参苓白术散对NAFLD大鼠肝脏脂质代谢及SIRT1/UCP2通路的影响

目的观察参苓白术散对高脂饲料建立的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠脂质代谢及沉默信息调节因子1(SIRT1)/解偶联蛋白2(UCP2)通路的调控机制。方法取SD大鼠32只,随机分为4组,即正常组,模型组,参苓白术散高、低剂量组(30,10 g·kg~(-1)),每组8只。采用高脂饲料喂养大鼠16周建立NAFLD大鼠模型,给药组大鼠灌服参苓白术散,16周后取血和肝组织样本,全自动生化仪检测血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)含量;对肝组织进行油红O染色;实时荧光定量RT-PCR仪检测肝组织SIRT1、UCP2 mRNA表达水平;Western blotting检测肝组织SIRT1、UCP2蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组大鼠病理证实肝组织脂质蓄积严重,血清TG、TC含量明显升高(P0.01),肝组织SIRT1 mRNA及蛋白表达均显著降低(P0.05),UCP2 mRNA及蛋白表达显著升高(P0.05,P0.01)。与模型组比较,参苓白术散高、低剂量组肝组织脂质蓄积明显改善,血清TG、TC含量明显下降(P0.05),肝组织SIRT1 mRNA和蛋白表达均显著上调(P0.05,P0.01),UCP2 mRNA和蛋白表达显著降低(P0.01),其中,参苓白术散高剂量组较低剂量组效果好;但二者比较差异无统计学意义。结论参苓白术散能够改善高脂饮食诱导的NAFLD大鼠脂肪代谢紊乱、减轻肝脏脂质蓄积,其作用机制可能与肝细胞内SIRT1/UCP2通路的激活有关。     

参苓白术散对高脂饮食诱导的NAFLD大鼠肝组织超微结构及AMPKα磷酸化的影响

目的:观察参苓白术散对高脂饮食建立的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝组织超微结构和腺苷酸活化蛋白激酶(AMPKα)磷酸化的影响。方法:选用SPF级SD大鼠32只,随机分为4组:正常组、模型组、参苓白术散30g/kg剂量组、参苓白术散10g/kg剂量组,每组8只。采用高脂饲料喂养大鼠16周建立NAFLD大鼠模型,各药物干预组大鼠分别灌服30g/kg和10g/kg参苓白术散进行干预,16周后取血和肝组织样本,全自动生化仪检测血清和肝匀浆甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)含量;HE染色观察肝组织病理学变化;透射电镜观察肝细胞的超微结构改变;实时荧光定量RT-PCR法检测肝组织AMPKαmRNA表达水平;Western blot法检测肝组织AMPKα蛋白及其磷酸化AMPKα蛋白(p AMPKα)的表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠病理证实肝组织脂质蓄积严重,肝组织匀浆和血清TG、TC含量显著升高,肝组织AMPKαmRNA和p AMPKα蛋白水平显著降低,与模型组比较,参苓白术散30g/kg和10g/kg剂量组大鼠肝组织脂质蓄积明显改善,肝组织匀浆和血清TG、TC含量显著降低,肝组织AMPKαmRNA及p AMPKα蛋白水平显著上调,其中参苓白术散30g/kg剂量组疗效更好;但各组大鼠总AMPKα蛋白水平差异无统计学意义。结论:参苓白术散能够改善16周高脂饮食诱导的NAFLD大鼠脂肪代谢紊乱、减轻肝脏脂质蓄积,其作用机制可能与其激活AMPKαmRNA及其蛋白磷酸化水平有关。     

参苓白术散对NAFLD大鼠肝细胞、Kupffer细胞mTOR通路相关基因及蛋白表达影响的实验研究

目的:观察参苓白术散对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝细胞、Kupffer细胞、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)通路相关基因及蛋白表达的影响,以阐明参苓白术散抗NAFLD的作用机制。方法:将80只大鼠随机分为正常组,模型组及参苓白术散低、高剂量组。对模型组、各药物组连续8周喂养高脂饲料制备NAFLD大鼠模型。造模成功后采用油红O染色观察肝组织病理变化;Ⅳ型胶原酶离体循环灌注法分离肝细胞、Kupfer细胞;全自动生化仪检测血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG);酶联免疫吸附法测定肝细胞及Kupffer细胞血管内皮生长因子(VEGF)、干扰素(IFN)-γ含量;实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法(Western blot)检测大鼠肝细胞及Kupffer细胞脑内富含的小G蛋白Ras同系物(Rheb)、m TOR复合物1(m TORC1)、核糖体S6蛋白激酶1(S6K1)和真核细胞翻译起始因子4E-结合蛋白1(4E-BP1) m RNA和蛋白表达。结果:模型组大鼠肝组织存在严重的脂质蓄积。血清TC、TG,肝细胞、Kupffer细胞,VEGF、IFN-γ含量,以及Rheb、m TORC1...     

