听觉系统损伤及其腺苷酸活化蛋白激酶相关机制研究

噪声暴露、耳毒性药物、衰老等因素均可造成听觉系统损伤，导致听力下降。听觉系统损伤造成听力异常的主要表现为听力阈值升高、语言接受和信号辨别能力下降；主要病理改变为螺旋器纤毛破坏、毛细胞丢失以及支持细胞的损伤。研究表明，造成听觉系统损伤的主要原因是氧化应激反应产生大量的活性氧（ROS），破坏了体内的稳态环境；而ROS对听觉细胞的损伤大部分依赖于激活腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）来实现。为此，本文拟对听觉系统损伤及其AMPK相关机制作一综述。     

金属硫蛋白对镍铬联合染毒小鼠肝脏损伤的拮抗作用

目的研究硫酸镍+重铬酸钾联合染毒对小鼠肝脏损伤的影响及金属硫蛋白(MT)的拮抗作用。方法将50只健康SPF级昆明小鼠按体重随机分为5组,分别为溶剂对照组(生理盐水)、镍铬(1.0 mg/kg硫酸镍+0.5 mg/kg重铬酸钾)联合染毒组和低、中、高剂量MT保护(1.0 mg/kg硫酸镍+0.5 mg/kg重铬酸+5.0、10.0、20.0 mg/kg MT)组,每组10只,雌雄各半。采取灌胃方式进行染毒,染毒容量为10 ml/kg,每天1次,连续染毒21 d。检测小鼠丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)活力及肝组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力和丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量。结果与溶剂对照组比较,镍铬联合染毒组小鼠血清AST、ALT、GGT的活力均增高,差异均有统计学意义(P0.05)。各剂量MT保护组小鼠血清AST、ALT、GGT的活力均低于镍铬联合染毒组,差异均有统计学意义(P0.05);且随着MT染毒剂量的升高,MT保护组小鼠血清AST、ALT、GGT的活性均呈下降趋势。与溶剂对照组比较,镍铬联合染毒组小鼠肝组织SOD、GSH-Px活力和GSH含量均下降,而MDA含量升高,差异均有统计学意义(P0.05)。与镍铬联合染毒组比较,各剂量MT保护组小鼠肝组织SOD、GSH-Px活力和GSH含量均升高,而MDA含量均降低,差异均有统计学意义(P0.05),且随着MT染毒剂量的升高,MT保护组小鼠肝组织SOD、GSH-Px活力和GSH含量均呈上升趋势,而MDA含量呈下降趋势。结论 MT对镍铬联合染毒所致小鼠肝脏损伤有较好的拮抗作用,其作用机制可能与MT抗氧化作用有关。     

金属硫蛋白对铬染毒小鼠肝脏氧化损伤的修复作用

目的：探讨金属硫蛋白（MT）对六价铬（Cr6^＋）染毒小鼠肝脏氧化损伤的修复作用。方法：60只清洁级昆明（KM）种小鼠雌雄各半,随机分为5组：对照组,铬（Cr6^＋）染毒组（50mg／kg）,低、中、高（5．0、10．0、20．0mg／kg）剂量MT保护组。对照组灌胃生理盐水,铬染毒组按50nag／（kg·bw）灌胃重铬酸钾溶液;MT保护组在给予铬染毒的同时继续分别按5．0、10．0、20．0mg／（kg·bw）剂量灌胃MT。各组灌胃时间均为15d,每日1次;灌胃体积均为0．1ml／（10g·bw）。实验结束麻醉处死动物采血,取肝脏计算其脏器系数;全自动生化分析仪检测肝功能AST、ALT、GGT含量;试剂盒检测肝组织SOD活性和MDA含量。结果：与对照组比较,铬染毒小鼠体重降低、肝脏器系数增高、血清AST、ALT、GGT增高、SOD活力下降、MDA含量增高（P〈0．05）。经MT保护后与铬染毒组比较小鼠体重有所回升、肝脏脏器系数下降、血清AST、ALT、GGT降低、SoD活力升高、MDA含量下降,其恢复程度与MT呈剂量－效应关系（P〈0．05）。结论：铬（Cr6^＋）对小鼠肝脏有损伤作用,MT对肝脏有保护作用,其机制与抗氧化作用有关。     

