荷人鼻咽癌裸鼠血血管内皮生长因子和内皮抑素的研究

目的：探讨不同病期荷人鼻咽癌裸鼠血血管内皮生长因子（VEGF）以及VEGF与内皮抑素（ES）比值的变化，以及它们与肿瘤发展的关系。方法：采用BALB/c裸小鼠复制荷人鼻咽癌裸鼠模型，通过ELISA方法和EIA方法分别测定不同病期荷人鼻咽癌裸鼠血VEGF和ES的浓度，并计算二者的比值。结果：发现荷瘤鼠血中VEGF含量在种瘤5 d组[(81.79±13.20) μg/L]或10d组[(87.78±2.76) μg/L]与正常裸鼠[(82.06±9.78) μg/L]比较未见明显差异（P>0.05），而种瘤20 d组[(101.58±10.71) μg/L]显著高于正常裸鼠（P<0.05）。种瘤30 d组、40 d组[(97.20±9.98) μg/L]、[(88.22±12.94) μg/L]与正常裸鼠、种瘤5 d组、10 d组比较未见明显差异（P>0.05）。随着荷瘤时间的延长，瘤宿主血VEGF含量逐渐升高，种瘤20 d组明显增高并达高峰，种瘤30 d组、40 d组降至正常水平。V/E比值在种瘤5 d组低于正常裸鼠（P<0.05），30 d组、40 d组持续在低水平（P<0.05）。结论：提示肿瘤的发展与血VEGF和VEGF/ES比值的变化有关。     

荷人鼻咽癌裸鼠全血GSH－PX和CAT活性的检测

用ＢＡＬＢ／ｃ裸小鼠（ｎｕｄｅｍｉｃｅ，ＮＭ）复制鼻咽癌（ｎａｓｏｐｈａｒｙｎｇｅａｌｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＮＰＣ）模型，检测不同病期荷人ＮＰＣＮＭ全血谷胱甘肽过氧化物酶（ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ，ＧＳＨ－ＰＸ）和过氧化氢酶（ｃａｔａｌａｓｅ，ＣＡＴ）活性，结果发现早期荷瘤鼠全血ＧＳＨ－ＰＸ活性明显高于正常裸鼠（Ｐ＜０．０１），然后随着病情发展有所下降，但中或晚期荷瘤鼠全血ＧＳＨ－ＰＸ活性仍高于正常水平（Ｐ＜０．０１）．而荷瘤鼠在潜伏、早和中期全血ＣＡＴ活性与正常裸鼠比较未见明显差异（Ｐ＞０．０５），仅在晚期荷瘤鼠全血ＣＡＴ活性明显低于正常裸鼠（Ｐ＜０．０１）．结果提示ＧＳＨ－ＰＸ和ＣＡＴ活性的改变与ＮＰＣ的发生和发展有关。     

中华眼镜蛇毒对荷人鼻咽癌裸鼠血过氧化氢酶和GSH-PX活性的影响

目的:探讨中华眼镜蛇毒(NNAV)对荷人鼻咽癌(NPC)裸鼠血中过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性的影响。方法:采用比色法检测经腹腔注射低、中或高浓度NNAV(1mg／L、5mg／L或10mg／L)的荷人NPC裸鼠血中CAT和GSH-PX活性。结果:荷人NPC裸鼠组血中CAT活性(16450U/L)低于正常裸鼠组(20680U/L)(P＜0.05),而荷瘤裸鼠组血中GSH-PX活性(27670U/L)与正常裸鼠组(28790U/L)相比P＞0.05。低、中和高浓度NNAV治疗后的荷瘤鼠组血中CAT活性(20570U/L、23090U/L、21280U/L)均高于荷瘤鼠组(16450U/L)(P＜0.05),并接近正常水平(20680U/L)(P＞0.05)。同时低、中和高浓度用药组血中GSH-PX活性均不同程度地高于荷瘤鼠组(27670U/L)(P＜0.05),其中高浓度组(37810U/L)明显高于低或中浓度组(29940U/L、30610U/L)(P＜0.05),其血中GSH-PX活性明显高于正常裸鼠组(28790U/L)(P＜0.05)。结论:NNAV的抑瘤作用可能与其提高荷瘤鼠血中CAT和GSH-PX活性有关。     

