胚胎停育患者蜕膜和绒毛组织中MMP-9、TIMP-1的表达及意义

目的:探讨胚胎停育患者蜕膜和绒毛组织中MMP-9、TIMP-1的表达情况,分析其与胚胎停育的关系。方法:随机选择早孕胚胎停育患者37例为Ⅰ组(其中Ⅰ1组为合并感染的胚胎停育22例,Ⅰ2组为未合并感染的胚胎停育15例),Ⅱ组正常早孕患者25例作为对照组。用免疫组化(sp)法测定蜕膜及绒毛组织中MMP-9、TIMP-1的表达情况。结果:胚胎停育患者蜕膜组织中MMP-9表达水平高于对照组(P<0·05),TIMP-1的水平低于对照组(P<0·05);而MMP-9及TIMP-1的水平在各组之间均无差异(P>0·05)。结论:基质金属蛋白酶(MMP-9)在感染引起的胚胎停育中起关键性作用,MMP-9/TIMP-1的平衡失调可能是导致胚胎停育的主要原因之一。     

MMP-9/TIMP-1在稽留流产中的表达及其相关性研究

目的:研究基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)在稽留流产蜕膜组织中的表达,探讨MMP-9/TIMP-1失衡与稽留流产的关系。方法:选取早孕和稽留流产妇女的蜕膜组织各36例和32例,采用免疫组化法检测MMP-9和TIMP-1的蛋白表达率。结果:MMP-9在早孕组和稽留流产组的蛋白表达率分别为22.2%和25.0%,两组比较差异无统计学意义(P>0.01);TIMP-1在稽留流产组的表达率为100.0%,显著高于早孕组(22.0%)(P<0.01)。结论:MMP-9/TIMP-1的动态失衡参与了稽留流产的发生和发展。     

药物流产后子宫出血与蜕膜MMP-3、MMP-9及TIMP-1表达的相关性

目的:探讨米非司酮药流产后子宫出血与蜕膜基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其抑制物-1(TIMP-1)表达含量变化的关系。方法:选取要求终止妊娠的、停经8周之内的早孕妇女,自愿选择药物流产或人工流产两种方法之一,分为人工流产组、药流不全组、药流完全组各20例。收集3组蜕膜组织采用10%甲醛固定,石蜡包埋,应用免疫组织化学方法检测MMP-3、MMP-9、TIMP-1的表达,图象分析仪定量分析。结果:MMP-3、MMP-9和TIMP-1主要分布于子宫蜕膜上皮细胞、腺上皮及基质细胞的细胞浆内。药流不全出血区MMP-3、MMP-9的表达强度显著增强(P0.01);TIMP-1的表达强度显著减弱(P0.01)。结论:米非司酮作用于蜕膜上皮细胞、腺上皮细胞及基质细胞使其表达MMP-3、MMP-9增多,TIMP-1减少,且两者比例失调,导致细胞外基质退化,血管脆性增加,发生出血。     

多囊卵巢综合征妇女促排卵后着床窗口期子宫内膜MMP-9和TIMP-1的表达

目的通过前瞻性的实验，探讨多囊卵巢综合征（PCOS）妇女促排卵治疗后MMP-9、TIMP-1在着床窗口期子宫内膜的表达。方法收集8例正常妇女和13例PCOS妇女促排卵后着床窗口期子宫内膜，用免疫组化的方法检测子宫内膜基质金属蛋白酶MMP-9、TIMP-1的表达。对比在MMP-9、TIMP-1的表达上是否存在差别。结果MMP-9和TIMP-1在着床窗口期主要表达于子宫内膜腺上皮细胞和间质细胞的胞浆中，腺上皮呈中-强阳性表达，间质为中等强度表达，血管内皮细胞中呈阴性一弱阳性表达。PCOS病人促排卵治疗有排卵的着床期子宫内膜MMP-9与TIMP-1的表达与正常对照组比较，差异无显著性（P〉0．05）。结论基质金属蛋白酶（MMPs）及其抑制物（TIMPs）的表达可能与PCOS患者促排卵治疗后低妊娠率有关。     

