苦瓜总皂苷对阿霉素肾病大鼠P-GSK-3β 表达的影响

目的 分析苦瓜总皂苷对阿霉素肾病大鼠磷酸化糖原合成酶激酶-3β(P-GSK-3β)表达的影响.方法 50只SD大鼠随机分为空白组、模型组、苦瓜总皂苷低、中、高治疗组,造模成功后给予8周治疗后处死大鼠,观察肾脏病理学,肾功能及P-GSK-3β 的表达.结果 与空白组相比,模型组12h蛋白定量、BUN、Scr、TG和CHO增加(P<0.05),苦瓜总皂苷治疗组相较于模型组下降(P<0.05);与空白组相比,模型组TP、ALB、Bax和Bcl-2降低(P<0.05),苦瓜总皂苷治疗组相较于模型组升高(P<0.05);组织病理学检测,空白组肾脏无异常,模型组上皮细胞明显变性,苦瓜总皂苷治疗后明显改善;与空白组相比,模型组P-GSK-3β 大量表达(P<0.05),苦瓜总皂苷治疗组相较于模型组明显降低(P<0.05).结论 苦瓜总皂苷可改善阿霉素肾病大鼠肾功能,与其可降低肾脏P-GSK-3β 表达有关.     

肾康丸对糖尿病肾病大鼠肾脏TGF-β1/Smad 7通路的影响

目的探讨肾康丸对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏TGF-β1/Smad 7信号通路的影响。方法用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射法诱导建立大鼠糖尿病(DM)模型,模型成功后随机分为3组:模型对照组、开搏通组、肾康丸组,另设正常对照组。治疗8周后,取大鼠肾脏,采用免疫组化法观察各组大鼠肾脏组织纤连蛋白(FN)、转化生长因子-β1(TGF-β1)和Smad 7蛋白表达的情况。结果8周后,DN模型组大鼠与正常大鼠比较,肾脏组织中FN和TGF-β1蛋白表达明显增加,Smad 7蛋白表达明显减少。肾康丸和开搏通都可以减少FN和TGF-β1蛋白的表达,增加Smad 7蛋白的表达。结论肾康丸可以抑制DN大鼠肾脏中TGF-β1/Smad信号传导通路的激活,减少ECM的沉积,从而延缓DN进程。     

苦瓜总皂苷对2型糖尿病肾病大鼠肾脏细胞间纤连蛋白和胶原Ⅳ蛋白表达的影响

目的：探讨苦瓜总皂苷对2型糖尿病肾病大鼠细胞间纤连蛋白（ FN）和胶原Ⅳ蛋白（Ⅳ-CP）表达的影响。方法雄性SD大鼠48只随机分为正常对照组、2型糖尿病肾病模型组及苦瓜总皂苷5 mg/（ kg·d）,治疗组左肾切除加1次大剂量链脲佐菌素腹腔注射建立动物模型,正常对照组和模型组给予生理盐水灌胃,苦瓜总皂苷治疗组给予苦瓜总皂苷灌胃,分别于实验第4、8周处死大鼠各半,测血糖、24 h尿蛋白定量以及炎性因子;免疫组化、RT-PCR以及Western Blot检测FN和Ⅳ-CP蛋白的表达。结果治疗组尿蛋白和血清肌酐与模型组相比明显减少,血糖明显升高（ P﹤0.05）;免疫组化、RT-PCR和Western Blot与模型组相比治疗组大鼠肾脏组织FN和Ⅳ-CP表达明显降低（ P﹤0.05）。结论苦瓜总皂苷可以通过抑制糖尿病肾病大鼠肾组织细胞间纤连蛋白和Ⅳ型胶原的表达,改善肾功能。     