荷人鼻咽癌裸鼠血浆MDA,cAMP／cGMP水平及PSP的影响

本实验利用ＢＡＬＢ／Ｃ裸小鼠，复制荷人鼻咽癌裸鼠模型，检测荷瘤鼠血浆丙二醛，ｃＡＭＰ，ｃＧＭＰ和ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ比值，观察云芝糖肽对荷人ＮＰＣ裸鼠的抑瘤作用及对荷瘤鼠血浆ＭＤＡ和ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ等的影响。结果发现荷瘤鼠血浆ＭＤＡ升高，ｃＡＭＰ，ｃＧＭＰ降低，ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ比值升高，高你低浓度ＰＳＰ对荷人ＮＰＣ裸鼠均有明显抗癌作用（Ｐ＜０．０１），抑瘤率５９．５８－９５．５３％；并可降低荷瘤     

裸鼠荷人鼻咽癌细胞株后免疫状态的动态观察

本实验选用4～6周龄NC系裸鼠,原代用双侧颈背部皮下接种CNE-2细胞株,鼠间传代用套针双侧接种上代的新鲜瘤块,共传8代,成功率100%。动态观测裸鼠荷瘤后免疫状态变化的结果如下:(1)净体重显著减轻;(2)脾系数增大,瘤重增加,两者间高度正相关(r=0.8395);(3)脾NK活性在第5天时轻度升高,10天时开始下降,15天后显著下降;NK活性与瘤重及脾系数均呈高度负相关(r_1=-0.7132,r_2=-0.8237);(4)第5天时,脾NK细胞体外对人干扰素反应性良好,10天时仍有一定的反应性,15天后失去反应性;(5)荷瘤裸鼠牌细胞自然转化率高于对照组,而对ConA刺激的反应性低于对照组;(6)“癌克星”通过降低血清MDA、提高NK活性及增加瘤组织中单核细胞浸润而起抑瘤生长的作用。揭示在T细胞缺陷的裸鼠,其脾NK细胞是抗移植瘤生长的重要免疫活性细胞。     

荷人鼻咽癌裸鼠全血GSH—PX和CAT活性的检测

用ＢＡＬＢ／ｃ裸小鼠复制鼻咽癌模型，检测不同病期荷人ＮＰＣＮＭ全血谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶活性，结果发现早期荷瘤鼠全血ＧＳＨ－ＰＸ活性明显高于正常裸鼠，然后随着病情发展有所下降，但中或晚期荷瘤鼠全血ＧＳＨ－ＰＸ活性仍高于正常水平。     

外周血中血管内皮生长因子、内皮抑素水平与流产发病的关系

目的通过检测外周血中血管内皮生长因子（vascular endotrelial growth factor,VEGF）、内皮抑素（endostatin,ES）浓度水平,探讨与先兆流产、难免流产发病的关系。方法（1）取90例孕妇外周血,其中正常妊娠要求流产组30例;先兆流产组30例;难免流产组30例。（2）清宫或治疗前采集前臂肘静脉血3ml,离心取血清于-70℃保存待测。（3）采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中血管内皮生长因子、内皮抑素的浓度水平。结果（1）血清VEGF浓度先兆流产组为（153.7±48.3）pg/ml,明显高于正常妊娠要求流产组的（39.7±22.8）pg/ml和难免流产组的（86.3±27.5）pg/ml,差异均有显著性（P〈0.01,P〈0.05）。（2）血清ES浓度先兆流产组为（46.3±26.4）ng/ml,明显高于正常妊娠要求流产组的（10.8±4.5）ng/ml和难免流产组的（23.4±10.7）ng/ml,差异均有显著性（P〈0.01,P〈0.05）。（3）在先兆流产组、难免流产组和正常对照组中,血管内皮生长因子与内皮抑素之间存在关联关系,呈显著正相关（r=0.560P〈0.05;r=0.563P〈0.05;r=0.572P〈0.05）。结论VEGF、ES水平变化反应了不良妊娠的不同结局,两者共同参与了先兆流产及难免流产的发生和发展。     

