酶联免疫斑点法在涂阴结核病人快速诊断中应用

目的 评价酶联免疫斑点技术(ELISPOT)在涂阴结核病人快速诊断中的临床应用价值。方法 应用ELISPOT技术检测30例涂阳结核病人、106例涂阴结核病人和71例非结核对照者外周血单个核细胞的γ干扰素(INF-γ),同时对14例涂阳结核病人、105例涂阴结核病人和全部71例对照者实施结核菌素皮肤实验(TST),计算灵敏度和特异度。结果 涂阳和涂阴结核病组的ELISPOT灵敏度分别为96.7%和88.7%,TST灵敏度分别为78.6%和65.7%,2组ELISPOT灵敏度、TST灵敏度间差异均无统计学意义(P＞0.05);涂阳结核病组ELISPOT灵敏度与TST灵敏度间差异无统计学意义(P＞0.05);涂阴结核病组ELISPOT灵敏度高于TST灵敏度,差异有统计学意义(χ²=15.83,P＜0.001);对照组中ELISPOT特异度为84.5%,高于TST特异度的59.2%,差异有统计学意义(χ²=11.28,P=0.001);对照组接种卡介苗和未接种卡介苗者ELISPOT特异度分别为88.5%和73.3%,差异无统计学意义(P＞0.05);对照组接种卡介苗者TST特异度为38.5%,低于未接种卡介苗者的71.1%,差异有统计学意义(χ²=7.27,P=0.007)。结论 ELISPOT可作为临床实践中涂阴结核病的辅助诊断技术,有助于结核病人得到更快速的诊断和治疗。     

IGRA与TST在肺结核痰菌阳性患者家庭密切接触者感染的诊断评价

目的探讨结核分枝杆菌γ-干扰素体外释放实验(TB-IGRA)与结核菌素皮肤实验(TST)在菌阳肺结核患者家庭密切接触者结核菌感染的诊断效能。方法选择2013年1月-2015年12月医院307例痰涂阳性的新发肺结核患者的家庭密切接触者586例为研究对象,均行外周血结核菌特异性干扰素-γ(IFN-γ)水平、TST平行检测,以胸部X线检查为金标准,比较酶联免疫斑点试验(ELISPOT)和TST诊断效能。结果 586例家庭密切接触者中,经胸部X线检查确诊为活动性结核患者15例,检出率为2.56%;586例家庭密切接触者中,TST检出阳性108例,ELISPOT检出阳性140例,ELISPOT检出阳性率23.89%高于TST阳性率18.43%(P=0.022);ELISPOT、TST≥60岁检出率均高于60岁(P0.001);15例确诊活动性结核接触者中,TST检出5例,ELISPOT检出12例。ELISPOT灵敏度为80.00%高于TST 33.33%(P=0.025),两种检测方法特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值比较无统计学意义。结论 TB-IGRA具有更高的灵敏度,可用于筛查及早期诊断菌阳肺结核病人家庭密切接触者结核菌感染。     

粪便抗原检测和~(13)C呼吸试验对儿童幽门螺杆菌感染诊断价值的系统评价和Meta分析

目的应用Meta分析分别对~(13)C呼吸试验和粪便抗原检测试验诊断儿童幽门螺杆菌感染诊断价值进行研究并对其进行比较。方法检索CNKI、万方、Pub Med、EMBASE、Cochrane等数据库中相关文献。提取数据的同时进行质量评价,然后进行meta分析。结果粪便抗原诊断幽门螺杆菌感染的合并灵敏度、特异度及95%CI分别是:0.93(95%CI:0.90~0.95)0.95(95%CI:0.93~0.96)。合并诊断优势比DOR及95%CI为212.26(126.37~356.54)。绘制SROC曲线,估计SROC曲线下面积AUC=0.9786。~(13)C呼吸试验诊断幽门螺杆菌感染的合并灵敏度、特异度及95%CI分别是0.96(95%CI:0.92~0.98)0.97(95%CI:0.94~0.99)。合并诊断优势比DOR及95%CI531.91(172.75~1637.73)。绘制SROC曲线,估计SROC曲线下面积AUC=0.9903。比较灵敏度U=-1.67,P0.05,比较特异度U=-1.27,P0.05。结论在儿童幽门螺杆菌诊断中,~(13)C呼吸试验诊断价值要好于粪便抗原检测试验。     

