白花蛇舌草注射剂联合紫杉醇对HO-8910和HeLa细胞生长抑制作用的研究

目的:研究白花蛇舌草注射液(ODI)联合紫杉醇(PTX)对人卵巢癌HO-8910PM细胞株与人宫颈癌HeLa细胞株的生长抑制作用.方法:用M1T法测定白花蛇舌草注射液及其联合紫杉醇分别作用于HO-8910和Hela细胞的生长抑制作用,并用IC50值进行评价.结果:ODI作用于HeLa和HO-8910细胞的IC50值分别为8.88μg/ml和2.91μg/ml(按ODI总黄酮计);LY294002作用于HeLa与HO-8910细胞的IC50分别为43.92μg/ml和23.91 μg/ml;PTX作用于HeLa和HO-8910的IC50值分别为>100μmol/L与46.75μgmol/L;PTX联合ODIICl0(10%生长抑制浓度,ICl0)作用于HeLa和HO-8910细胞的IC50值分别为>100μmol/L与31.02μmol/L,PTX联合LY2940021C10作用于HeLa和HO-8910的IC50值分别为73.26μmol/L和36.01μmol/L.结论:ODI对HO-8910和HeLa细胞均有明显的生长抑制作用,且呈浓度依赖;无毒性剂量或ICl00DI联合PTX)(可明显增加HO-8910细胞对PTX的细胞毒作用或敏感性,但对HeLa细胞无明显影响.     

阿克拉霉素对HeLa细胞染色体形成及细胞凋亡的影响

目的：探讨阿克拉霉素对HeLa细胞染色体形成的影响机制及与细胞凋亡的关系。方法：MTT方法测定阿克拉霉素对HeLa细胞的IC50值。不同浓度阿克拉霉素作用于HeLa细胞24h后，制备染色体，Giemsa染色，观察；应用吖啶橙和嗅乙啶双荧光染色及DNA凝胶电泳检测细胞凋亡；Western-blot分析半胱氨酸蛋白酶—3(caspase-3)含量变化。结果：阿克拉霉素对HeLa细胞的IC50值为6．83μg/ml。染色体分析表明，阿克拉霉素作用于HeLa细胞一定时间后，染色体不规则凝集，正常M期染色体形成受阻。细胞凋亡检测可见10μg/ml药物组与0．1μg/ml组及对照组相比，差异显著。Western-blot分析表明，10μg/ml药物组caspase-3表达比0．1μg/ml组和对照组显著增加。结论：阿克拉霉素能够阻止HeLa细胞染色体形成与分离，导致细胞G2／M期阻滞，诱导细胞凋亡。caspase-3在HeLa细胞凋亡中发挥重要作用。     

甲基苯丙氨酸氮芥(AT_(1420))对艾氏腹水癌细胞的杀伤动力学及对HeLa细胞DNA合成的抑制

本实验室以前的工作表明AT_(1420)具有显著抗瘤活性而无蓄积毒性。本文进一步表明:AT_(1420)主要抑制指数生长期的EAC细胞;在体外对培养中的HeLa细胞有直接细胞毒作用,100μg/ml浓度对~3H-TdR参入的抑制率43—55％.50μg/ml抑制率23—26％,25μg/ml抑制率为16％。采用显微分光光度计测定单个细胞DNA含量,并用电脑分析数据,对EAC细胞增殖周期动力学研究表明:用药后4小时即出现G_1期细胞堆积,进入S期受阻。用药后24小时仍有大量细胞堆积于G_1期,并出现相当部分低DNA含量的细胞。提示临床应用AT_(1420)时不宜与S期特异性药物(如MTX AraC等)同时使用以免产生自限作用而降低疗效。     

