脱氢表雄酮对氧化应激诱导的血管平滑肌细胞核转录因子表达的影响

目的观察脱氢表雄酮(DHEA)对血管平滑肌细胞(VSMC)氧化应激损伤中核转录因子(NF-κB)的表达干预作用。方法贴块法培养雄性SD大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞,实验分四组A组(对照组)、B组(50μmol/LH2O2处理6h)、C组(50μmol/LH2O2 1nmol/LDHEA处理6h)和D组(50μmol/LH2O2 10nmol/LDHEA处理6h)。免疫细胞化学法分析核因子p65(NF-κBp65)核易位情况。结果B组VSMCNF-κBp65的核易位阳性率显著高于A组;而与B组相比,C组和D组VSMCNF-κBp65的核易位阳性率显著降低,其中D组降低更为明显。结论DHEA能显著抑制H2O2引起VSMCNF-κB的激活,这可能是DHEA延缓动脉粥样硬化形成的机制之一。     

核因子相关因子2与心血管疾病

氧化应激是多种心血管疾病的重要发病机制之一,降低体内的氧化应激水平,对心血管疾病的防治具有重要的意义。核因子相关因子2是最近发现的体内调控氧化应激的重要转录因子,具有抗炎、抗凋亡、抗增殖、保护心肌细胞等作用。现就核因子相关因子2在心血管疾病中的作用做一综述。     

血管平滑肌细胞分泌氧化应激诱导因子的纯化与确定

活性氧通过促进血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖已被认为是动脉粥样硬化和高血压的病因之一。我们以前的实验显示 ,超氧阴离子生成剂LY835 83激活VSMC细胞外信号调节激酶 (ERK1 2 ) ,并呈现出两个效应峰值特征。早期效应出现在LY835 83作用后 10min ,晚期效应出现在LY835 83作用后 2h。LY835 83通过激活ERK1 2诱导VSMC增殖。我们推测 ,LY835 83作用的第一相是其进入细胞后产生超氧阴离子所致 ,因为超氧阴离子产生抑制剂Tiron只取消LY835 83的第一相作用 ;而第二相作用可能是由于LY835 83刺激VSMC释放ERK1 2激活因子所为。我们将这种因子命名为氧化应激诱导因子 (secretedoxida tivestress -inducedfactors,SOXF)。为了证实此一假设 ,我们采用SPSepharose、HeparinSepharose、PhenylSepharose、GelFiltration等一系列亲合层析和凝胶过滤技术 ,以分离获得的成分是否能激活ERK1 2为监测指标 ,从受LY835 83刺激 2h的VSMC条件培养基中分离出SOXF蛋白。然后通过毛细管色谱 (CCG)技术和ElectrosprayIonizationTandemMassSpectrometry技术分析发现热休克蛋白 90 -a (HSP90 -a)和CyclophilinB是主要的SOXF。免疫印迹分析发现 ,VSMC受LY835 83刺激后特异地分泌HSP90-a,而不是HSP90 -b。随后的实验发现 ,条件培养基中的H     

血管平滑肌细胞凋亡的相关调控因子

血管平滑肌细胞（VSMC）凋亡参与了动脉粥样硬化及冠状动脉介入治疗术后再狭窄等心血管疾病的发生和发展过程,有关VSMC凋亡的研究已经成为冠心病防治研究的热点。细胞凋亡是多种基因参与且复杂的分子调控机制,多种细胞因子在此过程中发挥极其重要的作用。该文对有关VSMC凋亡的调控因子概况作一综述。     

血管平滑肌细胞凋亡的相关调控因子

血管平滑肌细胞（VSMC）凋亡参与了动脉粥样硬化及冠状动脉介入治疗术后再狭窄等心血管疾病的发生和发展过程,有关VSMC凋亡的研究已经成为冠心病防治研究的热点。细胞凋亡是多种基因参与且复杂的分子调控机制,多种细胞因子在此过程中发挥极其重要的作用。该文对有关VSMC凋亡的调控因子概况作一综述。     