亚砷酸钠染毒对SD大鼠肝脏的损伤作用及血清相关蛋白的表达

  目的  探讨亚慢性砷暴露对大鼠肝脏糖代谢的影响及相关分子机制。  方法  以SD大鼠为研究对象,实验设对照组（灌胃蒸馏水）、亚砷酸钠（NaAsO₂ ）高、中、低剂量组（8、4、2 mg/kg,灌胃NaAsO₂）。连续12周。记录大鼠体重,第12周口服葡萄糖耐量试验（OGTT）检测葡萄糖耐受情况。12周后处死大鼠,取毛发和肝脏,检测毛发砷含量、肝脏糖原含量、己糖激酶和丙酮酸激酶活性;观察肝脏病理变化;检测糖代谢相关蛋白磷脂酰肌醇 – 3 – 激酶（PI3K）、蛋白激酶B（AKT）、糖原合成酶激酶 – 3β（GSK3β）、磷酸化糖原合成酶激酶 – 3β（P-GSK3β）、葡萄糖转运体2（GLUT2）、葡萄糖转运体4（GLUT4）表达情况。  结果  统计大鼠体重变化发现,亚砷酸钠高、中剂量组雄性和雌性大鼠体重在第8、12周时有所降低;与对照组[0.43 ± 0.08]mg/kg相比,NaAsO₂高、中、低剂量组[（49.24 ± 8.02）、（21.06 ± 3.42）、（14.59 ± 2.00）mg/kg]毛发砷含量明显升高（P＜0.05）;大鼠葡萄糖耐量异常、肝脏糖原含量降低;与对照组己糖激酶、丙酮酸激酶[（2.84 ± 0.08）、（55.95 ± 0.96）（U/mg）]活性相比,NaAsO₂高、中剂量组己糖激酶[（1.94 ± 0.11）、（2.14 ± 0.03）（U/mg）]、丙酮酸激酶[（43.64 ± 1.05）、（44.26 ± 0.10）（U/mg）]活性降低（P＜0.05）;病理结果显示,NaAsO₂高、中剂量组肝细胞轻度脂肪变性,有较多圆形空泡产生;WB结果表明,与对照组[PI3K（1.03 ± 0.02）、AKT（1.36 ± 0.02）、P-GSK3β/ GSK3β（0.96 ± 0.04）、GLUT2（1.24 ± 0.12）、GLUT4（1.80 ± 0.15）]相比,NaAsO₂高剂量组PI3K[0.76 ± 0.06]、AKT[1.19 ± 0.04]、P-GSK3β/GSK3β[0.76 ± 0.03]、GLUT2[0.82 ± 0.11]和GLUT4[0.88 ± 0.14]蛋白表达降低,NaAsO₂中剂量组AKT[1.08 ± 0.10]、GLUT4[1.38 ± 0.10]蛋白表达降低,NaAsO₂低剂量组GLUT4[1.10 ± 0.12]蛋白表达降低（P＜0.05）。  结论   亚慢性砷暴露可致大鼠肝脏糖代谢紊乱,其机制可能与改变糖原含量、影响糖代谢相关酶活性和相关蛋白表达有关 。     

