孕早、晚期接受七氟醚麻醉对大鼠子代大脑神经发育的影响

目的 研究孕早、晚期Wistar大鼠母体接受七氟醚吸入麻醉对子代大脑神经发育的影响。方法 将12只孕鼠按随机数字表法分为孕6d用药组（A组）、孕19d用药组（B组）和对照组（C组）,每组各4只。A、B组分别于孕6d、孕19d时吸入2.4%七氟醚6h,C组饲养于空气条件下。应用Nissl染色法观察仔鼠在出生后第1、14、21天脑组织海马CA1区神经元尼氏体的表达情况。在仔鼠出生后第32天采用Morris水迷宫实验对各组仔鼠学习记忆功能进行测定。结果出生后第1天,B组仔鼠海马CA1区神经元损伤程度明显高于A组及C组仔鼠;出生后第14天,B组仔鼠神经损伤减轻,A组仔鼠神经损伤加重;出生后第21天,B组仔鼠神经损伤程度较轻,A组仔鼠神经损伤较重。出生后第32天,A组和B组仔鼠逃避潜伏期、穿越目标象限次数、穿越平台次数与对照组仔鼠相比均无统计学差异（均P＞0.05）。结论在本实验条件下,孕早、晚期母体接受2.4%七氟醚麻醉对Wistar大鼠子代大脑神经发育的影响随时间变化而改变,并不造成子代远期学习记忆功能异常。     

异氟醚对胎鼠脑原癌基因蛋白Bcl-2/Bax表达及幼鼠空间学习记忆的影响

目的 研究异氟醚麻醉对胎鼠出生后的学习记忆能力,以及对胎鼠大脑海马CA1区和皮质压部后区(Retrosplenial RS)Bcl-2/Bax表达变化的影响.方法 28只孕21 d的大鼠以随机数字表法随机分为异氟醚处理组和对照组,每组n=14.异氟醚组使用1.3%的异氟醚处理6h,对照组只使用30%的氧气和70%氮气混合气.使用水迷宫检测出生后28d的幼鼠空间学习记忆能力.免疫组化研究中,处理后2 h检测胎鼠大脑皮质RS区和海马CA1区Bcl-2和Bax表达的变化.结果 水迷宫实验中,2组隐藏平台试验的逃避潜伏期差异没有统计学意义,但是空间探索试验中异氟醚组在平台所在象限停留的时间明显多于对照组[(42.33±2.31)s,(33.2±2.15)s,t=2.21,P<0.05],差异有统计学意义.异氟醚组海马CA1区和皮质RS区Bcl-2的表达高于对照组,Bax的表达低于对照组,Bcl-2/Bax比值高于对照组[海马CA1区(4.40±0.86),(1.31±0.32),t=3.378,P<0.01;皮质RS区(5.07±1.27),(1.47±0.48),t=2.656,P<0.05],差异具有统计学意义.结论 1.3%异氟醚处理孕21 d的大鼠能改善出生后幼鼠的空间记忆保持能力,并能增加胎鼠大脑皮质RS区和海马CA1区Bcl-2/Bax的比值.     

孕期吸入异氟醚对子代大鼠认知功能及海马GAP-43和NPY表达的影响

目的:探讨大鼠孕期吸入异氟醚对子代认知功能以及海马生长相关蛋白-43(GAP-43)和神经肽Y(NPY)表达的影响。方法:选取孕龄为18 d的SD大鼠12只,随机分为异氟醚处理组和对照组(n=6)。异氟醚组使用1.3%的异氟醚处理6 h,对照组吸入含30%氧气的空氧混合气体。待幼鼠出生4周后,使用水迷宫实验,检测幼鼠空间学习记忆能力。测试结束后,取其海马组织行免疫组织化学染色,观察GAP-43和NPY在两组仔鼠海马CA1区表达的差异。结果:在水迷宫测试中,与对照组仔鼠相比,异氟醚组仔鼠平均逃逸潜伏期时间明显延长(P<0.05)、第三象限活动时间和穿越平台次数明显减少(P<0.05)。异氟醚组仔鼠海马CA1区神经细胞内GAP-43和NPY的表达均较正常对照组明显下降,差异有显著性意义(P<0.01)。结论:1.3%异氟醚处理孕18 d的大鼠6 h可导致仔鼠学习记忆功能降低,这可能与海马CA1区GAP-43和NPY表达下调有关。     