参苓白术散对NAFLD大鼠肝细胞mTORC1/STAT3信号通路的影响

目的:观察参苓白术散对高脂饮食饲养的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝细胞哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合体1(mTORC1)/细胞信号转导因子及转录激活因子3(STAT3)信号通路的影响,从炎症角度揭示参苓白术散抗大鼠NAFLD的作用机制。方法:取SD大鼠80只,随机分为4组,分别为正常组、模型组、参苓白术散高、低剂量组(30,10 g·kg^-1),每组20只。采用高脂饲料喂养大鼠8周,建立NAFLD大鼠模型,各药物干预组大鼠灌服相应剂量的参苓白术散,8周后取血和肝组织样本,全自动生化分析仪检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)定量;对肝组织进行油红O,苏木素-伊红(HE)染色;采用Ⅳ型胶原酶离体循环灌注法分离肝细胞;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测肝细胞肿瘤坏死因子(TNF)-α,白细胞介素(IL)-1β,IL-5及IL-6含量变化,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠肝细胞mTORC1,STAT3 mRNA及蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠病理组织学改变表明,肝组织炎症及脂肪蓄积显著,血清ALT,AST,TC,TG及LDL-C含量显著升高,HDL-C显著下降,肝细胞TNF-α,IL-1β,IL-5及IL-6水平显著升高,mTORC1,STAT3 mRNA及蛋白相对表达量显著升高(P<0.01)。与模型组比较,参苓白术散高、低剂量组肝组织脂质蓄积明显改善,血清ALT,AST,TC,TG及LDL-C含量明显下降,肝细胞TNF-α,IL-1β,IL-5及IL-6水平明显下降,肝细胞mTORC1,STAT3 mRNA及蛋白相对表达量明显降低;参苓白术散高剂量组在改善脂质蓄积,抑制肝组织炎症反应方面,效果优于参苓白术散低剂量组,mTORC1,STAT3 mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:参苓白术散能够改善高脂饮食诱导的NAFLD大鼠脂肪代谢紊乱、减轻肝脏脂质蓄积及炎症反应,其作用机制可能与抑制肝细胞内mTORC1/STAT3通路相关mRNA及蛋白表达有关。     

参苓白术散对NAFLD大鼠肝细胞PTEN和PI3Kp85αmRNA及其蛋白表达的影响

目的:观察参苓白术散对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝细胞PTEN和PI3Kp85αmRNA及蛋白表达的影响并探讨其作用机制.方法:60只SD雄性大鼠,随机分为4组:正常组、模型组、健脾低剂量组、健脾高剂量组.除正常组外,其他各组均采用高脂饲料喂养建立NAFLD大鼠模型.同时,各组大鼠按10mL/(kg·bw)灌...     

基于Nrf2信号通路探究参苓白术散调节铁死亡对酒精性肝损伤大鼠的影响

目的：观察参苓白术散通过调节核因子E₂相关因子2(Nrf2)信号通路的干预调节铁死亡对酒精性肝损伤大鼠的影响。方法：将40只SD大鼠随机分为模型组、多烯磷脂酰胆碱组、参苓白术散高、中、低剂量组,每组8只,另取8只SD大鼠作为正常组。模型组、多烯磷脂酰胆碱组、参苓白术散高、中、低剂量组予以10 mL·kg^-1灌胃造模,正常组予以等体积蒸馏水灌胃;每日灌酒4 h后,予以多烯磷脂酰胆碱组143.64 mg·kg^-1药物灌胃、参苓白术散高、中、低剂量组分别予以15、7.5、3.75 mg·kg^-1的药物,正常组与模型组予以等体积蒸馏水灌胃,灌胃连续6周。全自动生化仪检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷氨酰转肽酶(GGT)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平,生化检测法检测脂多糖(LPS)、丙二醇(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、铁离子(Fe^...     