甲醛和苯联合吸入染毒小鼠肝脏DNA-蛋白交联和氧化损伤的研究

研究甲醛和苯联合吸入染毒致小鼠肝脏DNA-蛋白交联(DNA-protein crosslinks,DPC)和氧化损伤作用,探讨其遗传毒性.60只健康清洁级昆明种纯系雄性小鼠,随机分为对照组(清洁空气),甲醛低(1 mg/m~3)、中(3 mg/m~3)、高(5mg/m~3)剂量组,苯低(500mg/m~3)、中(1500mg/m~3)、高(2500 mg/m~3)剂量组,联合低(0.5mg/m~3甲醛+250mg/m~3苯)、中(1.5mg/m~3甲醛+750 mg/m~3苯)、高(2.5 mg/m~3甲醛+1 250 mg/m~3苯)剂量组,每组6只.采用静式吸入染毒,每天2 h,连续14 d.染毒结束次日处死小鼠,测定肝脏组织中DPC含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力、丙二醛(maleic dialdehyde,MDA)含量.与阴性对照组相比,甲醛、苯单独染毒中、高剂量组及联合染毒各剂量组DPC系数均升高(P＜0.05),甲醛、苯单独及联合染毒各剂量组SOD活力均降低(P＜0.05)、MDA含量均升高(P＜0.05);与单独染毒组相比,联合染毒中、高剂量组DPC系数明显升高(P＜0.05),联合染毒各剂量组SOD活力明显降低(P＜0.05)、MDA含量明显升高(P＜0.05).甲醛和苯联合吸入染毒对小鼠肝脏遗传毒性作用大于甲醛、苯单独染毒时的作用,提示二者同时存在对小鼠肝脏的遗传毒性具有协同作用.     

黄磷染毒对小鼠肝脏HSP70表达及NO的影响

[目的]观察黄磷染毒对小鼠HSP70表达及NO的影响，以探讨黄磷的毒作用机制，寻求黄磷中毒早期健康效应的生物标志物。[方法]通过对小鼠黄磷急性和亚急性毒理实验，应用生物化学和分子生物学的技术，选取176只健康雄性昆明种小鼠，体重18—22g，检测黄磷染毒对HSP70、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)等指标的影响。染毒时，急性剂量．效应关系研究取小鼠32只，随机分成4组，低、中、高剂量组的染磷量分别为3、6、9mg／kg体重、对照组给予等量的花生油，腹腔注射染毒48h。时间--效应关系研究取小鼠64只，随机分成8组，实验组以9mg／kg体重的剂量一次性腹腔注射染毒，分别于染毒O、12、24、48h后断头处死小鼠，各组配以相应的对照组。亚急性毒理实验取小鼠80只，随机分成以下10组：O、1、2、3、4周时问组，以1．5mg／kg体重的剂量隔日腹腔注射染毒，每组配以相应的对照组。[结果]随染磷剂量的增高和染磷时间的延长，小鼠肝匀浆HSP70的表达也逐渐升高，急性染磷的HSP70表达升高比亚急性染磷明显；小鼠肝匀浆NOS活性和NO含量逐渐升高，并呈现良好的剂量--反应关系和时间--效应关系。[结论]在黄磷染毒过程中，HSP70对细胞起着很重要的保护作用。提示NOS和NO有可能作为黄磷中毒早期健康效应的生物标志物。     

金属硫蛋白对镍铬染毒小鼠睾丸损伤保护作用

目的 探讨金属硫蛋白（MT）对镍铬联合染毒小鼠睾丸损伤的保护作用。方法 50只昆明种雄性小鼠随机分为5组：对照组,镍铬染毒组,低、中、高剂量MT组。对照组灌胃生理盐水,镍铬染毒组及MT组灌胃（NiSO₄ 1.0、K₂Cr₂O₇ 0.5 mg/kg混合溶液）,低、中、高剂量MT组分别灌胃5.0、10.0、15.0 mg/kg MT溶液,每日1次,连续20 d;实验结束处死动物检测睾丸、附睾脏器系数,睾丸病理形态学、精子质量观察,试剂盒检测睾丸细胞凋亡、超氧化物岐化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量。结果 与对照组比较,镍铬染毒组小鼠睾丸、附睾脏器系数[分别为（0.73±0.10）%、（0.24±0.07%）减小,睾丸结构受损,精子数[（9.96±0.67）10⁷个/g附睾]及活动度[（39.23±4.87）%]下降,睾丸细胞凋亡率[（20.65±1.68）%]及MDA含量[（112.51±7.21）nmol/g prot]升高,SOD活力[（118.17±12.28）U/g prot]下降（P<0.05）;与镍铬染毒组比较,高剂量MT组小鼠睾丸、附睾脏器系数[分别为（1.25±0.14）%、（0.39±0.11）%]明显升高,精子数[（17.79±0.86）10⁷个/g附睾]及活动度[（70.48±6.24）%]上升,睾丸细胞凋亡率[（9.02±1.14）%]及MDA含量[（25.55±5.81）nmol/g prot]下降,SOD活力[（313.19±15.37）U/g prot]升高（P<0.05）。结论 镍铬联合染毒对小鼠睾丸有损伤作用,一定剂量的MT对其受损的睾丸有修复作用,其作用机制可能与抗氧化作用有关。     

