脉通胶囊对大鼠纤溶系统的影响

目的:研究脉通胶囊对血液纤溶系统的影响.方法:用体外血凝块溶解实验观察脉通胶囊溶解血凝块的作用及用相应试剂盒测定血栓模型大鼠血浆纤溶酶原(PLG)和纤维蛋白原(Fbg)含量.结果:脉通胶囊能使体外血凝块重量减少及降低纤溶酶原和纤维蛋白原的含量.结论:脉通胶囊具有激活大鼠纤溶系统的作用.     

活血化瘀中药的纤溶和纤溶抑制作用

分别用尿激酶型纤溶酶原激活剂(u-PA)、组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)激活纤溶酶原的纤溶试验,观察了20余种常用活血化瘀药对纤溶的影响。结果表明,11味中药的水浸液在含纤溶酶原和不含纤溶酶原的纤维蛋白板上都出现同样程度的纤溶活性,按由强到弱的排列是益母草、三棱、水蛭、五灵脂、炮山甲、姜黄、川穹、红花、土鳖虫、桃仁、元胡,但未发现对t-PA、u-PA激活纤溶的增强作用。部分药物不同程度抑制t-PA、u-PA激活纤溶。其中,完全抑制t-PA激活纤溶的前10味由强到弱是大黄、复方丹参片、毛冬青片、丹参、赤芍、泽兰、丹参注射液、牛膝、红花、炮山甲;不完全抑制t-PA激活纤溶的前10味由强到弱是毛冬青片、赤芍、复方丹参片、丹参、桃仁氯仿液、牛膝、大黄、泽兰、丹参注射液、益母草;不完全抑制u-PA激活纤溶的前10味由强到弱是毛冬青片、赤芍、复方丹参片、丹参、大黄、桃仁氯仿液、牛膝、泽兰、丹参注射液、益母草。推测抑制纤溶系统活性的活血化瘀药也能调节其它丝氨酸蛋白酶的活性,从而对控制凝血、纤溶平衡、抗炎症、抗肿瘤的生长与转移都可能发挥作用。     

蚯蚓纤溶酶分离及部分生化性质的研究

采用亲合层析法对蚯蚓纤溶酶进行初步纯化,并对其生化特性进行鉴定。结果表明：经纯化的蚯蚓溶酶其分子量在20KD－30KD之间,对人血纤维蛋白平板具有良好的溶解作用,并考察了其热稳定性。纤溶酶能激活血栓中的纤溶酶原,从而使血栓溶解,直接作用于血栓表面,使形成血栓的纤维蛋白溶解成小分子,达到抗血栓之目的。     

蚯蚓纤溶酶分离及部分生化性质的研究

采用亲合层析法对蚯蚓纤溶酶进行初步纯化,并对其生化特性进行鉴定.结果表明经纯化的蚯蚓纤溶酶其分子量在20KD-30KD之间,对人血纤维蛋白平板具有良好的溶解作用,并考察了其热稳定性.纤溶酶能激活血栓中的纤溶酶原,从而使血栓溶解,直接作用于血栓表面,使形成血栓的纤维蛋白溶解成小分子,达到抗血栓之目的.     

基于磁珠配体垂钓和液相色谱-质谱联用技术的威廉环毛蚓抗血栓大分子活性成分研究

目的 通过构建靶蛋白固定化磁珠,从威廉环毛蚓Pheretima guillemi中垂钓出与靶蛋白（纤维蛋白原、纤溶酶原）直接作用的抗血栓活性大分子成分,并经液相色谱-质谱联用（LC-MS/MS）技术鉴定。方法 优化并合成纤维蛋白原、纤溶酶原固定化羧基磁珠,分别通过固定化量、透射电镜、傅里叶红外光谱仪、激光纳米粒度分析仪表征功能化磁珠的靶蛋白固定量、微观形态、官能团及表面带电性;利用功能化磁珠从威廉环毛蚓抗血栓部位DPf3中垂钓与靶蛋白直接作用的抗血栓大分子活性成分,洗脱后经LC-MS/MS技术分析,并结合威廉环毛蚓物种蛋白质数据库比对鉴定。结果 靶蛋白固定化磁珠的最佳制备方案为将纤维蛋白原（0.4 mg/mL）或纤溶酶原（1 mg/mL）与磁珠于4 ℃混旋孵育8 h,纤维蛋白原和纤溶酶原的最大偶联量分别为（9.84±2.17）μg/mg和（7.24±0.91）μg/mg;经表征,靶蛋白均已成功固定于磁珠表面。DPf3经纤维蛋白原、纤溶酶原固定化磁珠垂钓所得洗脱液经扫描比对,分别鉴定到20种和27种蛋白质,多属于丝氨酸蛋白酶类成分。结论 通过磁珠配体垂钓策略和LC-MS/MS技术可从威廉环毛蚓中快速筛选和鉴定目标生物活性大分子,可为动物类中药大分子的分离鉴定提供参考。     