针刺对急性脑出血大鼠Nrf2/ARE信号通路关键因子表达的影响

目的:探讨"百会"透"曲鬓"针刺法对急性脑出血大鼠Nrf2/ARE信号通路关键因子表达的影响。方法:将健康雄性Wistar大鼠54只随机分为针刺组、模型组和假手术组;再将各组分成3个时间亚组分别为1 d、3 d和7 d,每个亚组6只大鼠。采用自体血注入法建立脑出血大鼠模型。针刺组于造模成功后给予大鼠患侧"百会"透"曲鬓"针刺治疗。采用Longa评分法综合评价各组大鼠的神经功能缺损情况。Western-blot方法检测大鼠脑组织血肿周围转录调节因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)和醌氧化还原酶1(NQO1)蛋白表达情况。结果:神经行为学评分结果:模型组大鼠出现不同程度的神经功能缺损症状,术后3 d神经功能缺损最重,术后7 d减轻。针刺组大鼠在各个时间点的评分均低于同时间点模型组,与模型组比较,差异具有统计学意义(P0.05)。Western blot方法检测结果:模型组大鼠Nrf2、HO-1和NQO1蛋白表达量于术后1 d已有较明显增多,术后3 d表达最多,术后7 d较高峰期有所回落,但表达仍高于假手术组,差异具有统计学意义(P0.01)。针刺组大鼠各个时间点Nrf2、HO-1和NQO1蛋白表达量与同期模型组比较,均明显高于模型组,差异具有统计学意义(P0.01)。各组大鼠脑组织中Nrf2与HO-1、Nrf2与NQO1表达呈正相关。结论:"百会"透"曲鬓"头针疗法可以改善大鼠神经缺损症状,促进Nrf2/ARE信号通路关键因子Nrf2、HO-1和NQO1的表达,对抗氧化应激损伤,从而保护脑细胞。     

参苓白术散对NAFLD大鼠肝组织Nrf2/ARE信号通路的影响

目的观察参苓白术散对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝组织核因子E2相关因子2/抗氧化反应元件(Nrf2/ARE)信号通路相关蛋白表达的影响。方法取SD大鼠32只,随机分为正常组,模型组,参苓白术散高、低剂量组(30,10 g·kg-1),每组8只。采用高脂饲料喂养16周,建立NAFLD大鼠模型,给药组大鼠同时灌服参苓白术散浸膏剂进行干预,16周后取血和肝组织样本,全自动生化仪检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天门冬氨酸转氨酶(AST)含量;油红O染色观察肝组织脂质蓄积程度;Western Blotting法检测肝组织Nrf2/ARE信号通路相关蛋白(Nrf2)、醌氧化还原酶(NQO1)和血红素氧合酶-1(HO-1)蛋白的表达水平。结果模型组大鼠肝组织油红O染色结果表明肝组织脂质蓄积严重,提示高脂饲料诱导的NAFLD大鼠模型建立成功。与正常组比较,模型组大鼠血清TC、TG、LDL-C、AST水平显著升高(P0.01),HDL-C水平显著降低(P0.01);肝组织Nrf2、NQO1、HO-1蛋白表达水平显著升高(P0.01)。与模型组比较,参苓白术散高、低剂量组大鼠肝组织脂质蓄积程度明显改善,两组血清TC、TG、LDL-C含量及AST水平均呈不同程度下降,血清HDL-C及肝组织Nrf2、NQO1、HO-1蛋白表达水平呈不同程度升高(P0.05,P0.01),其中参苓白术散高剂量组变化更为显著。结论参苓白术散能够改善高脂饮食诱导的NAFLD大鼠肝脏脂肪代谢紊乱,减轻肝脏脂质蓄积,其作用机制可能与其激活Nrf2/ARE信号通路有关。     

基于Keap1/Nrf2/ARE信号通路探讨理中汤对非酒精性脂肪性肝炎大鼠抗氧化应激及其作用机制研究

目的 基于Keap1/Nrf2/ARE信号通路,研究理中汤对非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)大鼠的保护作用及其机制.方法 制备40只NASH大鼠模型,随机分为模型组、理中汤高剂量组、理中汤中剂量组、理中汤低剂量组,每组10只,另设正常组10只.理中汤中剂量组给予...     

