清肝活血方防治酒精性肝损伤的机理研究

为研究清肝活血方（主药：柴胡、黄芩、丹参、鳖甲、葛根）治疗酒精性肝病的机理。60只大鼠随机分为正常对照组（A）、模型组（B）、清肝活血方低剂量组（C）、清肝活血方高剂量组（D）和小柴胡汤组（E),每组12只，除A组外，其余各组用乙醇、玉米油、吡唑灌胃，并分别给予不同药物灌胃。14周后处死全部大鼠，以RT－PCR法检测大鼠肝组织ADH及P450CYPIIE1 mRNA表达。结果：B组表现为肝功能异常（以AST变化为显），ADH活性及其mRNA与P450CYPIIE1mRNA表达下降；三个用药组大鼠ADH活性及ADH与P450CYPIIE1 mRNA的表达有不同程度的提高，并以D组最明显。结论：提高ADH活性及ADH与P450CYPIIE1 mRNA的表达，促进肝脏的解毒功能，是清肝活血方法防治酒精性肝病的机理之一。     

吸入环孢菌素A对肺纤维化及其气道高反应性的干预作用

目的 检测博莱霉素致肺纤维化大鼠气道高反应性的形成，观察吸入环孢菌素A对肺纤维化及其气道高反应性的治疗作用。方法 雄性Wistar大鼠36只，按随机数字表法分为对照组（A）、模型组（B）、药物组（C）3组，每组12只。检测博莱霉素致肺纤维化大鼠模型吸入环孢菌素A治疗前后转化生长因子β（TGF-β）和肺匀浆羟脯氨酸（HYP）的含量，并使用大鼠呼吸机及气道压力监测仪测量各组大鼠气道压力峰值-时间指数（APTI）的差异。结果A组肺泡结构正常，B组28d时广泛的肺纤维化为主。C组病理改变与B组相似，但程度较轻。28dB组血清中TGF-β及肺匀浆中HYP的含量显著高于A组（P〈0．01），而且与C组血清中的含量相比有差别（P〈0.05）；B组APTI与A组、C组比较（mACh为0.05mg／kg时，三者分别为0.508，0．841，0．671mmHg／s），差异有显著性（P〈0．05）。结论博莱霉素致肺纤维化大鼠模型存在气道高反应性，吸入环孢菌素A可减轻肺纤维化程度，降低气道高反应性。     

川芎嗪对肺纤维化大鼠CTGF表达及胶原沉积的影响

目的通过观察川芎嗪对肺纤维化大鼠肺内结缔组织生长因子（Connective tissue growth factor,CTGF）表达及胶原沉积的影响,探讨川芎嗪对肺纤维化的治疗作用。方法将72只雄性SD大鼠随机分为正常对照组（A组）、肺纤维化模型组（B组）、川芎嗪治疗组（C组）各24只,采用大鼠气管内一次性滴注博莱霉素造模,Masson染色观察胶原沉积情况及SABC免疫组化法检测CTGF表达变化。结果B组肺内有大量胶原沉积;C组胶原沉积明显轻于B组;A组胶原沉积不明显。免疫组化发现B组CTGF表达最强,C组较弱,A组微弱表达。结论川芎嗪可抑制哮喘大鼠肺组织的胶原沉积。其作用机制可能是通过抑制CTGF的表达来实现。     

不同层次穴位埋线调节单纯性肥胖大鼠外周脂肪代谢的机制研究

目的 探讨不同层次穴位埋线调节单纯性肥胖外周脂肪代谢的机制。方法 将60只SD雄性大鼠随机分为对照组（A组）10只普通饲料喂养,模型组50只高脂饲料喂养。模型复制成功后,将模型组大鼠随机分为空白组（B组）、脂肪层埋线组（C组）、肌肉层埋线组（D组）、脂肪层埋线+AG490组（E组）、肌肉层埋线+AG490组（F组）,每组10只。给予不同的埋线治疗后,比较各组JAK2、STAT3、SOCS3、LEP-R mRNA和蛋白相对表达量。结果B、E、F组脂肪组织JAK2、STAT3 mRNA和蛋白相对表达量低于A组（P <0.05）;C、D组JAK2、STAT3mRNA和蛋白相对表达量高于B组（P <0.05）;E、F组与B组脂肪组织JAK2、STAT3 mRNA和蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义（P>0.05）;D、E、F组JAK2、STAT3 mRNA和蛋白相对表达量低于C组（P <0.05）;E、F组JAK2、STAT3 mRNA和蛋白相对表达量低于D组（P <0.05）。B、C、D、E、F组脂肪组织SOCS3mRNA相对表达量高于A组（P <0.0...     