传染病医院工作人员结核菌素皮肤试验接受度及影响因素分析

目的了解传染病医院工作人员结核菌素皮肤试验(TST)的接受度并分析影响因素,为传染病医院结核病(TB)的职业防护管理策略提供科学依据。方法采用横断面研究方法,于2011年5~12月对河南省传染病医院工作人员开展社会人口学特征、结核病防治知识、医务工作、医院职业防护以及院内感染培训情况的问卷调查和TST。采用SPSS 17.0软件对数据进行统计分析,TST接受度的影响因素分析采用单变量logistic回归和多变量逐步logistic回归。结果 503名调查对象中TST接受度为76.94%(387/503),不愿接受TST的主要原因为既往检查阳性、担心局部皮肤产生疼痛、水泡等。多因素分析结果显示,从事临床医务工作的时间≥5年(OR=0.52,95%CI:0.34~0.82)和TB门诊/病房工作≥2年(OR=0.62,95%CI:0.39~0.97)是传染病医院工作人员TST接受度的影响因素。结论应针对医务人员开展结核分枝杆菌潜伏感染的监测工作,探索利用TST联合新型检测方法对已发生结核分枝杆菌潜伏感染的医务人员进行随访,提高检测意愿,预防医务人员结核病的发生。     

TB-SAT检测支气管肺泡灌洗液诊断肺结核的价值研究

目的探讨结核分枝杆菌RNA恒温扩增荧光实时检测技术(TB-SAT)在肺结核诊断中的临床价值。方法纳入992例临床确诊肺结核患者和159例非结核病患者,采集患者支气管肺泡灌洗液,使用常规抗酸染色镜检(AFS)、Bactec MIGT960结核分枝杆菌液体培养(MIGT960)和TB-SAT三种方法检测结核分枝杆菌,应用ROC曲线比较三种方法的诊断价值。结果 AFS、MIGT960和TB-SAT三种方法诊断肺结核病时的AUC分别为0.635(95%CI:0.606~0.662)、0.681(95%CI:0.654~0.708)和0.758(95%CI:0.733~0.783),诊断价值由高到低依次为TB-SAT、MIGT960和AFS(均P0.05);AFS、MIGT960和TB-SAT三种方法的灵敏度分别为26.92%、36.29%和63.00%,特异度分别为100.00%、100.00%和88.68%。结论 TB-SAT具有快速、简便、准确等优点,可作为肺结核辅助诊断的方法。     

结核感染酶联免疫法在结核病临床诊断中应用价值研究

目的探讨结核诊断中应用结核感染酶联免疫法(TB-IGRA)诊断的临床应用价值,为临床诊断提供参考。方法选择2012年1月-2013年12月60例疑似结核病患者,对其进行结核菌素试验(TST)及TB-IGRA试验,统计两种诊断方式结果,对比两种诊断方法敏感度、特异度、阴性似然比(LR-)、阳性似然比(LR+)。结果 60例疑似结核病患者TST阳性36例、阴性24例,结核分枝杆菌培养阳性37例、阴性23例,TB-IGRA阳性45例、阴性15例,结核分枝杆菌培养阳性48例、阴性12例;TB-IGRA灵敏度、特异度、假阳性率、假阴性率分别为91.67%、91.67%、8.33%、8.33%,均明显优于TST 70.27%、56.52%、43.48%、29.73%,对比差异均有统计学意义(P<0.05);TB-IGRA诊断LR-为0.09、LR+为11.00。结论相比于TST试验、TB-IGRA试验诊断结核敏感性更好,且诊断快速,适合于结核筛检,应积极推广应用。     