早期流产者绒毛和蜕膜组织中MMP-9、TIMP-3的表达及其意义

目的:了解MMP-9和TIMP-3在早孕、先兆流产和药物流产绒毛及蜕膜组织中的定位及表达水平,探讨其水平及平衡在维持正常妊娠中的作用。方法:选取90例早孕妇女作为研究对象,其中行负压吸宫术者30例为对照组,行药物流产术者30例为药物流产组;自愿行吸宫术的先兆流产妇女30例为先兆流产组,均留取绒毛和蜕膜组织,应用免疫组织化学技术和计算机图像分析系统检测MMP-9和TIMP-3在不同早孕流产绒毛和蜕膜组织中的表达。结果:MMP-9和TIMP-3在3组绒毛的合体滋养细胞、细胞滋养细胞、毛细血管内皮细胞的胞浆,蜕膜的蜕膜细胞、腺上皮细胞和血管内皮细胞的胞浆呈不同程度的阳性染色。通过定量分析,药物流产组绒毛和蜕膜MMP-9的表达高于先兆流产组,先兆流产组高于对照组(P<0.05);3组绒毛和蜕膜TIMP-3的表达差异无统计学意义(P>0.05)。绒毛和蜕膜中MMP-9/TIMP-3药物流产组高于先兆流产组,先兆流产组高于对照组(P<0.05)。结论:MMP-9表达水平的升高在流产发生过程中具有重要作用,MMP-9和TIMP-3的平衡对维持正常妊娠起重要作用。     

药物流产后子宫异常出血的发病机理研究

目的:探讨米非司酮药物流产后子宫出血与基质金属蛋白酶(MMP)-3、9,MMP抑制物(TIMP)-1及子宫自然杀伤(uNK)细胞的相关性。方法:选取自愿终止妊娠、停经≤8周的早孕妇女,自愿选择人工流产方法并相应处理后,根据情况将其分为负压吸宫组、药物流产不全组、药物流产完全组各20例。收集3组蜕膜组织并应用免疫组织化学方法检测MMP-3、MMP-9、TIMP-1、CD56的表达,图象分析仪半定量分析。结果:较负压吸宫组药物流产不全组出血区的MMP-3、MMP-9表达显著增强(P<0.01);TIMP-1的表达,显著减弱(P<0.01);uNK细胞的数量显著增多(P<0.01)。结论:药物流产不全者子宫内膜出血区的蜕膜细胞MMP-3、MMP-9增多,TIMP-1减少,两者比例失调导致细胞外基质退化,血管脆性增加,发生出血;另外uNK细胞数量异常增多,导致异常血管生成,孕囊与蜕膜剥离不全而引发出血。     

基质金属蛋白酶在稽留流产发生中的作用和调控机制研究

目的研究基质金属蛋白酶在稽留流产患者绒毛组织中的表达变化,探讨其在稽留流产中的作用及其调控机制。方法选取2015年11月至2016年5月期间就诊于苏州大学附属第一医院计划生育门诊和苏州市立医院北区妇产科的稽留流产患者30例作为实验组,同期健康早孕流产患者30例作为对照组。采用ELISA法检测血浆TGF-β1水平,定量PCR(RT-PCR)检测患者绒毛组织中NF-κB、TGF-β1、TIMP-1和MMP-9的mRNA表达情况,采用蛋白印迹法(Western Blot)检测分析NF-κB、TGF-β1、TIMP-1和MMP-9的蛋白水平。结果实验组血浆中TGF-β1的平均水平低于对照组(P0.05);实验组绒毛组织中MMP-9的mRNA表达量高于对照组,而NF-κB1、TGF-β1和TIMP-1mRNA表达量均低于对照组(P0.05);实验组绒毛组织中MMP-9的蛋白表达水平高于对照组,NF-κB p50、TGF-β1和TIMP-1的蛋白表达水平均低于对照组(P0.05)。结论 NF-κB表达水平的降低导致TGF-β1水平降低,从而影响MMP-9/TIMP-1的平衡,使ECM过度降解,导致胚胎植入失败及胎盘形成障碍,最终发生胚胎停育。     

