急性白血病多药耐药基因表达的临床研究

为降低白血病细胞对化疗药物的敏感性，用逆转录聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术，定量检测了各病期９１例急性白血病患者的多药耐药基因（ＭＤＲ１）表达水平，发现初治组、缓解组、难治复发组ＭＤＲ１阳性率分别为４０．０％、２８．１％、８２．８％，且难治复发组ＭＤＲ１基因表达水平０．４３８８±０．０６７９（±ｓ）明显高于初治组０．２２０８±０．０８９６和缓解组０．２４５６±０．０７６８。在３０例初治患者中，ＭＤＲ１阳性组化疗缓解率为４１．７％，明显低于阴性组的８８．９％（Ｐ＜０．０５）。在缓解病人中，ＭＤＲ１表达阳性组与阴性组复发率有显著的差异（６６．７％；１３．０％Ｐ＜０．０１）。认为ＭＤＲ１基因表达增加是急性白血病患者的一个不良预后因素，是判断早期高危因素及耐药复发的一个重要指征。     

Bcl-2与乳腺癌耐药蛋白基因在老年急性髓系白血病中表达的意义

目的 探讨Bcl-2和乳腺癌耐药蛋白(BCRP)基因在老年急性髓系白血病(AML)中的表达及其相关性.方法 RT-PCR法检测20例老年AML患者及20例老年非恶性血液病对照组的骨髓白细胞BCRP mRNA,同时流式细胞仪(FCM)检测其骨髓单个核细胞(BMMNC) Bcl-2蛋白表达.结果 AML组Bcl-2总阳性率较对照组显著增高,其中初治组阳性率与对照组无显著差异,而难治与复发组阳性率明显高于初治组和对照组(P＜0.05);BCRP总阳性率明显高于对照组,其中初治组和难治与复发组阳性率均较对照组明显增高(P＜0.05),而初治组和难治与复发组间无显著差异(P＞0.05).Bcl-2+组和BCRP+组完全缓解(CR)率明显低于Bcl-2-组和BCRP-组,早期复发率明显高于Bcl-2-组和BCRP-组(均P＜0.05).Bcl-2和BCRP基因在初治组和难治/复发组表达不相关(P＞0.05).结论 Bcl-2和BCRP基因均与临床耐药密切相关,二者高表达均提示预后不良,但二者无相关性,联合检测Bcl-2和BCRP基因对评价AML预后有较大意义.     

白血病多药耐药基因和多药耐药相关蛋白基因的表达及临床研究

白血病是造血系统常见的恶性肿瘤 ,化疗是白血病治疗的主要手段 ,但白血病细胞产生的多药耐药是导致化疗失败的主要原因。多药耐药基因(ｍｄｒｌ)和多药耐药相关蛋白基因 (ＭＲＰ)的过度表达是引起白血病多药耐药发生的重要机制之一。本文应用半定量ＲＴ ＰＣＲ方法同时检测 40例急性白血病和慢性粒细胞白血病急变患者的ｍｄｒｌ和ＭＲＰ的表达水平 ,并探讨了它们与临床耐药的关系。1　对象与方法1 .1 　 研究对象40例患者均为我院 1 999年 7月～ 2 0 0 0年 5月住院患者 ,男 2 5例 ,女 1 5例 ,中位年龄 37岁 ( 4～ 68岁 )。初治组 2 7例 ,复…     

急性髓系白血病多药耐药表达与白血病克隆生长的关系

多药耐药（ＭＤＲ）及白血病细胞高度增殖能力所产生的再生耐药,是急性髓系白血病（ＡＭＬ）化疗失败的重要原因。我们采用植物血凝素——白细胞条件培养液（ＰＨＡ－ＬＣＭ）为生长刺激因子,体外培养白血病祖细胞（Ｌ－ＣＦＵ）。同时使用ＪＳＢ－１单克隆抗体免疫组化ＡＢＣ法检测ＡＭＬ病人骨髓细胞中Ｐ１７０表达,以探讨两者间关系及其临床意义。１　材料与方法１．１　研究对象　２１例ＡＭＬ均经细胞形态学、免疫学分型确诊。ＦＡＢ分型Ｍ１６例,Ｍ２５例,Ｍ３５例,Ｍ４１例,ＣＭＬ急变４例。其中初治１８例,复发２例,难治性…     

急性髓系白血病原发性耐药的表达

目的：探讨急性髓系白血病（ＡＭＬ）的原发性耐药蛋白ｐ１７０、ＧＳＴＰ－１等的表达和疗效、预后的关系。方法：采集ＡＭＬ患者治疗前骨髓液,采用ＡＢＣ－ＡＰ法检测ｐ１７０、ＧＳＴＰ－１和其他单抗。结果：①１０５例初治ＡＭＬ中１２例（１１．４％）出现ｐ１７０或ＧＳＴＰ－１的阳性表达。②耐药表达阳性的１２例中ＣＲ６例（５０％）,有效率为６６．７％;１２例中目前７例死亡,２例复发,总生存曲线下降较快。无病生存曲线反映１８个月追踪仅剩２５％左右。结论：成人ＡＭＬ原发性耐药的表达是治疗效果差的标志之一,与预后直接相关。     

