MRSA的随机扩增多态DNA分型研究

目的：应用随机扩增多态性DNA技术（RAPD），对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）进行基因分型研究，以确定医院内是否存在MRSA流行。方法：收集我院临床分离的40株MRSA，采用RAPD技术进行同源性分析。结果：40株MRSA经电泳可得到1～11条片段，分为6个基因型。结论：RAPD分型技术简便、快速，在医院感染流行病学调查中具有较大应用价值。     

ICU耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA)感染的调查分析和预防对策

目的 通过对ICU MRSA感染进行流行病学调查,并对临床分离MRSA和环境微生物学监测MRSA进行耐药谱分析,探讨同源性,依据分析信息做好预防和控制措施.方法 对2008年11月1日至2009年1月30日ICU病区感染MRSA的18例患者及医院环境进行了流行病学调查分析.结果 ICUMRSA院内感染占总感染的35.3%.且环境中空气、工勤人员、陪护人员、护士共151 份标本培养出MRSA9株,通过耐药谱分析显示细菌具有高度同源性.结论 此次MRSA感染为局部暴发流行,医院务必加强环境监控,防止交叉感染,严格无菌侵入性操作和抗生素的使用原则,从而减少MRSA院内感染的发生.     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌同源性分析及耐药性研究

目的对临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)进行耐药情况和分子流行病学监测,探讨院内MRSA的流行趋势。方法收集我院2009年1月~2011年6月临床标本分离的MRSA菌株60株;采用Microscan WalkAway 40进行菌株鉴定,同时对所有金黄色葡萄球菌进行药物敏感性分析;采用脉冲场凝胶电泳技术对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌进行分子分型。结果共收集60株MRSA菌株,其中17株被认为是可疑社区获得(CAMRSA),43株被认为是医院获得(HA-MRSA)。所有菌株均对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺、呋喃妥因和奎奴普丁/达福普汀敏感,未出现耐药菌株。CA-MRSA与HA-MRSA对左旋氧氟沙星和利福平的敏感性有明显差异。临床分离的MRSA菌株PFGE分型较为分散,共分为13种型别,每种型别的菌株数分别为2~6株不等,未出现大范围的院内流行克隆。结论本院收集的临床分离的MRSA菌株多重耐药性严重,其中CA-MRSA相对HAMRSA敏感性稍高。所有金黄色葡萄球菌未出现糖肽类抗菌药物耐药。MRSA菌株未出现大范围的院内流行株,但仍应加强院内感染流行控制。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌基因多态性分型研究

目的研究耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的基因多态性分型特征，为控制感染提供分子流行病学依据。方法利用一条10bp随机引物，建立随机引物多态性（RAPD）分析方法，并利用这一方法对44株MRSA进行基因分型的研究。结果44株MRSA中有30株产生RAPD指纹图谱，经电泳得到2．8条片段，可分为5个型，其中Ⅲ型菌株占50％。结论通过RAPD分型研究，可了解MRSA的基因型流行特征，为控制感染提供分子流行病学依据。     

金黄色葡萄球菌RAPD基因分型研究

目的了解医院内金黄色葡萄球菌RAPD基因分型,分析MRSA的流行传播情况。方法应用K-B纸片扩散法和随机多态性扩增DNA技术（Randomly amplified polymorphic DNA,RAPD）对医院分离的金黄色葡萄球菌进行MRSA鉴定和基因分型。结果 57株金黄色葡萄球菌中有MRSA31株,经RAPD扩增后,扩增产物在2~6条带之间,通过聚类分析57株菌产生10个基因型。结论Ⅵ型为本院金黄色葡萄球菌的流行优势基因型,不同来源菌株基因型分布有明显差异。RAPD分型技术简便、快速,在医院感染流行病学研究具有很大的应用前景。     

医院获得性肺炎的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌基因多态性研究

目的 探讨引起医院获得性肺炎(HAP)的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的基因多态性.方法 2007年1月至2008年1月上海交通大学医学院附属新华医院住院诊断为医院获得性MRSA肺炎患者74例,对所得82株菌株进行随机扩增DNA的多态性(RAPD)基因分型.结果 82株MRSA经电泳得到2～15条片段,经聚类分析可分为11个基因型.从重症监护室(ICU)病例中分离所得的菌株,主要为Ⅲ、Ⅵ型和Ⅶ型(32.56%、30.23%和13.95%).从老年科、急诊科和呼吸科病例中分离所得的菌株,除有各自相对独立的基因型外,同时还有与ICU所得菌株重叠的基因型存在.其余临床科室病例所分离的MRSA菌株数量较少,分布也较分散与独立.暴发和聚集性病例共占48.65%(36/74),所有暴发病例均发生于ICU病区内.结论 院内获得性MRSA肺炎易于播散,特别是在ICU可发生小范围的暴发.随机扩增DNA的多态性分型对及早识别高危患者、预防MRSA在院内的播散具有价值.     