米非司酮药物流产后子宫出血的相关性研究

[目的]探讨米非司酮药流产后子宫出血与蜕膜细胞凋亡、基质金属蛋白酶-3及其抑制物-1及子宫内膜自然杀伤(uNK)细胞等多种因素的相关性。[方法]选取自愿终止妊娠的停经8周之内的早孕妇女,自愿选择药物流产或人工流产两种方法,分为人工流产组、药流不全组、药流完全组各20例。收集3组蜕膜组织进行福尔马林固定,石蜡包埋,应用免疫组织化学方法检测FasL、MMP-3、TIMP-1、CD56的表达,图象分析仪定量分析。[结果]药流不全出血区FasL的表达显著减弱(P﹤0.01);MMP-3的表达强度显著增强(P﹤0.01);而TIMP-1的表达强度显著减弱(P﹤0.01);药流不全出血区uNK细胞的数量显著增多(P﹤0.01)。[结论]药流不完全出血区的蜕膜细胞FasL表达减弱,未凋亡的蜕膜组织残留于子宫内,导致流产不全,引发出血;MMP-9增多,TIMP-1减少,且两者比例失调,导致细胞外基质退化,血管脆性增加,产生出血;另外uNK细胞数量异常增多,导致异常血管生成,孕囊与蜕膜剥离不全,从而引起出血。     

正常妊娠不同孕期胎盘组织中基质金属蛋白酶-9及其组织抑制物-1的表达

目的 :探讨基质金属蛋白酶 (MMP) - 9及其组织蛋白酶抑制物 (TL MP) - 1在正常妊娠不同孕期胎盘组织中的表达情况及其在滋养层细胞侵蚀及孕卵着床等正常妊娠过程中的作用。方法 :采用免疫组织化学 SP法检测 4 5例正常孕妇 (早孕 10例、中孕 15例、晚孕 2 0例 )胎盘组织中 MMP- 9/ TIMP- 1表达程度。结果 :MMP- 9在早、中孕组的滋养细胞、基质细胞、蜕膜组织中呈强阳性表达 ,晚孕组呈阳性表达 ,与早、中孕期组相比表达明显减弱 ,有极显著性差异 (P<0 .0 1) ;TIMP- 1在早、中孕组呈阳性表达 ,晚孕组呈强阳性表达 ,与早、中孕组相比表达明显增强 ,有极显著性差异 (P<0 .0 1)。结论 :MMP-9/ TIMP- 1可能在胎盘的形成、子宫 -胎儿血管系统的建立等过程中发挥重要作用。     

多囊卵巢综合征子宫内膜基质金属蛋白酶-9、2的研究

目的探讨基质金属蛋白酶-9、2(MMP-9、MMP-2)在多囊卵巢综合征(PCOS)不孕患者子宫内膜中的表达特点。方法采用免疫组化法测定实验组PCOS不孕患者和正常对照组月经中期子宫内膜MMP-9、MMP-2的表达,同时测定血清E2、P、T、FSH、LH和PRL水平。结果PCOS组子宫内膜的MMP-9、MMP-2阳性表达分别为239.70±44.12和223.35±35.32,明显低于正常对照组的317.13±46.26和298.08±39.21(P(0.01);MMP-9、MMP-2在PCOS患者子宫内膜的表达与血清E2、P、T、FSH、LH和PRL水平无明显相关性。结论PCOS不孕者子宫内膜存在着MMP-9、MMP-2表达低的现象。     