急性淋巴细胞白血病患儿肺耐药蛋白表达及临床意义

应用免疫组化法 ,对 2 7例初治和 2 1例复发及难治的急性淋巴细胞白血病 (AL L )患儿检测外周血或骨髓中白血病细胞的肺耐药蛋白 (L RP)表达情况 ,同时体外应用 MTT方法观察了所有患儿的白血病细胞对柔红霉素 (DNR)化疗的敏感性。结果 :2 7例初治患儿的 L RP表达率为 18.5 % ,2 1例复发及难治患儿的 L RP表达率为 6 6 .7% ,两者比较 P<0 .0 1。在 2 7例初治患儿组中 ,L RP表达阴性者对 DNR的敏感率为 86 .4 % ,L RP表达阳性者为 2 0 % ,两者比较 P<0 .0 1;在 2 1例复发及难治患儿中 ,L RP表达阴性者对 DNR敏感率为 2 8.6 % ,L RP表达阳性者为 2 1.4 % ,两者比较 P>0 .0 5。在 2 7例初治组患儿中 ,L RP表达阴性者的 CR率为 90 .9% ,L RP表达阳性者为 6 0 % ,两者比较 P<0 .0 1;在 2 1例复发及难治患儿中 ,L RP表达阴性者的 CR率为 4 2 .9% ,L RP表达阳性者为 5 0 % ,两者比较 P>0 .0 5。认为 L RP可能是产生多药耐药 (MDR)的另外一个重要因素     

初治急性白血病患者肺耐药蛋白和多药耐药相关蛋白基因表达与预后的关系

目的 探讨肺耐药蛋白（1rp)基因和多药耐药相关蛋白（mrp)基因表达与初治急性白血病（AL）患者化疗效果的关系。方法 用逆转聚合酶链反应方法检测58例初治AL患者骨髓单个核细胞中lrp和mrp的mRNA的表达。结果 初治急性淋巴细胞白血病（ALL）患者lrp和mrp阳性表达率分别为15．0％和40．0％, 初治急性非淋巴细胞白血病（ANLL）患者lrp和mrp阳性表达率分别为15．8％和42．1％;在ALL和ANLL组,lrp和mrp基因阳性与阴性患者的首次完全缓解（CR）经统计学分析,差异无显著性（P＞0．05）,而lrp和mrp基因双阳性与双阴性患者的首次CR经统计学分析,差异有显著性（P＜0．05）;lrp和mrp基因两者无相关性。结论 lrp和mrp单独作为预测初治AL患者化疗效果的敏感性较差,而两者联合检测则是预示原发耐药的良好指标。     

CD40抗原和生存素基因在急性髓性白血病细胞中表达及其临床意义

目的探讨急性髓性白血病(AML)细胞的CD40抗原和抗凋亡基因生存素(survivin)mRNA表达及其临床意义。方法应用流式细胞仪和逆转录-PCR方法检测48例初治AML患者细胞的CD40抗原和抗凋亡基因survivin mRNA表达,并结合AML患者临床特征进行分析。结果(1)48例AML患者中25例(52．1％)表达CD40抗原,35例(72．9％)表达survivin mRNA。(2)CD40^ AML组中脾肿大、血小板减少和高白细胞白血病的发生率明显高于CD40^-AML组(36．0％、8．7％),P=0．025;(72．0％、43．5％),P=0．045;(32．0％、4．4％),P=0．024。(3)survivin mRNA在CD40^ AML和CD40^-AML两组中表达差异无显著性(20／25、15／23),P=0．25,但两组中的survivin mRNA表达均明显高于健康对照组(20／25、6／20),P=0．001;(15／23、6／20),P=0．021;48例AML患者中CD40抗原阳性率低于survivin mRNA阳性率(52．1％、72．9％),P=0．041。(4)survivin^ AML化疗完全缓解(CR)率明显低于survivin^-AML(31．4％、69．2％),P=0．018。结论CD40抗原表达和AML的临床血液学特征存在一定关系;表达抗凋亡基因survivin mRNA是AML患者化疗CR率低的原因之一,可能是影响AML患者预后的因素。     