纳米氧化石墨烯一次性染毒对小鼠肝脏的急性氧化损伤作用

目的探讨纳米氧化石墨烯(nano-GO)对小鼠肝脏的急性氧化损伤作用。方法将80只健康清洁级ICR小鼠随机分为对照(高纯水)组和0.35 mg/kg(1/16 LD50)、0.70 mg/kg(1/8 LD50)、1.40 mg/kg(1/4 LD50)nano-GO染毒组,每组20只,雌雄各半。采用1次性尾静脉注射染毒,染毒容量为10 ml/kg。分别于注射3、15 d后,检测小鼠肝脏组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力和丙二醛(MDA)含量。结果染毒3 d后,与对照组比较,各剂量nano-GO染毒组雌性小鼠和0.35 mg/kg nano-GO染毒组雄性小鼠肝脏的MDA含量及各剂量nano-GO染毒组小鼠肝脏的GSH-Px活力以及0.35、0.70 mg/kg nano-GO染毒组雄性小鼠肝脏的SOD活力均升高,0.70、1.40 mg/kg nano-GO染毒组雄性小鼠肝脏MDA含量和0.35、0.70 mg/kg nano-GO染毒组雌性小鼠肝脏的SOD活力均下降,差异均有统计学意义(P0.05)。染毒15 d后,与对照组比较,各剂量nano-GO染毒组小鼠肝脏的SOD活力升高,0.70 mg/kg和1.40 mg/kg nano-GO染毒组小鼠肝脏的GSH-Px活力下降,差异均有统计学意义(P0.05);而各剂量nano-GO染毒组小鼠肝脏的MDA含量均无明显改变。结论一次性尾静脉注射nano-GO后,肝脏可产生脂质过氧化作用,干扰小鼠肝脏抗氧化酶的活力。     

过氧化物酶体增殖物激活受体α基因在全氟辛酸致大鼠肝BRL-3A细胞氧化损伤中的作用

目的通过抑制和激活基因表达的方式,研究过氧化物酶体增殖物激活受体α基因(PPARα)在全氟辛酸(PFOA)致大鼠肝BRL-3A细胞氧化损伤中的作用。方法体外培养大鼠肝BRL-3A细胞,分为空白对照组(NC)、PFOA实验对照组、PPARα抑制剂组(GW6471)、PPARα激动剂组(WY14643)、PPARα抑制剂预处理PFOA组(GW6471+PFOA)、PPARα激动剂预处理PFOA组(WY14643+PFOA)。荧光免疫细胞化学检测法检测基因抑制和激动表达情况;自由基指示剂H2DCFDA检测活性氧(ROS)含量;q PCR检测PPARα及其下游基因Cyp4a1的表达;Western blot检测PPARα蛋白表达水平。结果通过抑制剂和激动剂成功抑制和激动了PPARα在大鼠肝BRL-3A细胞中的表达。GW6471+PFOA组与空白对照组、PFOA实验对照组比较,细胞内ROS含量显著升高(P0.05);WY14643+PFOA组与空白对照组、PFOA实验对照组相比,ROS含量明显下降(P0.05)。PPARα及其下游基因Cyp4a1在GW6471+PFOA组中的表达比PPARα抑制剂组高,但相较PFOA实验对照组明显降低(P0.05)。WY14643+PFOA组相关基因的表达虽然低于PPARα激动剂组,但显著高于PFOA实验对照组(P0.05)。GW6471+PFOA组中PPARα蛋白的表达水平较抑制剂组有所上调,但与空白对照组相比差异无统计学意义。WY14643+PFOA组中PPARα蛋白的表达水平与激动剂组比差异无统计学意义,但却显著高于PFOA实验对照组(P0.05)。结论 PFOA的暴露可以激活PPARα的表达,减轻细胞内ROS的累积,PPARα在PFOA导致的大鼠肝脏细胞氧化损伤中起到了一定的保护作用。     