基质金属蛋白酶及其抑制物在月经周期中表达的分析

目的观察子宫内膜组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和组织金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)在正常月经周期中不同时期的表达,探讨其意义。方法月经正常者37例,子宫内膜组织分为增殖期、分泌早期、分泌中期,所有标本采用免疫组织化学法及RT-PCR技术检测MMP-2、MMP-9和TIMP-1的表达,并采用病理图像分析技术进行半定量分析。结果 MMP-9、MMP-2及TIMP-1在各组子宫内膜中均呈阳性表达,在腺上皮细胞和间质细胞胞浆均可见棕黄色颗粒沉着,以腺上皮细胞表达为著。分泌中期MMP-9、MMP-2及TIMP-1在子宫内膜腺上皮中的表达明显高于增殖期和分泌早期(P0.05);分泌早期MMP-9、MMP-2及TIMP-1在子宫内膜腺上皮中的表达明显高于增殖期(P0.05)。子宫内膜间质中的表达无明显差异(P0.05)。结论人类月经周期中子宫内膜腺上皮中MMP-9、MMP-2及TIMP-1的表达呈周期性变化,其表达与子宫内膜功能相关。     

正常妊娠不同孕期胎盘组织中基质金属蛋白酶-9及其组织抑制物-1的表达

目的:探讨基质金属蛋白酶(MMP)-9及其组织蛋白酶抑制物(TLMP)-1在正常妊娠不同孕期胎盘组织中的表达情况及其在滋养层细胞侵蚀及孕卵着床等正常妊娠过程中的作用.方法:采用免疫组织化学SP法检测45例正常孕妇(早孕10例、中孕15例、晚孕20例)胎盘组织中MMP-9/TIMP-1表达程度.结果:MMP-9在早、中孕组的滋养细胞、基质细胞、蜕膜组织中呈强阳性表达,晚孕组呈阳性表达,与早、中孕期组相比表达明显减弱,有极显著性差异(P《0.01);TIMP-1在早、中孕组呈阳性表达,晚孕组呈强阳性表达,与早、中孕组相比表达明显增强,有极显著性差异(P《0.01).结论:MMP-9/TIMP-1可能在胎盘的形成、子宫-胎儿血管系统的建立等过程中发挥重要作用.     

基质金属蛋白酶-9及基质金属蛋白酶组织抑制物-1与卵巢上皮性癌血管生成的关系

目的:探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及基质金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)在卵巢上皮性癌血管生成中的作用。方法:采用免疫组织化学SP法检测45例卵巢上皮性癌组织中MMP-9和TIMP-1的表达,并检测其中微血管密度(MVD,CD34标记)。结果:卵巢癌组织和卵巢良性肿瘤中MMP-9阳性表达率明显高于正常卵巢组织(P<0.01),而TIMP-1未见升高(P>0.05),并且TIMP-1在卵巢癌组织中的阳性表达率显著低于MMP-9(P<0.01)。MMP-9在卵巢癌组织中表达与MVD显著正相关(r=0.286,P<0.05),而TIMP-1与MVD无相关性(r=0.194,P>0.05)。卵巢癌中MMP-9表达高于TIMP-1者,其MVD显著高于MMP-9表达低于TIMP-1者(P<0.05)。结论:MMP-9和TIMP-1表达失衡可能在卵巢上皮性癌血管生成中起重要作用,MMP-9表达增强而TIMP-1表达降低,其血管生成能力可能显著增强,但并非唯一决定因素。检测卵巢上皮性癌中MMP-9和TIMP-1表达对进一步了解卵巢上皮性癌局部血管生成情况有一定应用价值。     

MMP-2及TIMP-1、TIMP-2在自然流产绒毛和蜕膜组织中的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）及金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）和金属蛋白酶组织抑制剂-2（TIMP-2）在早孕自然流产绒毛和蜕膜组织中的表达及意义。方法采用S-P免疫组织化学染色的方法,对31例自然流产者（实验组）及36例人工流产者（对照组）绒毛及蜕膜组织中MMP-2和TIMP-2的表达进行分析;采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术对绒毛组织中MMP-2及TIMP-1的mRNA表达量进行分析。结果无论是绒毛组织还是蜕膜组织中MMP-2的表达两组之间均无统计学差异;但实验组两种组织中的TIMP-2强阳性（Ⅲ级）表达率均显著低于对照组（P〈0.01）;实验组TIMP-1 mRNA的表达量显著低于对照组（P〈0.05）。结论自然流产绒毛和蜕膜组织中MMP-2的正常表达及TIMP-1、TIMP-2的低表达导致MMP-2与TIMP-1及TIMP-2的比值升高,该比值失调可能与自然流产发生有关。     

