肝癌微环境中CD4~+CD25~+调节性T细胞与T细胞免疫的关系

目的:探讨肝细胞癌组织中CD4 CD25 调节性T细胞(CD4 CD25 regulartory Tcell,Treg)与肿瘤微环境T细胞免疫的关系。方法:对52例肝细胞癌组织和癌旁组织用CD4、CD25双重酶标免疫组化染色和用CD8 EnVision法染色,对癌组织中Treg细胞和CD4 T、CD8 T、CD4 T/CD8 T比值进行相关性分析。结果:正常肝脏组织中未发现Treg细胞,肝癌和癌旁组织中Treg细胞单个高倍视野平均数分别为(7.6±2.84)、(5.2±1.67),两组比较有显著差异(P<0.01);肝癌及癌旁组织中CD4 T细胞单个高倍视野平均数分别为(18.2±3.57)、(25.9±3.36),两组比较有显著差异(P<0.01);肝癌及癌旁组织中CD8 T细胞单个高倍视野平均数分别为(49.9±6.61)、(49.5±6.43),两组比较无明显差异;肝癌及癌旁组织中CD4 T/CD8 T比值分别为(0.37±0.08)、(0.53±0.09),两组比较有显著差异(P<0.01);肝癌组织中Treg细胞的数量与其浸润性CD4 T淋巴细胞的数量及CD4 T/CD8 T比值呈显著负相关(P<0.01),而与浸润性CD8 T淋巴细胞的数量分布无明显相关性。结论∶Treg细胞在肝癌微环境中可能通过抑制CD4 T淋巴细胞的增殖来抑制肿瘤局部免疫。     

微波在肝癌外科治疗实验和临床中的应用研究

目的 :探讨微波固化治疗肝癌的有效性、免疫效应及临床应用价值。方法 :1皮下接种 Hepa瘤细胞株建立小鼠肝癌模型 ,将 70只荷瘤小鼠随机分为 :微波固化 (MTC)组和对照组。 2单针微波固化 12只活体兔肝 ,观察肝功能变化。 3微波固化切除肝癌 45例 ,与同期传统方法切除肝癌40例作对照 ;微波固化不能切除的肝癌 2 0例与同期行肝动脉结扎合并肝动脉和门静脉双插化疗不能切除的肝癌 2 0例作对照。结果 :1MTC组小鼠肿瘤固化灶内癌细胞呈凝固性坏死 ,对照组肿瘤内有大量癌细胞存在。 2 MTC组癌旁组织内 CD 8和 CD 4 细胞的密度明显高于对照组。 3微波对肝脏功能有影响。4微波肝切除平均每例术中出血量比传统方法少 ,术后 3年复发率 31.1% ,而传统方法为 46 .3% ;微波固化不能切除肝癌组术后 3年生存率为 11.1% ,对照组 3年生存率为 10 .5 %。结论 :微波固化治疗肝癌是一种安全有效的方法 ,并且可促进固化灶周围组织的免疫反应 ;微波固化切除肝癌 ,止血效果好 ,并发症少 ,可减少切缘复发 ,值得临床推广应用     

微波凝固术后肝癌患者免疫功能变化的初步研究

目的:检测微波凝固术后肝细胞肝癌患者外周血免疫细胞指标,探讨微波凝固治疗对患者机体免疫功能的影响。方法:68例行肝癌微波凝固术治疗的患者,分别于微波凝固治疗前1天、治疗后7天、14天、21天和28天时,应用流式细胞技术检查患者外周血CD4+、CD8+、CD3+、CD4+/CD8+比值、NK细胞水平的变化。结果:微波凝固后第1周,各指标较术前无明显变化,第2周开始,CD4+值比术前明显上升,CD8+明显下降,第4周开始NK细胞水平明显升高。结论:微波凝固治疗后肝癌患者免疫功能增强,将对肝癌患者的预后起到重要作用。     