田七注射液对阿霉素肾病大鼠肾组织TGF-β/Smads信号通路的影响

目的探讨田七注射液对阿霉素（ADR）肾病大鼠转化生长因子β1（TGF-β1）、Smad3蛋白、Smad7蛋白表达的影响。方法采用单侧肾切除加ADR重复注射肾病模型。将健康SPF级SD大鼠随机分为3组：假手术组（n=8）、模型组（n=15）、田七注射液组（n=15）。治疗8周后处死大鼠,观察24h尿蛋白定量、血尿素氮,肌酐及肾脏组织病理改变,同时观察肾组织TGF-β1、Smad3、Smad7的表达。结果田七注射液能减少尿蛋白的排泄,改善肾功能（Bun、Cr）,明显降低肾小球硬化指数及肾间质损伤分数,下调TGF-β1、Smad3蛋白的表达,提高Smad7蛋白表达。结论在阿霉素肾病大鼠肾病模型中,田七注射液对肾组织有一定保护作用,其作用机制可能是通过下调TGF-β1、Smad3蛋白的表达,上调Smad7蛋白的表达,干预Smad蛋白介导的细胞内信号转导,从而实现抗肾纤维化。     

苦瓜总皂苷对2型糖尿病大鼠肾病组织中蛋白激酶C-α和转化生长因子β表达的影响研究

目的探讨分析苦瓜总皂苷对2型糖尿病肾病大鼠蛋白激酶C-α(PKC-α)及转化生长因子β(TGF-β)表达的影响,为苦瓜总皂苷开发和临床2型糖尿病肾病的治疗提供参考。方法雄性SD大鼠48只,随机分为正常对照组、2型糖尿病肾病模型组以及苦瓜总皂苷治疗组,大鼠左肾切除+链脲佐菌素腹腔注射建立动物模型,模型建立成功后,正常对照组和模型组给予生理盐水灌胃,苦瓜总皂苷治疗组给予苦瓜总皂苷灌胃,分别于实验第4周、第8周处死大鼠各半,测血糖、24h尿蛋白定量;取肾组织做HE染色行肾组织病理观察、RT-PCR以及Western Blot检测肾组织PKC-α和TGF-β蛋白和mRNA表达。结果苦瓜总皂苷治疗组尿蛋白和血清肌酐与模型组比较明显减少,血糖明显升高,差异有显著性(P0.05);病理组织显示正常对照组肾小球基底膜完整,没有增生,肾脏组织结构整齐,纹理清晰,模型组肾小球基底膜增厚同时伴有一定的系膜细胞增生,苦瓜总皂苷组肾小球基底膜较完整,增生较少,炎症反应也较小;RT-PCR和Western Blot可见:与模型组比较,苦瓜总皂苷治疗组肾脏组织PKC-α和TGF-β蛋白和mRNA表达明显降低(P0.05)。结论苦瓜总皂苷可抑制糖尿病肾病大鼠肾组织PKC-α和TGF-β的表达,进而保护肾脏,可能有一定的临床应用价值。     

苦瓜总皂苷对阿霉素肾病大鼠肾脏组织中结缔组织生长因子表达影响

目的:采用经典造模法构建阿霉素肾病大鼠动物模型,观察苦瓜总皂苷对其是否有治疗作用及其可能的治疗机理。方法:50只雄性SD大鼠,随机分为5组,分别为正常组,模型组,苦瓜总皂苷低、中和高剂量组,每组10只。除正常组外,其余各组经尾静脉注射阿霉素6.2 mg/kg建立肾病大鼠模型,模型建立成功后,正常组和模型组给予1 m L·kg-1·d-1生理盐水注射,苦瓜总皂苷组给予苦瓜总皂苷10、20、40 mg·kg-1·d-1灌胃,治疗8周末处死大鼠,测定24 h蛋白尿,以及BUN和Scr,此外HE染色检测其肾脏病理学,免疫组织化学、Western blot以及RTPCR检测肾脏组织中结缔组织生长因子(CTGF)的表达。结果:与正常组相比,模型组和苦瓜总皂苷3个治疗组24 h尿蛋白含量明显增加(P0.05),同时BUN以及Cr也明显增加(P0.05),与模型组相比,苦瓜总皂苷3个剂量组均可以明显的减少大鼠尿蛋白(P0.05),同时降低Cr和BUN的含量(P0.05);HE染色正常组结构完整,没有任何发炎和其它病理特征,而模型组则有明显的肾小球系膜的增生,同时可见有炎性细胞浸润,而苦瓜总皂苷则可以明显的改善其症状;免疫组化、Western以及RT-PCR可见,与正常组相比,模型组肾脏组织中CTGF表达明显升高(P0.05),而给予苦瓜总皂苷则可以明显的降低其表达(P0.05),此外,苦瓜总皂苷3个剂量组有明显的剂量依赖性。结论:苦瓜总皂苷能够显著的改善阿霉素肾病大鼠肾脏损害,减少24 h尿蛋白,同时降低BUN和Cr的含量,进而达到对阿霉素肾病大鼠的保护作用,其机理可能与苦瓜总皂苷可以降低肾脏组织中CTGF的表达有关。     

