Increased expression of stathmin in eutopic endometrium of patients with endometriosis

Background Stathmin was identified as an endometriosis-related protein by comparative proteomics in our previous study.As a microtubule-destablizing factor, stathmin was shown to participate in the relay and integration of diverse intracellular signaling pathways involved in cell proliferation, differentiation, and many other cellular activities.To investigate whether stathmin is involved in the pathogenesis of endometriosis, we examined the expression of stathmin in eutopic endometrium of women with or without endometriosis.Methods Eutopic endometrium samples were collected from thirty-six patients who were diagnosed as endometriosis and the nineteen age-matched patients who were confirmed to be free of endometriosis surgically and histologically.The expression of stathmin mRNA was detected by real-time PCR, and its protein was detected by Western blotting and immunohistochemistry.Results Stathmin was overexpressed in eutopic endometrium of women with endometriosis detected by real-time PCR in mRNA levels and by Western blotting in protein levels, without significant difference between proliferative and 0secretory phase.Immunohistochemistry showed that stathmin protein was localized in both endometrial glandular and stromal cells throughout the menstrual cycle.Conclusions Stathmin is overexpressed in endometrium of patients with endometriosis and may play a role in the pathogenesis of endometriosis.     

细胞周期蛋白B1及Cdc2在正常子宫内膜及子宫内膜异位症患者在位和异位内膜组织中的表达

目的探讨细胞周期蛋白（CyclinB1）及Cyclin-Dependent kinasel（Cdc2）在子宫内膜异位症发生发展中的作用及其与卵巢激素之间的相关关系。方法采用RT-PCR,Western印迹以及免疫组织化学的方法检测了子宫内膜异位症患者（异位症组）的异位内膜（29例）和在位子宫内膜（20例）以及正常生育期的其他良性疾病妇女的子宫内膜（对照组,30例）中CyclinB1及Cdc2的表达。结果CyclinB1在异位症组异位内膜上的表达量明显高于在位内膜及对照组（P〈0．05）。异位症组在位内膜上CyclinB1的表达量与对照组相比没有显著性差异（P〉0．05）。Cdc2在各组患者中的表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论CyclinB1高表达可能与子宫内膜异位症异位内膜的增生相关。     

抑癌基因ARHI 在子宫内膜异位症及非子宫内膜异位症患者中差异表达的意义

摘要：目的研究子宫内膜异位症（endometriosis, EMs）组织中抑癌基因ARHI的mRNA和蛋白表达情况。方法利用
RT-PCR和Western Blot免疫印迹的方法,对EMs的异位内膜组织、在位内膜组织和非EMs在位内膜组织（正常内膜组织）
进行mRNA和蛋白表达的半定量分析。利用原位杂交和免疫组化技术对研究各组进行定性及定位分析。结果（1）
ARHI mRNA 和蛋白在各组中均有表达,异位内膜的表达高于在位内膜和正常内膜,差异显著（P<0.005）,在位内膜组与
正常对照组比较,ARHI的表达无明显差异（P>0.05）;（2）原位杂交阳性率分别为非EMs组97.3%,EMs异位内膜组100%,
EMs在位内膜组93.8%;（3）免疫组化阳性率分别为非EMs组93.2%,EMs异位内膜组100%,EMs在位内膜组92.3%;（4）
ARHI的DNA与蛋白表达一致;（5）5例恶变的异位内膜ARHI免疫组化检测,4例呈阴性,1例呈弱阳性表达。结论抑癌
基因ARHI在子宫内膜组织中均表达,且在异位内膜中呈表达上调,而在恶变的异位内膜中多呈阴性表达,提示ARHI基
因可能与子宫内膜异位症不孕及恶变相关。     

Expression of TWEAK on the Ectopic and Eutopic Endometrium from Women with Endometriosis