肝脏灌注损伤过程中TNF-α的表达

探讨肝缺血再灌注过程中TNF-α浸润与肝损伤之间的关系及作用机制。建立肝缺血再灌注动物模型，用免疫组织化学方法染色显示肝组织细胞TNF-α的表达情况；并用Sampl—PCI图象分析系统进行半定量分析。TNF-α免疫组化染色检测结果显示：实验组肝组织细胞可见大量染色阳性细胞，免疫阳性细胞半定量分析，实验组平均光密度值高于对照组和正常组，差异有显著性（P〈0．01）。结论TNF-α参与肝缺血再灌注损伤过程，其升高程度与肝组织损伤程度有关。     

细胞外调节蛋白激酶通路活化参与邻苯二甲酸二丁酯诱导昆明小鼠睾丸损伤

目的探究细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinase,ERK)通路活化参与邻苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate,DBP)诱导昆明(KM)小鼠睾丸损伤的作用机制。方法性成熟雄性KM小鼠56只,随机分为8组:对照组、50mg/(kg·d) DBP组、50 mg/(kg·d)维生素E(vitmin E,VE)组、2 mg/(kg·d)尼莫地平(nimodipine,Ni)组、DBP+VE组、DBP+Ni组、Ni+VE组、DBP+Ni+VE组,处理28 d后测定小鼠体重、睾丸重量、脏器系数及精子密度,观察睾丸的组织病理学结果,DCFH-DA荧光定量法检测小鼠睾丸中的活性氧(reactive oxygen species,ROS)、硫代巴比妥酸(TBA)比色法检测丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,酶联免疫吸附法(ELISA)检测钙调蛋白(calmodulin,CaM)含量及磷酸化ERK(p-ERK)水平。结果与对照组比较,50 mg/(kg·d) DBP组小鼠体重、睾丸重量以及睾丸脏器系数下降为(36. 48±0. 99) g、(0. 25±0. 01) g、(0. 54±0. 09)%(P 0. 05),精子密度下降为(11. 70±0. 23)×10~6/m L(P 0. 05),睾丸组织损伤程度增加,ROS荧光强度、MDA含量增加为(1698. 18±77. 58)、(1. 65±0. 13)μmol/g prot(P 0. 05),CaM含量下降为(45. 61±2. 69)μg/m L(P 0. 05),p-ERK水平增加为(1150. 43±48. 79) pg/m L(P 0. 05);加入抗氧化剂VE和钙离子通道拮抗剂Ni处理后,与50 mg/(kg·d)DBP组比较,DBP+Ni+VE组小鼠体重、睾丸脏器系数增加为(40. 69±0. 75) g、(0. 69±0. 03)%(P 0. 05),精子密度增加为(13. 50±0. 16)×10~6/m L(P 0. 05),睾丸组织损伤程度缓解,ROS荧光强度、MDA含量降低为(1080. 60±98. 64)、(1. 06±0. 13)μmol/g prot(P 0. 05),CaM含量增加为(54. 76±1. 74)μg/m L(P 0. 05),p-ERK水平下降为(904. 55±64. 73) pg/m L(P 0. 05)。结论 VE作为抗氧化剂,Ni作为钙离子通道拮抗剂,均可不同程度地降低DBP对小鼠睾丸组织的损伤,推测DBP可能经氧化应激与Ca2+信号激活ERK1/2通路,从而导致小鼠睾丸组织的损伤。     

