肾康注射液对梗阻性大鼠肾间质NF-KB和TGF-β1表达影响的研究

目的 研究肾康注射液对梗阻性大鼠肾间质NF-KB和TGF-β1的表达情况的影响,为临床用药提供依据.方法 采用单侧输尿管结扎(UUO)肾间质纤维化模型,将Wistar大鼠72只随机分为三组假手术组、模型组和治疗组.于术后第5天、第10天、第15天,处死各组大鼠8只,在光镜下观察肾脏组织病理改变,并应用免疫组织化学方法检测肾小管间质中NF-KB和TGF-β1的表达情况.结果 同模型组相比,治疗组可明显降低NF-KB和TGF-β1在肾间质中的表达.结论 肾康注射液可通过降低NF-KB和TGF-β1在肾间质中的表达,抑制肾间质纤维化,从而具有延缓慢性肾功能衰竭的作用.     

TGF-β/Smads信号转导通路与肾间质纤维化的关系

Smads蛋白是目前所知的唯一的TGF-β受体的胞内激酶底物,介导了TGF-β的胞内信号转导。TGF-β参与肾纤维化的各个环节,如增加细胞外基质(ECM)的合成、抑制ECM的降解;增强细胞表面的受体-整合素的表达,使细胞与基质黏附增强,促使ECM沉积;TGF-β的自我诱生作用,即在损伤部位释放TGF-β可诱导细胞产生更多的TGF-β,从而在局部放大了其生物学作用。TGF-β介导的肾纤维化可为Smad2、Smad3激活,而为Smad7所阻断,通过提高Smad7的表达以阻断TGF-β信号转导途径可能为治疗肾纤维化的一种手段。通过对Smads介导的TGF-β胞内信号转导的深入研究,可以有助于对肾脏纤维化发病机制的理解,从而探索新的治疗途径和开发临床新药物。     

红花黄色素对实验性肾间质纤维化大鼠TGF-β及Ⅰ型胶原表达的影响

目的观察红花黄色素注射液对肾间质纤维化大鼠TGF-β及Ⅰ型胶原表达的影响,并探讨其肾脏保护机制。方法45只雄性SD大鼠,随机分为假手术组（A组）、单侧输尿管梗阻（Unilateral ureteral obstruction;uuo）组（B组）、UUO＋红花黄色素治疗组（C组）,各15只。C组红花黄色素5mg／kg·d,造模术前1天开始腹腔注射给药,各组术后10d处死大鼠,处死后取术侧肾组织行HE、Masson染色,转化生长因子（Transforming growth factor-β;TGF-β1）,Ⅰ型胶原（Collagen Ⅰ,Col Ⅰ）免疫组化检测、结果应用图像分析系统进行半定量分析。结果B组、C组可见明显肾间质纤维化的病理改变。c组与B组相比,肾间质纤维化病变程度较轻。免疫组化结果提示：C组与B组相比TGF-β、ColⅠ表达减少（P〈0．01）。结论注射用红花黄色素对大鼠肾间质纤维化有保护作用,这种作用可能是通过抑制TGF-β1的表达,减少Ⅰ型胶原合成的作用实现的。     

TGF-β_1与CTGF在肾间质纤维化中的作用

肾间质纤维化是肾脏疾病进展的关键过程,以大量的细胞外基质在肾间质和肾小管聚集为特征,是多种原因共同作用的结果,其中与多种细胞因子有关。研究表明,多条信号转导途径参与肾间质纤维化的发生、发展。转化生长因子β1(TGF-β1)是作用最强的致肾纤维化细胞因子,TGF-β1/Smad信号转导通路介导TGF-β1的致纤维化作用。结缔组织生长因子是由TGF-β1诱导产生的一种新的致纤维化蛋白,是TGF-β1的下游因子,在肾脏纤维化中发挥重要作用,并已成为研究的新热点。     