荷人鼻咽癌裸鼠血清丙二醛,自然杀伤细胞活性以及中药“癌…

本实验用ＢＡＬＢ／ｃ裸小鼠复制人ＮＰＣ模型，检测荷人ＮＰＣ裸鼠血清ＭＤＡ和脾ＮＫ活性，以探讨瘤宿主ＮＫ活性改变的原因和可能机理，观察中药“癌克星”制剂对ＮＰＣ的抑瘤作用及对ＭＤＡ含量和脾ＮＫ活性等的影响；以探讨其抑瘤机理。结果发现荷人ＮＰＣ裸鼠血清ＭＤＡ含量（３７．９２±５．３６ｎｍｏｌ／ｍｌ）明显高于正常裸鼠（１３．９０±１．６３ｎｍｏｌ／ｍｌ）（Ｐ＜０．０１），而脾ＮＫ活性（４０．９３±２．３     

抗血管内皮生长因子抑制裸鼠异位子宫内膜生长

目的构建子宫内膜异位种植裸鼠模型,在此基础上研究抗血管内皮生长因子(VEGF)抗体在治疗中的作用及机制。方法将人子宫内膜组织种植到裸鼠体内,抗VEGF抗体作用于种植灶,进行分组对照研究。用TUNEL标记法检测细胞凋亡、PCNA检测细胞增殖和微血管密度(MVD)。结果实验组细胞凋亡强度明显高于对照组,细胞增殖强度在各组间无明显差异。实验组人源性MVD和鼠源性MVD都明显低于对照组(P<0.05)。结论抗VEGF抗体可能是通过促进子宫内膜细胞和血管内皮细胞的凋亡、抑制血管生成,继而抑制内膜异位种植生长,而对细胞增殖无明显抑制作用。     

重组人内皮抑素腺病毒抗肿瘤实验研究

目的肿瘤生长具有血管依赖性。内皮抑素为胶原X羧基末端裂解片段,是重要的内源性血管抑制因子。实验中利用重组人内皮抑素腺病毒(recombinanthumanendostatinadenorirus,Ad-hEndo)在肿瘤局部给药以探索其抗血管基因治疗的可行性。方法以Ad-hEndo感染体外培养肿瘤细胞,观察重组蛋白表达及其对培养的血管内皮细胞的抑制效应;在裸鼠A549肺癌模型中瘤内注射重组病毒,观察肿瘤抑制效应、剂量依从效应和毒副反应。结果不同感染复数的Ad-hEndo感染肿瘤细胞均表达重组内皮抑素蛋白,并能抑制血管内皮细胞的生长。动物实验中Ad-hEndo治疗组肿瘤体积及肺转移结节数明显低于对照组,且转移数与治疗剂量负相关。结论以腺病毒为载体的肿瘤局部血管基因治疗能抑制肿瘤新生血管形成进而有效抑制肿瘤生长和转移,其效应具有剂量依从性。     