微波凝固术后肝癌患者免疫功能变化的初步研究

目的：检测微波凝固术后肝细胞肝癌患者外周血免疫细胞指标,探讨微波凝固治疗对患者机体免疫功能的影响。方法：68例行肝癌微波凝固术治疗的患者,分别于微波凝固治疗前1天、治疗后7天、14天、21天和28天时,应用流式细胞技术检查患者外周血CD4＋、CD8＋、CD3＋、CD4＋/CD8＋比值、NK细胞水平的变化。结果：微波凝固后第1周,各指标较术前无明显变化,第2周开始,CD4＋值比术前明显上升,CD8＋明显下降,第4周开始NK细胞水平明显升高。结论：微波凝固治疗后肝癌患者免疫功能增强,将对肝癌患者的预后起到重要作用。     

抗Gr-1抗体降低肺癌小鼠髓源性抑制细胞对CD8+T细胞数量和肿瘤生长的影响

目的探讨通过抗Gr-1抗体降低Lewis肺癌小鼠髓源性抑制细胞(MDSC)对肿瘤生长及对外周血、脾脏、肿瘤组织中CD8+ T细胞数量的影响。方法构建小鼠肺癌Lewis细胞荷瘤小鼠模型。每48 h腹腔注射抗Gr-1抗体降低MDSC(观察组), 以注射等量0.7% NaCl溶液的模型小鼠为对照组, 持续3周。接瘤第7、14、21天分别处死3只小鼠, 应用流式细胞仪动态监测各时间点小鼠外周血、脾脏、肿瘤组织中MDSC、CD8+ T细胞的比例;接瘤7 d后, 定时测量小鼠皮下肿瘤的长径、短径, 监测两组肿瘤大小。结果两组肿瘤体积均随时间延长而增长, 其中观察组上升趋势相对缓慢, 第20天观察组肿瘤体积较对照组小[(1 978±315)mm3比(1 356±432)mm3, P=0.001]。接瘤后第7、14、21天, 观察组小鼠外周血、脾脏、肿瘤组织中MDSC和CD8+ T细胞比例均低于对照组。两组小鼠外周血中MDSC比例随时间推移均呈上升趋势, 其中观察组小鼠MDSC比例上升趋势较对照组缓慢;两组外周血中CD8+ T细胞比例在第7天至第14天均呈现上升趋势, 且观察组上升趋势更明显, 第14...     

原发性肝细胞癌微环境中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞分布与局部免疫的关系

目的通过检测原发性肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）局部肝癌组织和癌旁组织中T细胞亚群的分布情况,探讨在肝癌发生、发展过程中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞与局部免疫状态的关系。方法54例肝癌组织和癌旁组织及10例正常肝组织用免疫组织化学S—P法标记CD4^＋T细胞、CD8^＋T细胞及CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（CD4^＋CD25^＋Tr细胞）,并对组织中CD4^＋CD25^＋Tr细胞与CD4^＋T、CD8^＋T及CD4^＋T／CD8^＋T值进行相关性分析。结果54例肝癌、癌旁组织中CD4^＋CD25^＋Tr细胞单个高倍视野平均数分别为5．6208±2．7235和3．8554±1．6018（P=0．001）;肝癌中CD4^＋CD25^＋Tr细胞数目与肿瘤大小、有无子灶有关,组间差异有显著性（P〈0．01）;肝癌中CD4^＋CD25^＋Tr数量与CD4^＋T细胞的数量以及CD4^＋T／CD8^＋T值呈显著负相关（r=-0．459,P=0．015;r=-0．563,P=0．011）,而与浸润性CD8^＋T细胞的数量分布无关（r=-0．485,P=0．072）。结论在肝癌微环境中CD4^＋T淋巴细胞表达降低,CD4^＋CD25^＋Tr细胞表达增高,后者可能通过抑制CD4^＋T淋巴细胞的增殖来抑制肝癌局部免疫,从而促进肿瘤的进展以及侵袭或转移。     