Egr-1蛋白、MMP-2、TGF-β1在肾小管间质纤维化大鼠中的表达及意义

目的 探讨Egr-1(early growth response-1)蛋白、MMP-2、TGF-β1在肾小管间质纤维化大鼠模型中的表达及意义.方法 采用单侧输尿管结扎术(Unilateral Ureteral Obstruction,UUO)致肾小管间质纤维化大鼠模型.将54只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、贝那普利(Benazepril)治疗组[10 mg/(kg·d)].手术后第5、10和15天分别处死各组中6只大鼠,用免疫组化方法观察各组大鼠肾小管间质中Egr-1蛋白,转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1),基质金属蛋白酶-2(matrix metalloProteinase-2,MMP-2)表达情况.行HE、Masson染色后进行图像分析评定各组肾小管间质损害程度.结果 模型组各时间点肾小管间质损伤指数及Egr-1蛋白、TGF-β1表达明显高于假手术组(P＜0.05),MMP-2表达明显低于同期假手术组(P＜0.05);而贝那普利组各时间点肾小管间质损伤指数及Egr-1蛋白、TGF-β1表达明显低于模型组(P＜0.05),MMP-2表达明显高于同期模型组(P＜0.05).结论 Egr-1蛋白参与肾小管间质纤维化过程;贝那普利在肾小管间质纤维化中对肾脏有保护作用.     

p27 在单侧输尿管结扎大鼠肾间质纤维化模型中的表达

目的：观察单侧输尿管梗阻（unilateral ureteral obstruction,UUO）大鼠模型中p27在肾小管中的表达,了解p27与肾间质纤维化程度的关系。方法：建立UUO大鼠模型,采用免疫组织化学方法检测UUO组及假手术组（Sham-operated rates,SOR）术后第7 d,14 d,21 d肾小管中p27的表达及其与肾间质纤维化程度的关系。结果：UUO组术后第7 d与SOR组比较,p27在肾小管上皮细胞中的表达无明显变化;术后第14 d UUO组p27的表达下降,与SOR组比较差异有显著性（P<0.05);术后第21 d UUO组p27的表达明显下降,与SOR比较差异有显著性（P<0.01)。结论：p27在早期UUO大鼠模型中的表达无明显变化,随着间质纤维化程度的增加,p27的表达明显下降。     

肾康注射液对梗阻性大鼠肾间质NF-КB和TGF-β1表达影响的研究

目的研究肾康注射液对梗阻性大鼠肾间质NF-КB和TGF-β1的表达情况的影响,为临床用药提供依据。方法采用单侧输尿管结扎(UUO)肾间质纤维化模型,将Wistar大鼠72只随机分为三组:假手术组、模型组和治疗组。于术后第5天、第10天、第15天,处死各组大鼠8只,在光镜下观察肾脏组织病理改变,并应用免疫组织化学方法检测肾小管间质中NF-КB和TGF-β1的表达情况。结果同模型组相比,治疗组可明显降低NF-КB和TGF-β1在肾间质中的表达。结论肾康注射液可通过降低NF-КB和TGF-β1在肾间质中的表达,抑制肾间质纤维化,从而具有延缓慢性肾功能衰竭的作用。     