碘缺乏和甲状腺功能减退对大鼠仔鼠海马钙调磷酸酶表达的影响

目的 观察碘缺乏和甲状腺功能减退对大鼠仔鼠海马钙调磷酸酶蛋白表达的影响.方法 健康2月龄雌性Wistar大鼠,交配妊娠后,取孕鼠28只,按体质量随机分成对照组、甲状腺功能减退组和碘缺乏组,甲状腺功能减退组根据饮水中含丙基硫尿嘧啶剂量分为5 ppm组和15 ppm组.每组7只孕鼠.分别于出生后7 d(PN7)、14 d(PN14)和31 d(PN21)时,每组随机取5只仔鼠,灌流固定大脑,进行组织病理切片和免疫组化染色,观察分析海马钙调磷酸酶的表达.结果 PN14和PN21时,在海马CA1和CA3区15 ppm组和碘缺乏组仔鼠海马钙调磷酸酶表达显著高于对照组(P<0.05),而海马DG区则相反.PN7时,各区均几乎观察不到阳性反应产物,各组间蛋白表达无显著差异.结论 碘缺乏和甲状腺功能减退可增加海马CA1和CA3区钙调磷酸酶的蛋白表达.     

条件性恐惧消退早期海马CA1区细胞周期依赖性蛋白激酶5的变化

目的 研究条件性恐惧消退后1周内海马CA1区细胞周期依赖性蛋白激酶5(CDK5)的变化,探索其在恐惧消退中的作用.方法 成年雄性SD大鼠42只,采用完全随机方法 分为正常组(6只),消退对照组(3组,每组6只)和24h消退组(3组,每组6只).在消退训练后不同时间(消退后第1,3,7天)进行消退保持测试.采用免疫组织化学方法 检测各组大鼠海马CA1区CDK5表达情况,用图像分析软件计数CDK5免疫反应阳性细胞.结果 (1)大鼠在恐惧消退后的第1,3,7天消退保持成绩整体呈现逐渐增加的趋势.24h消退组在消退训练后第1天[(15.62±10.28)%]、第3天[(20.58±7.79)%]的不僵立时间百分比均比正常组[(75.60±2.51)%]显著降低(P＜0.01);在消退训练后第7天,24h消退组[(71.04±11.65)%]的消退保持成绩比消退对照组[(35.48±12.37)%]显著增加(P＜0.01).(2)24h消退组CDK5阳性细胞数在消退后第1天[(24.94±5.20)个]、第3天[(32.25±6.14)个]、第7天[(33.28±6.56)个]均比正常组[(15.60±2.90)个]显著升高(P＜0.01);24h消退组在消退后3d、7 d,比消退对照组[(25.09±4.83)个,(26.70±4.57)个]显著升高(P＜0.01;P＜0.05);24h消退组内,1 d组显著低于3d组(P＜0.05)和7d组(P＜0.01).结论 在恐惧消退训练后1～7d内,海马CA1区CDK5可能参与了恐惧消退早期的保持.     

不同浓度异氟醚对胎鼠海马区Caspase-3表达及血浆S100β水平的影响

目的 本研究探讨不同浓度的异氟醚对胎鼠海马区Caspase-3表达及血浆S100β水平的影响.方法 18只健康清洁级SD孕21 d大鼠随机数字表法分成对照组(C组)、1.3%异氟醚组(1.3% ISO组)、3%异氟醚组(3%ISO组).C组不给予任何药物,1.3%ISO、3%ISO组分别吸入1.3%、3%异氟醚1 h,术中呼吸机控制呼吸,持续动态监测动脉血压,在模型建立完毕时(基础值)、30min后、1 h时抽取股动脉血检测血糖、血气.6h后3组孕鼠开腹随机取两只胎鼠,抽取胎鼠血液行S100β检测、通过免疫组化检测胎鼠海马CA1区Caspase-3阳性标记神经元的方法判断凋亡的情况.结果 与对照组胎鼠血浆S100β[(1.48±0.08)μg/L]比较,1.3%ISO组胎鼠[(1.53±0.12)μg/L]稍有升高,但两者间的差异无统计学意义,3%ISO组胎鼠[(3.12±0.15)μg/L,P＜0.05]明显升高,差异有统计学意义.与Con组胎鼠海马CA1区Caspase-3阳性标记的神经元数量比较[(33±4)个/mm2],1.3%ISO组胎鼠无明显改变[(31±5)爪/mm2],3%ISO组胎鼠明显增多[(75±7)个/mm2,P＜0.05],差异有统计学意义.结论 异氟醚对胎鼠脑发育的影响存在浓度依赖性,宫内暴露于3%异氟醚1h可诱发脑损伤,导致胎鼠血浆S100β浓度升高、诱发海马CA1区神经元发生凋亡;暴露于低浓度1.3%异氟醚1h不足以诱发脑损伤.

