PCR法与ELISA法检测HBV的比较

ＰＣＲ法与ＥＬＩＳＡ法检测ＨＢＶ的比较徐芸应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测２４３份人血清的ＨＢＶ－ＤＮＡ，并同时与ＥＬＩＳＡ法检测的乙肝病毒感染标志物（ＨＢＶＭ）的结果进行了比较，现将结果报告如下。１材料和方法１．１血清标本１９６份血清标本来自我院肝炎...     

戊型肝炎病毒核酸逆转录—套式聚合酶链反应法的建立及应用

应用戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）开放读框１（ＯＲＦ１）和开放读框２（ＯＲＦ２）区的两对寡核苷酸作为内外引物，建立了逆转录－套式聚合酶链反应（ＲＴ－ｎＰＣＲ）检测ＨＥＶＲＮＡ的方法，用本法检测２只人工感染ＨＥＶ猕猴的１１份系列血清，发现该２只猕猴地感染后第六天和第九天ＨＥＶＲＮＡ阳转，并持续至感染后第十七和第二十二天，检测４１例急性散发性戊型肝炎病人血清，ＨＥＶＲＮＡ阳性率为６８．３％（２８／４１），发病     

戊型肝炎病毒核酸逆转录－套式聚合酶链反应法的建立及应用

应用戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）开放读框１（ＯＲＦ１）和开放读框２（ＯＲＦ２）区的两对寡核苷酸作为内外引物，建立了逆转录－套式聚合酶链反应（ＲＴ－ｎＰＣＲ）检测ＨＥＶＲＮＡ的方法。用本法检测２只人工感染ＨＥＶ猕猴的１１份系列血清，发现该２只猕猴分别于感染后第六天和第九天ＨＥＶＲＮＡ阳转，并持续至感染后第十七天和第二十二天。检测４１份急性散发性戊型肝炎病人血清，ＨＥＶＲＮＡ阳性率为６８．３％（２８／４１），发病后１～１０天、１１～２０天和２１～３４天的血清ＨＥＶＲＮＡ阳性率分别为７２．７％（１６／２２）、７０．０％（７／１０）和５５．５％（５／９）。提示ＨＥＶ血症持续时间较短，随病程延长而下降     

PCR检测乙型肝炎患者血清HBV DNA

ＰＣＲ检测乙型肝炎患者血清ＨＢＶＤＮＡ湖南省儿童医院（４１０００７）李梨平湖南中医学院第一附属医院（４１０００７）王伟华本文应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术直接检测病毒性肝炎患者血清中的ＨＢＶＤＮＡ，以探讨ＰＣＲ技术在ＨＢＶ感染诊断中的应用以及ＨＢＶＤ...     

用聚合酶链反应研究乙型肝炎病毒的灭活

建立测定乙肝病毒脱氧核糖核酸（ＨＢＶ ＤＮＡ）的聚合酶链反应－溴乙锭法（ＰＣＲ－ＥＢ），该方法特异性好，灵敏度为１ｐｇＨＢＶ ＤＮＡ，可能检出ＨＢＶ敏感动物黑猩猩的最小感染量。应用ＰＣＲ－ＥＢ法测定氯消毒剂对ＨＢＶ的灭活作用表明，有效氯１２５０ｍｇ／Ｌ作用６０分钟或２ ５００ｍｇ／Ｌ作用３０分钟可使１０倍ＰＣＲ灵敏度的纯化ＨＢＶ ＤＮＡ转阴；有效氯２ ５００ｍｇ／Ｌ作用３０分钟或１ ２５０ｍｇ／     

应用聚合酶链反应（PCR）检测血清HBV—DNA

用ＰＣＲ技术检测２１３分血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ，ＥＬＩＳＡ法检测其血清五项标志（ＨＢＶＭ）。结果表明，在不同类型的ＨＢＶ感染标志物中其血清ＰＣＲ结果有所不同。１０例健康正常人血清无１例检出ＨＢＶ－ＤＮＡ，２０３例免疫标志各异的血清共检出５４例存在ＨＢＶ－ＤＮＡ。     