全氟辛酸对大鼠肝脏氧化应激与PPARα及其所调控的CYP4A1基因表达的影响

目的研究全氟辛酸(perfluorooctanoic acid,PFOA)致大鼠肝脏氧化应激以及对过氧化物酶体增殖剂激活受体(PPAR)α、细胞色素P450(CYP)4A1基因以及PPARα蛋白表达的影响。方法将28只雄性SD大鼠随机分为4组,每组7只,分别为对照组(双蒸水)、低剂量组[PFOA 1 mg/(kg·d)]、中剂量组[PFOA 5 mg/(kg·d)]和高剂量组[PFOA 25 mg/(kg·d)],连续14 d经口灌胃后处死,称重肝脏并计算肝脏系数。用生化检测试剂盒测定大鼠肝脏组织总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性以及丙二醛(MDA)含量;荧光定量PCR检测PPARα及CYP4A1基因的mRNA转录水平;Western blot检测PPARα蛋白表达水平。结果从灌胃第5天开始,高剂量组体重与对照组差异有统计学意义(P<0.05)。中、高剂量组肝脏重量和肝脏系数与对照组相比,均显著升高(P<0.05)。低剂量组大鼠肝脏SOD和GSH-Px活性与对照组相比显著升高(P<0.05);中、高剂量组大鼠肝脏MDA含量是对照组2.5倍和3.5倍(P<0.05)。低、中、高剂量组PPARα及其所调控的CYP4A1基因mRNA表达水平均被显著诱导升高。低、中、高剂量组PPARα蛋白表达均上调(P<0.05)。结论 PFOA暴露可导致大鼠肝脏氧化应激,从而引起SOD和GSH-Px以及MDA的变化。同时,PFOA暴露可诱导大鼠肝脏的PPARα、CYP4A1基因表达上调,可增强脂肪酸β氧化,从而导致脂质过氧化产生,对大鼠肝脏有明显的毒性作用。     

甲醛染毒小鼠睾丸DNA蛋白质损伤及相关基因蛋白质表达的变化

目的研究甲醛对小鼠睾丸细胞DNA损伤和交联作用及相关基因Bcl-2、Bax蛋白质表达的影响。方法用0.2～20.0mg/kg的甲醛对小鼠进行染毒,采用彗星实验检测小鼠的睾丸细胞DNA损伤及DNA蛋白质交联;进一步应用免疫组化技术结合显微镜图像分析技术检测睾丸细胞的Bcl-2和Bax的表达情况。结果低浓度(0.2mg/kg)的甲醛能引起小鼠睾丸细胞明显的DNA损伤,高浓度(20.0mg/kg)的甲醛引起DNA蛋白质交联。各浓度处理组Bax阳性表达率明显增多(P<0.05),而各浓度处理组Bcl-2的阳性表达率明显低于对照组(P<0.05)。结论甲醛能引起DNA损伤和交联,以及Bcl-2、Bax的表达发生显著性改变。     

不同剂量刀豆蛋白A诱导小鼠肝脏急性损伤的实验研究

目的研究不同剂量刀豆蛋白A(ConA)对小鼠肝脏损伤的影响。方法 60只小鼠被随机分为6组,对照组和试验组(3、6、9、12、15mg/kgBW)。对照组尾静脉注射医用生理盐水,试验组尾静脉注射剂量为3~15mg/kgBW的ConA,禁食8 h后眼球采血,并取肝组织,进行各项指标的检测及病理组织学检查。结果随着ConA剂量的提高,小鼠肝脾肿大较为明显,肝脾指数与对照组相比,差异有统计学意义(P0.01)。血浆谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)在较高剂量下升高比较明显(P0.01);ConA剂量的增加对血浆还原性谷胱甘肽(GSH)的影响较为明显(P0.01),而对超氧化物歧化酶(SOD)影响并不是很大。肝匀浆中的糖原含量、GSH-PX以及SOD活性均有不同程度的降低,但与ConA剂量没有对应关系。肝脏病变在上述剂量范围内不明显。结论较高剂量的ConA可引起小鼠血浆和肝脏生化指标的显著变化,对肝脏病变影响不大。     