参苓白术散联合辛伐他汀治疗非酒精性脂肪性肝病100例临床研究

目的:观察参苓白术散联合辛伐他汀治疗非酒精性脂肪性肝病的效果。方法:选取200例患者,随机分为治疗组与对照组各100例。对照组采用辛伐他汀口服治疗,治疗组在对照组基础上加用参苓白术散口服治疗。治疗90d后,比较2组患者症状体征、肝功能、血脂、肝脏彩超及综合疗效。结果:(1)治疗后,2组均能显著改善乏力、纳差、腹胀及肝区不适等症状体征(P0.05),且治疗组优于对照组(P0.05);(2)治疗后,2组患者TG、TC水平均较治疗前明显降低(P0.05),HDL-C水平均较治疗前明显升高(P0.05),且治疗组HDL-C改善明显优于对照组(P0.05);(3)治疗后,治疗组肝脏超声检测的正常例数明显多于对照组(P0.05),中重度病变例数明显低于对照组(P0.05);(4)治疗组总有效率83.0%,明显高于对照组的48.0%(P0.05)。结论:参苓白术散联合辛伐他汀治疗非酒精性脂肪性肝病效果显著,有助于改善症状、体征,并起到护肝、改善血脂异常及减轻肝脏脂肪变性等效果,且未发现副作用,值得推广应用。     

参苓白术散调控TLR4/NLRP3通路对酒精性肝病治疗作用的机制研究

该研究旨在探究参苓白术散(SBP)对酒精性肝病(ALD)细胞自噬的调控作用,以及其通过TLR4/NLRP3通路的干预效果。通过高度白酒灌胃法建立慢性酒精性肝病大鼠模型,并采用乙醇刺激BRL3A大鼠肝细胞建立ALD细胞模型;通过HPLC对SBP进行成分测定;对酒精性肝病大鼠肝组织进行苏木精-伊红(HE)染色和油红O染色,进行病理评估;采用ELISA检测脂多糖(LPS)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-18(IL-18)水平,利用qRT-PCR评估髓样分化因子88(MyD88)、Toll样受体4(TLR4)的mRNA表达;采用CCK-8分析不同药物对BRL3A细胞增殖活性的影响;通过Western blot分析核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、核因子κB(NF-κB、P65)、磷酸化核因子(p-P65)、半胱氨酸蛋白酶1(caspase-1)、核孔糖蛋白(P62)、苄氯素1(Beclin1)和微管相关蛋白1轻链3(LC3Ⅱ)蛋白表达。结果显示SBP能改善肝脏脂质沉积,降低肝功能,缓解肝脏组织炎症反应,降低LPS、TNF-α、IL-...     

黄连素配合高脂饮食控制对NAFLD大鼠肝组织PPARα mRNA及蛋白表达的影响

目的:观察黄连素对非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferator activated receptor alpha,PPARα)mRNA和蛋白表达的影响,探讨其作用机制。方法:66只雄性SD大鼠随机分为高脂饮食组56只和正常对照组10只。12 w时,从高脂饮食组中随机抽取6只进行肝脏病理切片,证实造模成功后,将造模组大鼠随机分为5组:黄连素高剂量组、黄连素低剂量组、东宝甘泰组、模型组、自然恢复组。除模型组继续给予高脂饲料外,其余各组均以基础饲料喂养。同时各治疗组给予相应药物灌胃,其余各组灌胃相应剂量蒸馏水。8 w后,所有大鼠腹主动脉取血及肝组织,全自动生化分析仪检测肝脂、血脂及肝功能;光镜观察肝组织病理形态变化;RT-PCR方法检测肝组织PPARαmRNA表达;免疫组织化学方法检测肝组织PPARα蛋白表达。结果:与模型组比较,药物治疗各组及自然恢复组肝脏脂变程度明显减轻;血脂、肝脂及肝功能指数显著降低(P0.01),肝组织PPARαmRNA和蛋白表达均有不同程度的上调(P0.05),尤以黄连素高剂量组最明显。结论:黄连素配合高脂饮食控制可显著促进肝组织PPARαmRNA及蛋白的表达,这可能是其防治NAFLD的重要机制之一。     

