自体骨骼肌卫星细胞移植治疗心肌梗死后心衰的实验研究

目的 :研究骨骼肌卫星细胞植入梗死区心肌组织后对心功能的影响 .方法 :幼猪 10只 ,对照组和治疗组各 5只 .治疗组从幼猪三角肌群处切取骨骼肌标本 ,获取卫星细胞 ,体外培养扩增 ,结扎冠状动脉建立幼猪的急性心肌梗死模型 ,通过局部注射的方法将卫星细胞植入梗死周边区及梗死区心肌 .对照组以同样的方法建立心肌梗死模型 ,予以等量的、不含卫星细胞的培养液接种 ,观察移植 4wk后卫星细胞移植对心功能的影响 .结果 :卫星细胞接种培养后 4 8h开始贴壁 ,细胞呈梭形 ,将细胞培养液中胎牛血清浓度降至 2 0mL·L-1以下时 ,细胞生长停滞 ,相互融合形成肌管 ;HE染色治疗组梗死区可见岛状、带横纹的肌肉组织 ,肌细胞核位于周边 ,光镜及电镜移植细胞及移植细胞与宿主细胞之间均未见闰盘连接 ;对照组梗死区为均匀一致的纤维疤痕组织 ;对照组 1wk左室射血分数 (LVEF)为 (2 3± 2 ) % ,4wk为 (33± 2 ) % ,治疗组 1wk为 (2 6± 3) % ,4wk为 (4 0± 2 ) % ,治疗组与对照组 1wk比较 ,无统计学差异 (P >0 .0 5 ) ;而 1wk与 4wk比较 ,有统计学差异 (P <0 .0 0 1) ,治疗组与对照组 4wk比较 ,LVEF有统计学差异 (P <0 .0 1) .治疗组 1wk与 4wk比较 ,1/3充盈分数 (1/3FF)有统计学差异 (P <0 .0 5 ) .结论 :骨骼肌卫星细胞植入     

不同数量大鼠L6骨骼肌成肌细胞移植对心肌梗死疗效的影响

心肌梗死是导致中老年人死亡的主要疾病之一.近年来,用正常细胞移植修复梗死心肌,改善心功能,越来越受到国内外学者关注[1],但移植细胞数量与心肌梗死面积间的关系尚未明确.     

自体骨骼肌卫星细胞移植对心肌梗死大鼠心功能的影响

目的 了解自体骨骼肌卫星细胞(satellite cell,SC)移植至心肌对心肌梗死(myocardial infarction,MI)大鼠心功能的影响及其可能机制.方法 45只Wistar大鼠采用随机抽签法分为假手术组、对照组及移植组,对照组及移植组大鼠经结扎冠状动脉前降支建立MI模型.将体外培养2周的大鼠自体SC以注射的方式移植到移植组大鼠梗死区周围,4周后测定各组大鼠血流动力学、心功能、血清血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)浓度及缺血心肌毛细血管密度的变化,同时观察移植细胞在梗死区的生长、增殖情况并探讨它们相互的关系.结果 SC在梗死区中可增殖分化为横纹肌纤维;与假手术组比较,尽管对照组及移植组大鼠之收缩压、舒张压、平均动脉压、左室收缩压及左室压力最大上升/下降速率均明显降低(P＜0.05,P＜0.01),左室舒张末压均明显增高(P＜0.01),但移植组左室压力最大上升速率、左室压力最大下降速率及左室舒张末压较之对照组则有明显改善(P＜0.05,P＜0.01);SC移植4周后,对照组大鼠毛细血管密度较之假手术组明显增高(P＜0.05);移植组大鼠缺血心肌中毛细血管密度及血清VEGF浓度较之假手术组、对照组亦明显升高(P＜0.05,P＜0.01).结论 SC在心肌梗死区中能增殖分化为横纹肌样细胞,并可分泌VEGF促使缺血心肌毛细血管增生,从而共同参与改善心功能.     

