罗勒多糖对HLECs中VEGFR-2/3表达的影响

目的研究罗勒多糖对人淋巴管内皮细胞(HLECs)的血管内皮细胞生长因子受体-2/3(VEGFR-2/3)表达的影响,揭示罗勒多糖抗肿瘤转移的分子机制。方法乏氧条件下体外培养HLECs,实验分为3组,A组为不加罗勒多糖处理的空白对照组,B组(罗勒多糖,200μg·m L~(-1)),C组(罗勒多糖,400μg·m L~(-1)),观察各组HLECs体外成管能力;实时荧光定量PCR检测罗勒多糖处理的HLECs中VEGFR-2/3 mRNA的表达;免疫细胞化学分析VEGFR-2/3蛋白的表达差异。结果 HLECs体外成管数目分别为:29.6±5.47(A组),23.6±3.68(B组),19.2±2.00(C组);与A组比较,B、C组均能减少HLECs的体外成管数目(P0.05)。VEGFR-2 mRNA相对表达量分别为:1(A组),0.59±0.25(B组),0.90±0.13(C组);与A组比较,B、C组VEGFR-2 mRNA相对表达量下降,但差异没有统计学意义。VEGFR-3 mRNA相对表达量分别为:1(A组),0.52±0.19(B组),0.19±0.09(C组);与A组比较,B、C组VEGFR-3 mRNA相对表达量均下降,差异有统计学意义(P0.05)。VEGFR-2蛋白表达累积光密度分别为:2.51±0.03(A组),2.42±0.03(B组),2.12±0.03(C组);与A组比较,B、C组VEGFR-2 mRNA相对表达量下降,但差异没有统计学意义。VEGFR-3蛋白表达累积光密度分别为:3.72±0.28(A组),2.91±0.26(B组),2.82±0.20(C组);与A组比较,B、C组VEGFR-3蛋白相对表达量均下降,差异有统计学意义(P0.05)。结论罗勒多糖可降低HLECs体外成管能力和并显著下调VEGFR-3的表达,这可能是罗勒多糖抑制淋巴管新生,抗肿瘤转移的分子机制。     

罗勒多糖对人卵巢癌细胞SKOV3细胞骨架的影响

目的:观察罗勒多糖对人卵巢癌细胞SKOV3细胞骨架的影响,探讨罗勒多糖抗卵巢癌细胞侵袭转移的可能机制。方法:将卵巢癌SKOV3细胞分为4组,A组为不加罗勒多糖处理的空白对照组,B、C、D组分别用不同浓度罗勒多糖处理,以罗丹明-鬼笔环肽标记微丝,免疫荧光法标记微管,用荧光显微镜观察。结果:罗勒多糖作用的SKOV3细胞微丝重排、伪足减少、微管蛋白弥散分布、细胞骨架的网络结构发生改变;这一作用与剂量呈正相关。结论:罗勒多糖可能通过影响人卵巢癌SKOV3细胞微丝、微管来调节其运动性和侵袭力。     

人参、三七组方对HUVEC VEGFR-2蛋白表达的影响

目的 探讨人参、三七组方对HUVEC VEGFR-2表达的影响.方法 采用免疫组织化学的方法,观察人参、三七组方干预后,HUVEC VEGFR-2的表达.结果 人参、三七组方大剂量组促进了HUVEC VEGFR-2的表达,其作用和bFGF 相当,和空白组相比有明显增加,且组间差异显著.结论 人参、三七组方可能通过促进V...     

解毒消癥饮通过VEGF-C/VEGFR-3信号途径抑制肝癌淋巴管生成的机制研究

目的 探讨解毒消癥饮(JXY)对人淋巴管内皮细胞(HLEC)体外淋巴管生成能力的影响.方法 MTT和Western blot法检测各浓度JXY对人肝癌细胞HepG2细胞活力和血管内皮生长因子C(VEGF-C)表达的影响.将HLEC细胞分为对照组、VEGF-C组、JXY低剂量组(简称低剂量组)、JXY中剂量组(简称中剂量...     