ICU多重耐药鲍曼不动杆菌的耐药性和同源性分析

目的通过对重症监护病房（ICU）的多重耐药鲍曼不动杆菌进行同源性分析,进行院内感染的基线调查,并分析其耐药谱特征,为临床防治和控制院内感染提供依据。方法测定17种抗菌药物对62株鲍曼不动杆菌的最低抑菌浓度（MIC）,并采用随机扩增多态性DNA（RAPD）技术分析其耐药株的同源性。结果有16株鲍曼不动杆菌对头孢菌素类、氨基甙类和氟喹若酮类等抗菌素均显示出较高水平的多重耐药性;其中4株RAPD分型显示有高度同源性。结论分离自ICU的鲍曼不动杆菌多重耐药率高达21％,且大多数菌株有高度同源性。因此建立全面的药敏谱和RAPD基因分型体系,加强鲍曼不动杆菌耐药监测,为及时找到感染源头、有效控制医院感染提供依据。     

铜绿假单胞菌医院感染流行病学分子研究及基因分型

目的 建立随机扩增多态性DNA(RAPD)基因分型方法检测铜绿假单胞菌(PA),调查铜绿假单胞菌医院感染流行病学的情况,为控制院内感染提供直接可靠的参考依据.方法 对2008～2009年分离的180株铜绿假单胞菌进行统计分析其临床分布;通过抗生素敏感性试验进行抗菌谱分型;再采用PAPD基因分型方法进行分析.结果 标本主要来自ICU、烧伤科、呼吸内科等.从痰液标本中分离的铜绿假单胞菌占58.9％,其次伤口分泌物标本占18.9％、中段尿16.7％,其它类型标本占5.5％.抗菌谱分型分为5型.180株铜绿假单胞菌用RAPD分型共得178株,分型率98.9％(178/180),分为9种类型:Ⅰ～Ⅸ.结论 RAPD分型技术对铜绿假单胞菌临床分离株分型率较高;同一抗菌谱型的基因型可能不同,同一基因型的抗菌谱也可能不同.     

医患鼻前庭携带耐甲氧西林金黄色葡萄球菌与医院感染菌同源性的研究

目的 探讨医院医务人员和住院患者鼻前庭带耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的相互关系和对发生与控制医院感染的影响。方法 对本院发生金葡菌感染较多的某科医务人员和住院1周以上患者的鼻前庭进行采样,常规方法进行金葡菌鉴定和MRSA确认。将医患鼻前庭以及肺炎患者痰中分离出的MRSA菌株,进行随机引物扩增多态DNA（RAPD）检测,将RAPD指纹图输入凝胶成像分析系统,经计算机处理,运用RAPD软件（Quantity one 4．4．0 Bio-Rad）进行同源性分析。判断医患鼻前庭携带MRSA的相关性及其与MRSA医院感染的相关性。结果 RAPD聚类分析,基因同源性较高的可分为5型,医患之间、患者之间鼻前庭以及3株MRSA院内肺炎与其本人鼻前庭所携带的MRSA有较高的同源性。结论 MRSA在鼻前庭较的定植或携带,可通过患者、医务人员的移动发生病室内、病室间的患者之间和医患之间的传播或感染。     

皮肤软组织感染耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCC mec分型和同源性分析

目的 对从皮肤软组织感染(SSTI)患者中分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)进行葡萄球菌染色体mec盒(SCC mec)分型和同源性分析,并了解其耐药情况,为规范合理使用抗生素和医院感染控制提供实验室依据.方法 收集从SSTI患者中分离的44株MRSA,采用药敏纸片扩散(K-B)法和Vitek 2 Compact仪器法进行抗菌药物敏感性试验,采用普通PCR检测mec A基因,多重PCR进行SCC mec基因分型,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术进行同源性分析.结果 44株MR-SA通过普通PCR检测均含有mec A基因,多重PCR共分出Ⅱ、Ⅲ、Ⅳa3种SCC mec基因型别,Ⅱ型5株(11.36％),Ⅲ型12株(27.27％),Ⅳa型8株(18.18％),未分型19株(43.18％).MALDI-TOF MS将44株MRSA分为两大簇.结论 SSTI患者分离的MRSA以SCCmec Ⅲ型为主,通过SCCmec基因分型和MALDI-TOF MS技术结合,为不同菌株间的同源性分析提供依据,并了解特定地区MRSA的分子生物学和流行病学特征.     

