线粒体ATP敏感钾通道对哮喘大鼠气道平滑肌细胞表型转化的影响

目的 研究线粒体ATP敏感钾通道(mitoKATP)对哮喘气道平滑肌细胞(ASMCs)表型转化的影响.方法 腹腔注射和雾化吸人制备哮喘大鼠模型.取哮喘及正常大鼠ASMCs,分为以下6组进行干预:正常对照组;正常+mi-toKATP开放剂diazoxide组;正常+mitoKATP阻断剂5-HD组;哮喘对照组;哮喘+diazoxide组;哮喘+5-HD组.激光共聚焦显微镜检测各组ASMCs R-123荧光强度以反映线粒体膜电位(△ψm),Western blot法检测各组细胞α一肌动蛋白(ractin)表达量.结果 ①与正常对照组比较.哮喘对照组R-123荧光强度明显增强,α-actin表达明显下调(均P<0.05).②diazoxide干预ASMCs 24 h后.正常及哮喘ASMCs R-123荧光强度均明显增强(均P<0.05);正常ASMCs α-actin表达量无明显变化(P>0.05).但哮喘ASMCs α-actin表达量明显增加(P<0.05).结论 diazoxide引起mitoKATP开放,并逆转哮喘ASMCs由收缩型向合成型发生的表型转化.     

IL-19对哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞增殖的影响

目的探讨IL-19对哮喘大鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖的作用。方法通过对大鼠进行雾化卵清蛋白,制备哮喘模型大鼠。提取哮喘大鼠ASMCs进行培养,分别以1μg/L、10μg/L、100μg/L IL-19干预ASMCs生长。采用流式细胞仪、MTT法检测ASMCs增殖情况,观察不同浓度IL-19对ASMCs增殖的影响。结果与正常鼠相比,慢性哮喘大鼠ASMCs增殖明显,处于S期的细胞比例明显增高。经10μg/L、100μg/L IL-19干预后,慢性哮喘大鼠ASMCs处于S期的细胞比例减少,增殖亦减弱。且两组间比较有明显差异。而经1μg/L IL-19干预后,慢性哮喘大鼠ASMCs处于S期的细胞比例及增殖均无明显变化。结论一定浓度的IL-19可能抑制慢性哮喘大鼠ASMCs的增殖。     

咳喘宁对RSV诱发哮喘大鼠血清IL-4、IFN-γ的调节作用及对支气管平滑肌增殖活性的影响

目的：观察咳喘宁对RSV诱发哮喘大鼠血清IL-4、IFN-γ的调节作用及对气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells,ASMCs)增殖水平（OD值）的影响。方法将60只大鼠随机分为6组,除正常组外,其余大鼠通过致敏、诱喘、病毒激发哮喘进行造模。造模完成当天分组干预,并用ELISA进行IL-4、IFN-γ水平的测定。造模成功后取支气管平滑肌进行细胞培养,倒置显微镜下化学荧光法鉴定为平滑肌细胞。制备大鼠不同组含药血清并加入第3-7代ASMCs中干预。运用MTT法检测各组ASMCs增殖水平（OD值）。结果 ELISA法结果,与模型组相比,西药治疗组、咳喘宁各剂量组血清IL-4、IFN-γ水平差异具有统计学意义（P<0.05）;与咳喘宁大、小剂量组相比,中剂量组血清IL-4、IFN-γ水平差异有统计学意义（P<0.05）。MTT法结果,与空白对照组比较,其余5组差异均有显著统计学意义（P<0.01）;与咳喘宁大、小剂量血清中比较,中剂量血清组差异有统计学意义（P<0.05）。结论咳喘宁对治疗RSV诱发的哮喘大鼠疗效较为显著,通过上调IFN-r水平、降低IL-4水平表达从而降低气道炎症反应,维持Th1/Th2平衡来调节机体免疫机制。咳喘宁治疗支气管哮喘可能与其能够抑制气道平滑肌增殖、影响哮喘气道重塑关系密切。     