齿科器械丙型肝炎病毒污染的调查

因齿科器械受病原体污染而导致医院获得性感染（医院感染），在口腔专科发生率很高。由于经过了一般消毒的齿科器械所污染的ＨＣＶ量极微，传统的、常规的方法难以获得监测结果，因此研究筛选实用有效的监测齿科器械受ＨＣＶ污染的方法，具有非常重要的实际意义。逆转录．聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术在检测病毒等微量微生物方面具有巨大的效能，将ＲＥ－ＰＣＲ用做监测齿科器械受ＨＣＶ污染的方法，是非常有效的，报道如下。１材料与方法１．１实验分组经０．１％苯扎溴铵（新洁尔灭）浸泡消毒或７０％酒精擦拭消毒；使用后未经消毒；…     

PCR法检测乙肝病毒携带者与ELISA法的比较

ＰＣＲ法检测乙肝病毒携带者与ＥＬＩＳＡ法的比较吴新科（滁州市医学科学研究所２３９００１）聚合酶链反应（ＰＣＲ）是模拟天然ＤＮＡ复制过程的体外基因扩增技术，具有高度的特异性、选择性和敏感性，现已广泛用于临床诊断。本文通过ＰＣＲ检测乙肝病毒（ＨＢＶ－ＤＮ...     

加热与洗涤法对HBV,HCV血清标志的影响

采用ＥＬＩＳＡ和聚合酶链反应（ＰＣＲ），对经６０℃１０ｈ加热的ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗－ＨＢＣ及抗－ＨＣＶ阳性血清和洗涤４次的ＲＢＣ洗涤及放散液的血清标志及ＨＢＶＤＮＡ、ＨＣＶＲＮＡ进行了检测。结果，６０℃加热１０ｈ用ＥＬＩＳＡ检测血清标志均由强阳性转为阳性，ＰＣＲ检测ＨＢＶＤＮＡ及ＨＣＶＲＮＡ均为阴性；洗涤液用ＥＬＩＳＡ和ＰＣＲ检测血清标志及ＨＢＶＤＮＡ、ＨＣＶＲＮＡ均呈阴性反应，放散液用ＥＬＩＳＡ检测阴性，用ＰＣＲ检测ＨＣＶＲＮＡ１０份标本９份阴性，１份阳性。提示６０℃加热１０ｈ和洗涤ＲＢＣ可灭活或去除血清中大部分ＨＢＶ、ＨＣＶ及其血清标志。     

HCV体外感染多种细胞株的观察

目的 寻找ＨＣＶ体外感染的细胞培养系统。方法 选用ＨＣＶ ＲＮＡ阳性血清感染人单核细胞株（Ｕ９３７）、人Ｔ淋巴细胞株（Ｍｏｌｔ－４）、人胆囊细胞株（Ｋｉｒｌｉｃｈ）、猪肾细胞株（ＰＫ１５）、鼠睾丸细胞株（ＳＴＥ）、人肝癌细胞株（ＨｅｐＧ２、Ｈｅｐ３Ｂ）等７种细胞。应用ＲＴ－ＰＣＲ法检测ＨＣＶ ＲＮＡ在这种７种细胞中的感染和复制情况。结果 ７种细胞中均能检测到ＨＣＶ ＲＮＡ正链，并且在Ｕ９３７、Ｍｌ     

山东地区HGV—RNA检测及部分核酸序列测定

目的 了解山东地区慢性丙型肝炎（ＣＨＣ）患者中庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）感染的状况，并测定其结构基因ＣＥ１区部分核苷酸序列。方法 用逆转录套式聚合酶链反应法（ＲＴ－ｎＰｃＲ）检测ＨＧＶＲＮＡ，并对部分阳性血清扩增的产物采用ＰＣＲ技术片段直接克隆法测定。结果 从１１６例慢性丙型肝炎患者血清中检出ＨＧＶＲＮＡ阳性３１例（２６．７％），其中１例患者ＨＧＶＣＥ１区部分核苷酸序列与中国第一株Ｕ７５３５６及另一例     