左旋氧氟沙星联合甲基泼尼松龙对慢性逆行性肾盂肾炎大鼠肾皮质瘢痕的影响及机制

目的探讨抗生素联合皮质激素防治肾盂肾炎延迟治疗时肾皮质瘢痕的效用及机制。方法大鼠分为正常组（A）,模型组（B）、左旋氧氟沙星及时治疗组（C）、左旋氧氟沙星加激素延迟治疗组（D）、左旋氧氟沙星延迟治疗组（E）,分别于30d、60d、90d测量各组肾小管功能（尿NAG/Cr）、肾功能（Scr、BUN）、24h尿蛋白定量,第90天统计各组肾皮质瘢痕率,RT-PCR及免疫组化测量肾组织TGF-β1mRNA及蛋白水平表达。结果B组第90天出现尿NAG/Cr显著升高,与A、C、D组比较有显著性差异（P﹤0.01）;实验期间各组肾功能、24h尿蛋白均无显著差异。C、D组二级及以上瘢痕发生率显著减少（P﹤0.05）,D组总体瘢痕率显著减少。RT-PCR及免疫组化提示各组较A组TGF-β1表达增加;相对于B组,C、D组TGF-β1肾内表达显著抑制,E组无此作用。结论延迟治疗时抗生素联合皮质激素有助于减少肾皮质瘢痕发生,单独使用抗生素无此作用。     

银杏叶提取物对肺纤维化大鼠模型血清PDGF及TGF-β1的影响

目的:观察银杏叶提取物对肺纤维化大鼠模型血清PDGF及TGF-β1含量的影响.方法:将96只健康Wistar大鼠随机分为正常对照组（A组）、模型组（B组）、强的松组（C组）和银杏叶提取物干预组（D组）,每组各24只,除A组外,其余各组采用博莱霉素复制大鼠肺纤维化模型,造模第2天起,D组用银杏叶提取物灌胃,C组用强的松混...     

PDGF对哮喘大鼠气道平滑肌细胞中ERK通路的影响研究

目的：研究血小板源性生长因子（PDGF）对哮喘大鼠气道平滑肌细胞（ASMC）中ERK信号通路的调控作用。方法建立哮喘大鼠模型,原代分离培养ASMC,设未干预组（A组）、ERK阻断剂组（B组）、PDGF组（C组）和PDGF＋ERK阻断剂组（D组）。A组不加干预;B组又分为B1、B2、B3、B4组,分别加入浓度为0.1、1、5、10μmol/L的ERK阻断剂U0126;C组又分为C1、C2、C3、C4组,分别加入浓度为1、10、25、50μg/L的PDGF同二聚体PDGF- BB;D组加入10μmol/L的U0126和50μg/L的PDGF- BB。以RT- PCR法检测各组ERK1和TGF-β1的mRNA表达,免疫组化法检测A、B4、C4和D组中以上蛋白的表达。结果 RT- PCR提示B1、B2、B3、B4组ERK1 mRNA表达均显著低于A组（均P＜0.01）,U0126以浓度依赖的方式抑制PDGF诱导的ASMC中ERK的活化,C1、C2、C3、C4组ERK1 mRNA表达均显著高于A组（均P＜0.01）,ERK1 mRNA的表达与PDGF- BB存在明显的浓度依赖关系,D组与A组比较无统计学差异（P＞0.05）。免疫组化提示B4组ASMC中ERK1蛋白表达显著低于A组,C4组显著高于A组（均P＜0.01）,D组与A组相比无统计学差异（P＞0.05）;B4组TGF-β1蛋白表达显著低于A组,C4组显著高于A组,同时C4组显著高于B4组（均P＜0.01）,D组与A组相比无统计学差异（P＞0.05）。结论 PDGF可剂量依赖性激活哮喘大鼠ASMC内的ERK通路,同时伴随TGF-β1信号通路的活化。ERK通路参与了ASMC增殖的细胞内信号转导过程,PDGF可能经ERK环节促进TGF-β1通路活化。     