地塞米松对哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖及ERK1／2 mRNA表达水平的影响

目的探讨地塞米松对哮喘大鼠气道平滑肌细胞（ASMCs）增殖及ASMCs上ERK1／2 mRNA表达水平的影响。方法建立哮喘大鼠模型,取气道平滑肌细胞进行原代培养,实验分对照组、哮喘组、地塞米松干预组（终浓度为100HM）。采用流式细胞仪检测各组ASMCs增殖周期的变化。RT—PCR检测ASMCs上ERK1／2 mRNA表达。结果与对照组相比,哮喘组S＋G2/M期细胞所占比例明显增高,G0／G1期细胞所占比例明显减小（均P〈0．01）;与哮喘组相比,地塞米松干预组S＋G/M期细胞所占比例明显降低,G0／G1期细胞所占比例明显增高（均P〈0．01）;干预组S＋G2／M期细胞所占比例仍高于对照组（P〈0．01）。哮喘组ERK1／2 mRNA表达量较对照组和干预组显著增加（均P〈0．01）,干预组与对照组之间比较无差异（P〉0．05）。结论哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖明显,ERK1／2 mRNA表达上调,该结果提示细胞外信号调节蛋白激酶（ERK）可能参与了气道重塑中平滑肌细胞的增殖过程。地塞米松能下调哮喘大鼠ASMCs上ERK1／2 mRNA的表达,能抑制气道重塑中平滑肌细胞的异常增殖。早期给予地塞米松干预可能延缓气道重塑的进程。     

SERCA2表达对哮喘大鼠气道平滑肌细胞分泌IL-8的影响

目的探讨哮喘大鼠气道平滑肌细胞（ASMCs）中肌浆/内质网Ca2+-ATP酶（SERCA2）的表达对IL-8分泌的影响。方法建立卵清蛋白（OVA）诱导的哮喘大鼠模型,分离原代ASMCs,分别用qRT-PCR及Westernblotting、FuraPE-3/AM和ELISA法检测各组ASMCs中SERCA2表达、细胞内Ca2+浓度（[Ca2+]i）和IL-8,利用siRNA技术下调SERCA2、毒胡萝卜素（TSG）抑制SERCA2以及吡咯烷二硫氨基甲酸（PDTC）抑制NF-资B活化,检测不同状态下IL-8的变化。结果与正常组比较,哮喘组SERCA2的表达减少,经缓激肽（BK）刺激的钙瞬变峰值明显下降,需更长时间重新摄取钙使[Ca2+]i恢复至基线水平,IL-8基础值和经IL-17刺激后的诱导值均增加（P＜0.05或0.01）。无论有无IL-17刺激,基因下调组IL-8mRNA表达和分泌均显著增加（均P＜0.01）,与哮喘对照组比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）。哮喘组I资B琢磷酸化和NF-资Bp65核转位均较正常组增加（P＜0.05或0.01）,基因下调组和TSG抑制组的NF-资Bp65核转位亦增加（P＜0.05或0.01）,而使用PDTC后,基因下调组、哮喘对照组和正常对照组在IL-17刺激诱导下的IL-8mRNA表达和分泌均减少（P＜0.05或0.01）。结论哮喘大鼠ASMCs中SERCA2表达减少,导致钙稳态的改变,可能通过增强NF-资B活化来介导IL-8分泌亢进。     

p21Ras对哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖的影响

目的观察p21Ras对哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖的影响。方法 14只SD大鼠,随机分为哮喘组和对照组,建立大鼠哮喘模型,采用酶消化法培养气道平滑肌细胞,免疫组织化学鉴定为平滑肌细胞,透射电镜观察细胞形态,分别取第3代对照组及哮喘组细胞,各自分为以下4个处理组,即对照组分为:a.对照空白组:不加任何干预剂;b.对照干预组;哮喘组分为:c.哮喘空白组;d.哮喘干预组。加入10mMFPTIII干预,流式细胞仪分析细胞周期分布,经Lev-ene’s方差齐性检验,按α=0.05水准,4组总体方差齐,组间比较采用Bonferron法检验,结果通过p21Ras干预后,哮喘空白组G0/G1期气道平滑肌细胞细胞(AMSC)比例显著低于对照空白组及哮喘干预组(P0.05);S期和S+G2/M期ASMC比例显著高于上述两组(P0.05);对照空白组与对照干预组差别不显著(P﹤0.05)。结论 p21Ras影响哮喘大鼠气道平滑肌细胞周期时相中G0/G1的比例,使其增殖受到抑制,提示p21Ras与哮喘气道平滑肌的增殖密切相关。     