微波消融治疗对肝癌小鼠调节性 T 细胞的影响

目的：研究微波消融治疗荷肿瘤后小鼠的Treg和淋巴细胞亚群的变化,探讨微波消融治疗荷瘤小鼠后的机体免疫功能的变化.方法：建立H22荷瘤小鼠模型,分为荷瘤对照组和微波消融组.微波消融荷瘤小鼠肿瘤.流式细胞术检测脾脏中的CD4＋CD25＋T细胞、CD25＋FOXP3＋T细胞、CD4＋T细胞、CD8＋T细胞.结果：与荷瘤对照组相比,微波消融治疗后21天、28天组小鼠CD25＋FOXP3＋T细胞明显下降,差异有统计学意义（P＜0.05）,以术后28天下降更为明显（P＜0.01）.微波消融术后各组小鼠CD4＋/CD8＋比值明显增高（P＜0.05）.结论：微波消融治疗减低Tregs比例可能是热消融治疗提高机体抗肿瘤免疫作用的主要机制.微波消融治疗肿瘤后,Treg数量下降及功能降低,且CD4＋/CD8＋比值升高,提示了微波消融治疗肝癌可以改善机体的免疫状态.     

化学诱导小鼠肝癌模型中CD133的动态变化

目的:检测肝癌干细胞标志CD133在化学诱导C57BL/6J小鼠肝癌过程中各时期的动态变化.方法:通过化学法[二乙基亚硝胺(diethylnirtosamine,DEN)/四氯化碳(carbon tetrachloride,CC14)/乙醇]诱发50只C57BL/6J雄性小鼠肝癌,对照组为45只正常C57BL/6J雄性小鼠.观察小鼠成瘤情况和生长状态,对每2周定期处死小鼠获得的组织标本分别进行病理学切片观察,并采用实时荧光定量PCR、免疫组织化学法、蛋白质印迹法和FCM法分别检测CD133 mRNA和蛋白的表达情况.结果:化学诱导20周后,成功诱发出小鼠肝癌.实时荧光定量PCR和FCM检测结果显示,第8周后诱癌组小鼠肝组织中CD133的表达高于正常对照组,差异有统计学意义(P＜ 0.05或P＜0.001);随着诱癌时间的增加,CD133的表达量呈上升趋势,第16周时诱癌组CD133的表达明显高于前期诱癌组(P＜0.001).蛋白质印迹法检测结果显示,诱癌组CD133蛋白从第4周起出现弱表达,随着诱癌时间的递增,CD133蛋白表达量逐渐增多.免疫组织化学检测结果显示,诱癌组第8周CD133出现弱阳性,第16周出现中等阳性,第20周出现强阳性;而正常对照组无表达.结论:肝癌干细胞标志CD133参与了肝癌的发生、发展全过程,随着诱癌进展其表达量逐渐增加.     

CD36与肝细胞癌细胞增殖和迁移的关系及其对人肝癌细胞异种移植裸鼠模型的影响

目的观察CD36在肝细胞癌组织和细胞株中的表达水平, 探讨CD36对人肝细胞癌细胞株增殖、迁移能力及人肝癌细胞异种移植裸鼠模型的影响。方法基于癌症基因组图谱(TCGA)数据库相关信息分析371份肝细胞癌及癌旁组织中CD36转录本表达水平差异。前瞻性收集2019年1月至2021年2月就诊于扬州大学附属医院行手术治疗的48例肝细胞癌患者癌组织及相应的癌旁组织, 采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测组织中CD36 mRNA水平。采用蛋白质印迹法检测人肝癌细胞株Huh7、HCCLM3及人正常肝细胞株LO2中CD36蛋白水平。将载有CD36干扰序列的质粒和空质粒转染到Huh7细胞或HCCLM3细胞, 分别为sh-CD36组和对照组;采用CCK-8法检测培养0、12、24、36、48、60 h各组细胞的增殖能力(以吸光度值表示), 采用划痕愈合实验、Transwell实验检测各组细胞迁移能力。将sh-CD36组或对照组Huh7细胞注射于BALB/c裸鼠腋窝皮下, 每组4只, 构建人肝癌异种移植裸鼠模型;接种1周后每周测量肿瘤长径、短径并计算肿瘤体积, 接种5周后处死裸鼠, 收集肿瘤...     

