NHERF1及β联蛋白在黑素瘤细胞系A375、M14、MV3中的表达及意义

【摘要】 目的 探讨钠氢交换子调节因子-1（NHERF1）及β联蛋白在黑素瘤细胞系A375、M14、MV3中的表达及意义。方法 使用免疫细胞化学法、实时荧光定量-PCR法、免疫印迹法对黑素瘤细胞系A375、M14、MV3及黑素细胞中NHERF1及β联蛋白的表达情况进行观察。使用MTT法对黑素瘤细胞系A375、M14、MV3及黑素细胞的增殖情况进行检测。结果 NHERF1及β联蛋白在黑素细胞中同时表现为细胞膜阳性表达,而在黑素瘤细胞系A375、M14、MV3中均出现膜表达的缺失,同时呈现不同程度的胞质和（或）胞核阳性表达。在3株黑素瘤细胞系中,MV3细胞中的NHERF1免疫细胞化学染色仅呈少部分胞质弱阳性表达,实时荧光定量PCR检测NHERF1的mRNA表达水平最低,免疫印迹法中未见NHERF1蛋白表达条带,而其在MTT法中检测到的增殖速度最快,明显高于另外两株细胞。A375细胞中的NHERF1免疫细胞化学染色呈胞质及胞核的强阳性表达,实时荧光定量PCR检测NHERF1的mRNA表达水平最高,免疫印迹法中可见NHERF1蛋白最强阳性表达,而其增殖速度却慢于MV3细胞。β联蛋白在MV3细胞中免疫细胞化学染色呈细胞质及细胞核的强阳性表达,实时荧光定量PCR检测的mRNA表达水平最高,免疫印迹法检测到蛋白最强阳性表达;而A375细胞及M14细胞中,β联蛋白在免疫细胞化学染色呈相对弱的细胞质阳性表达,实时荧光定量PCR检测的mRNA表达水平明显较低;免疫印迹法中的蛋白表达较MV3中的表达低。结论 黑素瘤细胞胞质中NHERF1表达量可能与细胞的增殖速度相关,NHERF1在黑素瘤细胞中表达程度越低细胞增殖越快。黑素瘤细胞中的NHERF1与β联蛋白存在着差异性表达。 【关键词】 黑色素瘤; 钠氢交换子调节因子-1; β连环蛋白     

NHERF1及β联蛋白在黑素瘤细胞系A375、M14、MV3中的表达及意义北大核心CSCD

目的探讨钠氢交换子调节因子-1（NHERF1）及B联蛋白在黑素瘤细胞系A375、M14、MV3中的表达及意义。方法使用免疫细胞化学法、实时荧光定量-PCR法、免疫印迹法对黑素瘤细胞系A375、M14、MV3及黑素细胞中NHERF1及13联蛋白的表达情况进行观察。使用MTr法对黑素瘤细胞系A375、M14、MV3及黑素细胞的增殖情况进行检测。结果NHERF1及β联蛋白在黑素细胞中同时表现为细胞膜阳性表达,而在黑素瘤细胞系A375、M14、MV3中均出现膜表达的缺失,同时呈现不同程度的胞质和（或）胞核阳性表达。在3株黑素瘤细胞系中,MV3细胞中的NHERF1免疫细胞化学染色仅呈少部分胞质弱阳性表达,实时荧光定量PCR检测NHERF1的mRNA表达水平最低,免疫印迹法中未见NHERF1蛋白表达条带,而其在MTT法中检钡4到的增殖速度最快,明显高于另外两株细胞。A375细胞中的NHERF1免疫细胞化学染色呈胞质及胞核的强阳性表达,实时荧光定量PCR检测NHERF1的mRNA表达水平最高,免疫印迹法中可见NHERF1蛋白最强阳性表达,而其增殖速度却慢于MV3细胞。β联蛋白在MV3细胞中免疫细胞化学染色呈细胞质及细胞核的强阳性表达,实时荧光定量PCR检测的mRNA表达水平最高,免疫印迹法检测到蛋白最强阳性表达;而A375细胞及M14细胞中,β联蛋白在免疫细胞化学染色呈相对弱的细胞质阳性表达,实时荧光定量PCR检测的mRNA表达水平明显较低;免疫印迹法中的蛋白表达较MV3中的表达低。结论黑素瘤细胞胞质中NHERF1表达量可能与细胞的增殖速度相关,NHERF1在黑素瘤细胞中表达程度越低细胞增殖越快。黑素瘤细胞中的NHERF1与β联蛋白存在着差异性表达。     