青藤碱对大鼠肥大细胞RBL－2H3活化的影响及机制

目的：探讨青藤碱对大鼠肥大细胞RBL－2H3活化的影响及其作用机制。方法将培养的大鼠RBL－2H3细胞随机分为对照Ⅰ组和青藤碱组。青藤碱组用青藤碱溶液处理,对照Ⅰ组则用PBS处理。利用生化法检测两组细胞培养上清中β－氨基己糖苷酶释放率,并用荧光定量PCR和Western blot方法检测细胞中信号调节蛋白α（SIRPα）mRNA和蛋白的表达水平。构建SIRPα过表达重组质粒或SIRPαsiRNA,将RBL－2H3细胞分为对照Ⅱ组、空载质粒组、过表达组、对照Ⅲ组、空白组、沉默组,对照Ⅱ组和对照Ⅲ组不进行转染,空载质粒组转染空白质粒,过表达组转染SIRPα过表达质粒,空白组转染非特异性siRNA,沉默组转染SIRPαsiRNA,转染结束后向对照Ⅲ组、空白组、沉默组添加青藤碱处理,并检测SIRPα的表达及炎症因子白细胞介素（ IL）－4、IL－6和肿瘤坏死因子－α（ TNF－α）的含量。结果与对照Ⅰ组比较,青藤碱组细胞中β－氨基己糖苷酶释放率显著降低（P＝0．000）,SIRPαmRNA及蛋白表达量均显著升高（P＝0．000）。与对照Ⅱ组和空载质粒组比较,过表达组细胞中SIRPαmRNA表达量显著升高（P＝0．000）,IL－4、IL－6和TNF－α含量均明显降低（P＝0．000）。与对照Ⅲ组和空白组比较,沉默组细胞SIRPαmRNA表达量显著降低（P＝0．000）,IL－4、IL－6和TNF－α含量均显著升高（ P＝0．000）。结论青藤碱处理能够显著抑制大鼠RBL－2H3细胞活化并上调细胞中SIRPα基因的表达,而SIRPα基因介导了青藤碱的这种抑制作用。     

激活的肺动脉成纤维细胞Piezo1通道通过活化p38-MAPK促进IL-6分泌诱发肺动脉高压的研究

目的 利用大鼠肺动脉成纤维细胞探讨机械敏感Piezo1通道与IL-6分泌的关系,分析Piezo1通道在肺动脉高压（PAH）发展过程中的作用机制。方法 利用组织块法获取成年SD大鼠肺动脉组织并分离培养肺动脉成纤维细胞;将细胞分为对照组和流体剪切力组,用流体剪切力系统在12 dyn/cm2条件下培养流体剪切力组细胞24 h,对照组不做额外处理;利用Western blot和PCR技术分别检测对照组和流体剪切力组细胞Piezo1蛋白和mRNA水平;将肺动脉成纤维细胞分为PBS组、Yoda1组和Yoda1+Dooku1组并分别加入10 μM PBS、Yoda1和Yoda1+Dooku1培养24 h,24 h后利用检测各组细胞IL-6蛋白和mRNA水平;取Yoda1组细胞分为PBS组、ERK抑制剂组、JNK抑制剂组和p38MAPK抑制剂组分别加入PBS、ERK抑制剂(PD98059,10 μM)、JNK抑制剂（SP600125,10 μM）和p38 MAPK抑制剂（SB203580,5 μM）,培养24 h后检测IL-6 mRNA水平;在PBS组、Yoda1组和Yoda1+Dooku1组细胞进行对应处理10 min后检测磷酸化p38 MAPK蛋白水平。结果 成功分离培养大鼠肺动脉成纤维细胞;12 dyn/cm2流体剪切力环境培养24 h后,相较于对照组,流体剪切力组细胞中Piezo1蛋白和mRNA水平均显著升高（P＜0.05）。PBS组、Yoda1组和Yoda1+Dooku1组细胞培养24 h后,相较于PBS组和Yoda1+Dooku1组,Yoda1组细胞IL-6蛋白和mRNA水平均显著增高（P＜0.05）,相较于PBS组,Yoda1+Dooku1组细胞IL-6蛋白和mRNA水平差异无统计学意义（P＞0.05）。相较于PBS组、ERK抑制剂组和JNK抑制剂组,p38 MAPK抑制剂组IL-6 mRNA水平受到抑制而显著降低（P＜0.05）,但PBS组、ERK抑制剂组和JNK抑制剂组IL-6 mRNA水平两两相比差异均无统计学意义（P＞0.05）。PBS组、Yoda1组和Yoda1+Dooku1组细胞培养10 min后各组磷酸化p38 MAPK水平显示,相较于PBS组,Yoda1组磷酸化p38水平显著升高（P＜0.05）,而Yoda1+Dooku1组磷酸化p38水平差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 血管内流体剪切力改变可上调并激活肺动脉成纤维细胞Piezo1的表达,介导Ca2+ 内流活化p38 MAPK通路促进IL-6的分泌,进一步导致血管重塑,加快PAH进程     