低氧环境下罗勒多糖对卵巢癌细胞生物学行为的影响

目的:观察不同氧环境下中药罗勒多糖对人卵巢癌细胞株SKOV3生物学行为的影响,探讨其抗卵巢癌作用的可能机制。方法:罗勒多糖分别在常氧(21%O2、5%CO2)和乏氧(1%O2、5%CO2和94%N2)环境中作用于人卵巢癌细胞株SKOV3,形态学观察不同氧环境下各组细胞形态差异;细胞凋亡-Hoechst33258染色检测药物对人卵巢癌细胞凋亡情况的影响;MTT法检测各组细胞增殖能力的变化。结果:与对照组相比,乏氧环境下罗勒多糖能够促进人卵巢癌细胞株SKOV3的凋亡,抑制SKOV3细胞增殖,而常氧环境下罗勒多糖作用相反。结论:罗勒多糖在常氧及乏氧环境下对人卵巢癌细胞株SKOV3生物学行为的影响效应截然相反,提示抗肿瘤药物及生物疗法的体外机制研究设计应充分考虑氧环境的影响。     

罗勒多糖对紫杉醇抑制肺腺癌A549细胞增殖作用的影响

目的:探讨罗勒多糖对紫杉醇体外抑制人肺腺癌A549细胞增殖作用的影响。方法:采用MTT法测定罗勒多糖对紫杉醇抑制A549细胞增殖作用的影响,倒置相差显微镜下观察罗勒多糖联合紫杉醇导致的A549细胞形态学变化,并采用Hoechst 33342/PI荧光双染法分析罗勒多糖与紫杉醇联合应用所引起的A549细胞死亡方式。结果 :MTT检测和形态学观察表明罗勒多糖对紫杉醇抑制A549细胞增殖具有明显的增效作用,其增效作用呈浓度和时间依赖性;Hoechst 33342/PI检测显示紫杉醇及紫杉醇联合罗勒多糖作用48 h后可见凋亡细胞。结论:罗勒多糖能增强紫杉醇对人肺腺癌A549细胞株增殖的抑制作用,具有化疗增效作用,这种增效作用以诱导细胞凋亡为主要方式,呈浓度和时间依赖性。     

VEGF-C、VEGF-D及VEGFR-3在宫颈癌组织中的表达及其意义

目的探讨VEGF-C、VEGF-D及VEGFR-3在宫颈疾病组织中的表达及其在宫颈癌发生发展过程中的变化及意义。方法利用SP免疫组织化学染色法检测100例宫颈疾病组织标本中VEGF-C、VEGF-D和VEGFR-3蛋白表达。结果 100例宫颈疾病组织标本中,VEGF-C表达范围为1%～90%,VEGF-D表达范围为0%～88%,VEGF-C、VEGF-D和VEGFR-3三者之间的表达呈正相关,随着病变由慢性宫颈炎到宫颈上皮内瘤变再到宫颈癌的进展,VEGF-C和VEGF-D表达逐级增强。VEGF-C、VEGF-D和VEGFR-3三者表达与淋巴结转移情况均呈明显正相关。结论 VEGF-C和VEGF-D可能在宫颈癌癌变过程中起一定的促进作用,对活检组织联合检测VEGF-C及VEGF-D的表达可能有助于预测宫颈癌是否有盆腔淋巴结的转移。     

参麦注射液对淋巴管生成影响的研究

目的：探讨参麦注射液（简称参麦）对淋巴管生成的影响。方法：采用MTT法检测参麦对淋巴管内皮细胞增殖的影响;划线刮除法检测参麦对淋巴管内皮细胞迁移的影响。结果：参麦能抑制淋巴管内皮细胞增殖;参麦能明显抑制淋巴管内皮细胞迁移。结论：参麦能抑制淋巴管生成;抑制内皮细胞增殖和迁移可能是参麦抗淋巴管生成的机理之一。     