原发性乳房外Paget病组织中钠氢交换子调节因子1和β联蛋白的表达和意义

【摘要】 目的 探讨钠氢交换子调节因子1（NHERF1）和β联蛋白在原发性乳房外Paget病组织中的表达及其意义。 方法 应用免疫组化方法,检测18例原位乳房外Paget病、22例侵袭性乳房外Paget病石蜡组织切片中NHERF1和β联蛋白的表达情况。 结果 NHERF1在22例侵袭性乳房外Paget病中18例（81.82%）为高表达,18例原位乳房外Paget病中7例（38.89%）高表达,两组差异有统计学意义（χ2 = 7.78,P ＜ 0.01）;β联蛋白在侵袭性乳房外Paget病中有0例胞膜高表达和18例（81.82%）胞质或核高表达,原位乳房外Paget病中分别为6例（33.33%）和8例（44.44%）,两组差异均有统计学意义（χ2值分别为8.63和6.08,P值分别 ＜ 0.01和 ＜ 0.05）。原发性乳房外Paget病组织中NHERF1的表达与β联蛋白胞膜表达呈负相关（ρ = -0.488,P ＜ 0.01）,与β联蛋白胞质或核表达呈正相关（ρ = 0.623,P ＜ 0.01）;β联蛋白胞膜表达与胞质或核表达呈负相关（ρ = -0.572,P ＜ 0.01）。 结论 乳房外Paget病组织中NHERF1和β联蛋白表达异常,并可能与原发性乳房外Paget病的发生发展及侵袭有关。 【关键词】 佩吉特病,乳腺外; β连环素; 钠氢交换子调节因子1     

胰岛素样生长因子ⅡmRNA结合蛋白3在恶性黑素瘤及良性痣中的表达

目的 探讨胰岛素样生长因子Ⅱ mRNA结合蛋白3(IMP3)在良性痣及黑素瘤组织中的表达,及其在恶性黑素瘤进展及诊断中的作用.方法 用IMP3抗体对28例恶性黑素瘤、8例Spitz痣、6例发育不良性痣和25例良性痣患者的标本组织进行免疫组化研究.结果 28例恶性黑素瘤组织标本中23例IMP3阳性,8例Spitz痣中4例阳性,6例发育不良性痣中2例阳性,25例良性痣均不表达.IMP3在黑素瘤中的表达明显高于Spitz痣及发育不良性痣(P<0.05),侵袭性黑素瘤表达明显高于原位黑素瘤(P<0.01).结论 IMP3可能是良性痣发展至恶性黑素瘤的一个生物学标志,在鉴别黑素瘤和良性痣之间存在一定的价值.     

黑素瘤中VEGF-D,MMP-7和MMP -9的表达

目的:确定黑素瘤组织中血管内皮生长因子D(VEGF-D)、基质金属蛋白酶- 7(MMP-7)和MMP-9表达水平及其与肿瘤侵袭和转移的关系.方法:应用免疫组化法检测16例黑素瘤和12例黑素痣组织中VEGF-D,MMP-7和MMP-9蛋白的原位表达,并与临床肿瘤的侵袭和转移进行相关分析.结果:黑素瘤组织中VEGF-D,MMP -7和MMP-9阳性表达率(75％,62.5％和56.3％)明显高于黑素痣组织(25％,16.7％,41.7％),在有淋巴转移的黑素瘤组织中,VEGF-D,MMP-7和MMP-9的表达(91.7％,66.67％和66.67％)明显高于无淋巴转移的黑素瘤组织(25％,50％和25％),均P ＜0.05.结论:VEGF-D,MMP-7和MMP-9与黑素瘤的侵袭和转移有关,它们的表达水平可作为预测肿瘤转移的指标,可为临床治疗提供靶点.     