自体骨骼肌卫星细胞心肌移植对心肌梗死大鼠心肌纤维化的影响

目的了解自体骨骼肌卫星细胞(satellite cell,SC)心肌移植对心肌梗死(myocardial infarction,MI)大鼠心肌纤维化的影响及可能机制。方法45只Wistar大鼠随机分为假手术组(n=15)、对照组(n=15)及移植组(n=15),对照组及移植组大鼠经结扎冠状动脉前降支建立MI模型;假手术组除不结扎左前降支外,其余操作同对照组和移植组。将体外培养2周的大鼠自体SC以注射的方式移植到移植组大鼠梗死区周围,4周后测定各组大鼠缺血心肌VEGFmRNA的表达、VEGF蛋白质的表达、缺血心肌毛细血管密度的变化及缺血心肌的纤维化程度,同时观察移植细胞在梗死区的生长、增殖情况并探讨它们相互的关系。结果SC在梗死区中可增殖分化为横纹肌纤维;SC移植4周后,与假手术组比较,对照组大鼠缺血心肌中毛细血管密度明显增高,差异有统计学意义(P<0.05),而移植组大鼠缺血心肌中毛细血管密度及VEGFmRNA、VEGF蛋白质的表达较之假手术组、对照组亦明显升高,差异有统计学意义(P<0.05或0.01或0.001)。移植组心肌梗死区域的纤维化被有效抑制,而对照组则呈现出明显的纤维化特征。结论SC在心肌梗死区中可增殖分化为具有弹性和收缩功能的横纹肌样细胞,并通过自分泌和旁分泌的形式分泌VEGF促使缺血心肌毛细血管增生,从而有效地抑制了缺血心肌的纤维化进程。     

自体骨髓干细胞移植治疗ST段抬高性心肌梗死

由于心肌梗死后左室功能障碍，再灌注治疗对ST段抬高性急性心肌梗死患者治疗效果有限。比利时Leuven大学的Stefan Janssens等以67例ST段抬高性急性心肌梗死患者为研究对象，进行了一项随机、双盲、安慰剂对照试验，探索在梗死相关动脉进行自体骨髓干细胞（BMSC）移植对左室功能和结构的影响。研究结果发表在近期Lancet杂志上。     

自体骨髓单个核细胞移植治疗急性心肌梗死与陈旧性心肌梗死的疗效对比研究

目的:探讨对照研究自体骨髓单个核细胞(BM-MNC s)冠脉内移植治疗急性与陈旧性心肌梗死的临床疗效。方法:选择35例NYHA心功能分级Ⅱ~Ⅲ级行择期介入治疗术的心肌梗死患者,急性心梗患者20例,陈旧性心梗患者15例。两组患者在介入治疗术结束后均通过大腔导管于梗死相关血管注入BM-MNC s。用流式细胞仪对BM-MNC s进行细胞计数及成分鉴定;术前、术后45d、90d行静息T e99m SPECT检查进行疗效判断。结果:①用F ico ll密度梯度离心法获得单个核细胞1.7×108~5.7×108(3.6±1.7×108)个,细胞活性均大于92%;CD 34+细胞2.56%±0.98%,AC 133+细胞0.56%±0.23%。②急性心梗组术前、术后45d、90d静息T e99m SPECT心肌灌注缺损区面积占总面积百分比分别为25.11%±7.26%、17.89%±5.49%、15.19%±3.95%(P<0.05);陈旧性心梗组术前、术后45d、术后90d静息T e99m SPECT心肌灌注缺损区面积占总面积百分比分别为25.28%±7.38%、21.12%±6.82%、18.86%±6.41%(P<0.05)。急性心梗组与陈旧性心梗组术后45dSPECT灌注缺损区面积较术前分别缩小28.75%和16.46%(P<0.05);急性心梗组与陈旧性心梗组术后90d SPECT灌注缺损区面积较术后45d分别缩小15.09%和10.70%(P<0.05)。结论:自体骨髓单个核细胞梗死相关冠脉内移植治疗急性心肌梗死与陈旧性心梗均有一定的疗效,但对急性心梗的疗效优于陈旧性心梗。     