白血病患者多药耐药基因1和多药耐药相关蛋白检测的临床意义

白血病细胞多药耐药性是影响疗效、导致化疗失败的主要原因。我们检测了３８例急性白血病（ＡＬ）患者多药耐药基因１（ＭＤＲ１）、多药耐药相关蛋白（ＭＲＰ）基因的表达,并探讨其与临床耐药及预后的关系。一、资料和方法１－研究对象：ＡＬ３８例,男１８例,女２０例,年龄１１～６５岁,中位年龄３３岁。其中急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ）２４例（Ｍ１２例,Ｍ２７例,Ｍ３８例,Ｍ４２例,Ｍ５２例,Ｍ６１例;慢性粒细胞白血病急粒变２例）;急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）１４例（Ｌ１６例,Ｌ２７例,Ｌ３１例）。初治组１３例…     

急性白血病多药耐药基因及多药耐药相关蛋白基因的表达及临床研究

目的探讨急性白血病（ＡＬ）多药耐药基因（ｍｄｒ１）及多药耐药相关蛋白基因（ＭＲＰ）的表达与预后的关系。方法采用逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）的方法检测５５例ＡＬ患者的ｍｄｒ１及ＭＲＰ的表达。结果发现复发急变组的ｍｄｒ１及ＭＲＰ基因表达水平（０．７３５±０．２４９,１．１５７±０．４４７）较初治组（０．４０８±０．１８６,０．４６５±０．２５３）明显升高（Ｐ＜０．０１）。而且ｍｄｒ１及ＭＲＰ同时高表达者的完全缓解（ＣＲ）率明显低于ｍｄｒ１及ＭＲＰ同时低表达者（Ｐ＜０．０１）。结论ｍｄｒ１和ＭＲＰ同时高表达是判断ＡＬ患者耐药复发及不良预后的重要因素。     

RT-PCR检测白血病患者mdr1表达的临床研究

目的：应用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法检测多药耐药基因（ｍｄｒ１）ｍＲＮＡ的表达,以探讨白血病细胞的抗药性及化疗效果的关系。方法：采用ＲＴ－ＰＣＲ法检测３３例不同类型白血病患者ｍｄｒ１、ｍＲＮＡ的表达,同时检测２０例正常骨髓做对照。结论：对照均为阴性表达,而初始组ｍｄｒ１的阳性表达率为３５．００％,复发、难治组ｍｄｒ１阳性表达率为８４．６２％（Ｐ〈０．０１）,ｍｄｒ１阳性与ｍｄｒ１阴性     

急性白血病患者Survivin基因表达与耐药的关系

目的　探讨急性白血病 (AL)患者Survivin基因表达及其与临床耐药的关系。方法　应用半定量RT PCR方法检测 71例急性白血病患者 ,10例健康人的Survivin、mdr1基因mRNA表达水平 ,并分析其临床意义。结果　AL患者Survivin、mdr1mRNA表达阳性率分别为 67.61%和 49.3 0 %。急性淋巴细胞白血病 (ALL)和急性非淋巴细胞白血病 (ANLL)患者SurvivinmRNA表达阳性率均高于对照组 (分别为P <0 .0 1,P <0 .0 5 )。半定量后进行方差分析 ,ANLL和ALL患者SurvivinmRNA表达水平 (分别为 0 .64± 0 .2 1,0 .63± 0 .15 )均高于对照组 ( 0 .3 3± 0 .0 1,P <0 .0 5 )。耐药组患者SurvivinmRNA表达阳性率高于敏感组 (P <0 .0 5 )。Survivin阳性mdr1阳性患者耐药比例 ( 73 .0 8% )明显高于Survivin阴性mdr1阴性患者 ( 3 1.2 5 % ,P <0 .0 1)。在 61例初治和复发AL患者Sur vivinmRNA表达水平和mdr1mRNA表达水平呈高度正相关 (r =0 .75 4,P <0 .0 0 1)与骨髓白血病细胞百分比呈正相关 (r =0 .3 89,P =0 .0 0 5 )。结论　Survivin基因在AL患者呈高表达 ,与临床耐药密切相关 ,有望成为AL靶向治疗的一个潜在靶点     

耐多药相关蛋白在人非小细胞肺癌组织中的表达

目的　检测人非小细胞肺癌组织中耐多药相关蛋白（ＭＲＰ） 的表达,探讨其与瘤组织学类型、分化程度、临床分期及预后的关系。方法　采用免疫组化方法及逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）技术,分别检测了９２ 份人非小细胞肺癌石蜡组织中ＭＲＰ的表达及１６ 份人非小细胞肺癌新鲜组织中ＭＲＰ基因的表达。结果　９２ 份人非小细胞肺癌组织中（ 鳞癌４３ 例,腺癌４９ 例）ＭＲＰ表达阳性检出率为５４％（５０／９２） ,１６ 份人非小细胞肺癌组织中ＭＲＰ基因表达阳性检出率为３１％ （５／１６）。ＭＲＰ在腺癌中的表达阳性率明显高于鳞癌（ Ｐ＜ ０－０５） ,ＭＲＰ表达与瘤分化程度、肿瘤大小及淋巴结转移无显著相关。ＭＲＰ阳性患者术后５ 年生存率为１６％ （８／５０）,ＭＲＰ 阴性患者术后５ 年生存率为５２％ （２２／４２） ,二者经统计学处理,差异有显著性（ Ｐ＜ ０－０５）。ＭＲＰ阳性患者术后５ 年生存率有随其瘤组织中该蛋白表达阳性程度的增加而降低之趋势。结论　非小细胞肺癌患者瘤组织中ＭＲＰ的表达与瘤组织学类型及预后明显相关。     