聚合酶链反应检测HBV DNA在HBV不同血清免疫学标志组合中的应用价值

乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染是一种世界性传染病，我国为高流行区，约1亿人口为乙型肝炎表面抗原携带者。随着聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术的推广应用，对患者体内ＨＢＶ复制及传染性有了更深刻的认识，现将本研究应用ＰＣＲ检测ＨＢＶＤＮＡ在ＨＢＶ不同血清免疫学标志中的分布结果报告如下。一、材料与方法：（1）标本来源：135份血清均来自本站实验室门诊，凡采用聚合酶链反应检测ＨＢＶＤＮＡ且同时检查ＨＢＶ血清免疫学标志者，静脉采血2ｍｌ，分离血清置-20℃备用。（2）试剂及方法：ＨＢＶＤＮＡ（ＰＣＲ法）购自复旦大学希格尔有限公…     

动脉粥样硬化血管组织中的巨细胞病毒感染

为探讨巨细胞病毒（Ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ，ＣＭＶ）感染与动脉粥样硬化的相关性，应用聚合酶链反应（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）技术及二次ＰＣＲ法对病例组２６例动脉粥样硬化血管组织石蜡标本和对照组２３例正常血管组织石蜡标本进行检测。结果：应用传统ＰＣＲ技术检测到病例组１７例ＣＭＶＤＮＡ阳性，阳性率为６５４％（１７／２６），对照组５例阳性，阳性率为２１７％（５／２３）；应用二次ＰＣＲ法检测到病例组２０例阳性，阳性率７６９％（２０／２６），对照组８例阳性，阳性率３４８％（８／２３）。结果表明，ＣＭＶ潜伏感染与动脉粥样硬化具有密切联系     

多基因PCR检测产毒性大肠杆菌和志贺氏菌的研究

为了提高普通的单基因ＰＣＲ检测致病性肠道杆菌的时效，采用ＥＴＥＣ４４８１３（ＬＴ）、ＥＴＥＣ１９４４９（ＳＴ）和福氏２ａＴ３２（ｉｐａＨ）３个标准株为模板，建立了检测产毒性大肠杆菌（ＬＴ，ＳＴ）和志贺氏菌的三基因ＰＣＲ方法。并分别用相应单基因ＰＣＲ方法标记的探针斑点杂交标准株ＥＴＥＣ４４８１５（ＬＴ）、工程株ＰＳＬＭ００４（ＳＴ）和标准株４８０２５１１（ｉｐａＨ）。杂交的结果都是阳性，证实了这个多基因ＰＣＲ扩增是特异的。并用此三基因ＰＣＲ反应系统检测１１３株ＥＴＥＣ和志贺氏菌，结果是ＬＴ２５株、ＳＴ１６株、ＬＴ和ＳＴ共３０株及ｉｐａＨ４２株。在几种病原体可能共存的样本中，用一次ＰＣＲ就能解决病原体的检测和鉴别问题，比单基因ＰＣＲ更快速、经济。     

戊型肝炎患者病毒血症的研究

为了更全面地了解戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）的感染过程，从ＨＥＶ开放读框１（ＯＲＦ１）区设计两对寡核苷酸引物，建立逆转录－套式聚合酶链反应（ＲＴ－ｎＰＣＲ），对６２例戊型肝炎患者发病后５３１份血清进行ＨＥＶＲＮＡ检测。结果显示，阳性患者占７１％。全程随访３２例患者２８８份系列血清，发现阳性２４例（７５％），其阳性率随病程延长而下降，平均持续时间为发病后２０．６天。观察４４例血清ＨＥＶＲＮＡ阳性患者，有３６例（８１．８％）在血清转氨酶和总胆红素水平开始回落时仍呈阳性；３９例（８８．６％）同时检测到抗－ＨＥＶ。ＨＥＶ血症的阳性率及阳性持续时间与血清转氨酶、总胆红素及抗体应答水平无直接相关     