自体骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死后心力衰竭的实验及临床研究

目的 观察自体骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对心肌梗死后心力衰竭的疗效.方法 选择21只中国小型家猪,应用闭胸经股动脉介入法制作心肌梗死后心力衰竭模型,术后动物左室射血分数(LVEF)<45%、B型钠脲肽(BNP)水平>100pg·ml-1为心力衰竭建模成功.随机将动物分为实验组(n=11)和对照组(n=10),术后2周内实验组及对照组经冠状动脉途径分别移植MSCs及磷酸盐缓冲液,8周后,行心脏彩超、单光子发射型计算机断层扫描(ECT)及BNP检查,观察心功能的改变.同时,选择心肌梗死致心力衰竭[左室射血分数(LVEF)<45%,BNP>100pg·ml-1]患者8例,发病2周内经皮冠状动脉途径植入MSCs,术前及术后8周行心脏彩超、ECT及BNP检查,监测心功能的变化.结果 动物实验组和对照组分别有8头和7头猪造模成功;心脏彩超结果显示:实验组MSCs移植后LVEF由(39±1.70)% 增加至 (51±3.52)%,ECT心血池显像显示LVEF由(35.08±3.12)% 升高至 (52.15±1.21)%,BNP水平由移植前的(298±17)pg·ml-1下降至(87±15)pg·ml-1;对照组以上指标无明显改变.临床观察显示:MSCs移植后患者心脏彩超显示LVEF由(34.06±2.13)%增加至(52.08±1.02)%,ECT心血池显像显示LVEF由(34.12±3.09)%增加至(53.03±1.01)%,BNP水平由(326±34)pg·ml-1降低至(101±7)pg·ml-1.结论 自体MSCs移植是治疗急性心肌梗死后心力衰竭安全、有效的新方法.     

左心室成形术结合骨骼肌成肌细胞移植治疗心肌梗死后心力衰竭

目的:探讨左心室成形术结合骨骼肌成肌细胞移植对心肌梗死后充血性心力衰竭的治疗作用.方法:48只心梗后4周的大鼠随机分为4组,组Ⅰ(n=10)在梗死区两侧边缘注射PBS;组Ⅱ(n=11)注射骨骼肌成肌细胞;组Ⅲ(n=13)行左心室成形术,同时注射PBS;组Ⅳ(n=14)行左心室成形术同时注射骨骼肌成肌细胞.分别在术后第1、2、3、4周超声随访心功能.结果:左室舒张末期内径(EDD)与收缩末期内径(ESD)值在组Ⅲ和组Ⅳ于术后1周时明显减小,然后有逐渐增大的趋势,到第4周时,组Ⅲ与组Ⅰ、Ⅱ已没有显著差别,而组Ⅳ仍小于其他3组,差异有非常显著意义(P<0.01);反映左室收缩功能的EF值在组Ⅲ、组Ⅳ于术后1周时达到最高,然后逐渐降低,到第4周时,组Ⅳ的EF大于组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ,差异有显著意义(P<0.01).结论:在左心室成形术的同时进行骨骼肌成肌细胞移植,可以加强手术的疗效,延缓心室的再次扩大和心功能的再次恶化.     

Regulation of Hypoxic Response Elements on the Expression of Vascular Endothelial Growth Factor Gene Transfected to Rat Skeletal Myoblasts under Hypoxic Environment

The regulation of hypoxic response elements on the expression of vascular endothelial growth factor （VEGF） gene transfected to primary cultured rat skeletal myoblasts under hypoxic environment was investigated. pEGFP-C3-9HRE-CMV-VEGF vector was constructed with molecular biology technique and transfected to primary cultured rat skeletal myoblasts by lipofectamine in vitro. Gene expression of transfected myoblasts was detected by RT-PCR, Western blot and fluorescence microscope under different oxygen concentrations and different hypoxia time. The results showed that in hypoxia group, the VEGF gene bands were seen and with the decrease of oxygen concentrations and prolongation of hypoxia time, the expression of VEGF mRNA was obviously increased. Under hypoxic environment, the expression of VEGF protein in the transfected myoblasts was significantly increased. EGFP was expressed only under hypoxic environment but not under normoxic environment. It was concluded that hypoxia promoter could be constructed with HRE and regulate the expression of VEGF gene under hypoxic and normoxic environment, which could enhance the re- liability of gene therapy.     