全反式维甲酸对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏TGF-β1/Smad3信号通路的影响

目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾脏组织TGF-β1/Smad3信号通路的影响.方法:雄性Wistar大鼠72只随机分成3组:假手术组、UUO组、ATRA干预组,每组均为24只.UUO组和ATRA组大鼠腹腔注射麻醉后,行左侧输尿管结扎术.在同样的条件下,假手术组只探及肾包膜.ATRA组自...     

三七总皂苷对阿霉素肾病大鼠肾组织ET-1蛋白及mRNA表达的影响

目的探讨三七总皂苷对阿霉素肾病大鼠肾组织内皮素-1蛋白及mRNA表达的影响。方法将45只大鼠随机分为5组,正常组、假手术组、模型组、苯那普利组和三七总皂苷组,手术切除大鼠右侧肾脏并腹腔注射阿霉素建立模型,10周末处死大鼠,无菌取肾脏,进行肾组织HE染色及masson染色,观察肾组织病理形态学改变,采用免疫组织化学及原位杂交方法分析肾组织内皮素-1蛋白及mRNA的表达。结果模型组大鼠肾组织肾小管上皮细胞(TEC)、肾小球系膜细胞(GMC)及肾小球上皮细胞(GEC)胞浆中ET-1蛋白及mRNA表达强阳性,三七总皂苷组大鼠肾组织ET-1蛋白及mRNA表达较模型组显著减少,有统计学意义(P<0.05)。结论三七总皂苷能够减少阿霉素肾病大鼠肾小管上皮细胞、肾小球系膜细胞及肾小球上皮细胞胞浆中内皮素-1蛋白及mRNA的表达,进而起到保护肾功能、延缓慢性肾衰竭的病程进展。     

黄芪汤剂对阿霉素肾病模型大鼠肾组织中Smad4表达的影响

目的：观察黄芪汤剂对阿霉素大鼠肾病模型中Smad4表达的影响,探讨其对阿霉素病大鼠肾脏的防治作用及其机制。方法：建立阿霉素肾病模型,灌服黄芪汤剂（0.28g/mL）治疗,空白组和对照组灌服蒸馏水,连续三周后检测生化指标和肾组织病理变化,免疫印迹（western blot）检测肾组织Smad4蛋白定位表达。结果：黄芪组生化指标和病理均优于造模组,Smad4较造模组表达明显减弱。结论：黄芪汤剂可能参与下调转化因子β1下游因子Smad4的高表达从而延缓肾脏纤维化。     

阿霉素肾病大鼠肾小管Smad7表达与细胞凋亡的关系

目的 研究阿霉素肾病大鼠肾小管Smad7表达改变与细胞凋亡的关系.方法 建立大鼠阿霉素肾病模型,RT-PCR半定量分析肾皮质中Smad7 mRNA的表达水平,免疫组化分析Smad7蛋白的定位和表达,用TUNEL法分析细胞凋亡.结果 肾病组肾小管中Smad7 mRNA、蛋白的表达均上调,与肾小管上皮细胞凋亡呈正相关.结论 阿霉素肾病大鼠肾小管中Smad7表达增加与肾小管上皮细胞凋亡相关.     