Objective To investigate the relationship between Tumor necrosis factor （TNF）-like weak inducer of apoptosis（TWEAK） and endometriosis.
Methods TWEAK mRNA and protein concentrations in paired samples of eutopic endometrial tissue from women with and without endometriosis, and also of ectopic endometrial tissue from women with endometriosis were measured by Real-time PCR, immunohistochemistry and Western blotting, respectively.
Results Compared with control endometrium from women without endometriosis and eutopic endometrium from women with endometriosis, TWEAK expressions were reduced on the ectopic endometrium （P〈O.05）. Moreover, the expressions of TWEAK mRNA on eutopic endometrium and control endometrium in proliferative phase were much lower than those in secretory phase. TWEAK protein was expressed in the cytoplasm of glandular cells and stromal cells of endometrium.
Conclusion TWEAK is expressed on the endometrium of reproductive women, and its concentration rises in secretory phase, compared with that in proliferative phase. Patients with endometriosis had a lower expression of TWEAK on ectopic endometrium, which may lead to a decreased level of apoptosis on endometrial cells. Consequently, endometrial cells were able to survive outside uterus helping the development of endometriosis.     

MMP-9和TIMP-3在内异症患者子宫内膜中的表达

目的 观察比较基质金属蛋白酶（MMPs）和基质金属蛋白酶抑制物（TIMPs）在异位、在位和正常子宫内膜中的表达,探讨其与子宫内膜异位症（内异症）的关系。方法应用免疫组化LSAB法和KS400图像分析系统,检测MMP-9和TIMP-3在26例卵巢子宫内膜异位囊肿患者的异位子宫内膜和其中15例在位子宫内膜中的表达,分析阳性细胞的分布规律,以20例正常子宫内膜作为对照。结果MMP-9和TIMP-3在正常和异位子宫内膜的腺上皮细胞、基质细胞中均有不同程度的表达。异位子宫内膜组织中MMP-9呈高表达状态,TIMP-3表达减少,与正常子宫内膜和在位内膜相比有显著差异（P〈0．05）;在位子宫内膜与正常子宫内膜MMP-9和TIMP-3的表达无显著差异（P〉0．05）。结论提示异位内膜组织具有更强的侵袭力,其在子宫内膜异位症发病中起重要作用。     

PROK1及其受体PROKR1在子宫内膜异位症中的表达和临床意义

目的：探讨前动力蛋白-1(prokineticin 1,PROK 1)及其受体(prokineticin-receptor 1,PROKR 1)在子宫内膜异 位症中的表达水平及意义。方法：采用定量PCR(quantitative PCR,qPCR)和蛋白质印迹法检测PROK 1和PROKR 1在18 例正常对照组和22例子宫内膜异位症患者在位内膜及异位内膜中的表达水平;将6例正常对照组子宫内膜间质细胞分 离、培养,给予雌二醇(estradiol,E2)及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)干预后,采用qPCR检测PROK 1 mRNA的表达水平。结果：PROK 1 和PROKR 1 mRNA在子宫内膜异位症患者的异位内膜和在位内膜以及正常对照组 子宫内膜中均有表达,表达最高的为异位内膜组,表达最低的为正常内膜组(P<0.05);PROK 1 和PROKR 1 蛋白在子 宫内膜异位症患者的异位内膜和在位内膜以及正常对照组的子宫内膜中均有表达,在异位内膜中表达最高,在正常 内膜中表达最低(均P<0.05);在正常子宫内膜组及子宫内膜异位症组中PROK 1的蛋白表达水平均为分泌期高于增生期 (均P<0.05);E2对子宫内膜间质细胞PROK 1 mRNA的表达无明显影响,TNF-α能上调子宫内膜间质细胞PROK 1 mRNA 的表达。结论：PROK 1及其受体参与了子宫内膜异位症的发生并对其发展有促进作用,TNF-α可能上调PROK 1的表 达从而促进血管生成。     