护心康片通过VEGF/VEGFR-2信号通路影响ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块的实验研究

目的 观察护心康片对动脉粥样硬化（AS）小鼠主动脉斑块的影响,探讨其作用机制。方法 以高脂饲料喂养ApoE-/-小鼠12周建立AS小鼠模型,设空白组、模型组、护心康低剂量组、护心康中剂量组、护心康高剂量组和阿托伐他汀钙组,连续给药12周,分别行HE染色观察主动脉形态学改变,油红O染色观察脂质含量,免疫组化法测定CD34、MOMA-2、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达情况,RT-qPCR检测VEGF、VEGFR-2mRNA表达水平,Western blotting检测血管内皮生长因子（VEGF）、血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)蛋白表达水平。结果 与空白组比较,模型组小鼠主动脉有较大斑块形成,脂质含量多（P <0.01）,α-SMA表达减少（P <0.01）,CD34、MOMA-2表达增加（P <0.01）,VEGF、VEGFR-2 mRNA及蛋白表达增加（P <0.01或P <0.05）;与模型组比较,给药各组小鼠主动脉斑块均明显减小,脂质含量减少（P <0.01或P <0.05）,α-SMA表达增加（P <0.01）,CD34...     

人参皂甙Rh2对小鼠移植瘤细胞间连接蛋白JAM的表达及对肿瘤淋巴管形成的影响

目的:观察人参皂甙Rh2对小鼠移植瘤肿瘤细胞间连接黏附分子JAM在肿瘤细胞间及淋巴管上表达的影响,探讨其抗肿瘤转移作用机制。方法:昆明小鼠40只(雌雄共用),前肢皮下接种S180小鼠癌性腹水0.2mL造模,成瘤后随机分为2组,给药组给予人参皂甙Rh2(20mg/kg-1)灌服;对照组给予等量生理盐水,4周后取材。免疫组化二步法观察LYVE-1在肿瘤组织淋巴管和JAM-1在癌细胞,JAM-2在淋巴管的表达。结果:JAM-1在两组阳性表达的肿瘤细胞吸光度(IA)有明显差异。LYVE-1在两组阳性表达的淋巴管数密度有明显差异。JAM-2阳性表达的淋巴管数密度两组间的明显差异P<0.05。结论:人参皂甙Rh2抑制肿瘤细胞脱离癌巢及淋巴管的生成,进而抑制肿瘤生长,干扰肿瘤的转移途径。     

桃红四物丸对兔皮片移植模型成活及VEGFR-2含量影响的实验研究

目的:观察桃红四物丸对兔皮片移植模型成活及组织VEGFR-2含量的影响,探讨其对皮片移植成活的作用机制.方法:将40只清洁级新西兰大白兔随机分为2组,均制成兔皮片移植模型,造模后治疗组予桃红四物丸灌胃治疗,对照组子等容积蒸馏水灌胃,每天2次,连续14d.通过组织病理学检查、血管密度检测和免疫组化染色的方法,观察比较2组术后11d和14d移植皮片组织病理学评分、血管密度及VEGFR-2含量.结果:治疗组术后11d和14d的组织病理学评分、血管密度和VEGFR-2含量均高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:桃红四物丸可通过改善组织病理学情况、促进血管新生、增加VEGFR-2含量,从而促进移植皮片成活.     

GA3、光照对不同罗勒种子萌发与幼苗生长的影响

目的:研究不同品种罗勒种子萌发特性,探寻适合其种子萌发的方法.方法:以紫叶罗勒和泰式罗勒的种子为材料,比较了不同浓度GA3和不同光周期处理对种子萌发和幼苗生长的影响.结果:(1)紫叶罗勒种子千粒重为(0.1530±0.0028)g,泰式罗勒种子为(0.1082±0.0032)g.(2)紫叶罗勒种子经浓度为200 mg/...     