Smad2,3,4,7蛋白在慢性移植性肾病的定位和表达变化

【目的】探讨Smad2,3,4,7蛋白在慢性移植性肾病（chronic allograft nephropathy,CAN）的定位和表达变化。【方法】收集13例经组织病理学明确诊断为CAN并行移植肾切除的肾标本作为实验组;取10例正常肾组织作为对照组。用免疫组化法检测Smad2、Smad3、Smad4、Smad7和TGF-β1蛋白的定位和表达;图像半定量分析肾小球和肾小管间质中Smads蛋白和TGF-β1的含量变化。【结果】Smad2、Smad3和Smad4主要在正常肾组织的肾小管上皮细胞内表达,肾小球偶见;而Smad7主要在肾小球表达。与对照组相比,Smad2、Smad3和Smad4蛋白在CAN中肾小球和肾小管上皮细胞的表达均明显增加（P〈0.01）,与TGF-β1上调成正相关;而Smad7蛋白在肾小球中的表达却明显下降（P〈0.01）,与TGF-β1上调成负相关。并且随着CAN的加重Smad2,3,4蛋白的表达逐渐增加,而Smad7蛋白的表达逐渐减少（P〈0.01）。【结论】TGF-β/Smad信号通路参与了CAN的纤维化进程,Smad2,3,4蛋白过度表达和Smad7负调控不足是导致CAN的纤维化的主要原因。     

虫草多糖对实验性大鼠Smad2/3 Smad7表达的影响

目的：探讨CCL4诱导的肝纤维化模型鼠肝组织Smad2／3，Smad7的表达及虫草多糖（Cordyceps Polysaccharide CP）抗肝纤维化的作用机制。方法：将40只大鼠随机型。行苏木素染色（HE）和特染2教员纤维染色（VG），判断肝组织炎症和纤维化的程度，免疫组化方法检测各组Smad2／3和Smad2／3的表达。结果：CP预防组和治疗组的肝组织炎症和纤维化程度明显低于模型组；Smad2／3在CP预防组和治疗组的阳性表达均明显低于模型组（P＜0．05）；Smad7在CP预防组和治疗组的阳性表达高于模型组（P＜0．05）：Smad2／3，Sinad7在CP预防组和治疗组的阳性表达高于模型组（P＜0．05）。Smad2／3，Smad7在CP预防组和治疗组的表达无差异性（P＞0．05）。结论：CP抗肝纤维化作用可能与抑制Smad2／3和促进Smad7的表达有关。     

苦瓜总皂苷降血糖作用的研究

苦瓜Momordica charantia L．为葫芦科植物苦瓜的果实，性苦味寒、无毒。具有清热解毒、补肾阳、祛寒湿等功效。苦瓜在许多国家和地区都有入药记载。研究证明，苦瓜中含有葫芦素烷型、齐墩果烷型皂苷，以及甾醇类、生物碱类等多种化合物。近年来药理研究表明苦瓜中的多种成分共同作用，显示出明显的降血糖作用，因此，一直备受国内外研究者的关注。为明确苦瓜的活性部位和开发利用这一丰富的药材资源，本实验采用葡萄糖性小鼠高血糖模型和链脲霉素及四氧嘧啶所致糖尿病小鼠高血糖模型，研究了苦瓜总皂苷的降血糖作用。结果显示，大、小剂量苦瓜总皂苷对葡萄糖性小鼠的降糖率分别为30．2％、28．3％；对链脲霉素所致糖尿病小鼠的降糖率分别为46．5％、41．4％，作用与降糖灵（44．1％）相当；对四氧嘧啶所致糖尿病小鼠的降糖率分别为59．4％、49．3％，作用与降糖灵（56．7％）相当。本研究结果可为苦瓜总皂苷用于糖尿病的防治提供理论依据。     