一种新型蚯蚓纤溶酶的研究

采用加提取剂的匀浆、盐析、超滤及层析方法从一种环毛蚓中获得一种新型纤溶酶。此酶分子量为22000,为单链蛋白。它不仅有强烈的直接溶解血栓及人纤维蛋白活性,而且还有纤溶酶原激活作用;动物试验表明此酶的毒副作用很小。本方法获得的酶的活性、纯度及得率都很高。     

丹参在纤洛系统中的作用及其机制

目的:研究丹参是否能提高纤溶酶的活性,促进纤维蛋白溶解.方法:用纤溶激活试验、补体免疫溶血试验、红细胞C3bR功能表达调节试验、抗原抗体结合干预试验,观察丹参不同制剂对纤溶、补体活性、红细胞C3bR功能、抗原抗体反应的影响.结果:①不同丹参制剂在含有和不含纤溶酶原的纤维蛋白板上均未出现纤溶活性,也未发现试验药物对t-PA、u-PA激活纤溶的增强作用.②丹参≥0.3 mg/ml、复方丹参片≥0.3 mg/ml、丹参注射液≥1.9 mg/ml对10 IU/ml t-PA、0.3 IU/ml u-PA激活纤溶的抑制率均≥50%,丹参≥4.0 mg/ml、复方丹参片≥3.6 mg/ml、丹参注射液≥18.8 mg/ml均完全抑制t-PA激活纤溶.③丹参≥64.1 mg/ml、复方丹参片≥25.0 mg/ml、丹参注射液≥75.0 mg/ml时引起羊红细胞溶解,丹参≥0.641 mg/ml、复方丹参片≥1.25 mg/ml、丹参注射液≥30.0 mg/ml抑制补体免疫溶血活性≥50%,丹参≥6.41 mg/ml、复方丹参片≥10.0 mg/ml、丹参注射液≥75.0 mg/ml完全抑制补体免疫溶血活性.④一定浓度的丹参制剂作用于HRBC后,不影响HRBC-Z花环率,但能导致HRBC-C3bR花环率极显著降低,复方丹参片、丹参注射液在较高浓度时使HRBC-C3bR花环率增加,在较低浓度时可减少HRBC-C3bR花环率.⑤丹参制剂在一定浓度范围,分别抑制Pg、C1INH、C4、ALb的抗原抗体结合反应,对ALb、Pg的抗原抗体结合反应抑制作用更强,对C3、PA的抗原抗体结合反应无明显影响.结论:丹参无直接纤溶活性,未见增强纤溶激活和提高纤溶酶的活性.丹参在一定浓度范围,能不同程度抑制t-PA、u-PA激活纤溶活性,抑制补体免疫溶血活性,使HRBC-C3bR活性减弱,抑制Pg、C1INH、C4、ALb的抗原抗体结合反应.在纤溶和补体系统之间,丹参可能主要作用于纤溶系统.     

丹参粉末衍射鉴定与丹参酮ⅡA成分定量分析方法研究

目的:建立丹参中药材粉末衍射鉴定分析技术与丹参酮Ⅱ_A成分的衍射定量分析方法.方法:采用粉末X射线衍射技术获取9个不同产地或来源的丹参样品及1个丹参对照品的粉末X射线衍射Fourier指纹图谱,通过对丹参酮ⅡA对照品的单一成分的衍射Fourier图谱获取其特征标记峰;通过高效液相色谱技术定量检测10个样品中的丹参酮Ⅱ_A成分含量值;分析计算丹参中药材粉末X射线衍射Fourier图谱中的衍射特征峰强度与丹参酮ⅡA含量关系.结果:粉末X射线衍射不仅可以给出反映中药材粉末的Fourier指纹图谱,并可实现对中药材中千分之一以上化学成分的定量含量检测.结论:利用粉末x射线衍射Fourier分析方法,可用于丹参中药材的粉末X射线衍射鉴定及丹参酮Ⅱ_A的定量成分检测.     

