血红素加氧酶-1对大鼠体外循环术后肺组织抗炎性损伤的研究

【】 观察钴原卟啉诱导肺组织血红素加氧酶-1（HO-1）表达在大鼠体外循环术后肺组织损伤中发挥的抗炎性损伤作用,并对其作用机制进行分析。方法 雄性Wistar大鼠144只,随机分为3组：A组（对照组）、B组（钴原卟啉,CoPP）、C组［钴原卟啉（CoPP）+锌原卟啉（ZnPP）］。建立改良大鼠体外循环肺损伤模型。制模前24 h,A组大鼠腹腔注射生理盐水,B组腹腔注射CoPP（5 mg/kg）,C组腹腔注射CoPP（5 mg/kg）和ZnPP（5 mg/kg）。制模成功后采用断颈法分别于体外循环前（T0）,体外循环结束即刻（T1),体外循环后2 h（T2）、6 h（T3）、12 h（T4）、24 h（T5）将大鼠处死,每个时间点8只。取肺组织检测相应的指标。用多聚甲醛来固定部分右肺组织,然后用石蜡包埋, 以用于HO-1蛋白表达的免疫组化方法测定。剩余肺组织置于液氮中冻存备用,用于检测肺组织匀浆胆红素的含量,酶联免疫吸附（ELISA）法检测肿瘤坏死因子α（TNF-α）表达。结果 B组大鼠肺组织中HO-1蛋白表达在体外循环（CPB）开始前后均有明显增加,其活性测定结果与蛋白表达结果一致,在各时间点均强于A组和C组（P<0.05）,各组HO-1蛋白表达在T2期最高,A、B、C三组分别为0.1852±0.070、0.2873±0.091、0.1917±0.082。B组大鼠肺组织TNF-α的含量在CPB后各时间点均低于A组和C组（P<0.05）,三组TNF-α的含量在T2期最高,分别为：480.42±41.67 pg/mL、358.19±32.35 pg/mL、466.53±39.42 pg/mL。结论 CoPP可以诱导肺组织HO-1的高表达,而且经过CPB后仍保持较高的表达。内源性HO-1高表达在体外循环肺损伤中具有抗炎作用,可有效抑制TNF-α炎性细胞因子分泌,从而减轻体外循环术后肺的炎性损伤。     

福辛普利对自发性高血压大鼠模型血压水平及炎症反应、心血管重构的影响

目的 研究福辛普利对自发性高血压大鼠血压水平、炎症反应及心血管重构的影响。方法 选择自发性高血压大鼠作为实验动物并分为对照组和ACEI组。对照组给予生理盐水，ACEI组给予福辛普利干预。干预前后分别测定尾动脉收缩压，干预后测定心脏组织中炎性因子、重构分子的含量以及肾脏组织中炎性因子的含量。结果[结果部分应列举主要数据，并修改英文摘要] 干预后2周、4周、6周、8周时，ACEI组大鼠尾动脉收缩压呈逐步降低趋势，对照组大鼠尾动脉收缩压无明显变化，ACEI组大鼠尾动脉收缩压显著低于对照组；干预后8周，ACEI组大鼠心脏组织中NF-κB（3.28±0.64 vs 6.61±0.93）ng/mg、IL-1β（1.02±0.17 vs 1.92±0.28）ng/mg、IL-6（0.74±0.11 vs 1.87±0.30）ng/mg、TNF-α（1.46±0.22 vs 3.42±0.57）ng/mg、CTGF（152.52±25.25 vs 353.68±51.24）pg/mg、α-actinin（1.86±0.26 vs 4.25±0.67）ng/mg、MMP-9（177.53±23.15 vs 353.64±46.79）pg/mg的蛋白含量均显著低于对照组，大鼠肾脏组织中NF-κB（2.24±0.35 vs 5.58±0.79）ng/mg、IL-1β（1.42±0.19 vs 3.20±0.56）ng/mg、IL-6（1.18±0.22 vs 2.78±0.35）ng/mg、TNF-α（0.51±0.62 vs 1.24±0.19）ng/mg的蛋白含量均显著低于对照组。结论 福辛普利用于自发性高血压大鼠能够降低血压并抑制炎症反应和心血管重构。     