鞘内注射氟代柠檬酸和/或米诺四环素对骨癌痛小鼠脊髓胶质细胞增殖及活化的影响

[目的]研究鞘内注射星形胶质细胞抑制剂氟代柠檬酸(FC)和/或小胶质细胞特异性抑制剂米诺四环素(MI)对骨癌痛小鼠脊髓胶质细胞增殖及活化的影响。[方法]建立小鼠跟骨癌痛模型。将雄性C3H/He小鼠随机分为6组(n=10),包括:正常组、假手术组、癌痛+人工脑脊液组、癌痛+FC组、癌痛+MI组、癌痛+FC+MI组。术后每天给药1次,持续21d,并于手术当天、术后3、7、14、21d采用免疫荧光法观察各组小鼠脊髓背角小胶质细胞及星形胶质细胞的增殖及活化情况,免疫印迹半定量分析骨癌痛小鼠脊髓腰膨大段星形胶质细胞标志物GFAP及小胶质细胞标志物CD11b的蛋白含量。[结果]⑴免疫荧光法:与正常组相比,癌痛组术后3d脊髓背角小胶质细胞明显被激活,术后14d脊髓背角星形胶质细胞明显被激活。癌痛组内,与ACSF组相比,MI、MI+FC组小鼠脊髓背角术后3d小胶质细胞及MI、FC、MI+FC组术后14d星形胶质细胞的活化均明显被抑制;其中MI+FC组更为显著。⑵免疫印迹结果显示:与术前对照组比较,骨癌痛组术后3d脊髓L4～L5节段小胶质细胞标志物CD11b的蛋白含量明显增加(P<0.05),术后14d星形胶质细胞标志物GFA...     

肝癌微环境中CD4+CD25+Treg细胞与肿瘤免疫细胞的关系

[目的]探讨肝癌微环境中Treg细胞的数量增多与HCC临床分期晚的可能原因。[方法]双重酶标免疫组织化学方法检测52例HCC组织中CD4^＋CD25＋Treg细胞以及CD4^＋CD25-T（CD4^＋T）细胞分布，免疫组化EnVision法检测20例HCC组织中CD8＋T细胞分布。[结果]正常肝脏组织中未发现Treg细胞。HCC组织中Treg细胞数量较癌旁组织明显增多（P=0．000），且肝癌组织中Treg细胞的数量与其浸润性CD4＋T淋巴细胞的数量以及CD4＋T/CD8^＋T比值呈显著负相关（r=-0．539，P=0．014；r=-0．545，P=0．000），而与浸润性CD8^＋T淋巴细胞的数量无明显相关性（f=-0．403，P=0．078）。[结论]Treg细胞在体内可能通过细胞接触的方式抑制CD8^＋T淋巴细胞的增殖来抑制肿瘤局部的免疫，去除或减少HCC微环境中浸润件Tree细胞数量可能提高肿瘤局部免疫治疗效果。     

乳腺癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的检测及意义

目的探讨乳腺癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的变化及意义.方法采用流式细胞技术检测64例乳腺癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞,采用ELISA法检测外周血中转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达水平.结果乳腺癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞占T淋巴细胞的百分比为(5.1±2.9)%,高于乳腺良性肿物患者和健康志愿者(P均<0.05).乳腺癌患者外周血中CD4+CD25+T细胞水平与肿物大小、TGF-β1呈正相关(r分别为0.511和0.253),与CD8+CD28+T细胞和NK细胞呈负相关(r分别为-0.243和-0.301).结论乳腺癌患者外周血中具有免疫抑制活性的CD4+CD25+调节性T细胞水平较高,对乳腺癌患者具有免疫抑制作用.     