姜黄素对淋巴管内皮细胞生成的影响

目的：探讨姜黄素对淋巴管内皮细胞（lymphatic endothelial cells,LECs）增殖和游走的影响。旨在筛选出安全、实用、有效的淋巴管生成抑制剂。方法：取健康猪的胸导管内皮细胞,进行 LECs 的原代培养并鉴定。采用 MTT 法观察姜黄素对 LECs 增殖的影响：采用 Hoechst 33258荧光染色法检测 LECs凋亡。结果：经鉴定,所培养的细胞为典型的 LECs。采用 MTT 法,当姜黄素的浓度≥5μg/mL 时,对LECs 的增殖具有抑制作用（P ＜0．05）;当姜黄素的浓度≥10μg/mL 时,对 LECs 的增殖具有明显的抑制作用（P ＜0．01）。 Hoechst 33258荧光染色检测证实,经姜黄素处理后 LECs,可观察到其核周围有凋亡小体。结论：姜黄素对 LECs 的增殖具有明显的抑制作用。     

罗勒提取物对高血脂症大鼠的实验研究

目的:采用高血脂症模型大鼠探讨罗勒提取物对血脂调节功能的影响.方法:采用高脂乳剂造成高脂血症模型大鼠,给药一个月后,腹主动脉采血,测定胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),同时检测肝匀浆TC、TG和肝指数.结果:罗勒两种提取物能显著降低大鼠血清中TC、LDL升高HDL,并能显著降低大鼠肝组织中TC、TG.结论:罗勒提取物能有效调节机体脂质代谢,对预防和治疗高血脂症有一定的应用价值.     

健脾补肾法对人结直肠癌裸鼠VEGF-C、VEGFR-3、E-cadherin、Vimentin表达的影响

目的：探讨健脾补肾法对人结直肠癌裸鼠血管内皮生长因子C(VEGF-C)、血管内皮生长因子受体3(VEGFR-3)、E黏钙蛋白（E-cadherin）、波形纤维蛋白（Vimentin）的影响。方法：16只裸鼠接种人结直肠癌细胞株HCT116构建结直肠癌移植瘤模型，随机分为对照组和实验组，对照组给予生理盐水灌胃，实验组给予健脾补肾中药复方灌胃，两组均隔天给药1次，持续14 d。给药结束后，脱颈处死后剥离瘤体，免疫组化检测肿瘤组织中VEGF-C、VEGFR-3、E-cadherin、Vimentin的表达。结果：16只结直肠癌移植瘤模型裸鼠均构建成功，免疫组化结果显示：与对照组比较，实验组移植瘤组织中VEGFC、VEGFR-3、Vimentin的表达均明显下调（P <0.05）,E-cadherin的表达明显上调（P <0.05）。结论：健脾补肾法能下调人结直肠癌裸鼠中促进肿瘤淋巴管生成和转移的VEGF-C、VEGFR-3表达及上皮-间质转化标志物Vimentin表达，同时上调E-cadherin表达，有抑制肿瘤细胞转移的作用。     

维吾尔药罗勒对环氧化酶的影响

目的:探讨维吾尔药罗勒醇提物在体外对环氧化酶的影响,从而研究罗勒抗血栓的作用机制。方法:测定人脐静脉内皮细胞6-keto-PGF1α、小鼠腹腔巨噬细胞PGE2的含量。结果:罗勒对环氧化酶-1(COX-1)和环氧化酶-2(COX-2)都有不同程度的抑制作用。在剂量相同时,罗勒醇提物对COX-2的抑制率大于COX-1。结论:本实验从底物的角度证实了罗勒醇提物对COX-1和COX-2的作用,抗血栓部分机理可能是由于抑制环氧化酶而介导的。     

三七总皂苷对肺纤维化大鼠的Smad2/3表达的影响

目的:观察三七总皂苷对肺纤维化大鼠smad 2/3表达的影响,探讨其作用机制.方法:56只SD大鼠随机分为模型组、对照组、三七总皂苷组、地塞米松组.采用博莱霉素制备肺纤维化大鼠模型,24 h后给予干预药物,分别于14 d、28 d处死动物后观察其病理变化、肺系数及Smad 2/3的表达.结果:与模型组比较,三七总皂苷组的肺泡炎和肺纤维化明显减轻,肺组织Smad 2/3表达降低.结论:三七总皂苷抑制博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化的机制与其抑制Smad 2/3蛋白有关.     