依普利酮对AMI大鼠心肌炎症反应及心脏功能影响的研究

【摘要】 目的 观察依普利酮对急性心肌梗死（AMI）大鼠心肌炎症反应、心脏功能的影响。方法 将结扎左冠状动脉致AMI大鼠模型随机分为AMI组（n=11）和依普利酮治疗组（AMI-E，n=11），并设立假手术（Sham，n=14）组大鼠。在依普利酮（30 mg·kg-1·d-1）治疗4周后，用超声心动图和血流动力学指标评价心脏功能；心肌Masson染色法测定心肌胶原容积分数（CVF）和血管周围胶原面积（PVCA），碱水解法测定羟脯氨酸（Hyp）含量；酶联免疫吸附法测定心肌组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α），白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）。结果 ①AMI组大鼠心肌CVF、PVCA、Hyp较Sham组显著增加（P＜0.01）；AMI-E组大鼠心肌CVF、PVCA、Hyp较AMI组均显著减低（P＜0.05）。②AMI组大鼠心肌组织中TNF-α(10.7±3.2pg/g)、IL-1β(14.5±3.5pg/g)、IL-6(21.1±8.0pg/g)表达较Sham组[(5.6±1.1pg/g)、 (8.2±2.1pg/g)、 (9.8±3.1pg/g)]显著增加（P＜0.01）；AMI-E组TNF-α(7.8±2.6pg/g)、IL-1β(11.3±3.2pg/g)、IL-6(14.7±4.7pg/g)表达较AMI组显著减轻（P＜0.05），并伴随心脏功能的改善（P＜0.05）。结论 依普利酮改善AMI大鼠心脏功能，可能与抑制心肌炎症反应、减轻心肌纤维化有关。     

黄芩苷对卡氏肺孢子虫肺炎大鼠TNF-α和sICAM-1的调节作用

目的 研究黄芩苷对卡氏肺孢子虫肺炎（PCP）大鼠血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）和可溶性细胞黏附分子1（sICAM-1）的调节作用。 方法 49只SD大鼠随机均分7组,分别为正常对照组（A组）、免疫抑制对照组（B组）、有效药物对照组（C组)、黄芩苷预防组（D组）、黄芩苷低（E组）、中（F组）和高剂量治疗组（G组）。A组不做任何处理,其他各组均于腹股沟皮下注射地塞米松磷酸钠（每次3.5 mg/只,每周2次,连续注射6周),诱导其免疫抑制建立大鼠卡氏肺孢子虫感染动物模型。D组注射地塞米松磷酸钠3周后,灌胃黄芩苷100 mg/(kg?d)连续5周。C、E、F和G组于连续注射地塞米松磷酸钠6周后给药,其中C组灌胃磺胺甲基异恶唑（SMZ）250 mg/(kg?d)和甲氧苄胺嘧啶（TMP） 50 mg/(kg?d),连续2周; E、F和G组分别灌胃黄芩苷100、200和400 mg/(kg?d),均连续2周。B组不给药。各组大鼠均于第8周末摘眼球取血、分离血清,用放射免疫分析法检测TNF-α含量,ELISA法检测sICAM-1含量。同时剖杀大鼠取肺组织制作印片（六胺银染色）和病理切片（HE染色）,观察其病理学变化。 结果 大鼠血清TNF-α含量,黄芩苷预防组［（2．14±0.14） ng/ml］及低［（2.57±0.15） ng/ml］、 中［（1.46±0.14） ng/ml］和高［（1.12±0.13） ng/ml］剂量治疗组均高于正常对照组［（0.70±0.21） ng/ml］（P<0.05）, 低于免疫抑制对照组［（3.65±0.73） ng/ml］（P<0.01）。有效药物对照组［（1.59±0.14） ng/ml］明显高于正常对照组（P<0.01）, 低于免疫抑制对照组（P<0.01）。血清sICAM-1含量, 黄芩苷预防组［（618.68±52.42） pg/ml］及低［（814.29±61.11） pg/ml］、 中［（498.08±32.56） pg/ml］、 高［（377.06±56.56） pg/ml］剂量治疗组均低于免疫抑制对照组［（1 247.39±288.57） pg/ml］（P<0.05）,有效药物对照组［（386.95±44.98） pg/ml］低于免疫抑制对照组（P<0.01）。黄芩苷各治疗组肺组织炎症较免疫抑制对照组明显减轻,肺间质炎性细胞浸润及肺泡腔泡沫样渗出物均明显减少。 结论 黄芩苷能降低PCP大鼠血清TNF-α和sICAM-1含量,减轻肺部炎性反应。     