肾病Ⅰ号方对肾间质纤维化大鼠TGF-β1和CTGF表达的影响

[目的]探讨肾病Ⅰ号方对肾间质纤维化大鼠肾组织转化生长因子-β_1(transforming growth factor-β_1,TGF-β_1)和结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)表达的影响,以及抗肾间质纤维化的可能机制。[方法]选取SPF级健康成年雄性SD大鼠72只,随机分为假手术组、模型组、贝那普利组和肾病Ⅰ号方组,每组18只。除假手术组外,其余大鼠建立单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)模型,术后第2天开始给予对应药物灌胃,贝那普利组给予贝那普利0.8mg/(kg·d)灌胃,肾病Ⅰ号方组则予肾病Ⅰ号方30g/(kg·d)灌胃,均为2次/d,共3周。检测术后第7、14、21天各组大鼠肾功能及肾组织病理学改变,应用免疫组化检测TGF-β_1和CTGF在肾组织的表达情况。[结果]与假手术组比较,模型组和两个药物处理组第7、14、21天血肌酐、尿素氮水平均明显升高(P0.05);与模型组比较,两个药物处理组血肌酐、尿素氮水平明显降低(P0.05)。Masson染色提示,与假手术组比较,模型组第7、14、21天肾间质纤维化指数均明显升高,两组之间差异均有统计学意义(P0.05),而贝那普利组和肾病Ⅰ号方组各时间点的肾间质纤维化指数均明显低于模型组(P0.05),两个药物处理组之间差异无统计学意义(P0.05)。与假手术组比较,第7、14、21天模型组和两个药物处理组TGF-β_1、CTGF表达水平均明显升高(P0.05);与模型组比较,贝那普利组或肾病Ⅰ号方组的表达水平均明显降低(P0.05);两个药物处理组之间差异则无统计学意义(P0.05)。[结论]肾病Ⅰ号方通过抑制肾小管上皮细胞TGF-β_1、CTGF的表达,减少细胞外基质的沉积,从而起到保护肾小管、抗肾间质纤维化的作用。     

慢性肾病大鼠血清Bcl-3、Gal-3、TGF-β1与肾间质纤维化的关系

目的 探讨腺嘌呤诱导的慢性肾病大鼠血清Bcl-3、Gal-3、TGF-β1与肾间质纤维化的关系。方法 将20只SPF级雄性大鼠随机分为对照组(n=10)和模型组(CKD组,n=10),模型组给予腺嘌呤灌胃,对照组给予等体积生理盐水灌胃,分别于第3、6周处死大鼠,留取血检测尿素氮、肌酐及Bcl-3、Gal-3、TGF-β1水平,HE染色观察肾脏病理改变,Masson染色观察肾间质纤维化情况及严重程度,免疫组化染色观察肾组织中α-SMA蛋白的表达情况。结果 与对照组相比,CKD组各时间点的血尿素氮、肌酐、Bcl-3、Gal-3和TGF-β1水平均明显升高(P<0.05)。CKD组大鼠肾组织HE染色可见肾小管上皮细胞变性坏死、肾间质纤维化等病理改变;Masson染色可见蓝色胶原沉积明显增多,同时α-SMA蛋白表达也明显升高(P<0.05)。CKD组肾间质胶原纤维相对面积评分明显高于对照组(P<0.05)。相关性分析显示血Bcl-3、Gal-3、TGF-β1水平与肾间质纤维化相对面积呈正相关(r_s=0.776,P<0.001;r_s     

大蒜素对大鼠肾间质纤维化的干预作用及对TGF-β1/Smads信号通路的影响[*]

目的 观察大蒜素对大鼠肾间质纤维化的干预作用，探究其作用与TGF-β1/Smads信号通路的关系。方法 将SD雄性大鼠随机分为3组，采用单侧输尿管结扎术（UUO）建立肾间质纤维化模型，造模后24h予大蒜素组大鼠大蒜素60mg/(kg?d)灌胃，予假手术组和模型组等量生理盐水灌胃。造模后第15日检测3组大鼠的血清肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）及24h尿蛋白（U-TP），并处死大鼠，留取肾组织，包埋切片后行Masson染色，观察肾组织的病理结构，运用免疫组化法检测大鼠肾组织中TGF-β1及α-SMA的表达，Western Blot法测定肾组织中p-Smad2和p-Smad3的表达。结果 与模型组相比，大蒜素组大鼠的体质量显著增高［（298.52±14.82）g比（275.53±23.92）g，P<0.05］，肾脏指数显著下降［（0.53±0.15）%比（0.84±0.25）%，P<0.01］，肾脏组织病变程度有所改善，SCr、BUN及U-TP均显著低于模型组［SCr：（48.54±5.03）μmol/L比（55.10±7.50）μmol/L，BUN：（5.56±0.43）mmol/L比（6.25±0.51）mmol/L，U-TP：（1009.87±105.02）mg/L比（1300.57±229.65）mg/L ，P<0.05］，肾组织中TGF-β1、α-SMA、p-Smad2和p-Smad3蛋白的表达均有下调［TGF-β1：（0.227±0.011）比（0.282±0.020），α-SMA：（0.326±0.009）比（0.471±0.012），p-Smad2：（0.195±0.011）比（0.279±0.016），p-Smad3：（0.220±0.020）比（0.699±0.076），P<0.01］。结论 大蒜素能够通过调节TGF-β1/Smads信号通路，从而改善大鼠的肾间质纤维化程度，对肾功能起到一定的保护作用。     