缬沙坦对肝纤维化大鼠TGF-β1及其Ⅱ型受体mRNA与Smad3、Smad7表达的影响

目的　观察缬沙坦抗大鼠肝纤维化的疗效及作用机制。方法　将 80只Wistar大鼠随机分为 5组 ,每组 16只大鼠 ,A组为正常对照组 ,B、D组为肝纤维化模型组 ,C、E组为缬沙坦治疗组。B、C、D和E组大鼠均给四氯化碳 8W诱导肝纤维化 ,C、E组大鼠分别于第 1、4W予以缬沙坦灌胃治疗。A、B、C组大鼠于第 8W处死 ,D、E组大鼠于第 12W处死。结果　与模型组比较 ,治疗组肝内TGFβ1与TGFRⅡmRNA以及Smad3表达明显降低 ,而Smad7的表达增加 ,Smad3的免疫阳性反应信号主要位于纤维间隔中的细胞浆 ,Smad7则主要在肝细胞浆表达。大鼠肝组织TGFβ1与TGFRⅡmRNA、Smad3与Smad7在C组与E组表达比较差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,而B组与D组TGFβ1与TGFRⅡmRNA、Smad3与Smad7比较差异无显著性。结论　缬沙坦减轻肝脏损伤及纤维化程度的机制与抑制肝内TGFβ1与TGFRⅡmRNA及Smad3表达 ,促进Smad7表达有关。     

伊贝沙坦对糖尿病大鼠心肌组织葡萄糖转运蛋白4表达的干预研究

目的观察伊贝沙坦对糖尿病大鼠心肌病模型心肌肥大和心肌细胞葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）表达的影响。方法将Wistar大鼠随机分为A组（健康对照组）、B组（糖尿病对照组）、C组（伊贝沙坦治疗组）,D组（小剂量胰岛素治疗组）和E组（小剂量胰岛素＋伊贝沙坦治疗组）。将B组、C组、D组和E组大鼠制成糖尿病模型后,C组和E组予以50 mg/（kg.d）-1伊贝沙坦灌胃,同时D组和E组予以普通胰岛素2.0u Bid皮下注射。观察第11周时,大鼠的心体比值（心脏重量/体重的比值）及相关的血糖变化。免疫组化方法观察各组大鼠心肌细胞GLUT4蛋白表达的情况。结果①B组、C组、D组和E组大鼠心体比值较A组均明显增高（P〈0.05）,E组心体比值较B组、C组和D组减少（P〈0.05）,而C组心体比值较B组和D组减少（P〈0.05）;②B组、C组、D组和E组血糖较A组明显增高（P〈0.01）,E组血糖较B组、C组和D组降低（P〈0.05）,C组血糖较B、D组降低（P〈0.05）,而后两组之间的差别无统计学意义;③免疫组化法半定量分析显示,E组心肌细胞表达的葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）较B组、C组和D组增高（P〈0.05）,C组GLUT4蛋白较B组和D组增高,B组和D组之间无明显差别,而此4组GLUT4蛋白的表达较A组均明显减少（P〈0.01）。结论糖尿病大鼠早期应用伊贝沙坦可增加心肌细胞GLUT4蛋白的表达,抑制糖尿病心肌细胞的肥大和组织重构,并有轻度的降低血糖的作用。而以上这些作用,是独立于胰岛素之外的。     