Abstract：

Objective To investigate the effects of different concentrations of isoflurane on the caspase-3 expression in the hippocampus and S100β level of plasma in fetal rats. Methods 18 pregnant rats at gestational day 21 were divided into control group, 1. 3% isoflurane group,3% isoflurane group. Rats in the control group spontaneously breathed 100% oxygen for 1 h. Rats in the treatment groups breathed 1.3% or 3% isoflurane in 100% oxygen through an endotracheal tube, with mechanical ventilation for 1 h. Rat pups were delivered by cesarean section 6 h after treatment, and fetal blood was sampled from the left ventricle of each fetal heart and evaluated for S100β. Fetal brains were then evaluated for apoptosis, using caspase-3 immunohistochemistry in the CA1 region of the hippocampus. Results Compared to the control group ((1. 48 ± 0. 08) μg/L) and the 1. 3% isoflurane group( (1.53 ±0. 12)μg/L) ,the 3% isoflurane group showed significantly higher level of S100β( (3. 12 ±0. 15) μg/L, P＜0.05) . There was no differences in densities of caspase-3-positive cells between the control ((33 ±4) cell/mm ) and 1.3% isoflurane groups((31 ±5)cell/mm2). Compared to 1.3% isoflurane,isoflurane at a concentration of 3%((75 ± 7) cell/mm2, P＜0.05) for lh increased neurodegeneration in the hippocampal CA1 area in the developing brain of fetal rats. Conclusion Isoflurane can dose-dependently induce brain damage. Isoflurane at a concentration of 3% for lh can induce apoptosis in the hippocampal CA1 area and increase S100β levels of fetal rats.     

围生期营养不良对仔鼠学习记忆功能的影响

目的研究围生期营养不良对仔鼠学习记忆的影响,探讨其可能的机制。方法怀孕14 d的SD大鼠分为实验组(半量饮食组)与对照组(正常饮食组),至哺乳期结束(仔鼠出生21 d)后实验组和对照组的仔鼠均正常饮食。测量仔鼠出生时和成年时的体质量。采用Morris水迷宫测试仔鼠的学习、记忆功能。免疫组化检测DNA氧化损伤(8-OhdG)和Western blot检测DNA氧化损伤修复(OGG1)指标。结果实验组仔鼠出生和成年后体质量均小于对照组[(4.66±0.28)g vs(6.59±0.16)g,(187.66±22.67)g vs(279.50±18.73)g,P<0.01];Morris水迷宫实验中,空间探索实验实验组较对照组潜伏时间长[(37.21±4.93)s vs(16.41±5.21)s,P<0.05],穿越平台次数较少[(6.57±1.22)vs(13.12±2.34),P<0.05],跨越目标象限时间占整个游泳的时间百分率低[(32.75±4.58)%vs(60.31±6.74)%,P<0.01],Morris水迷宫实验表明实验组学习记忆功能均比对照组下降;8-OHdG的表达在幼年期(22 d)和成年期(90 d)实验组均比较高,与对照组相比具有统计学意义[(18.01±0.05)vs(5.77±0.03),(21.15±0.10)vs(10.81±0.08),P<0.05];OGG1的表达在幼年期(22 d)和成年期(90 d)实验组均比较低,与对照组相比差异具有统计学意义[(0.32±0.08)vs(0.81±0.06),(1.57±0.10)vs(2.78±0.53),P<0.05]。结论围生期营养不良对仔鼠成年期的学习记忆功能产生影响,其机制可能与DNA氧化损伤、修复调节的障碍有关。     