毛叶茶和龙井茶提取物的抗瘤作用以及对DNA拓扑异构酶Ⅱ的抑制作用

作者用噻唑蓝(MTT)法研究了毛叶茶提取物(毛茶C)和龙井茶提取物(龙井A)对人宫颈癌HeLa细胞、鼻咽低分化鳞癌CNE_2细胞和胃低分化粘液腺癌MGC—803细胞的细胞毒作用。毛茶C对上述3种细胞株的半数抑制浓度(IC_(50))分别为495.6μg/ml、243.4μg/ml、268.6μg/ml;而龙茶A分别为421.1μg/ml、311.4和274.6μg/ml。体内抑瘤试验表明,毛茶C在2.5—10mg//kg剂量范围内,对小鼠艾氏腹水癌实体型(ESC)有明显抑制作用,抑瘤率为17.8％—48.3％;对小鼠网织细胞肉瘤(L_2)的抑瘤率为28.3％—54.5％;龙茶A在2.5—10mg/kg剂量范围内对艾氏实体瘤ESC的抑制率为31.5％—49.4％;对L_2的抑瘤率为35.8％—50％。而二种茶叶提取物对小鼠肉瘤S—180仅有边缘的抗瘤活性。用琼脂糖凝胶电泳方法则得毛茶C和龙茶A在1—50μg/ml浓度范围内,对DNA拓扑异构酶Ⅱ的抑制率分别为75—100％,抑酶作用有明显的量效关系。在50μg/ml浓度均可抑制全部酶活性,推测DNA拓扑异构酶Ⅱ可能是这两种茶叶提取物的靶酶。     

青蒿琥酯对人宫颈癌HeLa细胞的乏氧杀伤和辐射增敏作用初探

目的：观察青蒿琥酯对人宫颈癌HeLa细胞的乏氧杀伤及辐射增敏作用的影响。方法：采用Mosman′sMTT细胞增殖检测法。结果：青蒿琥酯（Artemisinin,Art）能够抑制人宫颈癌HeLa细胞的生长,其半数抑制浓度（IC50）为37μg/ml,在乏氧条件下,青蒿琥酯对HeLa细胞的IC50O 30μg/ml,在本实验条件下,咪嗦哒唑（MISO）的辐射增敏比（SER）为1．39,而青蒿琥酯在10μg/ml的SER为1．32,在30μg/ml的SER为2．00。结论：青蒿琥酯具有一定的辐射增敏作用,其辐射增敏作用是否与其结构有尚待深入研究。     

顺铂水针剂与粉针剂体外细胞毒作用的差异性研究

目的:比较两种不同剂型顺铂针剂的细胞毒效应.方法:用含不同终浓度顺铂水针剂与粉针剂的培养液培养Hela细胞系,采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测细胞存活率并计算顺铂的50%抑制浓度(IC50),分析比较两种不同顺铂剂型针剂在体外的细胞毒效应.结果:相对于顺铂粉针剂,相同终浓度顺铂水针剂作用的Hela细胞存活率较低,其IC50值分别为(14.0±0.07)μg·ml-1及(15.03±0.26)μg·ml-1(P=0.003).其中在(0.1、1、10)μg·ml-1组中细胞存活率存在差异.结论:顺铂水针剂较粉针剂体外细胞毒效应强.     

去氢骆驼蓬硷抗癌作用的研究

目的研究去氢骆驼蓬硷对小鼠移植性肿瘤及肿瘤细胞株的抑制作用.方法体内抑瘤试验选用肉瘤S-180、肝癌H22、艾氏腹水癌等瘤株腹腔注射给药,观察对实体瘤的抑制作用及对腹水癌的生命延长作用.体外细胞毒试验选用K562、Hela细胞株,采用MTT法,计算对肿瘤细胞株平均细胞生长抑制率.结果去氢骆驼蓬硷对肉瘤S-180及肝癌H22的抑制率具有非常显著性差异(P＜0.01)对艾氏腹水癌作用不明显.对K 562细胞生长半数抑制浓度IC50为3.8μg/ml,对Hela细胞生长半数抑制浓度IC50为13.1μg/ml.结论去氢骆驼蓬硷对肿瘤细胞体内抑瘤试验、体外细胞毒试验均有明显的抑制作用.     

采用微团培养模型探讨染料木黄酮的发育毒性

目的：利用大鼠胚胎肢芽和中脑细胞微团培养模型研究染料木黄酮（genistein,GEN）的发育毒性,并探讨其发育毒性机制。方法：实验分为不同浓度的GEN（0、0.94、1.875、3.75、7.5、15.0μg/ml）染毒组,受试物分别作用于培养大鼠胚胎肢芽细胞和中脑细胞微团,采用中性红摄取法检测GEN对细胞增殖的影响,采用阿利新蓝染色方法检测GEN对肢芽细胞分化的影响,采用图像处理分析方法检测GEN对中脑细胞分化的影响。计算细胞50%增殖抑制浓度（IC50-P）和50%分化抑制浓度（IC50-D）。用不同浓度的雌激素受体拮抗剂ICI182780（0.1,0.5,1μmol/L）分别预处理细胞后再加入GEN（7.5μg/ml）,观察雌激素受体途径在GEN诱导的发育毒性中的作用。结果：GEN对肢芽细胞的IC5-0P和IC5-0D分别为5.4μg/ml和4.9μg/ml,GEN对中脑细胞的IC5-0P为6.2μg/ml,IC5-0D分别为7.1μg/ml（集落分化个数）或5.3μg/ml（集落分化面积）。IC5-0P/IC50-D的比值均接近1。在GEN7.5μg/ml染毒组,用ICI182780预处理细胞,不能改变GEN诱导的发育毒性作用。结论：根据Flint＇s和欧洲替代方法验证中心ECVAM致畸物判别标准,并结合人体实际可能接触水平,认为GEN为强致畸物,并且对人类存在可能的风险。其致畸作用可能主要通过细胞毒性发挥作用,不依赖于雌激素受体途径。     