黄黑小斑蝥纤溶活性蛋白分离纯化及性质研究

目的以药用斑蝥(Mylabris)为原料,从其中分离纯化得到一种具有纤溶性的蛋白MFP(Fibrinolyric Protein of Myla-bris)。方法采用硫酸铵分段盐分、透析和DEAE-32纤维素离子交换层析等纯化方法进行分离纯化,SDS-PAGE电泳测定其分子量,纤维蛋白平板法测定其纤溶活性。结果该目的蛋白相对分子质量约为95.5 kD,其水解纤维蛋白的相对比活力为14.7 u/mg;该成分在35℃下最稳定,65℃及以上活性丧失,金属离子K+,Na+对其活力无影响,Mn2+,Ca2+对其有明显抑制作用,最适pH为6.0。结论研究分离出的斑蝥活性蛋白确为一种具有纤溶性的蛋白组分,并证明其纤溶作用机理为纤溶酶原激活;体外溶栓实验表明,其对血栓的溶解具有一定作用;溶血实验结果表明,该纤溶活性蛋白溶液无溶血反应。     

复方丹参注射液对急性脑梗死患者纤溶系统的影响

目的:探讨复方丹参注射液对急性脑梗死患者神经功能和纤溶系统的影响。方法:将72例患者随机分为对照组和观察组各36例。对照组给予西医常规治疗,观察组在对照组治疗基础上加用复方丹参注射液,每次20 mL,加入250 mL注射用生理盐水中静脉滴注,每天1次。2组疗程均为14天。采用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评估神经功能缺损严重程度,分别于第0天、7天、14天评价;检测治疗前后血浆组织纤溶酶原激活物(t-PA)、组织纤溶酶原抑制物(PAI)、纤维蛋白原(FIB)和D-二聚体(D-D)水平。结果:总有效率观察组88.89%,对照组69.44%,观察组优于对照组(P0.05);治疗第7天,2组NIHSS评分均较治疗前下降(P0.05);治疗第14天,2组NIHSS评分继续下降,观察组NIHSS评分低于对照组(P0.01);治疗后2组PAI、FIB和D-D水平均较治疗前下降,观察组低于对照组(P0.01);治疗后2组t-PA均较治疗前上升,观察组高于对照组(P0.01)。结论:复方丹参注射液能通过调节纤溶系统功能,有效溶解血栓,抑制血栓形成,从而改善病变部位的血供,促进了神经功能的恢复。     

加强u-PA纤溶途径与基质金属蛋白酶互促反应的研究概况

纤溶是纤溶酶原(PLG)经特异性激活物使其转化为纤溶酶(PL),导致纤维蛋白(Fb)溶解或降解的过程。近年研究表明尿激酶型纤溶酶原激活物(u-PA)除了纤溶作用外,还参与细胞与细胞,细胞与细胞外基质(ECM)的基质金属蛋白酶(MMP)之间的相互反应和调节[1-2]。协同研究它们的互促反应将会促进细胞微环境、炎症和免疫应答、血管新生、细胞迁移和肿瘤转移方面的新认识,应引起对它们的重视。1 u-PA纤溶u-PA纤溶途径由u-PA、尿激酶型纤溶酶原激活物受体(u-PAR)、纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)、PAI-2和PLG组成。PLG在u-PA作用下转化为活性…     

21种中药对体外纤维蛋白溶解作用的观察

本文报告21种活血化瘀和补气药对体外纤维蛋白溶解作用的观察,结果12种有增纤溶作用,3种有抗纤溶作用;大多数活血化瘀药配伍有增纤溶作用,活血化瘀药与补气药配伍则增纤溶作用减弱。     

UPLC-QE/MS法分析丹参酒炙前后5种质变化合物

目的通过UPLC-QE/MS法分析丹参Salvia miltiorrhiza Bge.酒炙前后5种质变化合物(迷迭香酸、丹酚酸B、隐丹参酮、二氢丹参酮Ⅰ、丹参酮Ⅱ_A)的转化机制。方法采用已知对照品模拟炮制技术,制备丹参酒炙前后5种质变化合物的模拟炮制品,其80%甲醇溶液的分析采用Halo C_(18)柱(100 mm×2.1 mm,2.7μm);流动相乙腈-水,梯度洗脱;柱温45℃;体积流量0.25 mL/min;检测波长280 nm。结果丹参中5种主要成分发生了质变,丹酚酸B模拟炮制品中检出了丹参素、原儿茶醛、咖啡酸、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸C;隐丹参酮模拟炮制品中检出了丹参酮Ⅱ_A;二氢丹参酮Ⅰ模拟炮制品中检出了极少的丹参酮Ⅰ;丹参酮Ⅱ_A模拟炮制品中检出了二氢丹参酮Ⅰ、丹参酮Ⅰ;迷迭香酸模拟炮制品中检出了丹参素、咖啡酸、阿魏酸。结论丹参酒炙后主要酚酸类成分和丹参酮类成分均发生了质变。     