TST和T-SPOT.TB对NTM肺病的诊断价值分析

目的评估目前判断是否感染结核分枝杆菌的2种方法:结核菌素皮肤试验(TST)和T细胞酶联免疫斑点试验(T-SPOT.TB试验),在辅助诊断非结核分枝杆菌(NTM)肺病中的价值。方法选取天津市海河医院2014年1月-2016年12月明确诊断为NTM肺病的患者53例作为研究对象(NTM组),选择同期我院结核3科住院痰慢速结核菌培养阳性明确诊断初治肺结核患者94例作为对照组(MTB组);对两组TST和T-SPOT.TB结果进行资料比较。结果 NTM组与MTB组TST试验比较,差异无统计学意义(P0.05)、T-SPOT检测鉴别MTB与NTM肺病的灵敏度为80.9%(76/94),特异度为77.4%(41/53),差异有统计学意义(P0.05)。胞内、龟/脓肿、偶然、浅黄、戈登、鸟、耻垢分枝杆菌T-SPOT检测阳性率均与MTB组的80.9%,差异有统计学意义(P0.05)。但堪萨斯分枝杆菌T-SPOT检测阳性率与MTB组无显著差异。结论 T.SPOT可快速、有效辅助NTM肺病和结核病的鉴别诊断。     

应用Xpert MTB/RIF法对我国肺结核诊断及利福平耐药检测的Meta分析

目的用Meta分析综合评价Xpert结核分枝杆菌/利福平(MTB/RIF)法对我国肺结核病诊断价值。方法通过对Pubmed、Embase、中国知网、维普数据库、万方数据库等进行文献检索,查找应用Xpert MTB/RIF诊断结核病的文献,摘录相关数据,应用Stata12和Revman5.2软件对所纳入的文献进行Meta分析,并对其发表偏倚进行评估。结果共纳入7篇文献进行分析。Xpert MTB/RIF法诊断肺结核的合并敏感度为93%(95%CI:91%~94%),合并特异度为81%(95%CI:79%~83%)。4篇文献分别分析了Xpert MTB/RIF法对涂片阳性和阴性结果的差异,对涂片阳性病例敏感度和特异度分别为98%(95%CI:96%~99%)、特异度为88%(95%CI:86%~91%),涂片阴性病例敏感度和特异度分别为73%(95%CI:64%~81%)、特异度79%(95%CI:77%~82%)。Xpert MTB/RIF法诊断利福平耐药结核病的敏感度为90%(95%CI:86%~94%)、特异度98%(95%CI:93%~99%)。结论 Xpert MTB/RIF法对我国基层防治机构结核病诊断具有一定价值,在利福平检测方面具有较好的应用前景。     

T细胞斑点试验在骨关节结核诊断中的应用价值研究

目的探讨T-SPOT.TB应用于骨关节结核诊断中的价值。方法本研究采用回顾性分析方法,对各组研究对象的一般临床资料、T-SPOT.TB、ESR、结核抗体等方法的检验诊断性能进行比较,研究T-SPOT.TB对骨关节结核感染的诊断价值。结果骨关节结核组抗原A(ESAT-6)和抗原B(CFP-10)检测阳性率分别为75.8%和72.4%;T-SPOT.TB的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、诊断准确率分别为82.7%、85.2%、88.8%、82.7%、85.7%,均显著高于结核抗体和血沉;通过ROC曲线分析,T-SPOT.TB抗原A和抗原B的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.869(95%CI:0.806～0.933)和0.881(95%CI:0.819～0.944),截断值分别为5.5和4.5,对应的敏感度分别为79.4%和85.0%,特异度分别为88.7%和85.3%。结论 T-SPOT.TB在骨关节结核感染的诊断中有较高的应用价值。     