饮水砷暴露对子代雌性大鼠海马组织神经生长因子、神经生长相关蛋白mRNA表达的影响

目的 探讨孕期和哺乳期大鼠亚砷酸钠暴露后,对第一子代雌性大鼠海马神经生长因子(NGF)和神经生长相关蛋白-43(GAP-43)mRNA表达的影响。 方法 12只雌鼠于受孕后第6 d开始以自由饮水方式分别暴露于0、10、50、100 mg/L NaAsO₂水溶液,连续染毒直到仔鼠出生后第21 d,取子代雌性大鼠脑海马组织进行HE、尼氏体染色观察海马CA1、CA3、DG区神经元的形态及数目改变;应用RT-PCR检测各组仔鼠海马NGF、GAP-43 mRNA的表达。 结果 HE结果显示对照组仔鼠CA1、CA3区海马神经元细胞结构正常,各染砷组仔鼠可见海马神经元边缘欠清晰,胞体皱缩,有核固缩等凋亡征象。尼氏体染色:对照组海马神经元胞浆富含尼氏体,随着染毒剂量的增加,尼氏体减少,其中以CA1区损伤最为明显。RT-PCR结果显示,各剂量组仔鼠NGF、GAP-43 mRNA表达降低,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。各砷暴露组之间NGF、GAP-43 mRNA的表达随砷剂量增高而下降(P均<0.05)。 结论 大鼠孕期和哺乳期砷暴露,可以损伤第一子代雌性大鼠海马神经元细胞,抑制海马区NGF、GAP-43 mRNA的表达,从而损害学习记忆能力。     

围生期双酚A暴露对雄性子代大鼠学习记忆能力的影响

目的 研究围生期双酚A暴露对雄性子代大鼠探索行为及学习记忆能力的影响.方法 自妊娠11 d开始直至产后7 d,一组母鼠每I:1皮下注射10μg/kg双酚A(BPA),另一组母鼠注射等量的BPA的溶剂.在大鼠出生后21 d进行开场实验、水迷宫实验,同时制作海马脑片,用电生理学方法 检测BPA暴露对海马CA1区LTP诱导的影响.结果 BPA模型组大鼠穿越格子数[(70.35±13.56)次]明显高于对照组[(29.32±14.12)次,P＜0.05];BPA模型组大鼠站立次数、理毛次数[分别为(38.52±6.52)次,(6.26±2.78)次]均较对照组大鼠显著增加[分别为(10.35±8.38)次,(2.67±1.46)次,P＜0.05].Morris水迷宫实验中,BPA模型组大鼠寻找平台的潜伏期[(55.22±5.78)s]较对照组显著延长[(21.22±2.65)s,P＜0.05];高频刺激后对照组海马CAI区可诱导稳定的LTP[(162.13±10.12)%],BPA模型组大鼠海马CA1区LTP诱导障碍[(101.05±7.58)%,P＜0.05].结论 围生期BPA暴露损伤了雄性子代大鼠的学习记忆能力,其机制可能和突触前功能受损有关.     

壬基酚对雄性仔代学习记忆和海马超微结构的影响

目的 探讨母体壬基酚暴露对后代学习记忆的影响.方法 受试雌鼠与雄鼠同笼,见阴栓确定受孕后分组试验:将SD大鼠随机分为4组(对照组、50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg壬基酚组),每组6～7只,妊娠第9～15天灌胃壬基酚.用Morris水迷宫和跳台的方法观察壬基酚对仔鼠学习记忆的影响;海马组织透射电镜观察其病理变化.结果 NP200mg/kg组仔鼠水迷宫中逃避潜伏期延长(61.14±5.92)s,错误次数增加(4.57±1.13)次;跳台实验中反应时间延长(37.5±6.3)s,步下潜伏期缩短(97.8±11.0)s,错误次数增加(3.0±1.4)次,阴性对照组分别为(35.85±4.29)s,(2.57±0.97)次,(27.1±3.8)s,(172.0±89.2)s,(0.9±0.7)次)],与对照组比较,差异具有显著性(P<0.05).NP200mg/kg剂量组仔鼠海马组织电镜下见线粒体肿胀呈空泡样变,染色质浓缩成块状聚集在核周围.结论 壬基酚官内暴露可导致仔鼠空间学习记忆障碍和海马超微结构改变.     