MiR23b和Sp1在卵巢子宫内膜异位症中的表达及其意义

目的：检测miR23b和特异蛋白1(specifi c protein 1,Sp1)在卵巢子宫内膜异位症中的表达和分布情况,探讨 二者在卵巢子宫内膜异位症发生发展中的作用及意义。方法：qPCR检测miR23b和Sp1 mRNA在异位内膜、在位内膜、 正常内膜中的表达水平;免疫组织化学和Western印迹检测Sp1蛋白在异位内膜、在位内膜、正常内膜的表达和分布情 况。结果：MiR23b mRNA在异位内膜、在位内膜、正常内膜组中的表达水平依次增加(P<0.05)。Sp1在子宫内膜间质 细胞、腺上皮细胞中均有表达,主要表达在细胞核,少量表达在胞质中;Sp1 mRNA和蛋白在异位内膜、在位内膜、 正常内膜中的表达均依次降低(P<0.05)。MiR23b与Sp1 mRNA表达呈负相关(r=–0.526,P<0.05)。结论：MiR23b和Sp1与 卵巢子宫内膜异位症的发生发展密切相关,二者可能通过相互拮抗,共同参与异位病灶的形成。     

血管内皮生长因子与子宫内膜异位症相关性的研究

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)在子宫内膜异位症(简称内异症)患者在位内膜与异位内膜的表达及意义。方法应用免疫组织化学法检测30例内异症30份在位内膜、34份异位病灶中VEGF的表达。以17例正常妇女的子宫内膜组织作为对照,比较VEGF表达有无差别。结果无论在位与异位内膜,VEGF蛋白主要存在于腺上皮细胞胞浆中,可在整个月经周期中检测到,同时也分散存在于周围间质细胞中。与对照组相比,内异症组在位内膜分泌期VEGF表达显著增高(P<0.05),异位内膜VEGF表达显著增高(P<0.01)。腹膜内异症与腺肌样结节之间VEGF表达差异无显著性。结论内异症患者的在位内膜分泌期VEGF的表达,可能与内异症的组织发生有关;异位内膜VEGF表达,可能与内异症的发病有关。     

血管内皮细胞生长因子受体在子宫内膜异位症中表达的研究

目的探索血管内皮细胞生长因子(VEGF)受体(Flt1,KDR)在子宫内膜异位症(简称内异症)患者的异位及在位子宫内膜组织中的定位及表达情况。方法分别采用免疫组化、Western印迹法和逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测内异症患者37份在位子宫内膜组织、34份卵巢子宫内膜异位囊肿组织、15份腹膜红色病变组织、4份腹壁子宫内膜异位灶组织,以33例非内异症患者的在位子宫内膜组织作为对照,比较不同组织中Flt1、KDRmRNA及蛋白的阳性表达率和表达强度的差异。结果Flt1、KDR蛋白质除在血管内皮细胞中表达外,还在子宫内膜的腺细胞和间质细胞中表达。Flt1、KDR在内异症患者子宫内膜的阳性表达率分别为94.3%,91.4%,高于卵巢巧克力囊肿(分别为74.3%,77.1%)两者比较P<0.05,与同期非内异症患者在位子宫内膜组织(93.8%,90.6%,P>0.05)的表达率相仿。Flt1、KDR在内异症患者在位子宫内膜组织的核酸水平[吸光度(A)比值]分别为2.4±1.2,3.0±1.4;蛋白质水平灰度值分别为31±17,36±24;同期卵巢巧克力囊肿组织中的核酸水平(A)比值分别为1.5±0.9,1.8±1.0;蛋白质水平灰度值分别为17±6,20±11(P<0.05);对照组子宫内膜组织的核酸水平(A)比值分别为1.9±0.8,2.3±1.3;蛋白水平灰度值为24±18,25±16(P>0.05)。结论VEGF可能通过子宫内膜细胞上的相应受体而发挥一定的生物学作用。内异症患者的异位子宫内膜中Flt1、KDR的表达可能与血管形成相关。     