胶原三螺旋重复蛋白1、β联蛋白和Wnt5a在黑素瘤不同阶段的表达及相关性研究北大核心CSCD

目的探讨胶原三螺旋重复蛋白1（CTHRC1）、β联蛋白和Wnt5a在色素痣和黑素瘤不同发展阶段中的表达,探讨三者在黑素瘤发生、发展过程中的可能作用及相关性。方法免疫组化SP法检测23例色素痣、14例原位黑素瘤、21例侵袭性黑素瘤和18例转移性黑素瘤组织中CTHRC1、β联蛋白和Wnt5a蛋白的表达,结合临床病理特征进行分析。结果色素痣和黑素瘤组织中CTHRC1的阳性表达率分别为34．8％、62．3％,两者比较,差异有统计学意义（P〈0．05）;β联蛋白的阳性表达率分别为21．7％、62．3％,两者比较,差异有统计学意义（P〈0．05）;Wnt5a的阳性表达率分别为34．8％、69．8％,两者比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。CTHRCl、13联蛋白的阳性表达与黑素瘤的浸润深度和淋巴结转移相关（P〈0．05）,wnt5a的阳性表达仅与淋巴结转移相关（P〈0．05）。黑素瘤中CTHRC1与β联蛋白之间以及CTHRC1与Wnt5a蛋白之间的阳性表达存在明显正相关（分别为r=0．798,P〈0．01;r=0．623,P〈0．01）。结论CTHRC1、β联蛋白和Wnt5a在黑素瘤的发生中起一定的作用,CTHRC1可能作为Wnt信号通路的辅助蛋白促进黑素瘤的发生和发展。     

皮肤恶性肢端黑素瘤中c-kit基因的表达及突变分析北大核心CSCD

目的 分析皮肤恶性肢端黑素瘤患者中c-kit基因突变的频率与类型及表达情况.方法 应用PCR、基因测序、免疫组化染色等方法检测115例皮肤恶性黑素瘤（CMM）患者、30例肢端黑素细胞痣患者及15例健康人皮肤组织标本中c-kit基因序列及c-kit蛋白表达情况.采用x2检验、Mann-WhitneyU检验、Spearman相关检验等统计学方法分析数据.结果 93例肢端CMM中84例（90.3％）表达c-kit蛋白,22例非肢端CMM中18例（81.8％）表达.58例肢端侵袭性CMM中,29例真表皮交界处肿瘤细胞c-kit蛋白表达强阳性,而8例真皮内呈侵袭浸润性生长的肿瘤细胞则不表达或弱表达c-kit蛋白;健康人皮肤组织中c-kit蛋白表达较弱;在30例肢端黑素细胞痣中19例（63.3％）阳性表达.c-kit蛋白在93例肢端CMM组的阳性表达率（90.3％）显著高于肢端黑素细胞痣组（63.3％）,两组差异有统计学意义（x2=12.14,P＜ 0.05）;71例侵袭性CMM中,c-kit蛋白在58例肢端CMM中阳性表达55例（94.8％）,在13例非肢端CMM中阳性表达11例,在肢端CMM的表达高于非肢端CMM,两组差异有统计学意义（x2=4.18,P＜ 0.05）.在原位、侵袭性、转移性肢端CMM组织中,c-kit蛋白表达水平与肿瘤的临床病理特征均未见明显相关（均P＞0.05）.115例CMM中检测到4例患者存在c-kit基因点突变,其中3例为L576P突变,1例为K642E突变,且均为肢端CMM,免疫组化显示弥漫性c-kit蛋白强阳性表达.结论 在侵袭性CMM中,c-kit蛋白在肢端CMM中的表达高于非肢端CMM.肢端CMM中检测到c-kit基因点突变,均为肢端型较常见的突变类型,但突变率较国外文献低.     