大鼠海马-隔核投射及隔核毁损对海马Ghrelin调控学习记忆的影响

目的 观察大鼠海马神经元向隔核投射,探讨大鼠隔核对海马Ghrelin调控学习记忆能力的影响.方法 采用荧光金(FG)逆行追踪方法,观察大鼠海马神经元向隔区投射;采用立体定向电极毁损大鼠隔核,海马CA1区微量注射Ghrelin,利用跳台实验及Morris水迷宫进行定位航行实验和空间搜索实验,探讨大鼠隔核毁损后海马Ghrelin对大鼠学习记忆的影响.结果 隔核注射FG,7d后可见海马CA1,CA2,CA3区均有大量标记FG的神经元;海马CA1区注射Ghrelin可明显增加大鼠学习记忆能力,表现为跳台实验中大鼠从安全台跳下的潜伏期明显延长[(3.2±0.9)s,(6.9±1.1)s,P＜0.05],5min内大鼠遭受电击次数明显减少[(1.8±0.4)次,(0.8±0.1)次,P＜0.05],Morris水迷宫实验中大鼠找到平台的潜伏期明显缩短[(19.5±3.2)s,(10.5 ±2.1)s,P＜0.05],但隔核毁损后,可明显减弱大鼠认知作用,表现为跳台实验中大鼠从安全台跳下的潜伏期明显缩短[(3.9±0.8)s,(1.8±0.5)s,P＜0.05],5min内大鼠遭受电击次数明显增加[(1.6±0.3)次,(4.0±0.7)次,P＜0.05],Morris水迷宫实验中大鼠找到平台的潜伏期明显延长[(18.0±2.5)s,(32.8±5.5)s,P＜0.05].结论 海马CA1区Ghrelin可提高大鼠学习记忆能力,而该作用可能与隔核-海马间神经通路有关.     

七氟醚对幼鼠获取空间学习记忆能力及海马pERK1/2表达的影响

目的探讨七氟醚对幼鼠获取空间学习记忆能力及海马p ERK1/2表达的影响。方法出生后14 d SD幼鼠54只,随机分为对照组(C组)、七氟醚5%组(Sevo组)、假手术组(Sham组)各18只。C组不做任何处理,Sevo组幼鼠暴露于5%的七氟醚4 h,Sham组幼鼠吸入氧气4 h,1周、3周、6周后于上午8:00~11:00应用Morris水迷宫对幼鼠进行7 d的行为学观察,记录逃避潜伏期,行为学结束后随即取出6只幼鼠用免疫组化法测定海马CA1区神经元p ERK1/2的表达。结果与Sham组比较,Sevo组逃避潜伏期和探索时间明显延长(P<0.01),Sevo组海马CA1区神经元p ERK1/2的表达明显减少(P<0.01);Sham组与C组逃避潜伏期时间差异无统计学意义,海马CA1区神经元p ERK1/2的表达之间差异无统计学意义。结论七氟醚对幼鼠获取空间学习记忆能力的影响与抑制海马p ERK1/2表达有关。     