益气养阴活血化痰汤对肺纤维化大鼠细胞免疫调控机制研究

目的 探讨益气养阴活血化痰汤对肺纤维化大鼠的细胞免疫的调控机制。方法 将40只大鼠随机分为A正常组、B模型组、C中药组和D西药组,每组各10只,并分组给与治疗。建立博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化动物模型,检测巨噬细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、转化生长因子-β1（TGF-β1）等细胞因子的变化情况。结果模型组MCP-1、TNF-α和TGF-β1等细胞因子的分泌水平明显高于正常组（P〈0．05）,中药益气养阴活血化痰汤可有效地降低MCP-1、TNF-α和TGF-β1等的过度分泌和表达,与模型组比较有显著性差异（P〈0．05）。结论益气养阴活血化痰汤通过降低MCP-1、TNF-α和TGF-β1等细胞因子的表达,抑制细胞免疫功能,达到减轻肺纤维化的目的。     

不同剂量的熊果酸对大鼠静脉桥再狭窄过程中细胞凋亡的影响

目的 研究不同剂量的熊果酸诱导大鼠静脉桥再狭窄过程中内膜和中膜细胞凋亡的作用。方法 SD大鼠60只，体重300～350 g，随机分成UA（熊果酸）0组、UA1组、UA2组和UA3组。将所有实验动物的右侧颈外静脉以套管法移植至右侧颈总动脉上。UA1组、UA2组和UA3组术后首日开始予以熊果酸灌胃，剂量分别为15 mg?kg-1?d-1、30 mg?kg-1?d-1和45 mg?kg-1?d-1，UA0组不予熊果酸干预。术后满第1周、第2周和第4周分三次取材，每次每组随机选取5只大鼠。每条静脉标本随机选取不同位置的切片共5张做TUNEL检测。计算凋亡细胞指数。将4组数据对比研究。结果 1周、2周、4周静脉桥内膜细胞凋亡指数： UA0组（22.0±4.1，18.6±2.8，8.4±3.6）%，UA1组（28.4±2.4，19.2±1.4，9.4±3.5）%，UA2组（35.2±1.7，25.6±2.7，11.6±2.7）%，UA3组（41.5±1.9，28.4±1.8，16.3±1.4）%。1周、2周、4周静脉桥中膜细胞凋亡指数： UA0组（4.0±2.2，2.6±1.5，2.0±0.7）%，UA1组（6.6±2.3，4.2±1.6，2.6±1.1）%，UA2组（7.8±3.7，4.4±2.1，3.4±1.1）%，UA3组（7.6±1.7，4.0±0.8，3.5±0.7）%。内膜细胞凋亡指数比较，时间效应的P＜0.05，组别效应的P＜0.05，交互效应的P＜0.05。中膜细胞凋亡指数比较，时间效应的P＜0.05，组别效应的P＞0.05，交互效应的P＞0.05。结论 熊果酸具有诱导大鼠静脉再狭窄的内膜细胞凋亡的作用，该作用随着熊果酸剂量的增大而加强；而熊果酸不具有诱导静脉桥中膜细胞凋亡的作用。     