恶性黑素瘤和普通痣细胞痣组织中双链RNA依赖的蛋白激酶的表达

目的 探讨恶性黑素瘤和普通痣细胞痣组织中双链RNA依赖的蛋白激酶(PKR)的表达情况,并分析PKR与恶性黑素瘤的细胞增殖程度及临床病理参数的关系。方法 应用免疫组化法检测42例恶性黑素瘤及25例普通痣细胞痣组织中PKR及增殖细胞核抗原的表达。结果 恶性黑素瘤中PKR阳性表达率显著高于普通痣细胞痣组织。恶性黑素瘤中PKR的表达水平与增殖细胞核抗原的表达呈显著负相关;与患者性别、年龄、有无淋巴结转移及TNM分级等临床病理特征均无明显相关性。结论 PKR在恶性黑素瘤细胞增殖过程中具有重要作用。     

痣样黑素瘤三例临床及组织病理学分析

【摘要】 目的 探讨痣样黑素瘤的临床和组织病理学特征。方法 回顾性分析2000—2020年西京皮肤医院诊断的3例痣样黑素瘤患者的临床和组织病理资料。结果 3例痣样黑素瘤患者中,女2例,男1例,皮损初始表现为黑斑、丘疹。2例在手术切除后皮疹复发增大成斑块或新发结节样皮损。组织病理学检查：表皮及真皮内上皮样黑素细胞增生,细胞有异型性,部分细胞核深染。免疫组化结果显示,皮损内瘤细胞Melan-A、S100表达阳性;HMB45在真皮瘤细胞内弥漫阳性,局部阴性;Ki67增殖指数升高,细胞周期蛋白D1表达活跃。结论 痣样黑素瘤易误诊为色素痣或脂溢性角化病;对于组织学诊断为色素痣,但临床出现复发或者转移的患者,需高度警惕痣样黑素瘤的可能。     

骨桥蛋白在黑素瘤中的表达

目的研究骨桥蛋白(OPN)的表达与黑素瘤浸润、转移的关系。方法采用免疫组化SP法检测OPN在黑素瘤(30例)、黑素细胞痣(30例)、正常皮肤组织(15例)以及在黑素瘤A375细胞株和不同浓度乙酰肝素酶反义寡核苷酸转染的裸鼠黑素瘤移植瘤中的表达。结果 OPN在黑素瘤、黑素细胞痣及正常皮肤组织中阳性表达率分别为86.67%(26/30),13.33%(4/30)和0(0/15),黑素瘤组与黑素细胞痣组及正常皮肤组OPN的阳性表达率比较差异有统计学意义(P=0.000)。3种不同浓度的乙酰肝素酶反义寡核苷酸在转染的裸鼠体内恶性黑素瘤移植瘤中表达表现出不同程度的抑制作用,30μmol/L实验组的抑制作用最强。OPN在人黑素瘤A375细胞株中呈强阳性表达。结论 OPN在黑素瘤中的表达明显高于其在黑素细胞痣和正常皮肤中的表达;乙酰肝素酶反义寡核苷酸对裸鼠体内黑素瘤移植瘤中OPN的表达有显著抑制作用;OPN在A375细胞株中呈强阳性表达。     

血管内皮生长因子及β-连环蛋白在皮肤黑素细胞肿瘤中的表达

目的：检测黑素细胞痣及不同生长阶段恶性黑素瘤(简称恶黑)中血管内皮生长因子(VEGF)及β-连环蛋白(catenin)的表达,以探寻它们之间的关系及其临床病理意义。方法：用免疫组化链霉亲和素一生物素法(简称SP法)检测50例黑素细胞痣及65例皮肤恶黑中的VEGF及β-连环蛋白的表达水平。结果：VEG17在所有黑素细胞痣中表达阴性,而在皮肤恶黑的初始阶段、侵袭阶段、侵袭转移阶段、转移阶段、未转移阶段阳性率分别为33．3％、73．1％、87．5%、89．3％及50．0%。β-连环蛋白在所有黑素细胞痣中表达率为66％,在皮肤恶黑的初始阶段、侵袭阶段、侵袭转移阶段、转移阶段、未转移阶段阳性率分别为93．3％、65．40%、37．5％、35．7％、77．3％。结论：VEGF表达随皮肤恶黑的侵袭与转移程度有增加趋势;β-连环蛋白表达随皮肤恶黑的侵袭与转移程度有下调趋势;皮肤恶黑中的VEGF与β-连环蛋白表达无相关关系;VEGF与β-连环蛋白的检测对预测皮肤恶黑的预后有重要意义。     