单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的产生机制

目的 探讨单侧输尿管梗阻后肾间质纤维化形成机制。方法 将30只大鼠采用单侧输尿管梗阻（uu0）模型，术后第3、7、14天观察双肾组织病理改变，并应用免疫组织化学方法检测肾间质中核转录因子（NF-KB），转移生长因子岛（TGF-β1），α-平滑肌肌动蛋白（α-sMA）的表达，并检测肾间质胶原蛋白的含量。结果随着梗阻时间延长，梗阻侧肾间质中NF-KB、TGF-β1、α-SMA及胶原蛋白的含量增加，对侧无明显变化，两组相比有明显差异（P〈0．05）。结论 单侧输尿管梗阻的大鼠肾间质NF-KB、TGF-β1、α-SMA的过度表达，可上调肾间质胶原蛋白的含量，是形成肾间质纤维化的主要原因之一。     

人肾微血管内皮细胞转分化在移植肾间质纤维化形成中的作用

目的:探讨人肾微血管内皮细胞-间充质细胞转分化(endothelial-mesenchymal transition,EndMT)在移植肾间质纤维化形成中的意义及相关机制?方法:通过对南京医科大学第一附属医院25例慢性移植肾失功能(chronic allograft dysfunction,CAD)患者和25例正常人血生化指标进行分析,对移植肾组织标本和正常肾组织标本进行糖原(PAS)和马松三色(Masson)染色检查分析,观察两组肾功能?肾小管萎缩?肾小球塌陷及肾间质纤维化程度的差异?用免疫组织化学和间接免疫荧光双重染色方法检测两组肾组织标本中血管内皮细胞标志物CD34和肌成纤维细胞标志物α-平滑肌细胞肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)以及转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的表达和分布特点?进一步以原代人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)为体外研究对象,以TGF-β1(5 ng/ml)作用0~72 h,采用免疫印迹方法观察细胞中CD34和α-SMA的表达变化?结果:与正常人相比,CAD患者血清肌酐水平明显升高,PAS和Masson三色染色结果显示CAD患者移植肾组织中出现明显肾小管萎缩?肾小球塌陷及肾间质纤维化改变;半定量统计分析结果表明两者间存在统计学差异(P < 0.01)?免疫组织化学及间接免疫荧光染色结果表明,与正常组相比,CAD组中CD34阳性表达率降低而α-SMA及TGF-β1阳性表达率显著升高,CAD组中部分肾小球和间质微血管内皮细胞呈CD34和α-SMA双重染色阳性?体外研究显示,TGF-β1作用于HUVECs细胞后,随着时间延长,CD34表达逐渐降低而α-SMA表达逐渐增多,与对照组相比,具有统计学差异(P < 0.01)?结论:人肾微血管内皮细胞可能在TGF-β1介导下通过发生EndMT现象进而在移植肾间质纤维化形成中起重要作用?     