促肝细胞生长素对大鼠肺纤维化的干预研究

日的观察促肝细胞生长素对大鼠肺纤维化模型的干预作用，并探讨其可能作用机制。方法选择雄性Wistar大鼠56只，随机分为4组，正常对照组（A组）、博来霉素模型组（B组）、地塞米松治疗组（c组）及促肝细胞生长素治疗组（D组）每组各14只。除A组外，其他大鼠均经气管内灌注博来霉素A5（5mg／kg）水溶液0．2—0．3mL，诱导肺纤维化。C组和D组于造模后第2天开始腹腔注射地塞米松每天3mg／ks和促肝细胞生长素每天1mg／kg，A组和B组注射等量生理盐水。各组分别于气管内灌注后的第7和28天经麻醉腹主动脉放血法处死7只大鼠。分离肺组织，免疫组化方法检测转化生长因子β1（TGF-β1）和基质金属蛋白酶9（MMP-9）、基质金属蛋白酶抑制剂1（TIMP-1）蛋白在大鼠肺组织的表达。通过苏木精．伊红染色、Masson胶原染色及测定肺组织羟脯氨酸浓度来评价治疗效果。结果①D组造模后第7，28天肺组织羟脯氨酸含量、肺纤维化评分、TGF-β1蛋白表达、TIMP-1蛋白表达均显著低于B组（P〈0．05—0．01）；②D组造模后第28天MMP-9蛋白表达水平均显著高于B组（P〈0．05）。③D组和C组各项指标比较差异无显著性意义（P〉0．05）。结论应用促肝细胞生长素能减轻博来霉素诱导的大鼠肺纤维化，其作用机制通过抑制TGF—β1和调节MMP-9、TIMP-1蛋白的表达而实现。     

戈舍瑞林对前列腺组织微血管密度及血管内皮生长因子影响的基础研究

目的：探讨戈舍瑞林对前列腺组织微血管密度（ MVD ）及血管内皮生长因子（ VEGF ）影响。方法：随机选取60只雄性SD大鼠,并且随机分成A、B、C、D、E、F六组;A组采取正常的饲养方式,其余各组均进行隔日颈部皮下注射丙酸睾丸酮建立大鼠前列腺增生模型,在第29天时随机选取一组（ B）处死观察模型是否建立成功,并取前列腺组织进行HE染色;剩余各组中,C组灌注生理盐水（15mL／kg）,D、E、F每日给予等量的戈舍瑞林溶液灌胃（1．0mg／kg）,分别持续1～3周后处死,观察各组前列腺增生例数、前列腺重量、VEGF 在前列腺组织中的表达、MVD在前列腺组织中的表达差异。结果：A、B、C、D、E、F六组大鼠中,A组正常饲养,结果大鼠前列腺没有发生增生,B、C、D、E、F五组均有不同程度的前列腺增生,并且每组10只老鼠全部发生增生。 B、C、D、E、F五组前列腺增生重量分别于A组比较,发现重量均明显高于A组,差异具有统计学意义（ P＜0．05）,五组之间采用单因素方差分析及组间比较差异不具有统计学意义（ P＞0．05）;C、D、E、F四组前列腺增生模型大鼠中,C组未采用戈舍瑞林灌胃,其VEGF阳性细胞面积、MVD均显著高于D、E、F三组,差异具有统计学意义（ P＜0．05）;D、E组间VEGF阳性细胞面积、MVD间差异不具有统计学意义（ P＞0．05）;D、E两组的VEGF阳性细胞面积、MVD均明显高于采用戈舍瑞林灌胃时间更长的F组,且差异具有统计学意义（ P＜0．05）。结论：前列腺增生模型大鼠的前列腺组织微血管密度（ MVD）及血管内皮生长因子（ VEGF）表达水平明显增高,戈舍瑞林能够有效降低MVD、VEGF的表达水平。     