天香丹对冠脉微循环障碍大鼠Nrf2/ARE信号通路表达的影响

目的探究天香丹对冠脉微循环障碍大鼠核转录因子 NF-E2 相关因子 2 /抗氧化反应元件（Nrf2/ARE）信号通路相关因子mRNA及蛋白表达的影响。方法36只SPF级SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、尼可地尔组、天香丹组，每组9只。除空白对照组外，其余大鼠开胸后左心室内注射月桂酸钠建立冠脉微循环障碍大鼠模型。各组大鼠分别给予天香丹［0.9408 （大鼠体重）2/3g/d］、尼可地尔［0.7840 （大鼠体重）2/3mg/d］、生理盐水灌胃28天，每只大鼠给药体积均为2 mL/d。HE染色观察大鼠心肌形态学变化，RT-PCR及Western Blot 法观察各组大鼠心肌中Nrf2/ARE信号通路核转录因子NF-E2相关因子2（Nrf2）、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1（Keap1）、醌氧化还原酶1（NQO1）、氧化氢酶（CAT）、血红素加氧酶-1（HO-1）mRNA及蛋白的表达变化。结果HE染色显示天香丹可减轻冠脉微循环障碍大鼠微血栓程度。与空白对照组比较，模型组大鼠 Nrf2、NQO1、CAT mRNA 表达降低（P<0.05），Keap1 mRNA及蛋白表达均降低（P<0.05）；与模型组比较，尼可地尔组Nrf2 mRNA及蛋白表达量明显升高（P<0.05），CAT mRNA表达升高（P<0.05），HO-1 mRNA表达降低（P<0.05）；天香丹组Nrf2、NQO1、CAT、HO-1 mRNA及蛋白表达升高（P<0.05），Keap1 mRNA表达升高（P<0.05）；与尼可地尔组比较，天香丹组Nrf2、Keap1、NQO1、CAT、HO-1 mRNA表达升高（P<0.05），CAT蛋白表达升高（P<0.05）。结论天香丹改善冠脉微循环障碍机制可能与调控Nrf2/ARE信号通路有关。     

天香丹对冠状动脉微循环障碍模型大鼠心肌组织Nrf2/ARE信号通路的影响

目的 探讨天香丹对冠状动脉微循环障碍的影响及可能作用机制.方法 63只SD大鼠随机分为空白对照组、假手术组、模型组、尼可地尔组和天香丹低、中、高剂量组,每组9只.除空白对照组外,其余各组大鼠开胸后左心室内注射月桂酸钠建立冠状动脉微循环障碍大鼠模型,假手术组注射生理盐水.造模后天香丹低、中、高剂量组大鼠分别给予天香丹颗粒...     

榄香烯联合介入治疗中晚期肝癌患者的近期疗效

目的 观察参苓白术散对高脂饲料建立的非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）大鼠脂质代谢及沉默信息调节因子1 （SIRT1）/ 解偶联蛋白2（UCP2）通路的调控机制。方法 选用SPF级SD大鼠32只,随机分为4组：正常组、模型组、参苓白术散高剂量组（ig,30.0g·kg-1·d-1）,参苓白术散低剂量组（ig,10.0g·kg-1·d-1）,每组8只。采用高脂饲料喂养大鼠16周建立NAFLD大鼠模型,各药物干预组大鼠分别灌服参苓白术散的高、低剂量进行干预,16周后取血和肝组织样本,全自动生化仪检测血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）含量;对肝组织进行油红O染色;实时荧光定量RT-PCR仪检测肝组织SIRT1、UCP2 mRNA表达水平;Western blotting检测肝组织SIRT1、UCP2蛋白表达水平。结果 与正常组比较,模型组大鼠病理证实肝组织脂质蓄积严重,血清TG、TC含量明显升高（P＜0.01）,肝组织SIRT1 mRNA及蛋白表达均显著降低（P＜0.05）,UCP2 mRNA及蛋白表达显著升高（P＜0.05,P＜0.01）,与模型组比较,参苓白术散高、低剂量组肝组织脂质蓄积明显改善,血清TG、TC含量明显下降（P＜0.05）,肝组织SIRT1 mRNA和蛋白表达均显著上调（P＜0.05,P＜0.01）,UCP2 mRNA和蛋白表达显著降低（P＜0.01）,其中参苓白术散高剂量组较低剂量组效果较好;但二者比较差异无统计学意义。结论 参苓白术散能够改善16周高脂饮食诱导的NAFLD大鼠脂肪代谢紊乱、减轻肝脏脂质蓄积,其作用机制可能与肝细胞内SIRT1/UCP2通路的激活有关。     