荷人鼻咽癌裸鼠血清丙二醛、自然杀伤细胞活性以及中药＂癌克星＂的影响

本实验用ＢＡＬＢ／ｃ裸小鼠复制人ＮＰＣ模型，检测荷人ＮＰＣ裸鼠血清ＭＤＡ和脾ＮＫ活性，以探讨瘤宿主ＮＫ活性改变的原因和可能机理，观察中药“癌克星”制剂对ＮＰＣ的抑瘤作用及对ＭＤＡ含量和脾ＮＫ活性等的影响；以探讨其抑瘤机理。结果发现荷人ＮＰＣ裸鼠血清ＭＤＡ含量（３７．９２±５．３６ｎｍｏｌ／ｍｌ）明显高于正常裸鼠（１３．９０±１．６３ｎｍｏｌ／ｍｌ）（Ｐ＜０．０１），而脾ＮＫ活性（４０．９３±２．３９）则明显低于正常裸鼠（６７．０９±６．２８）（Ｐ＜０．０１）。中药“癌克星”制剂对荷瘤鼠具明显抑瘤作用，抑瘤率２５．８５～９９．９９％；并可降低荷瘤鼠血清ＭＤＡ含量，部分提高ＮＫ活性，增加瘤组织单核细胞的浸润。本实验提示，ＦＲ可能作为免疫抑制因子之一，使ＮＫ活性下降。“癌克星”对ＮＰＣ具明显抑癌效应，其抑瘤作用可能是通过降低瘤宿主体内ＦＲ，提高机体免疫功能而实现。     

大豆异黄酮诱导裸鼠人胃癌移植瘤凋亡（英文）

目的：探讨大豆异黄酮诱导人胃癌原代细胞裸鼠移植瘤凋亡的机制。方法： 建立人胃癌原代细胞裸鼠移植瘤模型并测定移植瘤的生长曲线；25只BALB/C裸鼠接种胃癌原代细胞悬液生成移植瘤后，不同剂量的大豆异黄酮进行瘤旁注射，透射电镜和TUNEL法检测肿瘤组织细胞凋亡情况，免疫组化法和RT-PCR法检测肿瘤组织的凋亡相关基因bcl-2和bax的表达情况。结果： 大豆异黄酮对胃癌原代细胞移植瘤有明显的抑制作用，在剂量为0.5 mg/kg、1 mg/kg、1.5 mg/kg时，其抑制率分别为10.6%、29.7%和39.1%；透射电镜发现大豆异黄酮导致移植瘤内大量细胞发生调亡；TUNEL染色法发现大豆异黄酮注射组瘤细胞的凋亡指数是随剂量递增（28.7%±1.1%、33.4%±1.4%和37.1%±1.0%）。免疫组织化学法发现大豆异黄酮注射组的Bcl-2蛋白阳性细胞率随剂量递减（11.8%±0.9%、5.7%±0.8%和4.0%±0.8%），而Bax蛋白阳性细胞率随剂量递增（20.0％±±1.2%、24.7％±0.9%和29.3%±1.6%）；RT-PCR法发现,大豆异黄酮注射组的〖STBX〗bcl-2〖STBZ〗 mRNA条带强度随剂量的增大而递减，并明显低于对照组P<0.05）；而bax mRNA条带强度递增，并明显低于对照组（P<0.05），而2对照组bcl-2，bax之间差异无统计学意义（P>0.05）。结论： 大豆异黄酮对胃癌原代细胞移植瘤有明显的抑制作用，通过下调bcl-2的表达和上调bax的表达而诱导胃癌裸鼠移植瘤细胞发生凋亡，是其抗胃癌作用的机制之一。     

Survivin反义寡核苷酸抑制肝癌裸鼠皮下移植瘤生长的作用

目的：研究survivin反义寡核苷酸（ASODN）对人肝癌耐药细胞株移植裸鼠皮下后，移植瘤生长的抑制作用。方法:将人肝癌耐药细胞系SMMC-7721/ADM裸鼠移植瘤模型，随机分为：空白对照组、单纯脂质体转染组、正义链转染组、200 μg/L ASODN组、400 μg/L ASODN组和600 μg/L ASODN组，观察裸鼠移植瘤体积，计算抑瘤率。免疫组化检测Survivin蛋白的表达。结果:A组、B组和C组移植瘤随时间增长而增大，但3组间无显著差异（P>0.05）。D组、E组和F组注射ASODN后，裸小鼠移植瘤的体积随着注射ASODN时间的延长和ASODN浓度的增加，移植瘤生长越来越小，并呈时间-剂量-效应依赖性。实险第20 d D组、E组和F组的肿瘤抑制明显大于A组、B组和C组（P<0.05）。HE染色见对照组移植瘤细胞密集成群，核大深染，而ASODN组见肿瘤细胞少，癌细胞皱缩变圆，胞核固缩深染。免疫组化见对照组肝癌细胞浆Survivin蛋白表达较强，而ASODN组Survivin蛋白表达较弱。结论:Survivin反义寡核苷酸能够抑制裸鼠皮下移植瘤的生长。     