慢性马兜铃酸肾病肾间质纤维化大鼠TGF—β1及BMP-7蛋白的表达

目的：研究慢性马兜铃酸肾病肾间质纤维化大鼠TGF-β1及BMP-7蛋白的改变。为探讨防治肾间质纤维化（RIF）的治疗机理提供参考依据和实验支持。方法：采用关木通免煎剂建立马兜铃酸肾病大鼠模型。将大鼠随机分为分两组,空白对照组和慢性马兜铃酸肾病模型组（CAAN）。检测血清尿素氮（BUN）及血清肌酐（Scr）的差异,采用HE和Masson染色检测肾脏病理、免疫组化法检测肾组织TGF-β1和及BMP-7的表达,比较两组肾间质纤维化程度。结果：与空白对照组相比,CAAN组血清尿素氮、血清水平升高（P〈0．05）,肾间质损害分值增加（P〈0．05）,肾组织TGF-β1表达增加（P〈0．05）,BMP-7表达减少（P〈0．05）。结论：慢性马兜铃酸肾病肾间质纤维化的机制可能与TGF-β1及BMP-7蛋白表达有关。     

大黄素对大鼠肾间质纤维化干预作用的实验研究

目的:观察大黄素(Emodin)对肾间质纤维化的干预作用。方法:采用单侧输尿管梗阻法制备大鼠肾间质纤维化模型,并以小、中和大剂量大黄素(25、50、80mg/kg)干预。观察各组大鼠的生存状况,检测大鼠血清I型胶原(C-I)、Ⅲ前胶原肽(PⅢP)、透明质酸(HA)含量,及肾组织TGF-βmRNA表达并进行比较。结果:大黄素各剂量组与模型组比较:①大鼠生存率提高;②血清C-I、PⅢP、HA含量显著降低(P<0.05,P<0.01);③肾组织TGF-βmRNA表达显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论:大黄素能改善单侧输尿管梗阻法诱导的大鼠肾间质纤维化,其机制可能通过抑制大鼠肾组织TGF-βmRNA表达,发挥抗纤维化的作用。     

TGF-β1与BMP-7在肾间质纤维化中的作用

转化生长因子-β1(TGF-β1)是作用最强的致肾纤维化细胞因子,介导多条信号转导途径参与肾间质纤维化的发生发展,其中TGF-β1-Smads是最重要的信号转导途径.骨形态发生蛋白-7(BMP-7)是TGF-β细胞因子超家族的一员,通过Smad细胞间信号通路拮抗TGF-β1的致肾纤维化作用.     

Wnt/β-catenin信号通路在肾缺血再灌注致慢性肾间质纤维化大鼠中的表达

目的 观察Wnt/β-catenin信号通路在肾缺血再灌注(IRI)致慢性肾间质纤维化大鼠模型中的表达.方法 将SD大鼠分为3组,即假手术组(Sham组)及IRI 7 d组、IRI 14 d组.分离左侧肾动脉,IRI组用无创血管夹夹闭左侧肾动脉,35 min后去除血管夹;假手术组不夹闭左侧肾动脉.IRI 7 d组与IRI 14 d组分别于术后第6、13天切除右侧肾,分别于第7、14天处死大鼠.观察比较3组大鼠肾功能,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测3组肾组织β-catenin、纤维连接蛋白(Fibronectin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白表达水平,免疫组织化学观察β-catenin表达部位,生化染色检测胶原含量,Masson染色观察比较3组病理改变.结果 与Sham组相比,IRI 7 d组Fibronectin、α-SMA、胶原含量无明显增高,病理无明显肾小管间质纤维化;而IRI 14 d组Fibronectin、α-SMA的蛋白表达水平则明显增高,胶原含量增多,肾功能减退,病理显示肾小管间质纤维化.与Sham组相比,IRI 7 d组β-catenin表达增高,IRI 14 d组较IRI 7 d组增高更显著.结论 Wnt/β-catenin信号通路可能在肾IRI致慢性肾间质纤维化病程中发挥一定作用.     