老年大鼠血管平滑肌细胞对氧化应激反应的研究

目的观察老年大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）对氧化应激损伤的反应。方法贴块法培养雄性Wistar大鼠胸主动脉VSMC，采用50umol／L H2O2处理细胞6h形成氧化应激，比较老年组和成年组VSMC对氧化应激反应的差异。RT—PCR法检测单核细胞趋化因子-1（MCP-1）mRNA的表达，比色法测定细胞丙二醛（MDA）含量。结果给予H2O2氧化应激前，老年组VSMC的MCP-1mRNA表达及MDA含量无显著差异（P〉0．05）；给予H2O2氧化应激后，老年组VSMC的MCP-1mRNA表达及细胞MDA含量的显著高于成年组VSMC。结论老年大鼠VSMC对氧化应激有着更强烈的反应，这可能是老年期易患动脉粥样硬化性血管疾病的重要机制之一。     

核因子相关因子-2与动脉粥样硬化的研究进展

正动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)疾病在心血管疾病中属常见病。与大部分心血管病一样,As的发生发展与心血管系统自我保护功能丧失有关,而心血管系统的自身保护功能主要体现在其抗氧化应激的能力上。其中Keapl/Nrf 2是细胞内抵抗氧化应激和保持氧化还原平衡的最重要信号通道~[1],他存在一定争议。一、核因子相关因子-2的生物特性核因子相关因子-2(Nrf 2)是一种多功能转录因子,它是Moi等~[2]1994年在克隆实验发现的一种新蛋白,因为与核因     

核因子E2相关因子2介导的氧化应激在糖尿病肾脏疾病肾纤维化中的研究进展

肾纤维化是DKD终末期不可逆的肾脏病理变化,氧化应激（OS）在肾纤维化中起重要作用。核因子E2相关因子2(Nrf2)是维持氧化还原动态平衡的关键转录因子。本文综述Nrf2介导的OS在DKD肾纤维化中的研究进展。     

姜黄素诱导急性高脂血症大鼠动脉核因子E2相关因子2表达

目的观察姜黄素对急性高脂血症大鼠血脂、血管内皮功能及氧化应激状态的影响,探讨其抗氧化作用与核因子E2相关因子2(Nrf2)表达水平的关系。方法将雄性SD大鼠随机分为5组,即正常对照组、高脂组、姜黄素低剂量组[125 mg/(kg·d)]、姜黄素高剂量组[250 mg/(kg·d)]、阿托伐他汀组[(2.1 mg/(kg·d)]。正常对照组、高脂组用给药溶质玉米油预处理,其他组用相应药物预处理。预处理10天后采用腹腔注射蛋黄乳液的方法建立急性高脂血症大鼠模型,腹腔注射24 h后测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)、氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)、一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)活力,同时留取主动脉组织测定丙二醛(MDA)含量及行病理学检查。结果与正常对照组比较,高脂组TC、TG、LDLC、ox-LDL、MDA和Nrf2的表达升高,SOD活力、NO含量降低。与高脂组比较,高、低剂量姜黄素组及阿托伐他汀组TC、TG、ox-LDL、MDA降低,Nrf2、SOD活力、NO含量增加。高剂量姜黄素组上述作用优于低剂量姜黄素组。结论姜黄素通过降低血脂及诱导Nrf2的表达,提高主动脉的抗氧化能力,发挥内皮保护作用。     

钙磷诱导大鼠血管平滑肌细胞钙化的机制研究

目的：探讨氧化应激损伤在钙磷诱导的血管平滑肌细胞（VSMCs）钙化过程中的作用机制。
　　方法：采用氯化钙（CaCl2）联合β-甘油磷酸钠（β-GP）建立大鼠VSMCs钙化模型。实验分为4组,对照组、钙化组、钙化+过氧化氢（H2O2）组和钙化+过氧化氢酶组。8天后分别通过茜素红S染色法和邻甲酚肽络合酮比色法检测各组细胞钙结节形成及钙含量;活性氧检测试剂盒（DCFH-DA探针）检测各组细胞活性氧阳性细胞数;蛋白免疫印迹法检测各组细胞中成骨转录因子Runx2的蛋白表达量。
　　结果：钙化组活性氧的产生、钙结节、钙含量及Runx2蛋白表达量均显著高于对照组,钙化+过氧化氢组与钙化组相比,各项指标进一步升高,差异有统计学意义（P<0.05）。钙化+过氧化氢酶组活性氧产生量、钙结节、钙含量及Runx2蛋白表达量均低于钙化组和钙化+过氧化氢组,仍高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）,但其中Runx2蛋白表达量与对照组相比则差异无统计学意义（P>0.05）。
　　结论：氯化钙联合β-GP通过激活ROS-Runx2信号通路诱导大鼠VSMCs钙化形成。     