酶联免疫斑点试验在菌(涂)阴肺结核辅助诊断中的价值-Meta分析

目的通过对酶联免疫斑点试验(Enzyme linked immunospot assay,Elispot)与血清结核抗体检测试验(tuberculosis antibody,TB-AB)在菌(涂)阴肺结核诊断中的灵敏度和特异度优势比进行Meta分析,评价Elispot用于菌阴肺结核的诊断价值。方法计算机检索中文期刊全文数据库、万方医学网、维谱数据库、Pubmed、Elsevier Science等数据库,获取符合标准的10篇文献为研究对象,采用Stata12.0与Meta Disc1.4计算Elispot、TB-AB用于菌(涂)阴肺结核辅助诊断灵敏度与特异度的优势比,并获得Elispot合并后的灵敏度和特异度。结果 Elispot用于菌(涂)阴肺结核辅助诊断的合并灵敏度为87.4%(95%CI 83.3%-90.6%)、特异度为84.5%(95%CI 80.3%-88.0%);Elispot较之TB-AB的灵敏度优势比为OR=5.75(95%CI 3.38-9.83)、特异度优势比为OR=2.44(95%CI 1.55-3.83)。结论 Elispot阳性结果对于菌(涂)阴活动性结核病的辅助诊断价值与阴性结果对于活动性肺结核的排除诊断能力较TB-AB具备明显比较优势。     

北京市昌平区某高校大学新生结核潜伏感染调查

目的 调查大学新生结核潜伏感染情况,以便采取预防性措施。 方法 2010年10月随机纳入北京市昌平区某高校入学新生TST≥10 mm的健康受试者420例,应用ELISPOT检测经抗原刺激后分泌IFN-γ的效应T淋巴细胞(即斑点形成细胞,SFCs)数量,并对ELISPOT阳性者进行为期3年的结核感染发病情况监测。 结果 ELISPOT检测LTBI总的阳性率为41.2%,在BCG接种(阳性率41.5%)和未接种(阳性率40.0%)中差异无统计学意义(χ²=0.064, P=0.447),在TST直径10~14、15~19和≥20 mm组间(37.6%、45.4%和64.3%)差异有统计学意义(χ²=8.408, P=0.015),173例未治疗的 ELISPOT+/TST+者经3年的ATB监测,发病率为0。 结论 北京市昌平区某高校大学新生LTBI比率高,但仅以ELISPOT和TST双阳性者为预防性治疗指标,尚不足够。     

ESAT-6/CFP-10融合蛋白的抗原性分析及其对诊断结核临床应用价值

目的 分析ESAT-6/CFP-10融合蛋白作为结核抗原的特性,并探讨以其作为抗原的酶联免疫斑点实验(ELISPOT)在结核诊断中的应用价值.方法 以ESAT-6/CFP- 10融合蛋白为刺激抗原的EIISPOT法(ESAT-6/CFP-10-ELISPOT)检测经结核特异性抗原刺激后分泌γ干扰素的效应T淋巴细胞数量方法,测定65例单纯结核病患者,16例HIV/结核双重感染患者,20例HIV感染患者,32例非结核呼吸道疾病患者,30名健康体检者外周血单个核细胞中结核菌抗原特异的T淋巴细胞的频率.结果 ESAT-6/CFP- 10-ELISPOT与结核菌素皮肤试验(TST)在所有81例结核患者中的比较,ESAT-6/CFP- 10-ELISPOT阳性率98.8％,TST阳性率为56.8％;ESAT-6/CFP-10-ELISPOT在涂阳结核组、涂阴结核组、HIV/结核双重感染组阳性率分别为100.0％、97.1％、100.0％,其敏感性远高于痰涂片检查,且各组结果差异无统计学意义;20例HIV感染组有1例阳性,非结核呼吸道疾病患者组与健康对照组均为阴性,提示ESAT-6/CFP- 10-ELISPOT方法的特异度为98.8％.结论 ESAT-6/CFP-10融合蛋白可以很好的刺激效应T淋巴细胞分泌γ干扰素,适合作为结核诊断中的特异性抗原,因而可以用于ELISPOT的检测,ESAT-6/CFP- 10-ELISPOT对结核诊断有应用价值.     