急性白血病患者lrp、mdr-1/p170和mrp表达及其临床意义

目的 评价肺耐药相关蛋白基因（ｌｒｐ）多药耐药相关蛋白基因（ｍｒｐ）和多药耐药基因（ｍｄｒ－１）及其编码的ｐ１７０蛋白表达与急性白血病患者多药耐药（ＭＤＲ）的关系,方法 将８５例急性白血病患者分为初始敏感（Ａ）,完全缓解（Ｂ）和复发难治（Ｃ）组,用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）法检测患者骨髓单个核细胞中ｌｒｐ,ｍｒｐ和ｍｄｒ－１的ｍＲＮＡ表达,同时用免疫细胞化学方法检测ｐ１７０表达。患者骨髓单     

联合定量检测急性髓系白血病患者MDR1和WT1基因表达及临床意义

目的 联合定量检测初治急性髓系白血病(AML)患者MDR1及WT1基因的表达水平,探讨MDR1与WT1的表达量在AML耐药中作用及相互关系.方法 构建实时荧光定量PCR检测WT1和MDR1基因表达水平技术,并检测63例初治AML患者WT1和MDR1基因的表达量及与临床疗效的关系.结果 63例初治AML患者MDRI基因表达(拷贝/μg RNA)的中位数为2863(413～3 410 000),WT1基因表达为52 700(7731～1 020 000).10例正常对照组MDR1和WT1基因表达水平为337(125～840)和849(635～1402).初治AML患者MDR1和WT1基因表达水平均显著高于正常对照组(P＜0.001).且MDR1与WT1基因表达水平呈相关性(P=0.004);FAB各亚型中MDR1和WT1基因表达水平差异无统计学意义(P＞0.05);遗传学危险度分级的高、中、低危3组的WT1和MDR1基因表达水平差异无统计学意义(P＞0.05).FLT3-ITD突变阳性组MDR1基因表达水平与突变阴性组相比差异无统计学意义(P＞0.05).FLT3-ITD突变阳性组的WT1基因表达水平显著高于阴性组(P＜0.05).AML患者中WT1和MDR1基因共同高表达组完全缓解率显著低于共同低表达组(P＜0.05).结论 AML患者MDR1和WT1基因表达水平存在相关性;联合检测AML患者MDR1和WT1基因表达量更能早期预测预后.     

急性白血病患者细胞周期蛋白B1表达与耐药的关系

目的　探讨细胞周期蛋白B1 (cyclinB1 )在急性白血病 (AL)中的表达以及与耐药的关系。方法　本研究对 85例初治AL患者 (其中敏感组 47例 ,耐药组 38例 )及 1 7例正常人采用流式细胞术检测cyclinB1、p1 70蛋白表达水平。采用半定量逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测cyclinB1、多药耐药基因 1 (mdr 1 )、DNA拓扑异构酶Ⅱ的两个同工酶TOPOⅡα、TOPOⅡβ以及bcl 2的mRNA水平。结果　 (1 )耐药组cyclinB1蛋白 (M =1 2 3 % )和mRNA (M =0 2 1 7)以及TOPOⅡα(M =0 2 36)、TOPOⅡβ(M =0 32 8)的mRNA表达水平明显低于敏感组cyclinB1蛋白 (M =2 2 7% )和mRNA (M =0 563)、TOPOⅡα(M =0 51 4 )、TOPOⅡβ(M =0 635) (P <0 0 1 )。全部正常人cyclinB1蛋白的表达水平 <5 % ,在相同条件下未检出cyclinB1、TOPOⅡα、mdr 1的mRNA表达。 (2 )耐药组患者的p1 70蛋白 (M =1 4 3 % )及mdr 1 (M =1 0 71 )、bcl 2 (M =0 941 )的mRNA表达水平明显高于敏感组p1 70蛋白 (M =3 6 % )、mdr 1 (M =0 0 94)和bcl 2 (M =0 1 53)的mRNA表达水平 (P <0 0 1 )。 (3)cyclinB1蛋白与TOPOⅡα、TOPOⅡβ的mRNA表达呈正相关 (rTOPOⅡα=0 472 ,P <0 0 1 ) ;(rTOPOⅡβ=0 683 ,P <0 0 1 ) ;cyclinB1mRNA与TOPOⅡα