西罗莫司联用阿托伐他汀对大鼠血管平滑肌细胞氧化应激损伤和一氧化氮合酶的影响

目的探讨西罗莫司和阿托伐他汀联合使用对大鼠血管平滑肌细胞氧化应激损伤和一氧化氮合酶(NOS)的影响。方法取大鼠血管平滑肌细胞进行实验,分为空白组、DMSO组、西罗莫司组(100nmol/L)、阿托伐他汀组(3μmol/L)和联合组(西罗莫司100nmol/L加阿托伐他汀3μmol/L)。实验各组细胞给予相应药物干预2h后,加入三丁基过氧化氢诱导氧化应激损伤,24h后检测各项指标。结果与空白组比较,DMSO组、西罗莫司组、阿托伐他汀组和联合组细胞增殖率明显下降(P<0.01)。与空白组和DMSO组比较,阿托伐他汀组和联合组超氧化物歧化酶水平明显上升和丙二醛水平明显下降(P<0.05,P<0.01)。与空白组、DMSO组、西罗莫司组比较,阿托伐他汀组和联合组诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA和蛋白表达明显下降(P<0.01);联合组iNOS mRNA和蛋白表达较阿托伐他汀组明显下降(P<0.05,P<0.01)。结论在氧化应激状态下,西罗莫司和阿托伐他汀均能抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖和抗氧化损伤,维持NOS系统平衡,联合应用的效果优于单独应用。     

脱氢表雄酮对氧化应激诱导的血管平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白-1 mRNA表达的影响

目的观察脱氢表雄酮(DHEA)对氧化应激诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1) mRNA达的影响。方法贴块法培养雄性Wistar大鼠胸主动脉VSMC,实验分A组(对照组)、B组(50μmol/L H_2O_2处理6h)、C组(50μmol/L H_2O_2+1nmol/L DHEA处理6h)和D组(50μmol/L H_2O_2+10nmol/L DHEA处理6h)。逆转录聚合酶链式反应检测MCP-1的mRNA表达;比色法检测细胞丙二醛(MDA)含量。结果B组VSMC的MCP-1 mRNA表达及细胞MDA的含量显著高于A组;与B组比较,C组和D组VSMC的MCP-1 mRNA表达及细胞MDA含量显著降低,其中D组降低更为明显。结论DHEA能显著抑制H_2O_2引起VSMC的MCP-1 mRNA表达的上调,从而减轻氧化应激对VSMC的损伤,这部分是通过DHEA的直接抗氧化作用达到的。     

The effects of glucose-induced oxidative stress on growth and extracellular matrix gene expression of vascular smooth muscle cells

Summary Vascular smooth muscle cell (VSMC) dysfunction plays a role in diabetic macrovasculopathy and this may include abnormalities in growth characteristics and the extracellular matrix. As the actual mechanisms by which glucose induces VSMC dysfunction remain unclear, the aim of this study was to assess the potential role of glucose-induced oxidative stress. Porcine aortic VSMCs were cultured for 10 days in either 5 mmol/l normal glucose or 25 mmol/l D-glucose (high glucose). There was evidence of oxidative stress as indicated by a 50 % increase in intracellular malondialdehyde (p < 0.05), increased mRNA expression of CuZn superoxide dismutase and Mn superoxide dismutase (by 51 % and 37 % respectively, p < 0.01) and a 50 % decrease in glutathione in 25 mmol/l D-glucose (p < 0.001). Growth was increased by 25.0 % (p < 0.01). mRNA expression of extracellular matrix proteins (collagens I, III, IV and fibronectin) was not altered by high glucose in these experimental conditions. Repletion of glutathione with N-acetyl L-cysteine (1 mmol/l) in VSMC grown in high glucose was associated with reduction in malondialdehyde and restored growth to that of normal glucose. The water soluble analogue of vitamin E, Trolox (200 μmol/l), reduced malondialdehyde concentrations, but had no effect on glutathione depletion or the increased growth rate seen with high glucose. The addition of buthionine sulphoximine (10 μmol/l) to VSMC cultured in normal glucose reduced glutathione, increased malondialdehyde and increased growth to a similar extent as that found in high glucose alone. These results suggest that thiol status, rather than lipid peroxides, is a key factor in modulating VSMC growth and that mRNA expression of extracellular matrix proteins is not increased in VSMC under conditions of glucose-induced oxidative stress. [Diabetologia (1998) 41: 1210–1219] Received: 26 November 1997 and in revised form: 28 April 1998     