125I 粒子植入治疗荷人乳腺癌裸鼠移植瘤的实验研究

 目的 综合评价 ¹²⁵ I 粒子植入治疗荷人乳腺癌裸鼠移植瘤的疗效，为临床应用提供实验依据。 方法 在 3 ~ 4 周龄雌性 Nc-nu/nu 裸鼠右侧乳房脂肪垫部位注射人乳腺癌 MCF-7 细胞悬液 0.1 ml（5 × 10⁶ 个/ml），建立荷人乳腺癌动物模型。18 只荷瘤裸鼠分为治疗组（肿瘤中心部位植入放射性活度为 29.6 MBq 的 ¹²⁵I 粒子 1 枚）和对照组（不进行任何干预），每组 9 只。饲养 21 d，观察裸鼠肿瘤体积的变化，计算抑瘤率。第 21 天以脱颈椎法处死 2 组裸鼠，处死前检测外周血白细胞计数；处死后取肿瘤、肝脏、心脏、右侧肾脏组织进行组织形态学观察，以免疫组织化学方法检测肿瘤组织增殖细胞核抗原（PCNA）及凋亡抑制基因 Bcl-2 的表达，透射电镜行肿瘤组织超微结构观察。 结果 治疗组肿瘤体积治疗前后分别为（118 ± 14）mm³ 和（21 ± 3）mm³（t = 20.32，P = 0.00）；对照组分别为（118 ± 14）mm³ 和（339 ± 32）mm³（t = 18.98，P = 0.00），治疗组与对照组比较，抑瘤率为 93.8% ± 17.8%。2 组治疗前后比较外周血白细胞计数差异均无统计学意义。光镜观察治疗组裸鼠肝脏、心脏、右侧肾脏组织均未见出现水肿、充血等明显放射损伤改变，¹²⁵ I 粒子植入部位周围可见纤维组织增生，瘤细胞中心区出现大小不等的坏死区。肿瘤组织 PCNA 及 Bcl-2 表达阳性率治疗组分别为 35.42% ± 3.91% 和 11.90% ± 0.75%，对照组分别为 73.39% ± 3.55% 和 20.09% ± 1.69%，治疗组 PCNA 及 Bcl-2 表达阳性率均明显低于对照组（t = 21.55，P = 0.00；t = 13.26，P = 0.00）。透射电镜观察肿瘤组织内见凋亡细胞，并有大量胶原纤维增生和凋亡小体形成。 结论 ¹²⁵ I 粒子植入对荷人乳腺癌裸鼠移植瘤的增殖有明显抑制作用，能够有效地缩小肿瘤体积，有望作为乳腺癌保乳治疗的综合性手段之一应用于临床     

~(131)I标记抗人结肠癌单克隆抗体MC_3在荷瘤裸鼠体内分布及肿瘤放射免疫显像

抗人结肠癌单克隆抗体(McAb)MC_3用~(131)Ⅰ标记后在裸鼠人肠癌模型上进行肿瘤定位和放射免疫显像研究。结果显示:体外标记抗体特异性结合率为37.5%,裸鼠体内在48～120h的ECT照相可见在肿瘤部位均有放射性的特异性浓聚,其摄取量随时间延长逐渐增加,肿瘤显影清晰,显像的合适时间为96～120h。而给予非特异性的~(131)Ⅰ-NMIgG后,肿瘤部位未见放射性浓聚,而呈全身均匀性分布。120h肿瘤组织与肝脏及正常肠组织的比值分别为3.61和9.81,肿瘤定位指数为4.26。病理组织学检查显示注射~(131)Ⅰ-MC_3裸鼠肿瘤呈大片坏死,仅局部肿瘤边缘尚存少数完整的肿瘤组织。提示McAbMC_3用于肠癌的诊断和导向治疗可能有良好的前景。     