阿魏酸钠对肺纤维化大鼠肺组织转化生长因子β1信号通路分子mRNA表达的影响

目的观察阿魏酸钠对肺纤维化大鼠肺组织转化生长因子β1（TGF-β1）信号通路分子mRNA表达的影响，探讨其防治肺纤维化的作用及机制。方法气管内滴入博来霉素（5mg／kg）建立大鼠肺纤维化模型。将30只SD大鼠随机分为三组（每组10只）：对照组、肺纤维化模型组和阿魏酸钠组。HE染色检测肺组织病理改变，胶原纤维染色检测胶原纤维表达，原位杂交技术检测肺组织TGF-βRⅡ及Smad4 mRNA表达，实时荧光定量RT-PCR技术检测TGF-β1 mRNA表达。结果胶原纤维染色显示模型组大鼠肺内胶原纤维表达显著高于对照组和阿魏酸钠组（P〈0．001）。大鼠肺内TGF-β1、TGF-βRⅡ和Smad4的mRNA表达在模型组显著高于对照组（P〈0．01），在阿魏酸钠组显著低于模型组（P〈0．05）。结论阿魏酸钠能有效地减轻肺纤维化大鼠肺组织的纤维化程度，其作用机制主要是通过抑制TGF-β1、TGF-βRⅡ和Smad4的mRNA表达上调，从而干扰TGF-β1／Smad4信号通路对靶基因的激活来实现的。     

去势雌性大鼠HRT后血脂及冠状血管病理形态学变化研究

目的：探讨激素替代疗法（HRT）对心血管的影响,为性激素补充疗法提供心脏和血管病理形态学变化依据。方法：以去势雌性大鼠作为雌激素缺乏模型,在喂食高脂饲料情况下,行HRT后检测大鼠血脂及光镜下观察冠状动脉血管病理形态学变化。雌性大鼠分为6组,分别为A假手术组、B模型对照组、C尼尔雌醇组、D利维爱组、E倍美力组、F尼尔雌醇＋孕酮组。结果：C、F组TG增高,与A、B、D、E组比较P〈0.05;B组及C、E、F用药组TC增高,与实验前各组均值对照比较P〈0.01,与A组比较P〈0.05,C、E、F用药组与B组比较P〈0.05;各组间HDL-C比较P〈0.05;B组及C、E、F用药组LDL-C不同程度增高,与A组比较P〈0.05;D组TC、LDL-C增高不明显,与A组比较P〉0.05。实验各组大鼠心脏各级冠状动脉血管均见不同程度早期动脉粥样硬化症病变,F组病变程度最轻,A组、D组病变程度较轻,B组、C组、E组病变程度较重。结论：大鼠去势后HRT对血脂影响及冠状动脉粥样硬化病变的影响与雌激素类型、激素配伍使用及动物种属有关。     

卡托普利抗大鼠肺纤维化的作用及机制

目的探讨卡托普利对肺纤维化的治疗作用及可能的机制。方法将64只雄性SD大鼠随机分为对照组、博莱霉素模型组、卡托普利治疗组、地塞米松组治疗组,每组16只。采用HE染色、Masson染色行肺泡炎、肺纤维化程度分级,分别测定各组大鼠血浆AngⅡ、转化生长因子-β1（TGF-β1）mRNA含量以及羟脯氨酸、超氧化物歧化酶、丙二醛含量,并作各组间的对比分析。结果（1）第14天时：与对照组比较,其他3组大鼠肺泡炎评分、HYP含量、AngⅡ含量、MDA含量及TGF-β1 mRNA表达水平均明显升高（P〈0.05或0.01）,SOD含量均显著降低（均P〈0.01）,仅模型组肺纤维化评分显著高于对照组（P〈0.01）;与模型组比较,卡托普利组及地塞米松组肺泡炎、肺纤维化评分及HYP含量、AngⅡ含量、MDA含量及TGF-β1 mRNA表达水平均明显降低（P〈0.05或0.01）,SOD含量均显著升高（均P〈0.01）;地塞米松组显著高于卡托普利组（P〈0.01）,卡托普利组AngⅡ含量及TGF-β1 mRNA表达水平均明显低于地塞米松组（P〈0.05或0.01）。（2）第28天时：与对照组比较,其他3组大鼠肺泡炎及肺纤维化评分、HYP含量及TGF-β1 mRNA表达水平均显著升高（均P〈0.01）,模型组和地塞米松组AngⅡ含量显著升高（均P〈0.01）,仅模型组SOD含量显著降低、MDA含量显著升高（均P〈0.01）;与模型组比较,卡托普利组及地塞米松组肺泡炎及肺纤维化评分、HYP含量、MDA含量及TGF-β1 mRNA表达水平均明显低于模型组（均P〈0.05或0.01）,SOD含量均显著升高（均P〈0.01）,卡托普利组AngⅡ含量显著降低（P〈0.01）,地塞米松组AngⅡ含量显著升高（P〈0.01）;卡托普利组TGF-β1 mRNA表达水平明显低于地塞米松组（P〈0.05）。结论卡托普利可能是通过抑制AngⅡ的生成、减少TGF-β1 mRNA的表达以及纠正氧化／抗氧化失衡而博莱霉素诱导的大鼠     