重症监护室多重耐药鲍曼不动杆菌院内感染暴发的调查分析

目的对分离自重症监护室(ICU)患者及环境中的鲍曼不动杆菌进行同源性分析,判断ICU是否存在院内感染暴发流行。方法使用贝克曼Microscan Walkaway 40 plus鉴定及药敏分析仪对分离自ICU患者及环境中的鲍曼不动杆菌进行鉴定及抗菌药物敏感性试验,采用肠杆菌科基因组间重复序列(ERIC-PCR)对分离到的鲍曼不动杆菌进行同源性分析,结合流行病学调查结果,寻找导致院内感染暴发的原因。结果从ICU患者及环境中共分离出20株鲍曼不动杆菌,其中19株为多重耐药菌,1株为泛耐药菌。20株鲍曼不动杆菌共分为3型(A-C型),其中17株属于C型。结论本次ICU多重耐药鲍曼不动杆菌院内感染暴发流行由C型引起,含有多重耐药鲍曼不动杆菌的气溶胶可能是引起此次院内感染暴发流行的原因。     

金黄色葡萄球菌医院感染分子流行病学研究

目的：研究金黄色葡萄球菌（SA）医院感染的分子流行病学特点。方法：收集我院2000－04／11住院患者中分离的SA，调查临床资料，用脉冲场凝胶电泳（PFGE）对医院感染株分型。结果：31例患者发生医院感染，分离出34株SA。菌株经PFGE分为24型，散布于各病房，在ICU、肿瘤、神外、皮肤科病房有小型传播。医院感染的聚集性更多见于MRSA。结论：医院感染以多克隆散发为主，聚集性发生多见于MRSA。FPGE对SA医院感染的流行病学调查是一种较理想的分型方法。     

神经外科病房金黄色葡萄球菌的耐药性及MRSA基因多态性研究

目的了解某院神经外科病房金黄色葡萄球菌的耐药性及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)分子流行病学特点。方法采用纸片扩散法检测2008-2011年从神经外科住院患者分离的金黄色葡萄球菌254株的耐药性,MRSA的鉴定采用头孢西丁纸片扩散法和检测femA、mecA基因的双重PCR方法;采用随机引物多态性技术(RAPD)对分离的32株MRSA做同源性分析。结果神经外科病房MRSA的分离率92.9%,对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺的敏感率为100%,对复方新诺明和克林霉素的敏感率分别为82.3%和74.4%,对左氧氟沙星、环丙沙星、红霉素和青霉素耐药率均大于95%;32株MRSA的RAPD图谱有4种类型(Ⅰ-Ⅳ型),Ⅰ型20株(62.5%),Ⅱ型7株(21.9%),Ⅲ型3株(9.3%),Ⅳ型2株(6.2%)。结论某院神经外科病房存在基因型为Ⅰ型的MRSA菌株的暴发流行。     

多重耐药鲍曼不动杆菌中仅黏菌素敏感菌株的分子流行病学研究

目的从基因水平了解多重耐药鲍曼不动杆菌（MDR-AB）中仅黏菌素敏感鲍曼不动杆菌（COS-AB）的流行情况，为控制其流行暴发提供实验数据。方法收集并分析上海瑞金医院2004年6月至2005年5月136例COS—AB临床感染患者的临床资料，同时收集2004年5月至2004年12月临床分离的鲍曼不动杆菌66株，其中COS-AB33株，非黏菌素敏感鲍曼不动杆菌（non-COS-AB）33株，采用随机引物PCR（RAPD）和脉冲场凝胶电泳（PFGE）等分子流行病学方法和统计学方法分析其流行情况。结果证实2004年6月至2005年5月出现COS-AB的暴发流行，经RAPD（引物ERIC2、272）分型均为一个型别，而PFGE分型为两个型别，其中烧伤科COS-AB为PFGEB型，为单一克隆的科室内流行；而烧伤科以外的其他科室为A型，为科室间流行，且主要集中于外科系统。结论COS-AB交叉感染严重，应严格消毒隔离措施，加强对COS-AB在环境及患者中流行情况的严密监测。用PFGE对鲍曼不动杆菌进行分型更为精确。     

肺炎克雷伯菌随机扩增多态性DNA的分子流行病学研究

目的采用随机扩增多态性DNA（RAPD）基因分型方法监测肺炎克雷伯菌医院感染。方法对临床分离的36株肺炎克雷伯菌进行RAPD基因分型,并通过指纹图谱比较与分析,确证医院感染爆发。结果36株肺炎克雷伯菌共分得33型,肺炎克雷伯菌医院感染局部流行共1起。结论RAPD可对肺炎克雷伯菌进行分子流行病学调查。     