乙酰肝素酶和基质金属蛋白酶-9蛋白在皮肤黑素瘤中的表达

目的探讨乙酰肝素酶和基质金属蛋白酶-9蛋白在皮肤黑素瘤中的表达及其意义。方法应用免疫组化S-P法检测乙酰肝素酶和基质金属蛋白酶-9蛋白在皮肤黑素瘤30例、交界痣30例及15例正常皮肤组织中的表达。结果皮肤黑素瘤中乙酰肝素酶(63.3%)和基质金属蛋白酶-9蛋白(73.3%)的阳性表达率明显高于交界痣(6.6%)和正常对照组(0)(P均<0.05),交界痣与正常对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论乙酰肝素酶和基质金属蛋白酶-9蛋白的高表达可能与皮肤黑素瘤的发生发展有关,有望作为治疗黑素瘤的靶点。     

乙酰肝素酶mRNA和蛋白在恶性黑素瘤皮损及A375细胞株中的表达

目的探讨乙酰肝素酶mRNA和蛋白在恶性黑素瘤皮损及A375细胞株中的表达及意义。方法选择恶性黑素瘤30例、黑素细胞痣30例、恶性黑素瘤A375细胞株及15例正常皮肤组织,分别采用原位杂交、免疫组化法检测皮损及细胞株中乙酰肝素酶mRNA及蛋白的表达。结果A375细胞株及19例(19/30,63.33%)恶性黑素瘤皮损中乙酰肝素酶mRNA呈阳性表达,2例(2/30,6.67%)黑素细胞痣皮损中乙酰肝素酶mRNA表达阳性,正常皮肤组织中无1例呈阳性表达;恶性黑素瘤皮损中乙酰肝素酶蛋白的阳性表达率与黑素细胞痣、与正常对照组相比,差异均有显著性意义(χ12=19.200,P=0.000;χ22=25.714,P=0.000)。乙酰肝素酶蛋白在恶性黑素瘤、恶性黑素瘤A375细胞株、黑素细胞痣及正常皮肤组织的表达情况与mRNA相一致。结论乙酰肝素酶mRNA和蛋白的高表达可能与恶性黑素瘤的发生发展有关,有望作为治疗黑素瘤的靶点。     

深部穿通性痣

报告2例深部穿通性痣.男、女患者各1例,年龄分别为8岁和50岁.临床上为单发的深蓝色结节.组织病理检查均表现为皮损呈楔形,界限清楚,底部较宽位于邻近表皮,其余部分从真皮上部沿毛囊、汗腺、血管和神经向下穿透真皮深部.高倍镜下,位于真皮深部的黑素细胞呈梭形,胞质丰富,内含黑素颗粒,并有异形性,但未见核有丝分裂象.免疫组化检查显示黑素细胞的胞质S-100蛋白和HMB-45均强阳性.符合深部穿通性痣的诊断.临床和组织病理上该病主要需与蓝痣和黑素瘤鉴别.     

皮肤色素痣与黑素瘤标本中弹力纤维染色对比观察

目的探讨皮肤黑素瘤、色素痣及Spitz痣组织中弹力纤维的表达情况及其意义。方法应用Weigert间二苯酚—碱性品红染色法检测皮肤黑素瘤、色素痣及Spitz痣中弹力纤维的表达。结果 51例色素痣中见弹力纤维广泛散布于痣细胞团间;30例Spitz痣中,28例见弹性纤维广泛散布于痣细胞团间,2例弹力纤维减少;53例皮肤黑素瘤中,50例肿瘤团块内弹力纤维基本消失,3例存在少量且散在弹力纤维,弹力纤维在皮肤黑素瘤中的表达显著低于色素痣组与Spitz痣组,差异有统计学意义(P0.05)。结论弹力纤维染色有助于皮肤黑素瘤与色素痣及Spitz痣的鉴别诊断。     