肾康丸对糖尿病肾病大鼠TGF-β1/Smad信号通路的影响

目的探讨肾康丸对糖尿病肾病（diabetic nephropathy，DN）大鼠TGF-β1／Smad信号通路影响。方法用链脲佐菌素（STZ）腹腔注射法诱导建立大鼠糖尿病（diabetes mellitus，DM）模型，模型成功后随机分为3组：模型对照组、开搏通组、肾康丸组，另设正常对照组，治疗8周后，取大鼠肾脏，采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法观察各组大鼠肾脏组织纤连蛋白（fibronetin，FN）和TGF-β1mRNA基因表达情况；采用免疫组化法观察各组大鼠肾脏组织Smad2、Smad3蛋白表达的情况。结果在治疗的8周里，模型组大鼠血糖均维持在16．7mmol／L以上；出现多饮、多食、多尿、消瘦的DM症状；8周后，DN模型组大鼠与正常大鼠比较，肾脏组织中FN和TGF-β1mRNA基因表达显著上调（P〈0．01），Smad2、Smad3蛋白表达明显增加。肾康丸和开搏通都可以抑制DN大鼠肾脏组织中FN和TGF-β1mRNA基因表达，差异具有统计学意义（P〈0．01），都可以减少Smad2、Smad3蛋白的表达。结论肾康丸可以抑制DN大鼠肾脏中TGF-β1／Smad信号转导通路的激活，减少细胞外基质合成和分泌，从而延缓DN进程。     

腺病毒Smad 7转染对阿霉素肾病大鼠蛋白尿的影响

目的  在阿霉素（ADR）肾病大鼠模型中,探讨过表达Smad 7对肾病蛋白尿及其病理的影响。方法  本实验用单次尾静脉注射建立阿霉素肾病模型,通过构建重组腺病毒介导外源性Smad 7基因,单侧肾动脉灌注转染Smad 7至靶肾脏。用荧光显微镜检测Smad 7重组腺病毒的转染效果,用邻苯三酚红比色法测定大鼠24 h尿蛋白,HE染色检测各组肾脏病理改变。结果  ①用6.5 mg/kg ADR一次性尾静脉注射SD大鼠可成功构建肾病模型;4周末似微小病变型肾病。②单侧肾动脉灌注能有效将介导Smad 7的重组腺病毒转染至大鼠靶肾脏。③4周末肾病重组腺病毒（Ad-Smad7）组尿蛋白（38.4±6.0）较ADR组（69.58±10.63）减少（P <0.05）。④荧光显微镜显示肾病Ad-smad7组大鼠靶肾中,Ad-Smad7主要在肾小管表达,肾小球表达少。⑤肾病Ad-Smad7组肾脏病理改变轻微,肾病Ad-GFP组、ADR组病理较严重,出现类似局灶节段性肾小球硬化的慢性肾脏病病理表现。 结论  单侧肾动脉灌注有效地使重组腺病毒介导的Smad 7转染至大鼠靶肾脏,使Smad 7在该肾过表达,可减轻肾病大鼠蛋白尿,并改善阿霉素肾病病理。

     

续断总皂苷对膝骨关节炎大鼠软骨组织中Atg3、Atg4、Atg7表达影响的实验研究

目的 观察续断总皂苷对膝骨关节炎大鼠的干预作用,通过检测软骨组织中Atg3、Atg4、Atg7的表达,探讨续断总皂苷对膝骨关节炎大鼠的干预作用机制.方法 SPF级成年SD大鼠40只,采用随机数字法将大鼠随机分为两组,即假手术组(10只)和造模组(30只).采用大鼠前交叉韧带切断方法对造模组大鼠进行膝骨关节炎(knee ...     

绞股蓝总皂苷对免疫性肝纤维化大鼠肝功能和肝纤维化的影响

目的:研究绞股蓝总皂苷(GPs)对免疫性肝纤维化大鼠肝功能和肝纤维化的影响。方法:36只大鼠随机分为正常对照组、肝纤维化组和GPs组3组,每阻各12只。采用人血清白蛋白攻击注射大鼠建立免疫性肝纤维化模型,GPs治疗组大鼠则在连续30 d给予白蛋白攻击注射的同时给予0.5 mg GPs。采用全自动生化仪检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TBIL)、总胆汁酸(TBA)水平以评价肝功能,应用放射免疫法(RIA)检测血清中透明质酸(HA)、Ⅲ型胶原(PCⅢ)和层粘蛋白(LN)含量以评价肝纤维化程度,并以大鼠肝组织切片病理变化验证。结果:白蛋白攻击注射可显著升高肝纤维化大鼠血清中ALT、TBIL、TBA水平和HA、PCⅢ、LN水平(P<0.01,P<0.05)。GPs治疗可显著降低大鼠血清中 ALT、TBIL、TBA水平和HA、PCⅢ和LN水平(P<0.01,P<0.05)。GPs还可显著减少白蛋白攻击所致的胶原纤维生成,并改善大鼠肝纤维化病理损伤。结论:GPs可保护大鼠肝功能,抑制大鼠肝纤维化形成。     