色素上皮衍生因子对缺氧/复氧血管平滑肌细胞增殖及凋亡的影响

目的:观察重组人源性色素上皮衍生因子（Pigment epithelium-derived factor,PEDF）对缺氧/复氧(H/R)后平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）增殖和凋亡的影响。方法:以组织贴块法培养VSMCs后,随机分为3组,即对照组、H/R模型组及模型+PEDF组。模型+PEDF组又按PEDF的浓度(50、100、200及400 ng/ml)分为4组。用MTT比色法检测VSMCs增殖的变化;用Hoechst/PI双染色法和流式细胞仪法(FCM)检测VSMCs的凋亡;用Western blot法测定凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果:①MTT比色法检测显示,缺氧、复氧可促进VSMCs增殖;PEDF能够抑制VSMCs增殖,以200 ng/ml的PEDF作用更显著。Hoechst/PI双染色法和FCM检测显示,经100、200 ng/ml的PEDF作用后,VSMCs的凋亡率较对照组和H/R组明显增高(P<0.01)。与对照组和H/R组比较,Western blot检测显示,100、200 ng/ml的PEDF能够下调Bcl-2蛋白表达并上调Bax蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论:H/R后,VSMCs增殖增多,PEDF可抑制H/R后VSMCs增殖,其作用可能与Bcl-2、Bax通路促进VSMCs凋亡有关。     

氧化应激与核因子E2相关因子2在非酒精性脂肪性肝病中的作用

非酒精性脂肪肝病(NAFLD)是全球最流行的慢性肝病,发病率逐年上升。氧化应激是非酒精性脂肪肝病经典“二次打击”发病机制的第二次打击,是目前公认的NAFLD发病机制之一。核因子E2相关因子2(Nrf2)是保护肝细胞免受氧化应激的一组正向调节因子,是细胞抗氧化应激的关键因子,也是拮抗肝脏氧化应激的关键转录因子,在NAFLD发生发展中起重要作用,Nrf2可能是改善NAFLD的潜在治疗靶点。对氧化应激及Nrf2通路在NAFLD中的发病机制进行了综述。     

血管平滑肌细胞表达牛磺酸转运体

牛磺酸是一种条件必须氨基酸,是细胞内高丰度的一种自由氨基酸。牛磺酸主要通过牛磺酸转运体（Taurine transporter,TAUT）摄入细胞。本研究探讨牛磺酸转运体在血管平滑肌细胞内的表达。通过RT-PCR,测定TAUT基因在血管平滑肌细胞mRNA的表达,利用Western blot和免疫组织化学方法检测TAUT在血管平滑肌细胞蛋白的表达。体外培养的大鼠血管平滑肌细胞和大鼠主动脉组织切片中血管平滑肌细胞均可表达TAUT。血管平滑肌细胞可转录及翻译TAUT。     

血管平滑肌细胞表型的成骨转换与血管钙化

血管钙化是血管壁中钙盐沉积的过程,导致血管硬化和失去弹性。它通常发生在中老年人,尤其是患有动脉粥样硬化、高血压、糖尿病和慢性肾脏疾病等疾病患者。血管钙化是一个主动的过程,其中平滑肌细胞的成骨转换是重要事件之一。这些细胞在钙化过程中释放钙离子,导致钙盐的沉积,形成钙化斑块。血管钙化受多种因素调节,包括高磷、高钙水平及氧化应激、机械应力等。此外,中医药研究在减轻血管钙化方面显示出潜力,例如灵芝孢子粉和其衍生物,三七、黄芩素、根皮素、雷公藤甲素等。这些研究为进一步理解和干预血管钙化提供了重要的证据,并揭示了一些潜在的抑制因子,可以作为未来治疗血管钙化的研究方向。