银杏叶提取物对半乳糖致痴呆大鼠海马CA1区Caspase-9P35表达的影响

目的 观察银杏叶提取物(Extract ginkgo biloba,EGb)对D-半乳糖(D-Galactose,D-Gal)致痴呆模型大鼠海马CA1区Caspase-9P35( Cysteinyl aspartate-specific protease)蛋白表达的影响,探讨EGb改善认知能力的可能机制.方法 将48只SD大鼠随机分为6组,腹腔注射D-Gal建立痴呆模型,以不同剂量的EGb进行干预.以TUNEL染色观察海马CA1区神经元凋亡;以免疫组化和Western Blot法检测大鼠海马CA1区Caspase-9P35表达.结果 半乳糖组较空白对照组海马CA1区TUNEL阳性细胞[(37.8±1.3)个,(0.8±0.2)个]及Caspase-9P35[(37.6±1.8)个,(6.2±1.3)个]表达明显增加(P＜0.01);EGb中、高剂量组较半乳糖组海马CA1区TUNEL阳性细胞[(17.6±0.9)个,(9.8±0.8)个,(37.8±1.3)个]及Caspase-9P35表达[(28.6±1.3)个,(25.0±1.6)个,(37.6±1.8)个]不同程度降低(P＜0.01);治疗组TUNEL阳性细胞及Caspase-9P35蛋白表达较半乳糖组有所降低,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论 EGb能改善D-Gal致痴呆大鼠学习记忆能力,其作用机制可能与降低Caspase-9P35活性,抑制海马CA1区神经元凋亡有关,且疗效与剂量有关.EGb预防痴呆的效果比治疗效果更优.     

新生大鼠反复惊厥对脑内γ-氨基丁酸A受体α1和γ2亚单位表达的长期影响

目的:研究新生期反复惊厥对大鼠脑内γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid, GABA)A受体α1和γ2亚单位表达的长期影响,及成年期记忆功能和惊厥阈的长期改变.方法:将生后7天(postnatal 7 d,P7)的SD大鼠随机分成两组,每组16只,惊厥组每日吸入三氟乙醚诱导惊厥发作1 次,每次持续30 min,连续6 d;对照组同样操作但不吸入三氟乙醚.两组大鼠于出生后第61～65天(P61～P65)行Morris水迷宫实验,于P75时给予大鼠腹腔注射戊四唑测定大鼠的惊厥阈.随即处死大鼠,分别采用免疫组化方法和RT-PCR方法观察大鼠大脑皮层及海马GABA A受体(GABAAR)α1和γ2亚单位表达的变化.结果:惊厥组大鼠在P64的寻找水下平台时间[(82 424±35 622)ms]较对照组[(40 712±29 467)ms]明显延长(P=0.001).在P65,惊厥组大鼠120 s内穿越原平台位置次数[(1.2±0.9)次]较对照组 [(3.1±1.3)次]明显减少(P＜0.001).惊厥组大鼠注射戊四唑后发生惊厥的潜伏期[(1 487±662) s]与对照组[(1 841±648)s]比较差异无统计学意义(P=0.137).惊厥组大鼠GABAAR α1亚单位免疫化学累积光密度在顶叶及海马CA1、 CA2和CA4区较对照组明显降低(P＜0.05);惊厥组大鼠GABAAR γ2亚单位免疫化学累积光密度在额叶和海马CA4区较对照组明显降低(P＜0.05).惊厥组大鼠大脑皮层GABAAR γ2亚单位和海马区α1亚单位mRNA的表达较对照组明显减少(P＜0.05).结论:新生大鼠反复惊厥可造成脑内GABAAR α1和γ2亚单位表达的长期改变,这种改变可能与新生期反复惊厥导致的成年期记忆障碍相关.     

尼莫地平孕期干预对生长受限仔鼠神经系统损伤的保护作用

[目的]探讨钙离子拮抗剂孕期干预能否减轻生长受限仔鼠神经系统损伤.[方法]将40只SD大鼠按妊娠先后顺序随机分为3组:①A组:不缩窄子宫动脉,不予尼莫地平治疗;②B组,缩窄子宫动脉,不予尼莫地平治疗;③C组:缩窄子宫动脉,术后予尼莫地平治疗.通过TUNEL法检测各组新生仔鼠皮层和海马CA1区神经元凋亡;Morris水迷宫法检测出生21 d后各组仔鼠学习记忆功能.[结果]①3组仔鼠皮层神经细胞凋亡率差异有统计学意义(F=55.63,P<0.01).其中C组仔鼠平均为(2.98±0.54)个/HP,低于FGR组(5.05±1.17)个/HP(P<0.01),但高于对照组(2.30±0.69)个/HP(P<0.05).②3组仔鼠海马CA1区神经元凋亡率差异有统计学意义(H=34.88,P<0.01).其中C组中位数为0.833(0.332)个/HP,低于B组1.5(0.75)个/HP(P<0.01),高于A组0.5(0.333)个/HP(P<0.01).③Morris水迷宫学习记忆功能检测,3组仔鼠5 d的训练差异有统计学意义,F(组间)=44.052,P<0.01;F(时间)=7153.846,P<0.01).C组仔鼠找到平台的时间较B组短(P<0.05),但较A组长(P<0.05)[结论]钙离子拮抗剂尼莫地平孕期治疗能对生长受限仔鼠神经系统损伤有保护作用.     