LOX-1/NF-κB信号途径对ox-LDL刺激的人脐静脉内皮细胞炎症因子表达的影响及氟伐他汀的干预作用

目的：探讨血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体-1（LOX-1）/核因子（NF）-κB信号途径对氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）刺激的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）炎症因子表达的影响及氟伐他汀的干预作用。方法：设立不同浓度的ox-LDL刺激组,LOX-1中和抗体干预组,NF-κB抑制剂吡咯烷二硫代氢基甲酸盐（PDTC）干预组,氟伐他汀干预组及空白对照组;检测细胞上清液中肿瘤坏死因子（TNF）-α,白细胞介素（IL）-6的浓度。结果：25mg/L、50mg/L、100mg/L浓度的ox-LDL刺激组24h后上清液TNF-α浓度分别为：（32.34±2.46）pg/ml、（96.43±8.36）pg/ml、（62.79±4.64）pg/ml,IL-6浓度分别为：（264.71±15.06）pg/ml、（630.70±17.77）pg/ml、（378.62±16.33）pg/ml,均较空白对照组TNF-а（22.99±3.55）pg/ml、IL-6（80.37±8.29）pg/ml水平显著升高（P〈0.05~0.01）;NF-кB抑制剂PDTC和LOX-1中和抗体干预后上清液TNF-α浓度较50mg/L ox-LDL刺激组显著下降（P〈0.01）。不同浓度氟伐他汀（0.01μmol/L、0.1μmol/L、1μmol/L）干预HUVECs 24h后上清液TNF-α浓度分别为（73.84±6.50）pg/ml、（42.59±6.45）pg/ml、（23.55±4.27）pg/ml;IL-6浓度分别为（549.0±20.23）pg/ml、（434.56±22.4）pg/ml、（302.42±21.30）pg/ml,较50mg/L ox-LDL刺激组显著下降（P〈0.05~0.01）。结论：氧化低密度脂蛋白可刺激人脐静脉内皮细胞上清液中炎症因子TNF-α和IL-6的表达,在25~50mg/L剂量范围内呈显著的剂量-效应关系。氟伐他汀可浓度依赖性抑制人脐静脉内皮细胞上清液中炎症因子TNF-α和IL-6的表达。     

重组屋尘螨2类变应原疫苗免疫治疗小鼠过敏性气道炎症的研究

目的 观察以聚乳酸-羟基乙酸共聚物（PLGA）材料为佐剂制备的重组屋尘螨2类变应原（rDer p 2）纳米微粒疫苗（DEPN）对小鼠过敏性气道炎症的影响，并探讨其免疫治疗机 制。 方法 制备PLGA-rDer p 2纳米粒子并鉴定其特性。40只BALB/c小鼠随机分为5组，A组（对照组）均给予生理盐水（100 μl）。B、C、D和E组腹部皮下注射屋尘螨粗浸液（10 μg）免疫小鼠致敏，然后分别用PBS（100 μl）、2 mg 空白PLGA粒子（empty PLGA，EP）、100 μg rDer p 2、2 mg的DEPN纳米疫苗（载有100 μg rDer p 2）皮下注射进行免疫治疗，连续免疫治疗3 d，1次/d，各组用rDer p 2（50 μg）滴鼻激发，激发后第2天剖杀，收集支气管肺泡灌洗液（BALF）并对细胞进行总计数和分类计数；HE染色和PAS染色（Periodic Acid?鄄Schiff Stain）观察小鼠肺部组织炎症和支气管黏液分泌；用ELISA检测BALF和脾细胞培养上清的细胞因子（IL-4、 IFN-γ）和血清中变应原特异性IgG2a和IgE抗体浓度。 结果 B、C 组肺部呈明显的变态反应性炎症，D、E组变应原诱导的肺部嗜酸粒细胞浸润和黏液分泌比B、C 组显著减轻。BALF中的细胞总数B组比A组明显增多，分类细胞以中性和嗜酸粒细胞为主，超过50%。rDer p 2特异性IgE抗体水平，D组（0.93±0.04）和E组（0.77±0.10）均低于B组（1.14±0.10）（P＜0.01）；特异性IgG2a抗体水平，D组（1.02±0.01）和E组（1.17±0.46）均高于B组（0.14±0.01）（P＜0.01）。在BALF中，D组[（55.60±3.79） pg/ml]和E组[（48.60±4.50） pg/ml]IL-4水平均低于B组[（78.90±6.07） pg/ml]（P＜0.01）；IFN-γ水平E组[（68.50±2.87） pg/ml]显著高于B组[（27.30±3.51） pg/ml] （P＜0.01）。脾细胞上清的IL-4水平，D组[（56.3±4.85） pg/ml]和E组[（40.2±4.36） pg/ml]显著低于B组[（81.20±6.84） pg/ml] （P＜0.01）；IFN-γ水平，E组[（70.20±3.85） pg/ml]显著高于B组[（34.60±2.25） pg/ml] 。 结论 DEPN免疫治疗可抑制小鼠肺部过敏炎症，其机制可能与调节Th1/Th2平衡有关。     

