吸纯氧120 min,均于次日开始进行Morris水迷宫实验,包括4 d训练和1 d探索实验。训练期记录平均游泳速度、潜伏期和游泳距离。探索期记录穿越平台次数、平台象限滞留时间和平台象限滞留时间百分比,并进行统计学分析。结果训练期第2～4天,麻醉组小鼠潜伏期明显短于对照组(P<0.05);在训练期第2天,麻醉组小鼠的游泳距离也明显短于对照组(P<0.05)。探索实验显示,与对照组比较,麻醉组小鼠平台象限滞留时间和平台象限滞留时间百分比明显增加(P<0.05)。结论七氟醚麻醉具有增强小鼠空间学习和记忆能力的作用。