子宫内膜异位症患者肝细胞生长因子及其受体c-Met的表达

OBJECTIVE: To study the role of hepatocyte growth factor (HGF) and its receptor (c-Met) in the pathogenesis of endometriosis. METHODS: In situ hybridization and immunohistochemistry method was used to examine HGF mRNA and protein expression in eutopic and ectopic endometrium obtained from 54 women in reproductive age with endometriosis confirmed by laparoscopy and histological examination (including 28 cases of stages I/II and 26 of stages III/IV) and from the endometrium of 24 healthy fertile women. RESULTS: In patients with endometriosis, the positivity rate of HGF/c-Met expression was similar in the eutopic and ectopic endometria, but the number of positive cells and expression intensity were much higher in ectopic endometrium. The positive expression rate varied little between the proliferative and secretory stages of the endometrium. Compare with the healthy controls, patients with endometriosis of stages I/II and III/IV had significantly elevated positivity rate of HGF and c-Met expressions in either eutopic and ectopic endometrium, but without significant difference between the two patient groups (P<0.01). The rate of strong c-Met protein expression was significantly higher in III/IV endometriosis than in the controls, without statistical difference between other groups. CONCLUSION: The expressions of HGF and c-met gene are correlated with the pathogenesis of endometriosis, which is preceded by eventful changes in the biological behavior of the eutopic endometrium.     

促血管生成素-2在子宫内膜异位性疾病中的表达及其意义

目的检测促血管生成素-2（Ang-2）在子宫内膜异位性疾病患者在位及异位内膜中的表达，并探讨其在子宫内膜异位性疾病发病的作用。方法应用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）技术检测Ang-2mRNA在65例子宫内膜异位症患者（内异症组）、40例子宫腺肌病患者（腺肌病组）的异住及在位内膜中的表达及在30例正常子宫内膜组织（对照组）中的表达。结果内异症组及腺肌病组的异位及在位内膜中Ang-2的表达率均高于对照组，但其表达强度与子宫内膜异位症的临床分期无明显相关性。结论子宫内膜异位症及子宫腺肌病患者的异位及在位内膜组织中Ang-2的表达增强，Ang-2在子宫内膜异位性疾病的发病过程中起到一定的促进作用。     

子宫内膜异位症细胞间粘附分子-1的异常表达及意义

目的探讨细胞间粘附分子-1（Intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1）在子宫内膜异位症（内异症）的异常表达及意义。方法应用免疫组织化学及图像分析方法比较ICAM-1在正常子宫内膜、内异症在位及异位内膜中的含量。结果 （1）正常子宫内膜和内异症在位内膜腺上皮ICAM-1的表达无明显的周期性变化。在整个月经周期中,内异症在位内膜腺上皮ICAM-1的表达显著高于同期正常子宫内膜。（2）卵巢子宫内膜异位囊肿中异位内膜腺上皮ICAM-1的表达显著高于同组患者的在位内膜。结论内异症在位和异位内膜腺上皮ICAM-1的表达增高与内异症的发病密切相关。     

基质金属蛋白酶及其抑制物与子宫内膜异位症关系的研究

目的研究基质金属蛋白酶-2、3（MMP-2,3）、金属蛋白酶组织抑制物-2（TIMP-2）蛋白及其mRNA在正常子宫内膜、子宫内膜异位症（EMS）妇女正位及异位内膜的表达。方法采用免疫组织化学法半定量分析MMP-2、MMP-3、TIMP-2在正常子宫内膜、EMS妇女正位内膜及异位内膜的表达,使用实时荧光PCR法进行MMP-2、MMP-3、TIMP-2的mRNA的定量分析。结果MMP-2、MMP-3在EMS妇女异位内膜组阳性表达高于正常对照（P〈0．05）,TIMP-2在EMS妇女异位内膜组织阳性表达低于正常对照（P〈0．05）,而且MMP-2、MMP-3在异位内膜标本阳性染色范围有向间质浸润的趋势。在不同的组织学周期,MMP-2、MMP-3、TIMP-2的表达情况相似,差异不具有统计学意义。EMS妇女异位内膜的MMP-2、MMP-3、TIMP-2mRNA含量均高于正常对照（P〈0．05）。在不同的组织学周期,正常妇女子宫内膜组的MMP-2mRNA含量、EMS妇女正位内膜组的MMP-3mRNA含量的差异有统计学意义（P〈0．05）。结论EMS妇女的异位内膜具有更高的侵袭性可能与异位内膜MMP-2、MMP-3的过高表达及TIMP-2的低表达有关。     

Mechanism of Elevated Vascular Endothelial Growth Factor Levels in Peritoneal Fluids from Patients with Endometriosis