激活蛋白1和肿瘤坏死因子α在早期被动吸烟小鼠肺部表达增加

目的观察早期被动吸烟小鼠肺功能及肺组织的病理变化,核转录因子κB（NF-κB）和激活蛋白-1（AP-1）的活性变化以及炎症因子IL-8、IL-6和肿瘤坏死因子α（TNF-α）的表达变化,探讨转录因子与炎症介质的关系,为慢性阻塞性肺疾病发病机制的研究提供参考。方法将C57/BL6雄性小鼠随机分为被动吸烟组（10只）和健康对照组（10只）,被动吸烟2h,2次/d（间隔时间至少6h）,连续30d。用小动物呼吸机连接PowerLab压力传导器测定各组肺功能,HE染色法比较各组肺组织的病理变化,凝胶迁移检测（electrophoretic mobility shift assay,EMSA）观察肺组织中NF-κB和AP-1的活性,用酶链免疫吸附试验（ELISA）测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中IL-8、IL-6和TNF-α的浓度。结果健康组小鼠肺功能和吸烟组相比未见显著性差异,[吸气峰流速度（PIF）分别为（1.8244±0.4907）ml/s和（1.8675±0.4187）ml/s（P=0.6244）,呼气峰流速度（PEF）分别为（6.1369±0.5753）ml/s和（6.1689±0.7669）ml/s（P=0.3598）],肺组织病理观察可见终末细支气管和血管周围有大量淋巴细胞浸润,肺泡中有大量巨噬细胞聚集。肺组织EMSA结果显示NF-κB活性变化不明显,吸烟组AP-1活性明显增强。ELISA结果表明BALF中吸烟组较健康组TNF-α显著性增高[分别为（241.44±239.47）pg/mg和（106.58±64.229）pg/mg,P=0.0243],IL-8和IL-6无明显改变[IL-8分别为（20.404±24.204）pg/mg和（13.018±11.289）pg/mg,P=0.4392;IL-6分别为（75.612±89.278）pg/mg和（43.863±35.899）pg/mg,P=0.1206]。结论小鼠早期被动吸烟可以引起终末细支气管和血管旁淋巴细胞浸润,巨噬细胞肺泡腔内聚集。气道内TNF-α表达增加。肺组织AP-1活性增加,可能参与了吸烟引起的早期炎症变化。     

心脏瓣膜置换术患者围术期细胞因子浓度变化以及脑苷肌肽的影响

目的探讨体外循环（CPB）下心脏瓣膜置换术患者围术期血清细胞因子浓度的变化以及脑苷肌肽对其影响。方法40例CPB下心脏瓣膜置换术患者，随机分为脑苷肌肽组（A组）和对照组（B组），每组20例。A组于麻醉诱导后静脉注射脑苷肌肽20ml（每毫升含神经节苷脂50pg、多肽3．2mg），B组给等容积生理盐水。分别于给药前（T1）、CPB结束（12）及结束后2h（T3）、6h（T4）、24h（T5）各时间点采集颈内静脉球部血，测定细胞因子白介素-6（IL-6）、白介素-8（IL-8）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）浓度。结果两组IL-6、IL-8和TNF-α浓度在CPB后均显著升高，组间比较显示B组IL-6和IL-8浓度在T3、T4和髑时间点均显著高于A组（P〈0．05），B组TNF-α浓度在12、T3、T4和T5时间点均显著高于A组（P〈0．05）。结论脑苷肌肽可以减少体外循环心脏瓣膜置换手术中炎性细胞因子IL-6、IL-8和TNF-α的释放。     

Research and Evaluation of the Influence of the Construction of the Gate and the Influence of the Piston Velocity on the Distribution of Gases into the Volume of the Casting

Distribution of gasses to the cast volume and volume of pores can be maintained within the acceptable limits by means of correct setting of technological parameters of casting and by selection of suitable structure and gating system arrangement. The main idea of this paper solves the issue of suitability of die casting adjustment—i.e., change of technological parameters or change of structural solution of the gating system—with regards to inner soundness of casts produced in die casting process. Parameters which were compared included height of a gate and velocity of a piston. The melt velocity in the gate was used as a correlating factor between the gate height and piston velocity. The evaluated parameter was gas entrapment in the cast at the end of the filling phase of die casting cycle and at the same time percentage of porosity in the samples taken from the main runner. On the basis of the performed experiments it was proved that the change of technological parameters, particularly of pressing velocity of the piston, directly influences distribution of gasses to the cast volume.