川芎嗪对大鼠腹膜纤维化模型腹膜形态及TGF-β1表达的影响

目的观察不同剂量川芎嗪对腹膜透析腹膜纤维化大鼠模型腹膜形态的影响。方法50只大鼠随机分为5组,每组10只,1）空白对照组（大鼠不做任何处理）;2）模型组（HGC大鼠给于每天腹腔注射4.25%的透析液25ml）;3）川芎嗪给药组（HGL）：高剂量组每只大鼠腹腔注射含60mg/L川芎嗪的腹透液25ml;中剂量组每只大鼠腹腔注射含40mg/L川芎嗪的腹透液25ml;低剂量组每只大鼠腹腔注射含20mg/L川芎嗪的腹透液25ml。上述动物连续给药35d,HE染色观察腹膜形态,免疫组化的方法检测腹膜TGF-β1的表达。结果模型组腹膜组织厚度明显增加,壁层腹膜有大量纤维组织积聚,间皮细胞脱落,纤维裸露,间质有炎性细胞浸润。不同剂量川芎嗪对上述病变均有一定的改善作用,其中以中剂量组的作用最明显。正常大鼠腹膜组织的TGF-β1表达极少。而透析5周后腹膜组织TGF-β1表达明显增加,不同剂量川芎嗪均可抑制TGF-β1的组织表达量,低、中剂量抑制作用明显。结论川芎嗪能可抑制长期腹膜透析所致的腹膜纤维化,改善腹膜结构,而抑制腹膜组织TGF-β1表达可能是其抑制腹膜纤维化的机制之一。     

活性维生素D3抑制UUO模型大鼠肾间质纤维化作用的研究及其对TGF-β1，α—SMA表达的影响

目的：探讨活性维生素D3对单侧输尿管梗阻模型（UUO）大鼠肾小管间质纤维化的抑制作用,研究该病理过程中转化生长因子β1（TGF—β1）,α-平滑肌肌动蛋白（α—SMA）的表达变化。方法：36只雄性Wistar大鼠,随机分为三组,活性维生素D。组、假手术组、模型组,每组12只。造模后活性维生素D。组给予罗盖全（骨化三醇）灌胃（3ng／100g）,假手术组及UUO模型组给予等量生理盐水灌胃。三组大鼠于给药后第14天,28d分批（n=6）处死,留取造模侧肾脏。用HE染色及Masson染色法观察肾小管间质纤维化程度,用免疫组化法测定TGF-β1,α-SMA在各组大鼠造模侧肾脏的表达情况。结果：免疫组织化学显示：UUO模型组大鼠的肾脏组织中TGF—β1及α—SMA的表达显著高于假手术组（P〈0．05）,而在活性维生素D3治疗组中,TGF—β1及的n—SMA表达低于UUO模型组（P〈0．05）,肾脏组织形态学显示：模型组肾间质纤维化程度明显高于假手术组,活性维生素D3组肾间质纤维化程度明显小于模型组（P〈0．05）。结论：活性维生素D3能有效抑制UUo大鼠肾间质中TGF—β1及Ⅱ-SMA的表达,从而减轻UU0大鼠肾间质纤维化程度。     

中药芪红合剂对肺间质纤维化模型大鼠肺组织中TGF-β1表达的影响

目的:探讨中药芪红合剂在肺间质纤维化过程中的作用及其机理。方法:采用气管内注射博来霉素A5建立肺间质纤维化的大鼠模型。将40只Wistar大鼠随机分为4组:假手术组、模型组、泼尼松治疗组、芪红合剂治疗组,每组10只。给各组大鼠灌胃相应的生理盐水或药物,术后15d处死各组大鼠,取两肺组织,一部分行石蜡包埋切片,HE染色,观察病理改变,另一部分采用ELISA法定量测定TGF-β1。结果:与假手术组比较,模型组大鼠肺组织有明显的纤维化改变,TGF-β1的含量显著升高(P<0.01);与模型组比较,泼尼松治疗组和芪红合剂治疗组大鼠肺组织中TGF-β1含量显著下降(P<0.01)。结论:中药芪红合剂可能通过降低肺组织中TGF-β1的含量而减轻肺间质损伤及纤维化改变。