绒毛膜羊膜炎与产前糖皮质激素双重暴露对早产大鼠胎肺成熟与发育的影响

目的：探讨不同程度绒毛膜羊膜炎（chorioamnionitis,CA）与产前糖皮质激素双重暴露对早产大鼠胎肺成熟及远期肺发育的影响。方法：36只SD孕鼠随机分6组：生理盐水+地塞米松（A组）、脂多糖0.5 μg+地塞米松（B组）、脂多糖4.0 μg+地塞米松（C组）、生理盐水+生理盐水（D组）、脂多糖0.5 μg +生理盐水（E组）、脂多糖4.0 μg+生理盐水（F组）。孕19 d时每组每个羊膜腔内分别注射生理盐水、脂多糖 0.5、4.0 μg,24 h后分别肌注地塞米松 0.4 mg和生理盐水。再24 h后剖宫取胎,胎盘、胎膜行病检,每组随机处死6只新生鼠,胎肺行病检。实时荧光定量PCR测肺组织表面活性蛋白（surfactant protein,SP）A、B、C及炎性细胞因子白介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）的mRNA相对水平。生后第15天（P15）肺组织切片做形态学观察。结果：（1）C、F组胎鼠死亡率高于其他组而子鼠生存率低于其他组（P均<0.05）。（2）肺炎和CA病理评分C、F组最高,B、E组次之,A、D组最低（P均<0.05）。（3）SP-A、SP-C mRNAs相对表达水平D、F组低于其余4组而B组最高（P均<0.05）;SP-B mRNA表达水平D、E、F组低于其余3组而B、C组最高（P均<0.05）。（4）IL-1β mRNA表达水平在F组最高（P<0.05）;TNF-α mRNA表达水平在C、F组最高,A、D组最低（P均<0.05）。（5）P15时C组肺泡发育明显受抑。结论：孕鼠羊膜腔内注射不同剂量脂多糖可诱导不同程度的CA和肺炎,组织学炎症程度随脂多糖剂量增高而加重;轻中度CA和产前地塞米松双重暴露不会对围产期母子生存率造成不利影响,不会抑制胎儿和新生儿生长,炎症不被抑制反而协同诱导更显著的肺成熟;重度CA和产前地塞米松双重暴露会带来不利影响,尤其是增加支气管肺发育不良风险。     

早期药物干预对慢性阻塞性肺疾病大鼠转化生长因子β1的表达影响

目的:观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型的TGF-β1的表达变化和早期药物干预对其表达的影响.方法:利用烟薰和气道内多次滴入脂多糖(LPS)建立大鼠COPD模型(B组).早期给予冬虫夏草(C组),红霉素(D组),吸入布地奈德(E组)等分组干预.小动物肺功能仪测定气道阻力(RL)和动态顺应性(Cdyn).采用免疫组织化学法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测TGF-β1蛋白及mRNA.结果:模型组基本符合人类COPD病理生理变化.外周细支气管平滑肌层和细胞外基质胶原较正常组(A组)大鼠明显增多.C组与B组比RL减少(P＜0.01),D组、E组与B组比RL亦减少,但Cdyn增加(P＜0.01).B组细支气管上皮、肺泡巨噬细胞和小动脉内皮的TGF-β1蛋白及mRNA的表达高于A组(P<0.01),C组与B组无明显差异,而D组、E组与B组相比,TGF-β1蛋白及mRNA的抑制明显,主要表现在细支气管上皮,但两者抑制程度并无明显差异(P>0.05).气道阻力与细支气管黏膜上皮TGF-β1蛋白,支气管肺组织的TGF-β1mRNA均呈正相关(r＝0.510、P＜0.01,r＝0.367、P＜0.05).结论:慢性烟薰和气道内滴入LPS能构建含有气道重塑特征的COPD大鼠模型.早期应用红霉素,吸入布地奈德可明显抑制气道TGF-β1的表达,影响COPD大鼠气道重塑的发生发展,而冬虫夏草未见此作用.     