CD3AK细胞在裸鼠体内抗转移作用的研究

目的研究肿瘤引流淋巴结的淋巴细胞在体外用ＣＤ３单克隆抗体激活（ＣＤ３ＡＫ）后在体内是否仍然具有抗肿瘤作用。方法取卵巢癌病人盆腔引流淋巴结淋巴细胞,在体外用ＣＤ３单抗激活后输注载高转移人卵巢癌裸鼠体内实验性治疗。实验分４组：顺铂组,ＣＤ３ＡＫ组,联合治疗组,对照组。治疗于接种移植瘤后１０天开始,历时８０天。结果观察到ＣＤ３ＡＫ组１只裸鼠移植瘤消退,２／７只出现转移灶,与对照组８／１０只裸鼠出现转移灶比较差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。ＣＤ３ＡＫ组肿瘤体积（０．５７８８±０．２５４９）与对照组（１．５６８５±０．２８３０）比较差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。ＣＤ３ＡＫ组抑瘤率达６３．１％。ＣＤ３ＡＫ组裸鼠的血清孕酮含量（３．３８４３±０．５３１４）明显低于对照组（６．３４８０±０．７６１５）,两组比较差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。ＣＤ３ＡＫ组淋巴结窦性组织细胞增生（５９／６９枚）明显多于对照组（５５／９４枚）,两组比较差异有非常显著性（Ｐ＜０．０１）。结论ＣＤ３ＡＫ细胞在裸鼠体内具有抗肿瘤生长和抗转移作用,同时有提高宿主免疫功能的作用。     

白藜芦醇诱导人胃癌原代细胞裸鼠移植瘤凋亡的研究

目的：探讨白藜芦醇诱导人胃癌原代细胞裸鼠移植瘤凋亡的机制。 方法： 建立人胃癌原代细胞裸鼠移植瘤模型，采用瘤旁注射的方法，用不同剂量的白藜芦醇进行治疗，并设对照，用透射电镜和TUNEL法检测肿瘤组织细胞凋亡情况，免疫组织化学法和RT-PCR法检测肿瘤组织的凋亡相关基因bcl-2和bax的表达情况。 结果： 白藜芦醇对胃癌原代细胞移植瘤有明显的抑制作用； 透射电镜和TUNEL法发现白藜芦醇导致移植瘤内大量细胞发生凋亡；免疫组织化学法发现白藜芦醇注射组的Bcl-2蛋白阳性细胞率（3.92％±0.85％、5.70％±0.84％和11.86％±0.97％）明显低于两个对照组（P<0.05），两个对照组（27.56％±1.40％和29.48％±0.51％）之间无显著差异；Bax蛋白阳性细胞率（52.30％±1.54％、45.72％±0.88％和40.02％±1.20％）明显高于两个对照组（P<0.05），两个对照组（20.88％±0.91％和19.34％±0.35％）之间无显著差异； RT-PCR法发现白藜芦醇注射组的bcl-2 mRNA条带强度随剂量的增大而递减，并明显低于两个对照组（P<0.05），两个对照组之间无显著差异（P>0.05）；bax mRNA条带强度递增，并明显高于两个对照组（P<0.05），两个对照组之间无显著差异（P>0.05）。 结论： 白藜芦醇对胃癌原代细胞移植瘤有明显的抑制作用，通过下调bcl-2 的表达和上调bax 的表达而诱导胃癌裸鼠移植瘤细胞发生凋亡，是其抗胃癌作用的机制之一。