转染VEGF165基因的自体成肌细胞治疗心肌梗死的实验研究

目的:将体外培养、纯化并转染VEGF165基因的新西兰兔自体骨骼肌成肌细胞植入心肌梗死区,观测转染VEGF165基因的成肌细胞移植对改善梗死区心肌血运重建和心功能的影响。方法:采用pcDNA3.1-VEGF165和pcDNA3.1质粒转染经体外培养及纯化的新西兰兔自体骨骼肌成肌细胞。结扎兔冠状动脉致局部心肌梗死后2周,分别于心肌梗死区移植转染VEGF165基因成肌细胞(实验组,n=8)和空载体成肌细胞(对照组,n=8),4周后观察心肌梗死边缘区毛细血管密度、植入细胞的形态鉴定和心功能改善情况。结果:成功将pcDNA3.1-VEGF165和pcDNA3.1质粒转染体外培养的兔自体骨骼肌成肌细胞,成肌细胞移植后能在梗死区种植成活、分化。实验组细胞移植区域的毛细血管密度较对照组高(P<0.05)。经Buxco系统有创心功能测定显示:实验组较对照组的左心室等容收缩期室内压最大上升速率[+dp/dtmax,(1607.23±102.67)mmHg/s vs(1217.77±89.91)mmHg/s]和左心室等容舒张期室内压最大下降速率[-dp/dtmax,(1535.09±81.34)mmHg/s vs(1174.58±91.50)mmHg/s]均有所改善。结论:转染VEGF165的成肌细胞能改善心肌梗死区域的血液供应,增加心肌收缩力,改善心功能。     

静脉注射倍他乐克在急性心肌梗死早期应用的临床观察

目的:观察静脉注射倍他乐克治疗急性心肌梗死(AMI)早期的临床疗效。方法:87例AMI患者随机分为对照组40例、治疗组47例;对照组常规给予rt-pA、低分子肝素钙、阿司匹林、ACEI、硝酸甘油等药物;治疗组在常规治疗的基础上,静脉注射倍他乐克5mg(1mg/min),共3次,每次间隔5min,静脉注射完成后,根据病情口服倍他乐克25~50mg,q12h。观察两组治疗前后心率、血压变化,ST段回复时间,室性心律失常,心衰,死亡,房室传导阻滞等不良反应。结果:静脉应用倍他乐克后,患者心率明显下降,由(102.2±11.5)次/分降至(86.8±11.1)次/分(P<0.05);早期静脉应用倍他乐克可以有效预防、治疗心律失常,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);在缓解心绞痛、保护心功能、心肌酶峰值及峰值出现时间、住院后再梗死、梗死后心绞痛、死亡等心脏终点事件明显优于对照组(P<0.05);低血压、心动过缓等发生率相比较差异无显著意义(P>0.05)。结论:早期静脉应用倍他乐克安全、有效,可明显改善预后。     

脐血间质干细胞移植后梗死心肌细胞的凋亡及意义

目的探讨脐血间质干细胞移植对梗死心肌残存心肌细胞凋亡的影响。方法无菌条件下采集成年杂种妊娠犬脐血,体外分离、纯化、培养、扩增脐血间质干细胞,经5-氮杂胞苷(5-aza)体外诱导向肌源性细胞分化,DAPI荧光标记,经左冠状动脉前降支灌注移植入成年杂种犬急性心肌梗死模型区域,2、4、8周取心肌标本,采用HE染色及TUNEL法检测犬心肌梗死模型中脐血间质干细胞移植后心肌细胞的凋亡情况。结果免疫组化法检测结果表明,培养的细胞为脐血间质干细胞,在5-aza诱导作用下可向肌源性细胞定向分化,2、4、8周后在移植区域观察到带荧光的心肌纤维和细胞核,排列方向与残留心肌组织基本一致,荧光标记的肌纤维相互连接。经TUNEL法检测可见在脐血间质干细胞移植组和对照组心肌梗死区域均有凋亡的心肌细胞分布,但移植组凋亡细胞明显低于非移植组;HE染色有相似的阳性率,阳性细胞多具有凋亡的形态特征。结论脐血间质干细胞移植梗死心肌除能形成心肌再生外,尚能减少心肌梗死后梗死区域的心肌细胞凋亡,达到延缓心室重构的目的。应用TUNEL法检测心肌细胞凋亡有较强的实用性。     