灯盏益肾颗粒对糖尿病肾病大鼠TGF-β/Smad转导通路的影响

目的 观察灯盏益肾颗粒对糖尿病肾病（DN）大鼠TGF-Smad转导通路的影响，探讨其对DN防治作用。方法 雄性SD大鼠90只随机分成正常组（A组）、模型组（B组）、盐酸贝那普利组（C组）、灯盏益肾低、中、高剂量组（D、E、F组）。链脲佐菌素（STZ）55mg/kg一次性腹腔注射建立DN模型，给予不同实验因素干预后，生化检测胱抑素C（CysC）、血肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）、尿蛋白/尿肌酐（Up/Ucr）；免疫组化法测定大鼠肾组织TGF-β1、Smad 2、Smad 7、Ⅳ型胶原、纤维黏连蛋白（FN）的表达。结果 E、F组Up/Ucr、CysC、BUN低于B组（P<0.05或P<0.01）；E、F组肾组织中TGF-β1、Smad 2、Ⅳ型胶原、FN蛋白表达明显低于B组（P<0.01）、低于C、D组（P<0.05），Smad 7蛋白表达多于B、C、D组（P<0.05）。结论 灯盏益肾颗粒可以对糖尿病肾病大鼠肾脏组织中TGF-β/Smad信号传导通路产生影响，调控肾组织中Ⅳ型胶原、FN表达，影响肾纤维化进程，随剂量增加，影响作用增强。     

丹参、川芎嗪联合应用对肺纤维化大鼠肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达的影响

观察丹参川芎嗪合剂腹腔注射给药对博来霉素（bleomycin,BLM）致肺纤维化大鼠肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mR—NA表达的影响。方法：健康成年SD雄性大鼠90只,随机分为生理盐水（NS）组,BLM组,地塞米松（D）组,丹参川芎嗪合剂小剂量（S）组,合剂中剂量（M）组,合剂大剂量（L）组,每组15只,后五组按照BLM5mg／kg气管内给药制备肺纤维化大鼠模型,NS组气管内灌注同体积的NS。24小时后S组、M组、L组分别腹腔注射丹参川芎嗪合剂药物,NS组、BLM组腹腔注射等体积的NS．连续给药至第7天．第14天,第28天后各组分别处死大鼠5只。取肺组织分别行HE和Masson染色,观察肺泡炎和肺纤维化情况并评分;实时荧光定量PCR（Real—time quantitative Polymerase Chain Reaction,Real Time PCR）测定肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的表达;血清用于肝、肾功能检测。结果：（1）各组大鼠血清旰、肾功能测定结果两两比较差异无统计学意义。（2）肺组织病理学观察提示：NS组各时间点大鼠未发现肺泡间隔水肿、炎性细胞浸润及肺组织纤维化的形成;BLM组第7天大鼠肺泡炎症改变明显,肺组织纤维化不明显,BLM组第14天、第28天大鼠肺泡结构破坏、间质增生,形成广泛纤维化,同时存在肺泡炎;D组有肺泡炎症改变,但是炎性细胞浸润程度较BLM组轻,纤维化程度和肺泡结构破坏也较BLM组轻;S组肺泡炎和肺纤维化程度均与BLM组类似。M组、L组第7天大鼠肺组织改变与BLM组大致相同;M组、L组第14天肺泡炎程度明显低于BLM组。M组、L组第14天、第28天肺纤维化程度明显低于BLM组（P〈0．05）。（3）实时荧光定量PCR检测肺组织I、Ⅲ型胶原mRNA表达：以NS组为参考标准,BLM组mRNA表达明显增多,D组相对于BLM组表达明显减少：S组与BLM组比较无明显差异,与D组比较其表达增多;M组、L组明显低于BLM组,与S组比较表达也明显减少（均P〈0．05）。结论：丹参川芎嗪合剂腹腔注射能够改善肺纤维化,且对肝、肾功能无明显毒副作用。     