TGF-β_1对不同阶段哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞增殖的作用

目的探讨TGF-β1对不同阶段哮喘大鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖的作用。方法建立2周、6周哮喘大鼠模型,分别以1μg/L、10μg/L和100μg/LTGF-β1干预ASMCs生长。采用流式细胞仪、MTT法检测ASMCs增殖情况,观察不同浓度TGF-β1对ASMCs增殖的影响。结果 2周和6周哮喘组ASMCs的S期比例、A值分别为(34.31±1.41)%、(35.96±3.46)%;(0.546±0.005)、(0.559±0.009)与对照组(12.24±2.64)%、(0.289±0.009)比较均显著增高(均P0.01)。2周、6周哮喘模型组的各TGF-β1干预组ASMCs的S期比例、A值与各自哮喘组比较均显著升高(均P0.01),10μg/L和100μg/LTGF-β1组比1μg/LTGF-β1组对ASMCs增殖作用明显增加(P0.01),10μg/LTGF-β1组和100μg/LTGF-β1组相比,ASMCs增殖细胞占细胞总数的百分比无明显变化,两种浓度增殖作用无有明显差别(P0.05)。而2周和6周哮喘组相比,加入不同浓度TGF-β1干预后的差别不大(P0.05)。结论与正常鼠相比,2周和6周哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖明显,处于S期的细胞比例明显增高,6周哮喘大鼠气道平滑肌较2周哮喘大鼠增殖更明显。经TGF-β1干预后,2周和6周哮喘哮喘大鼠气道平滑肌细胞处于S期的细胞比例增加,增殖增强,提示TGF-β1可能在哮喘早期阶段即可促进大鼠气道平滑肌细胞增殖,并促进各阶段哮喘大鼠气道平滑肌细胞持续增殖。     

细胞外基质对哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞免疫调节作用

目的 研究在哮喘状态下,细胞外基质(extracellular matrix,ECM)对气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells,ASMCs)的免疫调节作用.方法 健康雄性Wistar大鼠随机分为哮喘组(8只)及正常对照组(8只).大鼠哮喘模型使用卵清蛋白(OVA)致敏及激发的方法建立.分离培养得到的大鼠ASMCs分别置于包被有LA及COL-1的细胞瓶中进行培养.结果 Western blot法检测结果显示,eotaxin 、TGF-β1的表达,哮喘空白组高于正常对照空白组(P＜0.05),哮喘组内ECM的干预促进表达的增加(P＜0.05),正常对照组表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 ECM影响哮喘ASMCs的免疫功能.     

微囊蛋白1及细胞内钙离子在TGF-β1诱导哮喘大鼠气道平滑肌增殖中的作用

目的探讨微囊蛋白1、细胞内钙离子在转化生长因子茁1（TGF-茁1）诱导哮喘大鼠气道平滑肌细胞（ASMCs）增殖中的作用。方法离体培养大鼠ASMCs，并分为正常组、哮喘组、TGF-茁1干预组、TGF-茁1+β-环糊精（茁-CD）干预组，CCK-8法检测各组细胞的增殖水平；Westernblot法检测各组微囊蛋白1含量；流式细胞仪检测各组ASMCs胞内钙离子荧光强度。结果哮喘组OD值较正常组明显增加（P＜0.05），TGF-茁1组OD值较正常组、哮喘组明显增加（P＜0.05），TGF-茁1+茁-CD组OD值较TGF-茁1组明显增加（P＜0.05）。TGF-茁1组较正常组和哮喘组微囊蛋白1含量减少（P＜0.05），TGF-茁1+茁-CD组较TGF-β1组微囊蛋白1含量减少（P＜0.05）。TGF-茁1组较正常组和哮喘组胞内钙离子荧光强度增加（P＜0.05），TGF-茁1+茁-CD组较TGF-茁1组胞内钙离子荧光强度增加（P＜0.05）。相关关系分析示细胞增殖水平与微囊蛋白1含量呈负相关（r=-0.51，P＜0.05），细胞增殖水平与钙离子荧光强度呈正相关（r=0.60，P＜0.05），微囊蛋白1含量与钙离子荧光强度呈负相关（r=-0.87，P＜0.05）。结论微囊蛋白1可以抑制TGF-茁1诱导的ASMCs增殖,这种抑制作用可能部分是通过减少胞内游离钙离子来实现的。     