JNK信号通路在异氟醚诱导新生大鼠海马神经细胞凋亡的作用

目的 探讨c-Jun氨基末端激酶(the c-Jun N-terminal kinase,JNK)信号通路对异氟醚诱导新生大鼠海马神经细胞凋亡以及对磷酸化JNK、Bcl-2和Bax蛋白表达的影响.方法 48只出生后7d(Py7)的新生大鼠按照随机数的方法随机均分为DMSO对照组(D组)、JNK抑制剂SP600125对照组(SP30组)、异氟醚+DMSO组(Iso+D组)和异氟醚+SP600125组(Iso+ SP30组).对照组吸入空气,异氟醚组吸入1.1％异氟醚4h.麻醉前20 min,幼鼠根据分组分别侧脑室注射SP600125 30 μg或者12％ DMS0 5μl.麻醉结束后6h,部分幼鼠灌注取脑,TUNEL荧光染色检测脑海马CA1区神经细胞凋亡(n=6);部分幼鼠取新鲜脑皮质,Western blotting法检测磷酸化JNK、Bcl-2和Bax蛋白表达的变化(n=6).组间资料的比较采用单因素方差分析.结果 幼鼠海马CA1区的TUNEL阳性细胞数比较,Iso+D组[(135.72±21.26)个/mm2]比D组[(24.07±1.35)个/mm2]增加5倍(P＜0.01);与Iso+D组相比,Iso+ SP30组[(42.49±5.56)个/mm2] CA1区的TUNEL阳性细胞数降低了84％ (P＜0.05).Iso+D组磷酸化JNK P46表达比D组增加44.1％ (P＜0.01),而Iso+ SP30组显著降低了磷酸化JNK P54 (p＜ 0.05)和P46(P＜ 0.01)的表达.Iso+D组Bax表达比D组增加1.5倍(P＜0.05),Bcl-2蛋白表达比D组下降42.2％ (P＜0.05);而Iso+ SP30组Bax表达下降(P＜0.05),Bcl-2蛋白表达上调(P＜0.01).D组与SP30组TUNEL阳性细胞数,磷酸化JNK,Bcl-2和Bax蛋白表达差异均无统计学意义.结论 JNK信号通路激活促进了异氟醚诱导发育期大鼠海马神经细胞凋亡,SP600125通过维持Bcl-2,降低Bax表达产生抑制凋亡作用.     

氟西汀和阿米替林对大鼠强迫游泳中的行为结构及体质量的影响

目的观察氟西汀与阿米替林对大鼠强迫游泳试验中各种行为表现及体质量的影响.方法大鼠随机分成四组:氟西汀组,阿米替林组,蒸馏水对照组及空白对照组.动物每周给药前称重,氟西汀及阿米替林按10 mg/kg连续腹腔注射16 d(1次/d).给药第15天进行强迫游泳试验第一阶段15 min的预游,第16天同样时间进行第二阶段5min的游泳测试,记录5min内出现不动行为的潜伏期和不动、游泳及攀抓行为的时间.结果①第1周[(30±13)g,(43±12)g,P＜0.01]、第2周[(37±11)g,(55±8)g,P＜0.01]氟西汀组体质量增长明显低于蒸馏水对照组,阿米替林组在第1周体质量增长明显高于蒸馏水对照组[(58±7)g,(43±12)g,P＜0.01],蒸馏水对照组与空白对照组体质量增长比较差异无显著性,各组动物体质量自身前后增长速率比较差异无显著性.②氟西汀组和阿米替林组不动行为的潜伏期明显长于蒸馏水对照组[(153.6±38.4)s,(108±12.2)s,P＜0.01;(126.3±20)s,(108±12.2)s,P＜0.05],不动时间明显短于蒸馏水对照组[(93±28.6)s,(142.1±22.9)s,P＜0.01;(85.9±18.5)s,(142.1±22.9)s,P＜0.01].氟西汀组游泳时间明显长于蒸馏水对照组和阿米替林组[(134.0±25.1)s,(82.9±13.3)s,P＜0.01;(134.0±25.1)s,(87.6±17.7)s,P＜0.01],阿米替林组攀抓时间明显长于蒸馏水对照组和氟西汀组[(125.6±24.7)s,(71.5±13.5)s,P＜0.01;(125.6±24.7)s,(73.5±21.5)s,P＜0.01].结论①氟西汀能一定程度的抑制大鼠体质量增长,而阿米替林在给药初期能促进大鼠体质量增长.②慢性给予氟西汀和阿米替林能不同程度地影响大鼠强迫游泳中的行为构成,发挥抗负性心理应激作用.     