β联蛋白和淋巴样增强因子1在恶性黑素瘤中的表达

目的 探讨β联蛋白、淋巴样增强因子1在恶性黑素瘤中的表达及意义.方法 采用免疫组化PowerVision^TM二步法检测25例皮内痣、45例恶性黑素瘤中β联蛋白、淋巴样增强因子1的表达情况.结果 β联蛋白在恶性黑素瘤中异常表达率为73%,皮内痣为36%,两组差异有统计学意义;淋巴样增强因子1在恶性黑素瘤中阳性表达率为62.2%,皮内痣组为0,两组差异有统计学意义.肿瘤组织中淋巴样增强因子1高表达率与淋巴结转移、TNM分期密切相关(P<0.05),而β联蛋白异常表达率与淋巴结转移及TNM分期无明显关系;β联蛋白异常表达与淋巴样增强因子1高表达之间存在正相关(P<0.05).结论 β联蛋白、淋巴样增强因子1异常表达可能与恶性黑素瘤发病相关.     

核转录因子E2F6通过β联蛋白信号通路调控恶性黑素瘤细胞增殖和转移的机制研究

【摘要】 目的 研究核转录因子E2F6在人恶性黑素瘤组织和细胞系中的表达,及其对恶性黑素瘤细胞A375增殖、迁移和侵袭的影响。方法 收集重庆市中医院2012年1月至2017年12月皮肤科确诊的50例皮肤恶性黑素瘤和30例色素痣冻存组织及石蜡切片。通过 qRT-PCR分析 E2F6 mRNA在人恶性黑素瘤和色素痣组织及7株恶性黑素瘤细胞系（HM、A375、WM451、WM35、SK-MEL-1、Hs-695T、MDA-MB-435s）和色素痣细胞中的表达,免疫组化和Western印迹检测E2F6、β联蛋白在人恶性黑素瘤组织中的表达。采用脂质体转染法将E2F6抑制质粒和对照质粒转染至A375细胞,通过qRT-PCR和Western印迹验证E2F6基因的敲减效率。通过CCK8、软琼脂平板克隆实验、Transwell迁移和侵袭实验、3D细胞培养实验检测E2F6基因敲减对A375细胞增殖、迁移和侵袭的影响,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率,通过Western印迹检测总β联蛋白、活化β联蛋白、c-Myc和细胞周期蛋白D1等水平。两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验;采用Pearson相关系数分析皮肤恶性黑素瘤中E2F6和β联蛋白表达的相关性。结果 7株恶性黑素瘤细胞系E2F6 mRNA相对表达水平均高于色素痣细胞（均P < 0.001）。qRT-PCR显示,皮肤恶性黑素瘤组织中E2F6 mRNA的相对表达（0.000 55 ± 0.000 17）高于色素痣组织（0.000 18 ± 0.000 09,t = 3.22,P < 0.001）。免疫组化、Western印迹显示,皮肤恶性黑素瘤组织中E2F6的相对表达水平高于色素痣组织（均P < 0.001）,而β联蛋白的相对表达水平低于色素痣组（均P < 0.001）。相关性分析显示,恶性黑素瘤组织中E2F6蛋白与β联蛋白的表达呈负相关（免疫组化：r = -0.56,Western印迹：r = -0.63,均P < 0.01）。敲减A375细胞E2F6基因后,E2F6抑制组E2F6 mRNA、蛋白相对水平低于对照组（t = 3.38、2.76,P < 0.001）。CCK-8实验显示,继续培养后48 h,E2F6抑制组细胞增殖能力低于对照组（t = 4.58,P < 0.01）;软琼脂平板实验显示,E2F6抑制组细胞相对克隆比低于对照组（t = 2.26,P＜0.001）;迁移实验显示,E2F6抑制组穿出小室细胞数（165 ± 23）低于对照组（376 ± 22,t = 3.14,P < 0.01）;侵袭实验显示,E2F6抑制组穿出小室细胞数（96 ± 11）低于对照组（315 ± 31,t = 2.12,P < 0.01）;3D细胞培养实验显示,E2F6抑制组细胞形态发生明显变化,侵袭性伪足消失。流式细胞仪检测显示,E2F6抑制组G0 - G1期细胞比例、细胞凋亡率均高于对照组（均P < 0.001）。Western印迹显示,E2F6抑制组β联蛋白水平、活化β联蛋白水平及其下游靶基因蛋白c-Myc、细胞周期蛋白D1水平均低于对照组（P < 0.001）,P21蛋白水平高于对照组（P＜0.001）;E2F6抑制组上皮-间质转化相关分子波形蛋白、神经钙黏着蛋白水平低于对照组（P < 0.001）,而上皮钙黏着蛋白水平高于对照组（P < 0.001）。结论 核转录因子E2F6在恶性黑素瘤中高表达,敲减A375细胞E2F6基因可能通过拮抗β联蛋白信号抑制细胞增殖、迁移和侵袭。     