重组IL-4R蛋白对SD大鼠过敏性哮喘干预作用的研究

目的探索重组IL-4R蛋白对过敏性哮喘动物模型的干预作用。方法选择6周龄SD大鼠60只,采用安全随机分组法分成哮喘模型组、IL-4R组、布地奈德组和对照组,每组15只。哮喘模型组在腹部选取3处于皮下注射10%鸡卵清白蛋白（OVA）混合液1ml（OVA100mg、氢氧化铝100mg及灭活的百日咳杆菌5×109个）进行致敏,1周后用上述同样药物再进行致敏,第2次致敏1周后将大鼠分别放入不完全封闭的箱中,用5%OVA与0.9%氯化钠混合溶液,连续10d超声雾化激发30min。IL-4R组和布地奈德组同法造模,但每次雾化激发前30min,IL-4R组腹腔注射重组IL-4R蛋白稀释液（400滋g/d）。布地奈德组腹腔注射布地奈德稀释液（400滋g/d）,对照组用0.9%氯化钠溶液连续10d超声雾化激发30min。取4组大鼠肺组织作HE染色的光镜病理切片,观察肺组织病理变化。建立间接ELISA方法,检测实验中4组大鼠肺泡灌洗液中的IL-4和IFN-γ的含量。结果哮喘模型组大鼠肺组织有大量嗜酸性粒细胞浸润,对照组大鼠肺组织几乎无嗜酸性粒细胞浸润,IL-4R组和布地奈德组大鼠肺组织嗜酸性粒细胞浸润明显少于哮喘模型组。IL-4R组和布地奈德组肺泡灌洗液中IL-4和IFN-γ的含量明显高于哮喘模型组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论研究结果提示IL-4R蛋白对过敏性哮喘有良好的干预作用。     

布地奈德联合辛伐他汀对慢性阻塞性肺疾病大鼠炎症因子与肺组织病理的影响

目的探讨布地奈德联合辛伐他汀对慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠模型炎症因子与肺组织病理的影响，为药物干预方案提供实验依据。方法根据不同的药物干预方案将COPD 大鼠分为模型组（M 组）、布地奈德组（BD 组）、辛伐他汀组（SV 组）及布地奈德联合辛伐他汀组（BD+SV 组），比较不同组别COPD 大鼠血清和支气管肺泡灌洗液（BLAF）中的白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素8（IL-8）、白三烯B4（LTB4）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平及肺组织病理的改变。结果血清炎症因子水平：BD 组IL-6、TNF-α，SV组IL-6，（BD+SV）组IL-6、IL-8 及TNF-α分别较M 组降低（均 p<0.05）；（BD+SV）组IL-8 水平较SV 组下降（p <0.05）。BALF 炎症因子水平：BD 组IL-6、IL-8，SV 组IL-6、TNF-α，（BD+SV）组IL-6、IL-8、LTB4 及TNF-α水平分别较M 组降低（均p<0.05）。（BD+SV）组BALF 中IL-8、LTB4 及TNF-α水平较BD 组降低，IL-8、LTB4水平较SV组下降（均p<0.05）。BD组、SV组、（BD+SV）组肺组织病理半定量评分较M组降低（均p<0.05），病理均显示肺气肿囊腔变小、支气管炎症减轻。结论使用布地奈德联合辛伐他汀可以有效降低COPD 大鼠全身和气道炎症反应，改善肺组织病理。     