红芪多糖对实验性脾虚大鼠胃黏膜中COX-2表达的影响

目的:观察红芪多糖对实验性脾虚大鼠胃黏膜组织中COX-2表达的影响.方法:100%大黄水煎液连续42天灌胃制备脾虚证大鼠模型,造模后将大鼠随机分为6组,其中空白对照组、模型对照组正常饲养,药物组(高、中剂量组)用红芪多糖灌胃30天,对照组(高、中剂量组)以黄芪多糖灌胃30天进行干预;用免疫组化法检测大鼠胃黏膜组织中环氧...     

La（NO3）3对猴头菌多糖产生的影响

在猴头菌（Ｈｅｒｉｃｉｕｍ ｅｒｉｎａｃｅｕｓ）菌丝发酵增减液中,加入不同浓度的Ｌａ（ＮＯ３）３,接种接头７ｄ后,测定菌体和上清液的多糖含量,发现０．５ｍｍｏｌ／Ｌ的Ｌａ（ＮＯ３）３可促进菌丝分泌胞外多糖,发酵液中多糖含量对照高１２６．６９％;０．７５ｍｍｏｌ／Ｌ的Ｌａ（ＮＯ３）３可刺激菌丝多糖的合成,水提多糖含量比对照高１９．４％,碱提多糖含量比对照高４．７１％。     

黄芪多糖对游离脂肪酸所致人血管内皮细胞NLRP3炎性小体表达的影响

目的:研究黄芪多糖对游离脂肪酸所致的人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)的NLPR3炎症小体表达的影响。方法:体外培养HUVECs,用不同浓度的黄芪多糖以及不同的刺激时间刺激HUVECs,通过检测去除游离脂肪酸含量,筛选最适的黄芪多糖刺激浓度与时间。实验过程中采用Caspase-1抑制剂YVAD阻断Caspase-1作用。用NLRP3 siRNA沉默胞内NLRP3表达,观察黄芪多糖对两种蛋白的作用情况。运用蛋白印迹法分别检测细胞内NOX4、NLRP3、Caspase-1以及IL-1β含量。结果:与对照组比较,APS组三酰甘油及游离脂肪酸含量差异均无统计学意义(均P>0.05),游离脂肪酸组中三酰甘油及游离脂肪酸含量均明显升高,差异有统计学意义(均P<0.01)。与游离脂肪酸组比较,游离脂肪酸加APS组三酰甘油及游离脂肪酸含量均明显减少(P<0.01)。黄芪多糖200 mg/L、400 mg/L浓度下,各个蛋白与游离脂肪酸组相比均有明显的降低,有统计学差异(P<0.01)。游离脂肪酸处理后,在NLRP3沉默基因作用下,NLRP3蛋白表达量显著降低(P<0.01),而单独APS的作用与沉默基因的效果相似(P<0.01)。且相对于APS以及NLRP3沉默基因单独作用,两者共同作用下,NLRP蛋白表达降低更多。在Caspase-1抑制剂YVAD作用下,Caspase-1显著降低(P<0.01)。单独APS作用下Caspase-1也显著降低(P<0.01)。且相对于各自单独作用,在YVAD与APS共同作用下,Caspase-1蛋白表达降低更多。结论:在游离脂肪酸所致人血管内皮细胞产生炎症后,黄芪多糖可通过抑制NLRP3炎症小体表达,抑制Caspase-1生成,降低胞内炎症介质IL-1β活性片段生成,减少血管炎症的发生。