硒激活Nrf2对镉致小鼠肝脏氧化损伤保护作用的研究

摘要:目的　研究硒对镉暴露小鼠肝脏转录因子（Nrf2）表达的影响及其保护作用的机制。方法　60只ICR小鼠随机分为5组,对照组采用去离子水灌胃（10 ml/kg）,镉暴露组用氯化镉（7 mg/kg）灌胃,硒处理组分别采用不同浓度的亚硒酸钠（0.05、0.1、0.2 mg/kg）灌胃后用氯化镉（7 mg/kg）灌胃,30 d后颈椎脱臼处死。光镜下观察肝脏形态学变化,测定血清谷丙转氨酶（ALT）和血清谷草转氨酶（AST）、肝匀浆超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、活性氧（ROS）,蛋白印迹法（Western blot）检测肝脏Nrf2表达水平。结果　光镜观察镉暴露组小鼠肝脏结构形态有明显损伤,而硒处理组（0.2 mg/kg）小鼠肝脏形态损伤不明显。镉暴露组AST、ALT、MDA、ROS均高于对照组,有统计学意义（P＜0.05）,硒处理组（0.2 mg/kg）AST、MDA、ROS低于单独镉暴露组,差异有统计学意义（P＜0.05）。镉暴露组和硒处理组肝脏Nrf2的表达量均高于对照组,其中硒处理组Nrf2（0.1、0.2 mg/kg）的表达量明显高于镉暴露组（P＜0.05）。结论　硒可通过抑制ROS和上调Nrf2蛋白表达,对镉暴露小鼠肝脏的氧化损伤具有保护作用。     

全氟辛烷磺酸钾对胎鼠肝脏信号因子STAT3蛋白表达的影响

[目的]以胎鼠肝脏细胞中的信号转导及转录激活因子3（STAT3）蛋白表达的阳性细胞率（STAT3蛋白表达量）为指标,探讨全氟辛烷磺酸钾（PFOS。K）对小鼠胚胎的肝脏发育是否有影响,进而了解其胚胎毒作用。[方法]用染毒剂量分别为3、12mg／kg（按体重计）两个浓度的PFOS—K混悬液给怀孕9d的雌鼠灌胃,4d后（即怀孕第13．5天时）采用免疫组织化学法检测胎鼠肝脏的STAT3蛋白表达量。[结果]3、12mg／kg两个剂量组的阳性细胞表达率分别为41．62％和14．77％,差异有统计学意义（P〈0．01）。[结论]PFOS—K能够影响小鼠胚肝脏发育过程中的信号转导因子STAT3蛋白的表达量,对哺乳动物的模式动物胎鼠肝脏细胞具有一定的胚胎毒作用。     

亚慢性镉暴露BALB/c小鼠丝裂原活化蛋白激酶信号通路蛋白在肾损伤中的作用

目的 探讨丝裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinase,MAPK）和细胞外信号调节激酶（extracellular signal-regulated kinases,ERK）在亚慢性镉染毒小鼠肾脏损害发生后表达的变化及其意义。方法 21只雌性BALB/c小鼠随机分成3组,高、低剂量染镉组分别腹腔注射CdCl2溶液10.0、2.5 μmol/kg,对照组腹腔注射等量生理盐水,每周3次连续染毒14周。对肾脏进行苏木精-伊红(HE)染色、碘酸雪夫(PAS)染色和胶原纤维染色（Masson染色）,观察肾组织病理变化;免疫印迹(Western blot)法检测肾脏中ERK、p38、c-Jun氨基末端激酶(JNK)蛋白及其磷酸化蛋白的表达差异。结果 高剂量染镉组pERK、pp38和pJNK蛋白表达水平均高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05),低剂量染镉组pJNK蛋白表达水平高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。镉染毒组的bcl-2、bax蛋白表达水平降低,且bcl-2/bax比值低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05)。镉染毒组肾小球和肾小管均有损害。结论 CdCl2可能通过调节ERK、JNK和p38蛋白激酶信号相关蛋白表达水平的变化,引发肾脏损害。     