酶联免疫斑点试验快速检测结核分枝杆菌感染的应用评价

目的评价γ干扰素释放实验(IGRA)诊断活动性结核病的价值。方法选取130例胸片异常的出入境人员,根据胸片是否存在活动性病变将研究对象分为试验组(60例)和对照组(70例),采取IGRA检测试剂盒T SPOT.TB,测定结核杆菌特异抗原刺激反应的效应T淋巴细胞数量,结合实验室痰菌涂片和培养结果评价该技术对活动性肺结核的筛查价值。结果T-SPOT.TB在筛查临床诊断的活动性肺结核患者中的敏感性与结核菌素皮肤试验(TST)接近,分别为73.3%比78.3%特异性显著优于TST试验(结核菌素皮肤试验),为60%和27.3%;在痰菌检查阳性的活动性肺结核确诊患者和痰菌检查阴性的对照组受试者中,T-SPOT.TB诊断活动性肺结核患者的敏感性和特异性进一步提高,与TST试验相比,敏感性为93.1%比75.9%,特异性为62.7%比35.8%。结论T-SPOT.TB检测活动性肺结核的敏感性高,优于传统的TST方法,提示该技术可用于在临床疑似结核病患者中快速筛查活动性肺结核。     

γ干扰素释放试验在肺内结核和肺外结核中的诊断价值

目的：探讨IFN-γ释放试验在肺内及肺外结核诊断中的应用价值。方法采用IFN-γ释放试验试剂盒分别检测185例结核病患者（包括119例肺结核和66例肺外结核）、139例其他肺部疾病患者和100例健康对照者结核患病情况,并以病原培养或/和临床诊断为标准,评价IFN-γ法诊断的敏感度和特异性,同时分别与痰菌培养及痰涂片平行检验的结果作比较。结果以临床诊断为准金标准,IFN-γ释放试验检测敏感度为93.51%,特异度为84.52%,检测肺结核和肺外结核的敏感度分别为90.76%和98.49%,两者差异无统计学意义（P〉0.05）;而痰涂片检测肺结核和肺外结核的敏感度分别为11.76%和3.03%;痰培养检测的敏感度也仅为24.37%和3.03%,3种方法对肺结核和肺外结核检测敏感度,差异均有统计学意义（ P均〈0.05）。全部424例标本,经培养阳性有33例,其中鉴定发现2例非结核分枝杆菌感染,均为脓肿分枝杆菌,IFN-γ释放试验检测为阴性,按鉴定确认的31例结核分支杆菌培养阳性结果为金标准,IFN-γ释放试验敏感度为90.32%（95%CI：75.10%~96.65%）。结论IFN-γ释放试验肺内、外结核具有快速方便和较高的敏感度,值得用于临床结核筛查。     

2～14岁赴美移民申请人结核病筛查结果分析

〔目的〕对2~14岁赴美移民申请人结核病筛查的结果进行分析,为早期发现潜伏结核感染、肺结核患者及结核病防控提供参考依据。〔方法〕对2009年7月—2010年3月期间在广东国际旅行卫生保健中心体检的2747名2~14岁赴美移民申请人进行结核病筛查,所有申请人均进行结核菌素皮试(TST);若TST≥10mm或申请人有疑似结核的体征或症状,应进行X线胸片检查;若胸片所见疑似结核或有疑似结核的体征或症状的,进行结核分枝杆菌实验室检测。〔结果〕TST皮试结果显示阳性率为47.40%,阴性率52.60%,其中中度阳性者624名,占总人数的22.72%,强阳性者25名,占总人数的0.91%。阴性率随年龄增长逐渐下降,阳性与中度阳性率随年龄增长逐渐上升(P0.001)。649名TST≥10 mm者胸片检查结果发现,疑似结核病患者8人,其中非领养儿童1例,领养儿童7例。结核分枝杆菌实验室检测结果发现,8例疑似肺结核患者中,1例为耐多药结核患者。〔结论〕加强儿童,特别是生活条件和营养条件差的儿童结核病的筛查,提高卡介苗覆盖率及接种质量对于儿童肺结核的防控具有重要意义。     

基于结核分枝杆菌多表位抗原的诊断试剂研制及临床评价

目的:基于结核分枝杆菌多表位抗原研制的新型结核免疫诊断试剂进行临床评价,评价其灵敏度和特异性,探讨其应用价值。方法:采用建立的间接ELISA方法,分别检测结核病和肺部其他疾病及健康人群血清样品。结果:508份肺结核患者样品中,检出阳性433份,灵敏度85.23%(433/508),健康人523份中,检出阳性49份,特异性90.63%(49/523)。结论:研制的新型的结核抗体免疫诊断试剂灵敏度高,特异性强,可用于结核感染的大规模筛查试验。     