双氢青蒿素逆转人肺腺癌细胞多药耐药作用研究

目的观察双氢青蒿素和顺铂在体外对A549及A549/CDDP细胞的作用,分析双氢青蒿素抗肺癌和逆转耐药效果。方法采用细胞计数法绘制亲代A549细胞和A549/CDDP细胞生长曲线,细胞增殖及增殖抑制实验采用MTT检测法:A549/CDDP细胞分为顺铂单药作用组,联合作用组(100nM双氢青蒿素加顺铂,320nM双氢青蒿素加顺铂),序贯治疗组(100nM双氢青蒿素预处理),用MTT检测法分析计算IC50值进行比较。结果顺铂对人肺腺癌A549细胞和A549/CDDP细胞IC50值分别为0.270μg/ml和5.703μg/ml,耐药倍数为21.12。对A549/CDDP细胞,联合治疗100nM双氢青蒿素组顺铂IC50值为2.225μg/ml(逆转倍数2.56),320nM双氢青蒿素组顺铂IC50值0.464μg/ml(逆转倍数12.29)。对A549/CDDP细胞,序贯治疗组顺铂IC50为2.523μg/ml(逆转倍数2.26)。结论联合用药和序贯治疗均可逆转A549/CDDP细胞对顺铂的耐药。     

青蒿琥酯的抗肿瘤作用研究

目的:研究青蒿琥酯的抗肿瘤作用.方法:用青蒿琥酯或全铁转铁蛋白联合青蒿琥酯进行体外抗肿瘤实验,用MTT法检测青蒿琥酯对体外培养人结肠癌HCT-8细胞、人红白血病K562细胞及人乳腺癌MCF-7细胞的杀伤作用.结果:体外实验表明青蒿琥酯对上述3种人肿瘤细胞均有杀伤作用,对HCT-8、K562、MCF-7的IC50值为1.99μg/ml、1.62μg/ml、10.54μg/ml;加用1mg/ml全铁转铁蛋白处理3小时后再给予青蒿琥酯,其IC50值分别为3.54μg/ml、4.14μg/ml、11.95μg/ml.结论:青蒿琥酯钠在体外对HCT-8、K562、MCF-7等细胞有明显的杀伤作用,加用全铁转铁蛋白未明显增强对肿瘤细胞的杀伤作用.     

紫杉醇对K562细胞增殖抑制及诱导凋亡的作用

目的　探讨紫杉醇体外抑制 K5 6 2细胞株及诱导凋亡的作用。方法　体外培养 K 5 6 2白血病细胞株 ,以不同浓度紫杉醇处理 12～ 72小时后 ,用 MTT法测定细胞生长抑制作用 ,用细胞形态学观察和 DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡 ,用流式细胞仪 (FCM)检测细胞 DNA含量及细胞周期。结果　 K5 6 2细胞经紫杉醇处理后细胞生长受抑 ,对 K5 6 2细胞的半数抑制浓度 IC50 为 0 .84μg/ ml。经药物作用后可见细胞染色质浓聚和凋亡小体形成 ,FCM显示细胞凋亡率明显增加 ,但电泳检测未见 DNA裂解。结论　紫杉醇能抑制 K5 6 2细胞的生长 ,诱导细胞凋亡可能为其抗肿瘤作用机制之一     