隔药饼灸对慢性肾衰竭兔肾组织TGF-β1、Smad3、Smad7蛋白表达的影响

目的:观察隔药饼灸对慢性肾衰竭兔肾组织中TGF-β_1、Smad3、Smad7蛋白表达的影响,探讨隔药饼灸抗慢性肾衰竭兔肾纤维化的分子机制。方法:健康新西兰纯种雄性兔45只,随机分为正常对照组、模型组、隔药饼灸组、直接灸组、氯纱坦钾组。除正常对照组用等量蒸馏水灌胃外,其他兔用腺嘌呤灌胃21 d致兔肾间质纤维化,建立慢性肾衰竭动物模型。除正常对照组和模型组外各组分别进行相应干预,均持续3个月,其中穴位为Ⅰ组(肾俞、脾俞)、Ⅱ组(足三里、关元)交替。干预结束通过免疫组化法检测各组兔肾组织TGF-β_1、Smad3、Smad7蛋白表达。结果:免疫组化染色结果显示,与正常对照组比较,模型组兔肾组织TGF-β_1、Smad3阳性表达明显增加(P0.05),Smad7阳性表达明显降低(P0.05);与模型组比较,隔药饼灸组、直接灸组、氯纱坦钾组肾组织TGF-β_1、Smad3阳性表达均明显下降(P0.05),Smad7阳性表达明显升高(P0.05);隔药饼灸组Smad7阳性表达较直接灸组、氯纱坦钾组升高更明显(P0.05)。结论:隔药饼灸能有效干预慢性肾衰竭兔肾纤维化的形成,其分子机制可能是通过调节TGF-β_1/Smad信号通路发挥抗肾纤维化的作用。     

蒺藜总皂苷对AD大鼠的影响

目的探讨蒺藜总皂苷对AlCl3致AD大鼠的影响。方法采用AlCl3灌胃制作AD大鼠模型,Morris水迷宫检测大鼠空间记忆能力,免疫印迹检测tau蛋白磷酸化水平。结果蒺藜总皂苷明显缩短大鼠寻找平台的时间,降低tau蛋白磷酸化水平。结论蒺藜总皂苷能有效改善因AlCl3所致的大鼠空间记忆障碍,其机制可能与抑制tau蛋白过度磷酸化有关。     

肝纤维化大鼠星状细胞Smad3、Smad7基因表达差异的研究

通过检测肝纤维化大鼠原代肝星状细胞 (HSC)的 Sm ad3和 Smad7编码基因的表达 ,探讨 HSC活化及转化机制。皮下注射四氯化碳 (CCl4)制备大鼠肝纤维化模型 ,于注射 CCl4后 1、 4、 8周分批分离 HSC并计算 HSC平均得率 ;RT- PCR检测其 Sm ad3、Smad7m RNA的表达变化。结果显示 :1CCl4注射后第 1、 4、 8周大鼠 HSC平均得率分别为 :(3.34± 0 .36 )× 10 7/只、 (4 .2 1± 0 .6 4)× 10 7/只、 (5 .88± 0 .79)× 10 7/只 ,均高于正常大鼠 HSC平均得率(2 .2 3± 0 .19)× 10 7/只 ,组间比较有显著性差异 ,P<0 .0 5。 2与正常对照组相比 ,注射 CCl4后 1、 4、 8周大鼠 HSC中 Sm ad3m RNA表达增加 ,P<0 .0 5。注射 CCl4后 1周 Sm ad7m RNA较正常明显升高 ,P<0 .0 5 ,到第 4周和第 8周表达水平则持续下降 ,P<0 .0 1。提示 Sm ad3和 Smad7在肝纤维化发生、发展中对 HSC的活化及转化起不同的介导作用。