Risk for tuberculosis among children

Contacts of adults with tuberculosis (TB) are at risk for infection. Tests based on interferon-gamma (IFN-gamma) expression in response to Mycobacterium tuberculosis antigens may be more sensitive than the tuberculin skin test (TST). Risk for infection was assessed by using TST and an IFN-y-based assay (QuantiFERON Gold in Tube [QFT-IT] test) for 207 children in Nigeria in 1 of 3 groups: contact with adults with smear-positive TB, contact with adults with smear-negative TB, and controls. For these 3 groups, respectively, TST results were >10 mm for 38 (49%) of 78, 13 (16%) of 83, and 6 (13%) of 46 and QFT-IT positive for 53 (74%) of 72, 8 (10%) of 81, and 4 (10.3%) of 39 (p < 0.01). Most test discrepancies were TST negative; QFT-IT positive if in contact with TB-positive persons; and TST positive, QFT-IT negative if in contact with TB-negative persons or controls. TST may underestimate risk for infection with TB in children.     

Detecting Mycobacterium tuberculosis Infection in Children Migrating to Australia

In 2015, Australia updated premigration screening for tuberculosis (TB) disease in children 2–10 years of age to include testing for infection with Mycobacterium tuberculosis and enable detection of latent TB infection (LTBI). We analyzed TB screening results in children <15 years of age during November 2015–June 2017. We found 45,060 child applicants were tested with interferon-gamma release assay (IGRA) (57.7% of tests) or tuberculin skin test (TST) (42.3% of tests). A total of 21 cases of TB were diagnosed: 4 without IGRA or TST, 10 with positive IGRA or TST, and 7 with negative results. LTBI was detected in 3.3% (1,473/44,709) of children, for 30 applicants screened per LTBI case detected. LTBI-associated factors included increasing age, TB contact, origin from a higher TB prevalence region, and testing by TST. Detection of TB and LTBI benefit children, but the updated screening program’s effect on TB in Australia is likely to be limited.     

Tuberculosis screening in the federal prison system: an opportunity to treat and prevent tuberculosis in foreign-born populations

OBJECTIVES: Despite recent success in tuberculosis (TB) control efforts in the United States, marked declines in TB case rates have not been observed in foreign-born populations. Because foreign-born populations are becoming more important for targeted national TB control efforts, the Federal Bureau of Prisons (BOP) reviewed inmate medical data to evaluate risk factors associated with Mycobacterium tuberculosis infection and active TB disease. To improve screening strategies, BOP implemented chest radiograph screening for all inmates entering a federal detention center in San Diego, California. METHODS: Tuberculin skin test (TST) data from an approximated intake cohort of inmates entering the system from February 1 to June 30, 1999, were analyzed to assess risk factors for M. tuberculosis infection among inmates entering federal prisons. The most recent case reports of inmates diagnosed with TB disease were reviewed. All inmates entering a San Diego detention facility from July 1 to December 31, 1998, were screened for TB by symptom review, TST, and chest radiographs. RESULTS: System-wide, foreign-born inmates were 5.9 times more likely to have a positive TST than US-born inmates, and accounted for 60% of recently diagnosed TB cases. Chest radiograph screening of all inmates entering the San Diego facility reduced exposure time to active TB cases by 75%, but TB incidence remained unchanged. CONCLUSIONS: The high prevalence of M. tuberculosis infection and TB disease among foreign-born inmates entering the federal prison system presents a strategic opportunity to provide preventive therapy to a high-risk population and to identify contagious cases that might elude traditional public health efforts. Universal chest radiograph screening was no more sensitive than TST for detecting active TB cases among newly incarcerated foreign-born inmates with a high prevalence of TB infection, but the screening reduced potential TB exposures through rapid identification of contagious cases.