利多卡因对七氟醚致发育期大鼠认知功能的影响

目的 通过观察利多卡因对七氟醚致发育期大鼠认知功能的影响,进一步研究利多卡因在调节七氟醚致发育期大鼠海马组织自噬中的作用.方法 清洁级健康SD大鼠36只,雌雄不限,7日龄,按随机分组原则分为三组(n=12).七氟醚+利多卡因组:(S+L组)出生第7-9 d腹腔注射利多卡因10 mg/kg后行七氟醚暴露;对照组:(C组)...     

七氟醚预处理对局灶性脑缺血再灌注后大鼠空间学习与记忆能力的影响

目的:目前,对七氟醚的脑保护功能研究较多,其对认知功能方面的研究相对较少,文中观察七氟醚预处理对局灶性脑缺血再灌注后大鼠空间学习与记忆的影响. 方法:雄性SD大鼠24只,随机分成假手术(C)组,缺血再灌注组(I/R)和七氟醚预处理组(S),每组8只.采用线栓法大脑中动脉阻断前脑血供1h,拔出栓线给予再灌注,七氟醚预处理组术前吸入七氟醚1h,呼气末七氟醚浓度维持在1.0(2.4%)肺泡最低有效浓度(MAC).再灌注72h后利用Morris水迷宫测量术后大鼠空间学习与记忆的能力,用免疫组织化学法测定大鼠海马CA1区胆碱乙酰转移酶(ChAT)的变化. 结果:七氟醚预处理组大鼠逃避潜伏期明显短于缺血再灌注组(P<0.05),在记忆保留实验中七氟醚预处理组大鼠穿越平台次数和平台所在象限探索时间明显多于缺血再灌注组(P<0.05),海马CA1区ChAT阳性细胞的数目七氟醚预处理组也明显多于缺血再灌注组(P<0.05). 结论:1.0 MAC七氟醚预处理1h可能通过保护CA1区胆碱能神经元,对局灶性缺血再灌注大鼠的空间学习与记忆有明显的改善作用.     

L-NAME对围生期仔鼠的毒性不良反应

目的 研究N-硝基-左旋精氨酸甲酯(N-nitro-L-arginine methyl ester, L-NAME)对围生期仔鼠的毒性不良反应,为L-NAME建立动物模型寻找合适剂量提供理论依据。方法 通过给孕鼠灌胃的方法使围生期仔鼠接受不同剂量L-NAME(分为低剂量组、中剂量组、高剂量组)或生理盐水(对照组),观察仔鼠生长发育情况,统计孕鼠产仔数、仔鼠畸形情况、出生体重等。结果 (1)低剂量组和中剂量组孕鼠的产仔数较对照组差异无统计学意义[(11.40±5.60)只、(8.00±3.22)只vs.(10.30±2.23)只,P=0.551、0.172],高剂量组产仔数较对照组显著降低,差异有统计学意义[(4.78±2.82)只vs.(10.30±2.23)只,P=0.001]。(2)低剂量组与中剂量组间畸形率差异无统计学意义(P>0.05),高剂量组畸形率显著高于中剂量组与低剂量组(P=0.000)。(3)各组间仔鼠出生体重差异无统计学意义(P>0.05)。结论 (1)L-NAME会引起新生鼠产生先天肢体畸形,但不影响出生体重。(2)大剂量L-NAME会导致孕鼠产仔率降...