金花茶总黄酮体外抗肿瘤活性的实验研究

目的观察金花茶总黄酮对4种肿瘤细胞株体外增殖的作用。方法采用噻唑蓝染色法(MTT法)检测金花茶总黄酮在体外对人肝癌细胞株(SMMC-7721)、人高分化鼻咽癌细胞株(CNE-1)、人胃腺癌细胞株(SGC-7901)、人大细胞肺癌细胞株(H460)的增殖抑制率,并计算相应的半数生长抑制浓度(IC50)。结果金花茶总黄酮对SMMC-7721、CNE-1、SGC-7901、H460均有抑制作用(P<0.05),且呈一定的浓度依赖性,IC50分别为242.44μg/ml、313.79μg/ml、259.87μg/ml、385.87μg/ml。结论体外实验显示金花茶总黄酮有抗肿瘤活性。     

Iq7611对博莱霉素所致的L1210细胞DNA单链断裂重接修复的影响

Iq7611是从中草药马蔺子的种皮中分离出来的一种醌类化合物。本实验以碱洗脱微孔滤膜法证明了Iq7611(20、40μg/ml)能导致小鼠白血病L1210细胞DNA单链断裂,这可能是Iq7611的抗癌作用机理之一。实验还证实,博莱霉素也能导致DNA单链断裂,但细胞经37℃温育后,其DNA断裂仍可修复。而Iq7611(10μg/ml)与BLM合用则可抑制BLM所致的DNlA单链断裂后的重接修复。     

榄香烯联合热疗对Raji细胞增殖的影响及其机制探讨

目的:观察榄香烯(elemene,ELE)联合热疗(hyperthermia,HTM)对人Burkitt’s淋巴瘤Raji细胞增殖及DNA拓扑异构酶Ⅰ和Ⅱ(TOPOⅠ,TOPOⅡ)表达的影响。方法:采用噻唑蓝还原法(MTT)观察ELE联合HTM对Raji细胞增殖的影响;流式细胞术(FCM)检测细胞周期;RT-PCR法检测细胞TOPOⅠ和TOPOⅡmRNA表达;Western Blot法检测细胞TOPOⅠ和TOPOⅡ蛋白表达。结果:与单纯HTM和单纯ELE比较,ELE联合HTM对Raji细胞增殖的抑制作用增强(P<0.05),呈时间和剂量依赖性,而ELE联合HTM作用Raji细胞24h、48h和72h后,IC50值(93μg/ml、68μg/ml和41μg/ml)小于单纯ELE IC50值(116μg/ml、84μg/ml和60μg/ml);ELE联合HTM阻滞Raji细胞于S期[(35.40±1.27)%、(42.38±2.50)%VS(48.88±1.93)%,P<0.05],并下调TOPOⅠ和TOPOⅡmRNA及蛋白的表达。结论:ELE联合HTM可增强对Raji细胞增殖的抑制作用,下调TOPOⅠ、TOPOⅡ表达可能是其机制之一。     

胰岛素对人乳腺癌细胞株化疗增效作用的体外研究

目的:探讨用胰岛素提高癌细胞生长代谢水平及其对化疗敏感性的影响。方法:选用人乳腺癌细胞株(MDA-MB-543)为靶细胞,以胰岛素为细胞生长代谢促进剂,采用MTT比色法,分析细胞活力及细胞代谢。结果:MTT比色分析法发现,胰岛素(4.0~32.0mU/ml,8~18小时)使MDA-MB-543细胞株的细胞总数,细胞活力增加,可增加5-Fu(28.0μg/ml)及阿霉素(0.36μg/ml)的细胞毒作用。结论:初步证实提高癌细胞的生长代谢水平,继之给予化疗,可提高化疗药物的细胞毒作用。     

β-榄香烯联合紫杉醇诱导胃癌细胞凋亡的体外研究

目的:观察联合β-榄香烯和紫杉醇对诱导胃癌细胞凋亡以及对凋亡相关蛋白表达的影响。方法:β-榄香烯和紫杉醇单独及联合作用于胃癌SGC7901细胞,MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡,免疫印记检测凋亡相关蛋白的表达。结果:单药β-榄香烯作用SGC7901细胞24、48和72小时的IC50值分别为(52.56±6.26)、(28.69±2.36)和(13.33±0.64)μg/ml。单药紫杉醇作用24、48和72小时的IC50值为(7.23±1.98)、(1.72±0.76)和(0.22±0.19)μg/ml。选用低浓度药物(10μg/ml的β-榄香烯和2μg/ml的紫杉醇)联合处理SGC7901细胞24小时,与相应浓度β-榄香烯、紫杉醇单药组相比,两药联合组对SGC7901的增殖抑制率显著增强(P<0.05),细胞凋亡率显著提高。进一步研究发现β-榄香烯和紫杉醇联合后,诱导了PARP裂解以及显著下调了Bcl-2与Bax的比值。结论:β-榄香烯和紫杉醇联合用药后,可能通过下调Bcl-2与Bax的比值诱导PARP裂解,进而抑制胃癌细胞增殖和诱导细胞凋亡。     