米非司酮药物流产后子宫异常出血与内膜MMP-9、TIMP-1的关系研究

目的：研究米非司酮药物流产后子宫内膜基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和基质金属蛋白酶特异性组织抑制物-1（TIMP-1）的表达变化,探讨药物流产后子宫异常出血的机理。方法：取药物流产（简称药流）后和吸宫术后子宫出血〉14天妇女各20例以及药物流产后子宫出血≤14天20例妇女的子宫内膜,应用免疫组化二步法测定子宫内膜MMP-9和TIMP-1的表达,对3组子宫内膜MMP-9和TIMP-1表达进行组织学积分测定。结果：药流非出血组、药流出血组和吸宫出血组子宫内膜组织中MMP-9的表达依次下降（P〈0.05）,TIMP-1表达3组间无差异,3组子宫内膜中MMP-9/TIMP-1组织学积分比值分别为1.47、1.00、1.14。MMP-9/TIMP-1比值药流出血组高于其它两组（P〈0.05）,而药流出血组和吸宫出血组之间子宫内膜MMP-9/TIMP-1比值无差异。结论：子宫内膜MMP-9的下降和MMP-9/TIMP-1比值降低与人工流产术后的子宫出血有关,并非是药物流产后子宫出血所特有的内膜局部因子改变。     

MMP-9及TIMP-1在妊娠高血压综合征患者母胎界面的表达及意义

目的:研究基质金属蛋白酶(m atrix m etalloprote inases,MMP)-9及其组织抑制物(tissue inh ib itor of m etallo-prote inases,TIMP)-1在妊娠高血压综合征(妊高征)患者胎盘组织的表达情况及其与妊高征发病的关系。方法:采用免疫组织化学SP法检测48例妊高征(轻度10例、中重度38例)胎盘组织中MMP-9及TIMP-1的表达情况;同时做HE染色观察妊高征时胎盘的病理改变。结果:MMP-9、TIMP-1主要表达于滋养细胞、绒毛间质血管壁及蜕膜组织中。轻度妊高征MMP-9呈阳性表达,TIMP-1蛋白呈强阳性表达;中、重度妊高征MMP-9和TIMP-1蛋白均呈弱阳性表达,分别与正常妊娠和轻度妊高征相比表达均减弱,差异有极显著性(P<0.01)。中重度妊高征时胎盘组织绒毛数及间质血管数减少,出现典型的纤维素样坏死。结论:母胎界面MMP-9/TIMP-1表达异常与妊高征发病及胎盘病理改变的发生发展有关。     

线粒体融合蛋白2在胚胎停止发育者绒毛组织中的表达

目的:测定线粒体融合蛋白2(Mitofusin 2,Mfn2)在正常早孕妇女和不明原因胚胎停止发育患者绒毛组织中的表达差异,探讨Mfn2在胚胎发育过程中的可能作用。方法:采用HE染色观察正常早孕妇女(正常早孕组,30例)和不明原因胚胎停止发育患者(胚胎停育组,35例)绒毛组织形态;采用免疫组织化学技术(SABC法)检测Mfn2在两组妇女绒毛组织中的定位表达和表达强度;同时采用实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)技术检测两组妇女绒毛组织中Mfn2的相对表达。结果:Mfn2在正常早孕组和胚胎停育组绒毛合体滋养细胞和细胞滋养细胞中均有阳性表达,在细胞滋养细胞中表达尤为明显,而在间质细胞中无明显表达,且Mfn2阳性表达主要分布在细胞浆中。胚胎停育组的绒毛组织中Mfn2的相对表达量(0.006 8±0.003 2)显著低于正常早孕组(0.023 9±0.005 5),差异有统计学意义(P<0.01)。结论:Mfn2在不明原因胚胎停止发育患者绒毛组织中的表达水平下降,提示Mfn2可能与胚胎发育相关,绒毛滋养层细胞中Mfn2的正常表达可能对维持早期妊娠起到一定作用。     