Sequential T Cell Response Involved in Tumor Rejection of Sarcoma, Meth A, in Syngeneic Mice

We investigated the type of T cell response involved in Meth A tumor rejection in primary immune and hyperimmune syngeneic mice. It was found that a CD4⁺ T cell-mediated delayed-type hypersensitivity (DTH) response activating non-specific killer cells such as macrophages, NK and LAK cells, without a specific CD8⁺ cytotoxic T lymphocyte (CTL) response, was the major immune response leading to Meth A tumor rejection in primary immune mice. In contrast, the specific CD8⁺ CTL response was the major response leading to the tumor rejection, in addition to CD4⁺ T cell-mediated DTH response, in hyperimmune mice. Analysis of CD4⁺ T cell clones established from primary immune and hyperimmune spleen cells indicated that a CD4⁺ T cell clone (C9) of primary immune mice (although only one clone was established) was of Th1 type, and induced cytotoxicity in accessory cells by classic DTH in vitro. Eight CD4⁺ T cell clones were established from hyperimmune spleen cells. Six out of the eight clones were of the Th2 type and two were Th0-like. However, no Th1-type CD4⁺ T cell clone was established from hyperimmune spleen cells. All of these CD4⁺ T cell clones, even the Th2-type clones, were capable of inducing cytotoxicity in vitro in T cell-depleted accessory cells, as in an in vitro DTH response. We postulate on the basis of these results that the T cell response leading to Meth A tumor rejection in vivo sequentially changed from a CD4⁺ T cell-mediated classic DTH response to a CD8⁺ CTL response, in addition to a cellular response mediated probably by Th2-type cells, during the process of repeated immunization.     

肝癌荷瘤小鼠调节性T细胞数量的改变及其与肿瘤生长的关系

目的研究肝癌荷瘤小鼠调节性T细胞数量的改变及其与肿瘤生长的关系。方法采用小鼠肝癌细胞系H22接种BALB／c小鼠,建立肝癌模型;采用流式细胞术方法检测CD4^＋ CD25^＋T／CD4^＋T细胞的比例;以RT-PCR和流式细胞术检测Foxp3基因的表达。以免疫磁珠分选法纯化CD4^＋CD25^＋T和CD4^＋CD25^-T细胞;在体外,用3H-TdR掺入法检测T细胞的增殖情况;在体内,观察荷瘤小鼠来源的CD4^＋CD25^＋T细胞对肿瘤生长的作用。结果（1）荷瘤小鼠在引流淋巴结中,CD4^＋CD25^＋T细胞占CD4＋T细胞（18．80％±0．06％）比例增高,与对照组（9．50％±0．03％）相比,差异有统计学意义（P〈0．01）;在非引流淋巴结（LN）和脾脏（SP）中,荷瘤小鼠CD4^＋CD25^＋T／CD4^＋T比例分别为16．28％±0．02％和17．28％±0．06％,与对照组9．50％±0．03％和11．08％±0．04％相比,差异有统计学意义（P〈0．01,P〈0．05）;同时,调节性T细胞特异性标志Foxp3 mRNA的表达也升高。在同一只荷瘤小鼠中,引流淋巴结中CD4^＋CD25^＋T细胞数量（18．8％±0．06％）较对侧非引流淋巴结（16．28％±0．02％）略有升高,但差异无统计学意义（P〉0．05）。（2）从荷瘤小鼠中纯化的CD4^＋CD25^＋T细胞,在体外对抗CD3单抗的刺激无反应,但能抑制CD4^＋CD25^-T细胞的增殖。（3）CD4^＋CD25^＋T／CD4＋T比例与肿瘤大小呈正相关,并且可以抑制CD4^＋CD25^-T细胞的抗肿瘤效应。结论肝癌细胞在小鼠体内的生长可以提高调节性T细胞的数量,其数量的高低与肿瘤的大小呈正相关,提示清除调节性T细胞将是肿瘤免疫治疗的策略之一。     