二十碳五烯酸体外逆转人乳腺癌细胞株耐药性的研究

目的：研究不饱和脂肪酸二十碳烯酸（EPA）逆转肿瘤细胞多药耐药性。方法：采用MTT法对EPA和阿霉素合用时肿瘤细胞的IC50值进行检测。结果：浓度为10μg/ml的EPA能提高阿霉素对MCF－7／R的细胞毒作用。提高倍数达7．2，浓度为20μg/ml的EPA提高倍数则达6．7，结论：EPA在体外能部分逆转乳腺癌耐药细胞对阿霉素的耐药性。     

骆驼蓬碱抗癌作用研究

本文采用纯的盐酸骆驼蓬碱进行了体外及体内抗癌试验。结果表明:骆驼蓬碱对Hela细胞、S—180肉瘤腹水细胞均有明显的体外细胞毒作用,半数抑制浓度IC_(50)分别为37.84μg/ml及34.7μg/ml。对艾氏腹水癌细胞的细胞毒作用较弱,IC_(50)为139.97μg/ml。在体内抑瘤试验中,骆驼蓬碱对S—180肉瘤、网状细胞肉瘤L_2、肝癌等瘤株,用22.5及45μg/kg/d两个剂量组,重复3次试验,除网状细胞肉瘤L_2有一组实验疗效不显著(P>0.05)外,其余各组都具有明显的疗效,抑瘤率为S—180 32.2—47.7％,L_2 33.2—49.6％,肝癌29.4—58.2％,均有显著差异。该药对艾氏腹水癌疗效不显著。     

香加皮宝霍甙-Ⅰ诱导人食管癌细胞Eca-109凋亡的实验研究

背景与目的:研究香加皮宝霍甙-Ⅰ诱导人食管癌细胞Eca_109的凋亡作用及其作用机制。材料与方法:采用MTT法分析不同浓度(12.5、25、50μg/ml)宝霍甙-Ⅰ分别作用Eca_109细胞24h、48h、72h后,对细胞增殖的抑制作用;经不同浓度(12.5、25、50μg/ml)宝霍甙-Ⅰ作用Eca-109细胞48h后,用流式细胞术分析细胞凋亡率及凋亡相关蛋白Survivin的表达;用透射电镜观察凋亡细胞的超微结构变化;用RT-PCR技术检测SurvivinmRNA的表达。结果:不同浓度宝霍甙-Ⅰ均可明显抑制Eca-109细胞的增殖(P均<0.05)且随浓度的增加和作用时间的延长抑制作用增强,作用48h后的半数抑制浓度IC50为24.8μg/ml。不同浓度宝霍甙-Ⅰ作用48h后,均可诱导Eca_109细胞凋亡,50μg/ml时细胞凋亡率达55.26,且导致Eca-109细胞发生凋亡特征性超微结构改变,并使Eca-109细胞SurvivinmRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.01)。结论:香加皮宝霍甙-Ⅰ可抑制Eca-109细胞增殖,诱导细胞凋亡,该作用可能与下调细胞Survivin表达有关。     

长春新碱对鼻咽癌细胞增殖和周期的影响

[目的]探讨长春新碱(VCR)对鼻咽癌CNE鄄2Z细胞增殖和周期的影响。[方法]MTT法检测增殖抑制率和IC50,流式细胞术分析细胞周期。[结果]不同浓度的VCR分别处理细胞24h、48h、72h时,抑制率随浓度的增加和时间的延长而增加,其IC50分别为(2.01±0.26)、(1.59±0.23)、(0.92±0.11)μg/ml,各IC50间的差异有非常显著性意义(P<0.01)。0.5μg/ml、1μg/ml、2μg/mlVCR分别处理细胞6h、12h、24h时,G0/G1期细胞明显下降,G2/M期细胞明显升高,随时间的延长变化更明显(P<0.01)。[结论]VCR对CNE鄄2Z细胞具有增殖抑制作用,该抑制作用具有剂量和时间依赖性;阻滞细胞于G2/M期,此阻滞作用具有时间依赖性;一定剂量的VCR可能通过阻滞CNE鄄2Z于G2/M期而抑制其增殖。