基质金属蛋白酶7在恶性黑素瘤中的表达

目的 探讨基质金属蛋白酶7（MMP7）的表达与恶性黑素瘤浸润、转移的关系。方法 采用免疫组化SP法研究MMP7在恶性黑素瘤（30例）、交界痣（30例）、正常人皮肤（15例）组织中的表达，并观察其在恶性黑素瘤A375细胞株和不同浓度乙酰肝素酶反义寡核苷酸转染的裸鼠体内恶性黑素瘤移植瘤中的表达情况。结果 MMP7在恶性黑素瘤组、交界痣组及正常人皮肤组中的阳性表达率分别为83.33%（25/30）、6.67%（2/30）和0，恶性黑素瘤组与交界痣组MMP7的阳性表达率比较，χ2 = 35.62，P < 0.01；交界痣组与正常人皮肤组比较，差异无统计学意义。10、20、30 μmol/L乙酰肝素酶反义寡核苷酸对裸鼠体内恶性黑素瘤移植瘤MMP7表达表现出不同程度的抑制作用，30 μmol/L组的抑制作用最强，与其他2个组相比，差异均有统计学意义（P < 0.05）。MMP7在A375细胞株中呈强阳性表达。结论 MMP7在恶性黑素瘤中的表达明显高于其在交界痣和正常人皮肤；乙酰肝素酶反义寡核苷酸对裸鼠体内恶性黑素瘤移植瘤中MMP7的表达有显著抑制效应；MMP7在A375细胞株中呈强阳性表达。     

黑素瘤中VEGF—D，MMP-7和MMP-9的表达

目的：确定黑素瘤组织中血管内皮生长因子D（VEGF—D）、基质金属蛋白酶-7（MMP-7）和MMP-9表达水平及其与肿瘤侵袭和转移的关系。方法：应用免疫组化法检测16例黑素瘤和12例黑素痣组织中VEGF—D,MMP-7和MMP-9蛋白的原位表达,并与临床肿瘤的侵袭和转移进行相关分析。结果：黑素瘤组织中VEGF—D,MMP-7和MMP-9阳性表达率（75％,62．5％和56．3％）明显高于黑素痣组织（25％,16．7％,41．7％）,在有淋巴转移的黑素瘤组织中,VEGF—D,MMP-7和MMP-9的表达（91．7％,66．67％和66．67％）明显高于无淋巴转移的黑素瘤组织（25％,50％和25％）,均P〈0．05。结论：VEGF—D,MMP-7和MMP-9与黑素瘤的侵袭和转移有关,它们的表达水平可作为预测肿瘤转移的指标,可为临床治疗提供靶点。     

恶性黑素瘤和普通痣细胞痣细胞外信号调节激酶途径相关蛋白的研究

目的 探讨恶性黑素瘤(MM)和普通痣细胞痣细胞外信号调节激酶(ERK)途径相关蛋白ERK1和ERK2以及细胞周期素D1(Cyclin D1)蛋白的表达情况,分析这3种蛋白与MM的临床病理关系。方法 采用免疫组化SP法对30例MM和13例普通痣细胞痣中ERK1、ERK2和Cyclin D1蛋白的表达进行检测,并进行临床病理相关性分析。结果 ERK1、ERK2和Cyclin D1在MM组织中表达较普通痣细胞痣组织明显升高(P<0.01),ERK1、ERK2和Cyclin D1与MM的Clark分级和Breslow厚度无明显相关性,ERK1和ERK2与Cyclin D1在MM组织中表达显著相关。结论 MM中ERK途径得到了过度激活,并可能促使Cyclin D1表达增加,因此它们在MM的发病机制中可能起到一定作用,而它们在普通痣细胞中仅在A型痣细胞表达增加。