子宫内膜异位症与卵巢癌患者IL-6、IL-8变化及MMP-9、TIMP-3的表达

目的:探讨子宫内膜异位症(endometriosis EMs)、卵巢癌腹腔液白细胞介素-6、8(Interleukin-6、8,IL-6、IL-8)水平及基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂-3(tissue inhibitor of metalloproteinase-3,TIMP-3)表达的意义。方法:采用双抗体夹心ABC-酶联免疫吸附实验(ELISA)检测EMs、卵巢癌、卵巢良性肿瘤患者血清及腹腔液和正常妇女血清中IL-6、IL-8量,采用免疫组化S-P法检测EMs、卵巢癌、卵巢良性肿瘤和正常卵巢组织中MMP-9和TIMP-3的表达。结果:EMs与卵巢癌患者血清及腹腔液中IL-6、IL-8水平明显高于卵巢良性肿瘤患者及正常妇女(P<0.01),IL-6、IL-8高水平与MMP-9组织表达率和强阳性率一致,各组TIMP-3表达无明显差异。结论:EMs与卵巢癌患者腹腔液中IL-6、IL-8异常增高是腹腔免疫内环境失衡的一种表现,可能提高MMP-9的水平与EMs的发生、发展有关,揭示内异症与卵巢癌具有共同的生物学基础。     

野生型P53诱导的蛋白磷酸酶1对卵巢癌细胞侵袭的影响

目的:探讨野生型p53诱导的蛋白磷酸酶1(Wip1)与卵巢癌细胞SKOV3侵袭力的关系,揭示Wip1对SKOV3细胞的侵袭和迁移等恶性生物学行为的影响。方法:采用划痕实验、Transwell小室法测定Wip1沉默后SKOV3细胞体外侵袭能力。实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot方法检测SKOV3细胞中基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、组织金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)、组织金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)的表达。结果:细胞迁移距离Wip1-siRNA组(30.33±3.67)短于Control组(59.33±7.69),细胞侵袭到Transwell小室滤膜下细胞数Wip1-siRNA组(17.17±1.84)低于Control组(30.17±3.43),RT-PCR和Western blot检测Wip1-siRNA组MMP-2(0.51±0.01)和MMP-9(0.40±0.03)的表达较Control组(1.00±0.00)降低(均P0.01);Wip1-siRNA组TIMP-1和TIMP-2的表达与Control组未见差异(P0.05)。结论:沉默Wip1能够抑制人卵巢癌SKOV3细胞侵袭能力,可能是通过抑制MMP-2、MMP-9的表达实现的。     

MMP-2、MMP-9及其组织抑制因子在子宫内膜异位症中的表达

目的 探讨基质金属蛋白酶-2、-9(MMP-2、MMP-9)及其组织抑制因子-1、-2(TIMP-1、TIMP-2)在子宫内膜异位症(EMs)患者血清及腹水中的表达。方法 采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测62例EMs患者血清、腹水和30例对照组血清中MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2水平。结果 MMP-2和MMP-9水平EMs组显著高于对照组,TIMP-1和TIMP-2水平EMs组显著低于对照组,随着EMs分期的增加,MMP-2和MMP-9表达呈上升趋势(P<0.05)。EMs组血清中MMP-2和MMP-9水平显著高于其腹腔液水平,TIMP-1和TIMP-2水平显著低于其腹腔液水平(P<0.05)。结论 MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2表达在子宫内膜异位症的发病过程中可能起重要的作用。