九味肝泰胶囊对高脂饮食诱导大鼠非酒精性脂肪肝的治疗作用

目的研究九味肝泰胶囊对高脂饮食诱导的大鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的治疗作用和可能机制。方法采用高脂饮食诱导大鼠NAFLD动物模型。设对照组,模型组,水飞蓟素阳性对照组(0.05 g/kg),九味肝泰胶囊高、中、低剂量(1.80、0.90、0.45g/kg)组。除对照组给予普通饲料饲养外,其他各组以高脂饲料喂养,饲养10周。从第5周开始,4个给药组分别ig给予相应药物,共给药6周。观察和检测大鼠体质量、肝湿质量、肝脏指数和肝脏形态学变化;检测血清中的高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)、游离脂肪酸(FFA)、天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)水平;检测肝脏组织中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平。结果与模型组比较,九味肝泰胶囊高、中剂量组能显著降低NAFLD大鼠血清中的FFA、AST、ALT水平(P0.05),升高HDL-C水平(P0.05);显著降低NAFLD大鼠肝脏组织中的TC、TG、MDA水平(P0.05),升高SOD的活性(P0.05);NAFLD大鼠的肝组织病理学形态均得到不同程度改善,大鼠肝组织脂肪变程度减轻。结论九味肝泰胶囊对NAFLD大鼠具有调节脂质和保护肝脏的作用,其作用机制可能与减少脂质在肝脏的沉积、减轻过氧化损伤有关。     

疏肝健脾方药对LXRα/FAS信号通路介导非酒精性脂肪性肝病大鼠肝细胞脂肪沉积的影响

目的探讨疏肝健脾方药对LXRα/FAS信号通路介导非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠肝细胞脂肪沉积的影响。方法选用SPF级雄性SD大鼠75只,共分5组,每组15只,分别为:正常组,模型组,疏肝组,健脾组及合方组;除正常组,其余均各组采用高脂饮食复制NAFLD大鼠模型,给药各组分别给予疏肝方(柴胡疏肝散)、健脾方(参苓白术散)、合方(柴胡疏肝散和参苓白术散合方)进行干预,采用全自动生化分析肝脂改变,分离出肝细胞,Typan blue染色和流式细胞术(FCM)对肝细胞的活性及纯度进行鉴定。采用实时定量PCR法检测肝细胞LXRαmRNA、FAS mRNA的表达,采用Western blot法检测LXRα、FAS蛋白在肝细胞中的表达。结果 (1)油红O染色后模型组的NAFLD大鼠病理结构显示肝细胞肿胀,细胞核位于细胞边缘,细胞浆内可见大小不等的小空泡,部分肝细胞小空泡融合成大泡等特征性改变,提示成功建立高脂饮食诱导NAFLD大鼠实验动物模型。各组中药对NAFLD病理结构改变均有不同程度的修复作用,尤以疏肝组明显。(2)与正常组比较,模型组肝细胞LXRα、FAS基因及蛋白的表达水平均明显升高(P<0.01);与模型组比较,健脾方和疏肝方组的表达水平下调明显(P<0.01,P<0.05)。结论 LXRα/FAS通路是介导NAFLD脂质平衡代谢紊乱重要的信号通路,疏肝健脾方药能够调控肝细胞LXRα/FAS通路使NAFLD大鼠肝细胞脂肪沉积趋于恢复,这可能是疏肝健脾方药抗实验性大鼠脂肪肝的作用机制之一。     

糖络宁对糖尿病周围神经病变大鼠Nrf2/ARE通路的影响

目的探讨糖络宁对糖尿病周围神经病变(DPN)大鼠Nrf2/ARE通路相关蛋白的影响。方法将SD雄性大鼠随机分为空白对照组和链脲佐菌素(STZ)组,STZ组大鼠一次性腹腔注射60 mg/kg STZ,造模1周后,将空腹血糖浓度≥16.7 mmol/L的大鼠稳定1个月后,随机分为模型对照组、α-硫辛酸组、糖络宁低剂量组和糖络宁高剂量组,并给予相应药物12周。麻醉取大鼠坐骨神经,采用免疫组织化学方法检测大鼠坐骨神经Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1),核转录因子NF-E2相关因子(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)、及谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)的表达。结果与空白对照组比较,模型对照组大鼠坐骨神经髓神经纤维排列紊乱,脱髓鞘严重,坐骨神经中Keap1、Nrf2、HO-1和γ-GCS的表达增加,差异有统计学意义(P0.05);与模型对照组比较,糖络宁低、高剂量组大鼠坐骨神经髓神经纤维排列紊乱和脱髓鞘现象得到改善,其中糖络宁低剂量组Keap1、Nrf2表达增加,糖络宁高剂量组HO-1、γ-GCS表达增加,差异均有统计学意义(P0.05)。结论糖络宁能够改善DPN大鼠坐骨神经的病理状态,上调Nrf2/ARE信号通路中Keap1、Nrf2、HO-1及γ-GCS的表达,增强机体抗氧化应激的能力。     