土鳖虫对大鼠抗凝血和促纤溶作用研究

目的：研究土鳖虫的抗凝、促纤溶作用。方法：土鳖虫给大鼠灌胃7天后测定凝血和纤溶两方面的指标。结果：土鳖虫在抗凝血方面未能表现出明显作用。在纤溶方面，土鳖虫表现出明显的血液纤溶酶原（Plg）活性提高和纤溶酶原激活剂（t-PA）活性提高。促进纤溶酶原活性的成分为非水溶性物质，而促进纤溶酶原激活物的成分存在于水提物中。结论：土鳖虫的作用主要在于促进纤溶功能，而不在于抗凝血。     

冠心病患者凝血纤溶系统的异常及中医药对其影响

冠心病患者凝血纤溶系统异常,其机制主要涉及血管内皮细胞损伤、凝血酶、抗凝血酶Ⅲ(ATⅢ)、凝血酶-抗凝血酶Ⅲ复合物(TAT)、凝血因子Ⅶ、纤维蛋白肽A(FPA)、纤维蛋白原(FIB)、冯维勒布兰德因子(vWF)、血栓调节蛋白(TM)、组织型纤溶酶原激活物(t-PA)、纤溶酶原活化剂抑制物(PAI)等相关因素,单味中药及结合辨证的中药复方对冠心病患者凝血纤溶系统的异常具有调节作用.     

应用均匀设计筛选补阳还五汤处方

以纤维蛋白溶解活性,纤溶酶活性为考察指标,采用均匀设计的方法,对不同药物配比的补阳还五汤进行组方考察。优化结果表明:补阳还五汤原方的药物配比是合理的。     

复方丹参黏附微丸与普通微丸中隐丹参酮与丹参酮ⅡA体外溶出对比研究

[目的]建立复方丹参微丸中脂溶性成分隐丹参酮与丹参酮ⅡA含量测定方法,并对比不同工艺制备的3种复方丹参微丸（冰片包合复方丹参黏附微丸、冰片不包合复方丹参黏附微丸、普通微丸）中隐丹参酮与丹参酮ⅡA体外溶出度的差异。[方法]采用高效液相色谱（HPLC）法测定3种复方丹参微丸中隐丹参酮与丹参酮ⅡA的含量,计算溶出度,并绘制溶出度曲线,采用相似因子对比不同微丸中这两种成分的体外溶出差异性。[结果]丹参类的脂溶性成分累积溶出度均较低。其中,两种黏附微丸隐丹参酮溶出行为较为相似,24 h的累积溶出度均在40%左右,普通微丸中隐丹参酮的溶出行为与黏附微丸具有明显的差异性,其累积溶出度为64.05%。两种黏附微丸的隐丹参酮溶出更符合Higuchi方程,普通微丸更符合Peppas模型,n<0.43,均符合Fickian扩散。3种制剂中丹参酮ⅡA的溶出过程均较缓慢,3个制剂的溶出行为比较相似,累积溶出曲线接近重合,3种制剂的累积溶出度基本一致,均在40%左右。3种微丸更符合Higuchi方程,同样属于Fickian扩散。[结论]黏附微丸具有一定的缓释效果,丹参类脂溶性成分中,由于溶出度的限制,体外溶出实验评价隐丹参酮缓释效果更为明显。     

从血液制品组分Ⅲ中制备人纤溶酶原

目的 建立制备人纤溶酶原方法。方法 血液制品组分Ⅲ经磷酸盐缓冲液溶解、聚乙二醇(PEG)4000沉淀及8000r／min离心后，Lysine Sepharose—4B和Sephacrlyl S200层析纯化人纤溶酶原。结果 纯化的纤溶酶原在SDS—PAGE电泳上呈单一条带。结论 本纯化方法简单易行适合规模化生产。     

纤溶酶原激活剂与抑制剂的测定方法和临床意义

组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)和其抑制剂(PAI-1)是纤溶系统的主要成分,是纤溶系统关键性调节物质,在纤溶系统的活化过程中占有重要地位。两者之间的动态平衡对维持正常的血液流动有着重要意义,如失衡将导致出血或血栓形成。近年来,对t-PA和PAI的研究日益深入,笔者就其测定方法及     

纤溶酶原激活剂与抑制剂的测定方法和临床意义

组织型纤溶酶原激活剂（t-PA）和其抑制剂（PAI-1）是纤溶系统的主要成分，是纤溶系统关键性调节物质，在纤溶系统的活化过程中占有重要地位。两者之间的动态平衡对维持正常的血液流动有着重要意义，如失衡将导致出血或血栓形成。近年来，对t-PA和PAI的研究日益深入，笔者就其测定方法及与疾病发生发展的关系探讨如下。