Endometriosisisoneofcommon gynecologicdiseasesanditspathogenesisisunclear .Theimplan tationofexfoliatedendometrium ,depositedintheperitonealcavitybyretrogrademenstruation ,isas sumedinmostcasestobethecause .However ,acrit icalstepintheestablishmentofanyex…     

子宫内膜异位症患者肝细胞生长因子及其受体c-Met的表达

目的 研究肝细胞生长因子(HGF)及其受体c-Met在子宫内膜异位症发病机制中的作用。方法 采用mRNA原位杂交和免疫组织化学技术检测经腹腔镜手术及病理证实的54位子宫内膜异位症妇女(Ⅰ/Ⅱ期患者28例,Ⅲ/Ⅳ期患者26例)在位和异位内膜组织及24例正常对照组妇女在位内膜HGF、c-Met的分子和蛋白表达。结果 子宫内膜异位症患者在位内膜HGF、c-met基因和蛋白阳性表达与异位内膜一致,但阳性切片中,异位内膜阳性细胞数及表达强度高于在位内膜。增生期和分泌期的内膜细胞HGF/c-Met mRNA和蛋白的表达相近,无明显差异。对照组、Ⅰ/Ⅱ期患者在位、异位内膜与Ⅲ/Ⅳ患者在位、异位内膜比较,HGF、c-met基因和蛋白阳性表达频率依次上升,组间差异显著(P<0.01)。Ⅰ/Ⅱ期、Ⅲ/Ⅳ期患者在位和异位内膜与对照组比较,HGF、c-met基因和蛋白阳性表达频率有显著差异;Ⅰ/Ⅱ期患者与Ⅲ/Ⅳ期患者比较,HGF/c-Met阳性表达频率和表达强度均无显著差异。Ⅲ/Ⅳ期患者c-Met强阳性表达频率与对照组比较,有显著差异。结论 HGF、c-met基因和蛋白表达与子宫内膜异位症发病机制相关,在位内膜性质的改变可能是子宫内膜异位症发病机制的关键环节。     

细胞周期蛋白A及P21在子宫内膜异位症患者在位和异位内膜组织中的表达

目的探讨细胞周期蛋白A(CyclinA)及P21在子宫内膜异位症发生、发展中的作用。方法采集子宫内膜异位症患者(观察组)在位内膜(25例)和异位子宫内膜(28例)以及其他良性疾病患者的子宫内膜(对照组35例),用免疫印迹、RT-PCR、免疫组化的方法检测CyclinA和P21表达。结果cyclinAmRNA在异位内膜增生期与分泌期表达量(1.24±0.10)、(1.33±0.21)均明显高于在位内膜(0.72±0.26)、(0.42±0.22)及对照组(0.68±0.09)、(0.35±0.06)(P0.05)。CyclinA蛋白在异位内膜增生期与分泌期表达量(0.95±0.10)、(0.91±0.18)均明显高于在位内膜(0.53±0.08)、(0.27±0.11)及对照组(0.47±0.11)、(0.22±0.09)(P0.05)。在位内膜CyclinA表达量与对照组相比均无显著性差异(P0.05)。P21mRNA在对照组内膜增生期与分泌期表达量(0.21±0.01)、(0.54±0.35)均明显高于在位内膜(0.09±0.06)、(0.28±0.02)及异位内膜(0.06±0.01)、(0.13±0.00)(P0.05)。P21蛋白在对照组内膜增生期与分泌期表达量(0.74±0.13)、(1.13±0.15)均明显高于在位内膜(0.59±0.21)、(0.62±0.29)及异位内膜(0.40±0.36)、(0.43±0.33)(P0.05)。CyclinA在对照组内膜增生期表达高于分泌期(P0.05),P21在对照组内膜分泌期表达高于增生期(P0.05),而两者在异位内膜表达均失去周期性(P0.05),两者在异位内膜中表达呈显著负相关(r=-0.738,P0.01)。结论CyclinA及P21异常表达可能在子宫内膜异位症异位内膜增殖中起重要作用。     