铜绿假单胞菌随机扩增多态性DNA基因分型研究

目的采用随机扩增多态性DNA(RAPD)基因分型方法监测铜绿假单胞菌(PA)医院感染.方法以优化的反应体系和扩增条件对临床分离的49株PA进行RAPD基因分型,通过指纹图比较与分析,确证医院感染类别与爆发.结果 49株PA共得RAPD 29型,分型率100%;以周为时限, PA医院感染爆发流行共3起;9例个体连续感染的PA有7例为内源性医院感染,2例为外源性医院感染.结论 RAPD可对PA进行分子流行病学调查.     

儿科分离金黄色葡萄球菌耐药性和耐甲氧西林株的流行病学研究

目的 了解儿童感染金黄色葡萄球菌的耐药性和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的基因型及分布,为临床治疗提供依据和确定MRSA流行情况.方法 采用ATB分析系统对菌株进行药敏试验,头孢硝基噻吩显色法检测β-内酰胺酶,随机扩增多态DNA(RAPD)方法进行MRSA同源性分析.结果 348株金黄色葡萄球菌中,334株产β-内酰胺酶,对β-内酰胺类抗菌药物的耐药率为6.03%～100.00%.耐药率较高的有四环素(65.23%)、大环内酯类(64.66%)、复方新诺明(48.28%)和克林霉素(43.97%),较低的有呋喃妥因(3.74%)、利福平(4.02%)、左氧氟沙星(8.91%)和环丙沙星(16.38%).未发现对万古霉素、替考拉林和利奈唑胺耐药.MRSA的检出率为9.77%,MRSA对17种抗菌药物的耐药率高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA).经RAPD分型,34株MRSA分为6型,以Ⅰ型为主(64.71%),主要分布于儿科PICU.结论 本地区儿童感染金黄色葡萄球菌有不同耐药谱,应加强儿童感染金黄色葡萄球菌的耐药性监测和掌握MRSA流行情况,对防止耐药性进一步蔓延和MRSA感染暴发有重要意义.     

25株多重耐药鲍曼不动杆菌同源性分析

目的：分析临床分离的多重耐药鲍曼不动杆菌（MDR-AB）中仅对黏菌素和碳青霉烯类敏感鲍曼不动杆菌（CCOS-AB）菌株的同源性,为控制其流行暴发提供实验数据。方法收集并分析武汉市第一医院2012年1月至2013年12月临床分离的CCOS-AB菌株25株,采用琼脂稀释法测定其耐药性,随机引物多态性DNA扩增（RAPD）和琼脂凝胶电泳分析CCOS-AB菌株的同源性。结果电泳结果显示,25株CCOS-AB菌株分为12个克隆株,A型克隆包括2株,B型克隆包括5株,C型克隆包括6株,D型克隆包括2株,E型克隆包括3株,F、G、H、I、J、K、L型克隆各1株。结论该院2012-2013年期间CCOS-AB存在5型克隆株的院内流行,临床应加强院内感染控制。     

鄂尔多斯地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌基因分型的研究

目的:了解本地区MRSA菌株的分子流行病学特点,明确本地区MRSA的基因型别及其分布规律.方法:收集2009年1月～2011年8月间鄂尔多斯地区门诊及住院患者非痰标本分离的MRSA菌株54株,应用SCCmec方法和spa方法进行基因分型.结果:应用SCCmec基因分型分离的MRSA以SCCmecⅡ、Ⅲ型为主,分别占本次分离的50％和46.4％;应用spa基因分型分离的MRSA以t030和t002为主,占该院分离率的41％和35.1％.结论:本地区分离MRSA以SCCmecⅢ- t030和SCCmecⅡ- t002为主.     

金黄色葡萄球菌随机扩增DNA多态性分型研究

目的:建立金黄色葡萄球菌随机扩增DNA多态性(RAPD)分型技术,以应用于临床菌种鉴定及流行病学调查。方法:对临床分离的15株金黄色葡萄球菌,酚氯仿法提取其DNA后行RAPD分型,同时进行噬菌体分型。结果:15株临床分离株大多数产生独特而稳定的RAPD带型,可分成5个噬菌体型和14个RAPD谱型。采用同一反应体系,产肠毒素金黄色葡萄球菌未出现RAPD谱型。结论:RAPD基因分型技术不需己知核酸序列,分型率高,分辩力强,简便快捷,可为金黄色葡萄球菌临床分离株提供分型标志,是分子流行病学研究的有效方法。