参苓白术散调节Nrf2/ARE通路改善高尿酸血症型少弱精子症小鼠的生精功能

目的 探讨参苓白术散对高尿酸血症（HUA）型少弱精子症异病同治的作用及机制。方法 将32只雄性昆明种（KM）小鼠随机分为空白组（n=6）、模型组（n=6）、参苓白术散高剂量组（n=7）、参苓白术散低剂量组（n=7）和非布司他组（n=6）。除空白组外,其余各组连续腹腔注射氧嗪酸钾悬液（600 mg·kg^-1）7 d。造模完成后,参苓白术散高、低剂量组分别给予参苓白术散20.14、10.07 g·kg^-1灌胃,非布司他组给予非布司他0.25 g·kg^-1灌胃,空白组和模型组给予同体积生理盐水灌胃,每天灌胃1次,连续14 d后取材。生化法检测血清尿酸（UA）,睾丸组织超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）;苏木素-伊红（HE）染色法观察睾丸组织病理学变化并进行生精功能评分;全自动精子分析仪检测精子密度和活动率;单细胞凝胶电泳（SCGE）检测精子DNA完整性;原位末端标记法（TUNEL）检测睾丸细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测睾丸组织Kelch样ECH相关蛋白1（Keap1）、核因子E₂相关因子2（Nrf2）、血红素加氧酶-1（HO-1）、B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、胱天蛋白酶-3（Caspase-3）蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测睾丸组织Keap1、Nrf2、HO-1 mRNA表达水平。结果 与空白组比较,模型组小鼠血清UA显著升高（P<0.01）,睾丸生精功能、精子密度和活动率均显著下降（P<0.01）,精子拖尾率、睾丸细胞凋亡率均显著升高（P<0.01）。与模型组比较,参苓白术散高剂量组小鼠上述指标均有明显改善（P<0.05, P<0.01）,且睾丸组织Keap1、Bax、Caspase-3表达量明显降低,Nrf2、HO-1、Bcl-2表达量明显升高（P<0.05, P<0.01）,Keap1 mRNA水平明显降低（P<0.05, P<0.01）,Nrf2、HO-1 mRNA水平明显升高（P<0.05,P<0.01）。结论 参苓白术散能明显改善HUA型少弱精子症,其机制可能与Nrf2/抗氧化反应元件（ARE）信号通路有关。     

葛根素对6-羟多巴胺所致帕金森病大鼠黑质组织Nrf2/ARE通路的影响

目的:研究葛根素对6-羟多巴胺(6-OHDA)致帕金森病(PD)大鼠黑质组织核转录因子(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)通路的影响。方法:建立帕金森SD大鼠模型,随机分成5组:模型组、美多巴阳性组(40 mg.kg-1)及葛根素低、中、高剂量组(20,40,80 mg.kg-1)。持续灌胃给药30 d。Elisa法检测黑质组织中γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)、谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢酶(CAT)活性。RT-PCR法检测黑质组织细胞色素c氧化酶(COX)mRNA表达。Western blot法检测转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keapl)蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组黑质中r-GCS,GSH,CAT活性显著降低,COX mRNA Nrf2,Keapl蛋白表达显著降低(P<0.01);与模型组比较,葛根素有效地增加帕金森病大鼠黑质γ-GCS,GSH,CAT活性(P<0.01)。葛根素低,中,高剂量组能明显上调黑质COX mRNA水平(38.5±4.3)%,(43.2±5.1)%,(57.4±6.2)%(P<0.01),显著增加Nrf2,Keapl蛋白表达(38.5±3.6)%,(52.4±4.8)%,(78.5±7.3)%;(31.7±2.3)%,(40.8±3.5)%,(65.9±6.1)%(P<0.01)。结论:葛根素有效地对抗6-OHDA诱导PD大鼠黑质神经细胞氧化应激性损伤,其机制可能与其调节Nrf2/ARE通路有关。