钙结合蛋白S100A8在内毒素休克小鼠肝脏中的表达

[目的]探讨S100A8在内毒素休克小鼠肝脏组织中的表达。[方法]SPF级BALB/c小鼠随机分为正常对照组和LPS处理组(LPS刺激1h、3h和6h,LPS剂量为35mg/kg);采用免疫组织化学染色法检测两组肝脏组织S100A8蛋白水平的变化。[结果]S100A8在内毒素休克小鼠肝组织的胞浆及胞膜上表达增强。[结论]S100A8在内毒素休克的肝组织中表达增强,提示S100A8可能参与LPS诱导的信号转导。     

小鼠严重TBI后GR在大脑皮质和肝脏蛋白表达变化的差异

[目的]研究小鼠闭合性严重颅脑外伤(Traumatic Brain Injury,TBI)后中枢大脑皮质糖皮质激素受体(GR)蛋白水平的变化与外周肝脏GR蛋白水平的变化、血清皮质醇(cortisol)、促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)变化的关系。[方法]利用BIM-III型小型多功能动物撞击机对小鼠清醒致伤,于致伤后30min、2h、8h、24h、48h、72h采用Western Blot免疫印迹法检测大脑皮质和肝脏GR的蛋白水平的变化,酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组外周血清中ACTH含量,放免法检测皮质醇含量。[结果]致伤后大脑皮质和肝脏GR均在致伤2h后开始出现蛋白水平表达降低,8h后呈现恢复趋势,肝脏GR至72h仍未完全正常;而大脑皮质GR在致伤后24h再次呈现持续的表达降低。外周血中ACTH、皮质醇较对照组有明显升高,均具有的两个峰值特征,但是两者的高峰期并不完全吻合。[结论]严重颅脑外伤后中枢和外周组织均存在糖皮质激素抵抗,两者的变化具有时相差异性。     

原花青素对硫酸镍染毒大鼠肝脏细胞Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的观察原花青素对硫酸镍染毒大鼠肝脏细胞凋亡相关基因Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白表达的影响,探讨原花青素在拮抗镍诱导肝细胞凋亡中发挥的作用及可能的调控机制。方法选择健康Wistar雄性大鼠40只,每组8只,硫酸镍模型组给予硫酸镍2.50mg/kg腹腔注射染毒及生理盐水灌胃处理,原花青素干预组在用硫酸镍2.50mg/kg腹腔注射染毒的同时,给予原花青素水溶液1.25、2.50、5.00mg/kg等容积灌胃处理,1次/d,连续30d。采用Western Blot技术检测各组大鼠肝脏细胞中Caspase-3、Bcl-2及Bax的蛋白表达水平。结果原花青素可拮抗硫酸镍染毒大鼠肝脏细胞中Caspase-3的活化,并引起Bcl-2蛋白表达量的增强及Bax蛋白表达量的减弱,且Bax/Bcl-2比值随着原花青素干预剂量的增加呈下降趋势,其中原花青素1.25mg/kg剂量组Pro-Caspase-3活性、5.00mg/kg剂量组Cleaved-Caspase-3活性与硫酸镍模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05);原花青素1.25mg/kg剂量组Bcl-2蛋白表达量、1.25和5.00mg/kg剂量组Bax/Bcl-2比值与硫酸镍模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论原花青素可拮抗硫酸镍诱导的大鼠肝脏细胞凋亡,其机制可能与拮抗Caspase-3蛋白活化、并抑制Bcl-2蛋白表达的下调和Bax蛋白表达上调有关。