维生素D对原代培养哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖的影响

目的:探讨维生素D对哮喘大鼠气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells,ASMCs)的抗增殖机制,并证明细胞周期蛋白D1(cyclin D1)在其抗增殖调控中的作用?方法:原代培养正常对照组和哮喘组大鼠ASMCs,取第3~5代细胞用于实验?总分为以下5组:正常对照ASMCs组?哮喘ASMCs组?哮喘ASMCs + 1 × 10-8 mol/L维生素D组?哮喘ASMCs + 1 × 10-7 mol/L维生素D组?哮喘ASMCs + 1 × 10-6 mol/L维生素D组?用四甲基偶氮唑盐(MTT)法?流式细胞术检测各组ASMCs增殖活性的变化;用逆转录-聚合酶链反应(RT－PCR)和蛋白质印迹(Western blot)检测不同组ASMCs cyclin D1 mRNA和蛋白的表达?结果:① 哮喘ASMCs组G0/G1期细胞比例(80.01 ± 2.55)%明显少于其他各组,S期(8.31 ± 0.42)%和G2/M期(11.21 ± 1.43)%比例增加,MTT法检测其吸光度值增高(0.78 ± 0.04),提示ASMCs增殖明显增强?其中各值分别与正常对照ASMCs组[(90.15 ± 3.02)%?(5.41 ± 0.62)%?(4.38 ± 0.56)%?0.22 ± 0.04]相比,有显著性差异(P < 0.001);同时哮喘ASMCs组与哮喘ASMCs + 1 × 10-6 mol/L维生素D组各值[(89.08 ± 2.81)%?(5.58 ± 0.92)%?(4.61 ± 1.12)%?0.38 ± 0.02]相比,其差异有统计学意义(P < 0.001);与哮喘ASMCs + 1 × 10-7/1 × 10-8 mol/L维生素D组相比,差异也有统计学意义(P < 0.01);②在cyclin D1 mRNA和蛋白表达水平上,哮喘ASMCs组与正常对照ASMCs组?哮喘ASMCs + 1 × 10-6 mol/L维生素D组分别相比较均偏高,差异显著(P < 0.001);③在各不同剂量维生素D作用组,分别在细胞增殖活性检测?cyclin D1 mRNA和蛋白表达水平上,大剂量维生素D组作用均优于最小剂量组,差异有统计学意义(P < 0.001),显示维生素D的抗增殖作用有明显剂量-效应相关性?结论:哮喘组大鼠ASMCs增殖明显,维生素D可以通过调节cyclinD1表达发挥其对哮喘大鼠ASMCs的抗增殖作用?     

Effect of human umbilical cord mesenchymal stemcells on cytokines in rat model of emphysema

目的 研究外源性人脐带间充质干细胞(HUMSC)对肺气肿大鼠模型中细胞因子水平的影响.方法 建立猪胰蛋白酶诱导的肺气肿模型,40只雄性SD大鼠随机分为HUMSC组(经尾静脉输注1×106个HUMSC/ml)、PBS组(经尾静脉输注PBS 1 ml)、模型组(不予任何干预)、假手术组,每组10只.干预2周后处死大鼠,ELISA法检测血清及肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及白细胞介素10(IL-10)的表达水平.结果 与假手术组比较:HUMSC、PBS、模型组血清及BALF中IL-1β、TNF-α水平显著升高(P<0.05),IL-10水平显著降低(P<0.05);给予HUMSC干预后血清TNF-α及BALF中IL-1β、TNF-α水平较模型组、PBS组明显下降(P<0.05),而血清IL-1β未见明显改变;血清及BALF中IL-10水平均明显升高(P<0.05).结论 HUMSC干预可以影响肺气肿大鼠血清及BALF中IL-1β、TNF-α及IL-10的表达,对肺气肿大鼠炎症反应有调节作用,可能是干预肺气肿形成、修复肺组织的机制之一.     

沙利度胺对内毒素刺激大鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF-α和IL-6的影响

目的探讨沙利度胺对内毒素刺激大鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF-α和IL-6的影响。方法分离、培养Wistar大鼠腹腔巨噬细胞，贴壁后的腹腔巨噬细胞分为空白对照组、内毒素（LPS）组、沙利度胺处理组、沙利度胺对照组。空白对照组不予任何处理；沙利度胺处理组提前2h加入不同浓度的沙利度胺，2h后加入内毒素；LPS组加入LPS，沙利度胺对照组仅加入沙利度胺80μg／mL。细胞培养4h后取上清液测TNF-α和IL-6浓度。结果空白对照组大鼠腹腔巨噬细胞上清TNF-α和IL-6含量均很低，沙利度胺对照组与空白组无显著性差异。大鼠腹腔巨噬细胞经LPS诱导后，细胞上清中TNF-α及IL-6含量显著增高，提前2h沙利度胺预处理后，TNF-α和IL-6的释放明显受到抑制，抑制作用随沙利度胺预处理浓度的增大而增强。结论沙利度胺能抑制大鼠巨噬细胞对TNF-α和IL-6等促炎细胞因子的释放，可能是其对抗脓毒症的机制之一。     