美托洛尔针剂在急性心肌梗死的临床应用研究

目的：观察静脉注射美托洛尔治疗急性心肌梗死（AMI）的临床疗效及安全性。方法：34例AMI患者（治疗组）在常规治疗基础上，静脉应用美托洛尔，规察和记录治疗前后心率变化、不良反应及住院期间心脏终点事件。并与40例口服倍他乐克（对照组）进行对照分析。结果：（1）静脉应用美托洛尔后，急性心肌梗死患者心率能明显降低，平均降低19．4次／min；（2）早期静脉应用美托洛尔可以有效地预防、治疗房早、室早等心律失常，与对照组相比，差异有统计学意义（P〈0．05）；可降低住院期间再梗死、梗塞后心绞痛、死亡等心脏终点事件的发生率。结论：早期静脉应用美托洛尔安全、有效，可明显改善预后。     

直接经皮冠状动脉介入治疗应用血栓抽吸对STEMI患者心肌灌注及临床预后的影响

目的 探讨直接经皮冠状动脉介入治疗(primary percutaneous coronary intervention,PPCI)应用血栓抽吸对ST段抬高型心肌梗死(ST-segment elevation myocardial infarction,STEMI)患者心肌灌注及临床预后的影响.方法 采用回顾性研究方法...     

血府逐瘀颗粒对急性心肌梗死犬的保护作用

目的观察血府逐瘀颗粒对急性心肌梗死犬的保护作用。方法将24只杂种犬。随机分为4组。第1组为生理盐水（Control）对照组。第2组为阳性药血府逐瘀口服液（xfzhyo）对照组。第3。4组为血府逐瘀颗粒（xfzhyg）小，大剂量组。采用麻醉开胸犬。结扎冠状动脉左前降支。复制犬急性心肌梗死模型。测定心肌梗死面积（MIS）、血清心肌三酶以及心肌细胞超微结构的改变。结果血府逐瘀颗粒均可缩小MIS，降低心肌三酶的活性。减轻缺血对心肌细胞超微结构的损伤程度。结论血府逐瘀颗粒对急性心肌梗死犬的心肌具有一定的保护作用。     

自体骨髓干细胞移植治疗心肌梗死的临床研究

目的研究自体骨髓干细胞经冠脉移植对心肌梗死患者心功能的影响及其安全性。方法6例冠心病伴心肌梗死患者,男5例、女1例,平均年龄62岁(51~75岁),体外分离培养自体骨髓干细胞2~3周,开通梗死相关“罪犯”血管,通过冠脉转运将骨髓干细胞植入患者的心肌梗死区,移植的骨髓间充质干细胞数为(0.9~3.2)×106个,骨髓单个核细胞数为(1.6~5.3)×106个。术前和术后6个月分别行99mTc-MIBI心肌灌注显像、二维超声心动图、心电图和动态心电图检查。结果6例患者二维超声心动图检查示左室射血分数(LVEF)较术前明显增加[(52.33±8.70)%vs(42.92±12.60)%,P<0.05],左室舒张期内径(LVDd)较术前明显减少[(54.33±4.84)vs(61.67±6.83),P<0.05];6例99mTc-MIBI检查显示梗死部位心肌灌注明显改善。术中及术后随访6~18个月无心律失常和其他合并症发生。结论进行自体骨髓干细胞经冠脉移植治疗冠心病、心肌梗死具有抑制左室重构、改善心脏功能的作用。