肝癌小鼠脾脏免疫细胞的变化及其意义

目的:观察小鼠H22细胞原位种植性肝癌模型中,脾脏正性免疫细胞和负性免疫细胞比例的变化,并且观察脾脏切除后外周血和肿瘤组织免疫细胞比例的变化以及对肿瘤生长的影响。方法:建立小鼠H22细胞原位种植性肝癌模型,在荷瘤的不同时期,用流式细胞术检测脾脏中负性免疫细胞（MDSC、Treg）和正性免疫细胞（总CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、NK细胞、NKT细胞）比例的变化。荷瘤1 w后切除脾脏,用流式细胞术检测外周血及肿瘤组织中免疫细胞比例的变化,并比较切脾前后肿瘤重量、腹水量、荷瘤小鼠生存期的变化。 结果:荷瘤小鼠脾脏MDSC细胞的比例一直高于正常组;Treg细胞在荷瘤2 w时显著升高;总CD3+T细胞和CD4+T细胞在荷瘤1 w时显著升高,2 w时显著下降;CD8+T细胞在荷瘤2 w时明显下降;NK细胞在荷瘤3 w时明显下降;NKT细胞无显著变化。脾脏切除后外周血和肿瘤组织MDSC的比例下降,CD8+T细胞的比例升高;肿瘤重量和荷瘤小鼠生存期无显著变化,腹水量在荷瘤2 w时显著减少,腹水发生率明显降低。 结论:小鼠肝脏种植H22细胞株后,脾脏中正性免疫细胞的比例下降,负性免疫细胞的比例升高,脾脏的负性免疫状态逐渐占主导地位,从而促进了肝癌的发展。     

康莱特注射液对现代二野清扫术食管癌患者围术期细胞免疫支持治疗的临床随机对照研究

目的作者前期的研究证实食管癌患者存在明显的细胞免疫功能抑制，手术创伤引起食管癌的暂时性细胞免疫抑制，本研究旨在观察细胞免疫支持治疗对食管癌患者围术期细胞免疫机能的影响。方法采用前瞻性的临床随机对照研究，60例施行现代二野清扫术的胸段食管癌患者随机分成对照组与治疗组，治疗组术后应用康莱特注射液。抽取术前、术后3天、术后9天的外周血，分别利用KL型肿瘤免疫图象分析系统检测AgNOR活性表达，流式细胞术分析T淋巴细胞亚群。结果对照组的围术期细胞免疫的变化规律：术后第3天细胞免疫功能下降最为明显，但从第3天开始可观察到细胞免疫功能恢复趋势，术后第9天继续恢复，但仍未恢复到正常水平。治疗组的围术期细胞免疫的变化规律：AgNOR、CD3^＋、CD3^＋CD4^＋术后3天已经恢复至术前水平，其中AgNOR、CD3^＋术后9天上升更为明显，高于术前水平；CD3^＋CD8^＋、CD4^＋CD25^＋表现为术后逐渐增高，术后9天明显高于术前水平（P〈0．05）。术后第3天AgNOR、CD3^＋CD4^＋、CD4^＋／CD8^＋治疗组明显优于对照组（P〈0．05）；术后第9天AgNOR、CD3^＋与CD4^＋CD25^＋治疗组明显优于对照组（P〈0．05）。结论治疗组患者术后应用康莱特注射液能明显改善现代二野清扫术的胸段食管癌患者因肿瘤及手术而引起的免疫细胞抑制作用，尤其是以AgNOR、CD3^＋、CD3^＋CD4^＋及CD4^＋CD25^＋T淋巴细胞的功能改善最为明显。     

Increased Frequency of Foxp3+ Regulatory T Cells in Mice with Hepatocellular Carcinoma

The CD4+CD25+ regulatory T cell (Treg) is a special kind of T cell subset. Studies have showed that Tregcells are involved in a number of physiological processes and pathologic conditions such as autoimmune diseases,transplantation tolerance and cancer. Tregs with unique capacity for immune inhibition can impair anti-tumourimmunity and help tumor cells to escape from immune surveillance. The aim of our study was to investigatewhether Tregs are involved in hepatocellular carcinoma (HCC). A BABL/C mouse with HCC in situ model wasestablished to evaluate the Treg existence in carcinoma tissues and the changes of Tregs in spleen using flowcytometry and immunohistochemistry methods. Granzyme B expression in carcinoma tissues was analyzedby immunohistochemistry to investigate the tumor local immune status.The proportion of CD4+CD25+/CD4+spleen lymphocytes of tumor bearing mice (18.8%±1.26%) was found to be significantly higher than that innormal mice (9.99%±1.90%) (P<0.01 ). Immunohistochemistry of spleen tissue also confirmed that there wasan increase in Treg in tumor-bearing mice, while in carcinomas it showed Treg cells to be present in tumorinfiltrating lymphocyte areas while Granzyme B was rarely observed. Anti-tumour immunity was suppressed,and this might be associated with the increase of Tregs. Our observations suggest that the CD4+CD25+Treg/CD4+ proportion in spleen lymphocytes can be a sensitive index to evaluate the change of Tregs in hepatocellularcarcinoma mice and the Treg may be a promising therapeutic target for cancer.     