电针干预促进大鼠肩袖损伤修复和运动功能康复

目的 观测电针治疗对肩袖损伤模型大鼠的肌腱愈合和功能恢复的治疗作用,检测关节液介素-1β（IL-1β）、IL-6、α肿瘤坏死因子（TNF-α）等3种炎症因子表达以及肩袖生物力学的影响,探讨电针治疗肩袖损伤的疗效及机制。 方法 选取90只SD大鼠,随机分为电针组、对照组及空白组各30例,其中电针组和对照组行肩袖损伤造模手术,空白组不做处理。术后电针组给予电针干预,空白组与对照组不予干预,分别于造模术后2、4、8周测定各组大鼠的右前足足底热缩足潜伏期（TWL）,关节液IL-1β、IL-6、TNF-α含量以及肩袖的最大拉力负荷。结果 术后2、4、8周,对照组TWL值均低于空白组,均高于对照组（P<0.05）;在3个观测时间点,对照组IL-1β、IL-6和TNF-α含量均高于空白组,电针组的IL- 1β、IL-6和TNF-α含量均低于对照组（P<0.05）;在造模术后2周时,电针组与对照组最大载荷均小于空白组（P<0.05）。术后4、8 周时,电针干预组的最大拉力载荷高于对照组（P<0.05）。结论 电针疗法既能有效降低炎症因子的表达以缓解疼痛,又能促进损伤组织的修复以提高肩袖的生物力学性能,是肩袖损伤的有效治疗方法。     

心理干预对支气管哮喘患者及应激哮喘大鼠免疫功能的影响

目的探讨心理干预对支气管哮喘患者及大鼠生理与免疫的影响。方法将60例患者随机分为干预组（n=30）和非干预组（n=30）,非干预组给予常规治疗,干预组在常规治疗的同时实施心理干预,检测治疗前后支气管哮喘患者唾液皮质醇和α-唾液淀粉酶活性;对应激哮喘大鼠施行音乐治疗,检测大鼠血清皮质醇、肺灌洗液IL-4和脑组织IL-1β含量。结果干预后干预组患者唾液中皮质醇水平和α-唾液淀粉酶活性与干预前比较明显下降,均有统计学意义（P〈0.05）;干预后干预组患者唾液中皮质醇水平和α-唾液淀粉酶活性显著低于非干预组相同时间点,均有统计学意义（P〈0.05）;音乐治疗组与应激哮喘组比较,血清皮质醇水平明显下降;应激哮喘组IL-4含量显著高于哮喘模型组,音乐治疗组较应激哮喘组明显下降,但与哮喘模型组比较无明显差异;应激哮喘组脑组织IL-1β含量显著高于正常对照组,其他各组均无明显差异,尽管音乐治疗组具有降低脑组织IL-1β含量的趋势,但统计学上仍无意义。结论心理干预可使支气管哮喘患者唾液皮质醇水平和α-唾液淀粉酶活性下降;音乐可以缓解应激对哮喘的加重作用,而对外界物理刺激诱发的哮喘无明显作用;心理干预、音乐对哮喘有一定的治疗效果。     

丙泊酚联合地塞米松对早期脓毒症大鼠炎症因子的影响

目的观察丙泊酚联合地塞米松对早期脓毒症大鼠炎症因子的影响。方法采用大鼠尾静脉注射脂多糖复制脓毒症模型。按完全随机化原则分为5组：正常对照组（N）、脂多糖组（L）、脂多糖＋地塞米松组（LD）、LPS＋异丙酚组（LP组）、LPS＋异丙酚＋地塞米松组（LPD组）。各组大鼠于造模后麻醉处死,取腹主动脉血,用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）和白细胞介素-10（IL-10）。结果 L组TNF-α、IL-1β和IL-6较对照组明显升高,IL-10则明显降低（P均〈0.05）;LD组、LP组、LDP组同L组比较,其结果显示TNF-α、IL-1β和IL-6均明显降低,IL-10明显升高（P〈0.05;P〈0.05;P〈0.05）;LDP组同LP组、LD组比较,LDP组TNF-α、IL-1β和IL-6表达量明显下降,IL-10明显升高（P〈0.05）。结论 LPS可迅速引起TNF-α、IL-1β和IL-6的释放,抑制IL-10的表达;地塞米松、丙泊酚干预后,TNF-α、IL-1β和IL-6的量明显减少,IL-10明显升高,且两药联用干预效果更明显,对早期脓毒症大鼠有明显保护作用。