HGF、c-Met及MMP-2在子宫内膜异位症在位内膜的表达及意义

目的:探讨子宫内膜异位症在位内膜肝细胞生长因子(HGF)、其受体(c-Met)及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达与发病机理的关系。方法:采用链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法检测45例盆腔子宫内膜异位症患者(内异症组)及30例非子宫内膜异位症妇女(对照组)在位内膜HGF、c-Met与MMP-2的免疫表达水平。结果:内异症组HGF、c-Met与MMP-2表达水平均高于对照组,且差异有显著性(P均<0.01),且两两之间均呈正相关性(P均<0.01)。结论:在位内膜HGF、c-Met、MMP-2的高表达可能与子宫内膜异位症的发病相关。     

抵抗素蛋白在子宫内膜异位症患者中的表达及意义

 目的检测抵抗素蛋白在子宫内膜异位症患者异位子宫内膜、在位子宫内膜和正常子宫内膜中的表达情况。方法采
用免疫组织化学SP法检测抵抗素蛋白在异位内膜、在位内膜及正常子宫内膜组织中的表达情况,并分析和比较其表达是否有
差异。结果抵抗素蛋白在异位内膜的表达率及强度均高于在位内膜,差异有统计学意义（ P< 0.05）。而在位内膜与正常内膜
的表达率及强度比较差异无统计学意义（ P> 0.05）。阳性表达定位于子宫内膜间质细胞的细胞质。结论抵抗素蛋白在子宫内
膜异位症的发病中可能起重要作用。     

细胞色素芳香化酶基因及环氧合酶-2基因mRNA在子宫内膜异位症异位与在位内膜的表达

目的 探讨细胞色素芳香化酶（P450arom）基因、环氧合酶-2（COX-2）基因mRNA在子宫内膜异位症（内异症）患者异位、在位子宫内膜组织中的表达及其意义。方法 采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测内异症患者在位及异位子宫内膜及正常子宫内膜中P450arom mRNA、COX-2 mRNA的表达情况。结果 P450arom mRNA在内异症患者异位及在位子宫内膜均有强表达，正常子宫内膜无表达，分泌期、增殖期无差别；COX-2 mRNA在内异症患者异位及在位子宫内膜均有强表达，正常子宫内膜弱表达（P〈0．05），且内异症患者在位子宫内膜及正常子宫内膜COX-2 mRNA表达分泌期均略强于增殖期，但差别均无统计学意义（P〉0．05），异位内膜分泌期、增殖期无差别。不同rAFS分期内异症子宫内膜P450arom mRNA、COX-2 mRNA的表达无差别。结论 子宫内膜P450arom mRNA、COX-2 mRNA的高表达与内异症的发生、发展可能密切相关。     

TNFR1和TNFR2与子宫内膜异位症发病的研究

目的：从基因和蛋白水平探讨肿瘤坏死因子受体1（TNFR1）和2（TNFR2）在子宫内膜异位症（简称内异症）发病中的作用。方法：采用原位杂交及免疫组化SABC法检测50例内异位症患者（内异症组）在位及异位子宫内膜TNFR1mRNA、TNFR2mRNA和TNFR2蛋白的表达,并与35例对照组在位内膜进行比较。结果: TNFR1mRNA、TNFR2mRNA在内异症组在位、异位内膜的光密度值分别高于对照组(P<0.05);TNFR2蛋白在内异症组在位、异位内膜及对照组间两两比较均无显著差异(P>0.05)。TNFR1mRNA、TNFR2mRNA和TNFR2蛋白在内异症组Ⅰ～Ⅱ和Ⅲ～Ⅳ期间均无明显差异（P>0.05）。三者在内异症组和对照组月经周期的增生期与分泌期亦无明显差异（P>0.05）;但TNFR1mRNA、TNFR2mRNA在内异症组增生期、分泌期光密度值分别高于对照组同期水平（P<0.05）;TNFR2蛋白在内异症组与对照组同期比较无明显差异（P>0.05）。结论：内异症在位内膜TNFR1表达降低可能在内异症的发病中其重要作用;TNFR2在内异症和对照组无差别的表达可能有利于内异症的发生。