监测肾癌患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞在术后免疫治疗中的作用

目的:探讨肾癌患者外周血CD4+CD25+T淋巴细胞的监测在术后辅助免疫治疗中的作用。方法:将24例肾癌患者随机分为两组:A组,根治性肾切除术后行IFN-α辅助免疫治疗;B组,单纯行根治性肾切除术;C组,10例健康对照。分别在术前、术后1周以及术后3个月免疫治疗结束时采集外周血样本,流式细胞仪检测CD4+、CD8+、CD4+CD25、CD4+CD25high T淋巴细胞亚群含量,并计算各部分比值。结果:A、B组术前CD4+CD25+、CD4+CD25high T淋巴细胞亚群总体上增加,并且其含量随肿瘤分期的进展而增加(P<0.05),但部分患者并不高于健康对照组。免疫治疗后,肾癌患者CD4+CD25+T淋巴细胞总体略有上升,但术前较高的患者中,约2/3下降。结论:利用流式细胞仪监测肾癌患者外周血CD4+CD25+T淋巴细胞亚群可反映机体抗肿瘤免疫状态,有助于预测免疫治疗的预后,为肾癌尤其是早期肾癌术后辅助免疫治疗的选择提供参考。     

肾癌术后干扰素治疗对人体免疫功能的影响

目的:评价肾癌患者术后应用干扰素免疫治疗对机体免疫水平的影响。方法:选取肾癌患者50例,术后应用干扰素(IFN)行免疫治疗,同时选取术后未行免疫治疗的肾癌患者45例作为对照组。于术前及术后1、2、3个月检测患者免疫指标（CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、CD19+、CD16+56+）,比较两组间指标差异及手术前后免疫指标变化情况。结果:术前免疫治疗组与对照组间各项免疫指标差异无统计学意义（P＞0.05）。术后1、2、3个月对照组各免疫指标与术前相比差异无统计学意义（P均＞0.05）,治疗组术后第2、3个月较术前均有显著差异（P＜0.05、P＜0.01）。结论:肾癌术后应用干扰素免疫治疗能有效提高机体免疫水平,对患者远期预后需进一步随访。     

CD4+CD25+CCR6+调节性T细胞在小鼠乳腺癌模型中对CD8+T细胞的抑制作用

目的：观察CD4+CD25+CCR6+调节性T细胞（简称CCR6+Tregs）体内对CD8+T细胞功能的抑制作用,并探讨其与肿瘤免疫逃逸的关系。方法：建立4T1乳腺癌细胞荷瘤裸鼠模型,FACS分选CCR6+Tregs,检测其Foxp3的表达;FACS分选4T1特异性CD8+T细胞,CFSE标记后分别与CCR6+Tregs或CCR6Tregs共同过继转输入4T1荷瘤裸鼠体内,观察荷瘤裸鼠肿瘤生长情况和小鼠存活时间;FACS检测肿瘤组织中CD8+T细胞的增殖、细胞因子IFNγ的产生和颗粒酶B的表达情况。结果：CCR6+Tregs和CCR6Tregs均高表达Foxp3;CCR6+Tregs和CD8+T细胞共转输组4T1荷瘤裸鼠肿瘤的生长明显快于CCR6Tregs共转输组和CD8+T细胞单转输组,同时该组荷瘤裸鼠生存时间也明显缩短（P<0.05）;CCR6+Tregs和CD8+T细胞共转输组CD8+T细胞的增殖、IFNγ的产生和颗粒酶B的表达均明显低于CCR6Tregs共转输组和CD8+T细胞单转输组（P<0.05）。结论：CCR6+Tregs在体内可以有效抑制CD8+T细胞的功能,其在肿瘤免疫逃逸和肿瘤发生、发展中发挥重要作用。