补肾健脾固本法治疗支气管哮喘的实验研究

为探讨补肾健脾固本法治疗哮喘的作用机理,将72只雄性SD大鼠,随机分为正常对照组（A）、哮喘模型组（B）、止喘胶囊小剂量组（C）、止喘胶囊大剂量组（D）、西药对照组（E）和中西药结合组（F）6组,每组12只。除A组外,采用腹腔注射卵白蛋白和灭活百日咳杆菌的方法,制成大鼠哮喘模型。在此基础上,各组模型鼠分别给予不同的药物“治疗”,两周后处死测定各组大鼠血浆及支气管肺泡灌洗液（BALF）中NO、ET－1和IL－5含量。结果：B组BALF中NO浓度、ET－1含量明显高于A组;与B组相比,D、E组显下降,后两组之间无统计学差异,F组BALF中NO浓度显低于D组、E组,接近A组。B组血浆和BALF中IL－5含量均明显高于A组;与B组相比,除C组外,其余各治疗组均明显下降;其中F组显低于D组、E组,接近A组。提示：通过下调血浆和BALF中IL－5,抑制BALF中NO、ET－1的合成和释放,从而减轻哮喘气道炎症及气道上皮重建,降低气道高反应性,可能是补肾健脾固本法治疗哮喘的机制之一。     

促红细胞生成素对高糖环境下系膜细胞凋亡的影响及其可能机制

目的探究促红细胞生成素（EPO）在高糖环境下对正常人肾小球系膜细胞凋亡的影响及其可能机制,为延缓糖尿病肾病（DN）进展寻找新的治疗方法。方法体外培养正常人肾小球系膜细胞。将培养后的正常人肾小球系膜细胞随机分为8组:空白对照（A）组（未加任何刺激物）,高糖（B）组(D-葡萄糖30 mmol·L-1),高渗（C）组(甘露醇25 mmol·L-1),EPO（D）组(EPO 20 U·mL-1),低浓度EPO干预（E）组(D-葡萄糖30 mmol·L-1+EPO 5 U·mL-1),中浓度EPO干预（F）组(D-葡萄糖30 mmol·L-1+EPO 10 U·mL-1),高浓度EPO干预（G）组(D-葡萄糖30mmol·L-1+EPO 20 U·mL-1),Y27632（H）组(D-葡萄糖30 mmol·L-1+Rho激酶抑制剂10μmol·L-1)。各组细胞均培养24 h。RT-PCR检测各组RhoA mRNA、ROCK1 mRNA的表达水平,流式细胞术检测各组的细胞凋亡。结果C、D、E 3组系膜细胞凋亡率与A组比较差异无统计学意义（P>0.05）。与B组比较,C、D、E、F、G 5组系膜细胞凋亡率、RhoA mRNA、ROCK1 mRNA表达水平均降低,H组系膜细胞凋亡率、ROCK1 mRNA表达水平均降低（均P<0.05）;与E组比较,F、G、H 3组系膜细胞凋亡率均升高,RhoA mRNA、ROCK1 mRNA表达水平均降低（均P<0.05）;与F组比较,G、H 2组系膜细胞凋亡率、ROCK1 mRNA表达水平均降低,G组RhoA mRNA表达水平降低、H组RhoA mRNA表达水平升高（均P<0.05）。Pearson相关性分析结果显示,B组及E、F、G 3组RhoA mRNA表达与ROCK1 mRNA表达均呈正相关（r=0.829、0.898、0.831、0.861,均P<0.05）。结论 EPO可抑制高糖诱导的正常人肾小球系膜细胞的凋亡,其作用机制可能与阻断RhoA/ROCK信号通路有关。