用多基因PCR检测和区分不同群型霍乱病原菌

目的 建立一种快速、敏感的诊断方法,用于检测和区分霍乱弧菌Ｏ１群古典型（ＣＶＣ）,埃尔托型（ＥＶＣ）、Ｏ１３９群和非Ｏ１和Ｐ１３９群,方法 分别针对霍乱弧菌肠毒素Ａ亚单位（ｃｔｘＡ）基因,Ｏ１３９群特异基因、霍乱弧菌溶血素Ａ亚单位（ｈｌｙＡ）基因和毒力协同调节菌毛Ａ亚单位（ｔｃｐＡ）基因设计引物,建立多基因ＰＣＲ方法。ＰＣＲ产物经电泳,根据扩增条带的大小和数目,可检测和区分ＣＶＣ、ＥＶＣ,Ｏ１３９     

一起伤寒水型爆发的调查报告

应用套式ＰＣＲ检测抗－ＨＣＶ阴性献血员血清中ＨＣＶＲＮＡ陈友纯，赖进祥，蔡庆，林万明我们采用敏感特异的套式ＰＣＲ法，检测经ＥＬＩＳＡ试剂筛选后抗－ＨＣＶ阴性的献血员血清中ＨＣＶＲＮＡ，以了解抗－ＨＣＶ阴性献血员ＨＣＶ的感染情况。一、材料和方法：１．血...     

猪感染流行性出血热病毒的流行病学与实验研究

为了解猪在流行性出血热（ＥＨＦ）疫区的流行病学意义，探讨猪的感染与人群发现的关系，采用病原学、血清学和ＰＣＲ技术对猪感染ＥＨＦ病毒（ＥＨＦＶ）进行流行病学调查与研究。结果：猪不仅存在自然感染，而对ＥＨＦＶ感染，随血液行播及多种脏器组织，在体内增殖并随排泄物排出感染性病毒。作者认为猪具有具备作为ＥＨＦ传染源的条件。     

乙型肝炎病毒血清学标志与其DNA相互关系的对比分析

本文采用酶免疫测定法（ＥＩＡ）及聚合酶链反应（ＰＣＲ）同时对２６９例乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染可疑者进行ＨＢＶ血清学标志（ＨＢＶＭ）及ＨＢＶＤＮＡ的检测。结果表明；ＨＢｓＡｇ的不同组合状态及ＨＢＶ感染的临床类型对血清ＨＢＶＤＮＡ检出率有显著性影响，而ＨＢＶ诸抗体的不同组合对之影响不显著。并对ＨＢＶＭ的临床意义有了新的认识。     

聚合酶链反应结合斑点杂交测定乙型肝炎病毒DNA的评价

分别以Ｄｏｔｂｌｏｔ，ＰＣＲ－ＥＢ，ＰＣＲ－Ｄｏｔｂｌｏｔ法测定了１４６例慢性乙型肝炎患者血清ＨＢＶＤＮＡ。结果显示在ＨＢｅＡｇ组，ＰＣＲ－Ｄｏｔｂｌｏｔ阳性率（１００％）显著高于ＰＣＲ－ＥＢ（９４．８％），在ＨＢｅＡｂ组，ＰＣＲ－Ｄｏｔｂｌｏｔ的检出率为５４％，ＰＣＲ－ＥＢ为３８％。两者总检出率分别为８４．２％和７５．３％，统计学处理差异显著。有３例ＰＣＲ－ＥＢ再现生信号，但ＰＣＲ－Ｄｏｔｂｌｏ