α-1酸性糖蛋白的分离纯化

本文报道α-1酸性糖蛋白的分离纯化。人血清经DEAE-Sephadex-A50和ReactiveBlue 2-Sepharose CL-6B两次柱层析即可获得纯化的α-1酸性糖蛋白。纯化产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳、SDS-聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳、免疫电泳和琼脂双向扩散等证明,其纯度和特异性均符合要求。     

Isolation and purification of guinea pig inner ear antigens by preparative polyacrylamide gel electrophoresis

目的　分离与纯化豚鼠内耳抗原 ,为寻找内耳特异性抗原打下基础。方法　采用冻融法提取豚鼠内耳抗原 ,制备性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离与纯化内耳抗原的亚组份 ,快速染色和脱色定位蛋白区带 ,将主要蛋白区带切下匀浆回收 ,并与分析性聚丙烯酰胺凝胶电泳比较。结果　豚鼠内耳抗原的加样量为 3mg时 ,各亚组份仍能有效分离 ,三种主要亚组份 (31、4 2 - 4 5和 60kD)的相对含量分别为 2 5 99%、2 1 91%和 2 1 1%。结论　制备性PAGE可以用于纯化内耳抗原的主要亚组份。     

琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳检测肠道菌群基因扩增产物的方法学比较研究

琼脂糖凝胶电泳(agarose gel electrophoresis, AGE))和聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis, PAGE)最常用的分离纯化和鉴定核酸的方法.琼脂糖凝胶电泳的有效分离范围是0.1～2kb,聚丙烯酰胺分离小片段DNA(5～500 bp)效果最好,分辨力极高,测序的聚丙烯酰胺凝胶可分离相差lbp的DNA片段.     

人肌肉型醛缩酶的纯化和抗血清制备

以硫酸铵分级和磷酸纤维素亲和层折法分离和纯化了人肌醛缩酶。经醋酸纤维素膜电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定均为一条带。用Swensson法测得酶比活力为48U/mg,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定酶的亚单位为一条带,亚基分子量约为40,000。纯化的酶免疫鸡产生     

招远市5例异常血红蛋白的解链及纯化

①目的 对发现于招远市的异常血红蛋白(Hb)进行分子结构的研究。②方法 取异常Hb血样,以生理盐水洗去血浆蛋白质,再以蒸馏水处理压积红细胞以溶血,溶血液以-20℃的酸性丙酮处理提取珠蛋白,用尿素将珠蛋白解链,再经柱层析分离及纯化异常链。③结果 经羧甲基纤维素及交联葡聚糖层析分离及纯化得到异常α或β链,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)检查纯度,这些异常α或β链均为一条电泳带。④结论 纯化的异常α或β链均电泳纯净。     

子宫内膜黏液抗菌肽的分离纯化及鉴定

目的从人子宫内膜黏液酸溶性提取物纯化及鉴定抗菌多肽,探讨子宫内膜的抗菌机制。方法采用酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳琼脂糖弥散法分析人子宫内膜黏液酸溶性提取物的抗菌活性,切下相应的抗菌条带进行洗脱电泳,并用反相高效液相色谱进一步分离纯化。用琼脂糖弥散法检测纯化分子抗菌活性;Trieine-SDS-PAGE电泳检测其相对分子质量。根据N端氨基酸序列和质谱分析的测序结果推导纯化分子的氨基酸序列,并进行生物信息学分析。结果从人子宫内膜酸溶性提取物中纯化出一种相对分子质量为6777的抗菌肽HUP-39,经鉴定为人血红蛋白α链N端第33-95的氨基酸残基片段。该片段富含碱性氨基酸,包含3个完整的α螺旋跨膜结构域,对大肠埃希菌氨苄西林耐药株ML-35p、标准株ATCC25922和临床分离株54080有较强的抑菌活性。结论本研究从人子宫内膜黏液酸溶性提取物中分离纯化出的抗革兰阴性菌多肽,为人血红蛋白α链片段。子宫内膜黏液中的抗菌分子不仅来源于上皮细胞和白细胞,也可来源于红细胞。     

招远市5例异常血红蛋白的解链及纯化

（１）目的：对发现招远市的异常血红蛋白（Ｈｂ）进行分子结构的研究。（２）取异常Ｈｂ血样，以生理盐水洗去血浆蛋白质，再以蒸馏水处理压积红细胞以溶血，溶血液以－２０℃的酸性丙酮处理提取珠蛋白，用尿素将珠蛋白解链，再经柱层析分离及纯化异常链。（３）结果：经羧甲基纤维素及交联葡聚糖层析分离及纯化得到了异常α或β链用十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）检查纯度，这些异常α或β链均为一条电永     

亲和层析法纯化溶栓素

目的 :探讨亲和层析纯化溶栓素的方法。方法 :采用高碘酸钠法制备溶栓素抗体的亲和层析介质纯化溶栓素。结果 :提纯的溶栓素经聚丙烯酰胺凝胶电泳 ( PAGE)鉴定为一条带 ,活性回收率为 49.5 %。结论 :亲和层析的高碘酸钠法是纯化溶栓素的一种分离速度快、特异性强、经济、安全可靠的方法 ,并适合于大规模纯化     

El-Tor生物型霍乱弧菌可溶性血凝素的纯化

用改进的Finkelstein的方法从Wg2(El-Tor 生物型)弧菌菌株中提纯的可溶性血凝素有下列特点:(1)纯化的血凝素(SHA)具有凝集红细胞的作用,且对不同来源的红细胞的敏感性不同。(2)纯化的SHA具有蛋白酶的水解活性。(3)经免疫双扩散、免疫电泳检测,纯化的SHA,粗制SHA与纯SHA抗血清反应均呈单一沉淀线。与霍乱肠毒素无反应。(4)聚丙烯酰胺凝胶电泳,SDS-凝胶电泳的结果与文献报道基本一致。     

不同的红细胞破膜方法对血红蛋白A2现象的影响

目的：观察不同破膜方法对HbA2现象的影响。方法：采用淀粉-琼脂糖凝胶电泳对不同破膜方法处理的红细胞进行电泳。结果：溶血液组的HbA2电泳速度最慢,距碳酸酐酶（CA）的距离最近;红细胞组的HbA2电泳速度最快,距离CA的距离最远;其它破膜组的HbA2电泳速度居中,位于溶血液和红细胞HbA2之间。结论：HbA2现象与红细胞膜完整性有关。     

微柱层析法检测糖基化血红蛋白的临床意义

使用国产724弱阳离子交换树脂的微柱层析法对正常健康人、糖尿病、尿毒症和高脂血症等惠者进行糖基化血红蛋白(HbA_1c)的检测。发现正常人健康含量是6.98±1.26%、糖尿病组 HbA_1c 含量是11.98±3.98%,两组之间的差异在统计学上具有非常显著的意义(P<0.01)。空腹血糖与 HbA_1c 的水平呈正相关,提示 HbA_1c的检测对糖尿病的诊断和治疗效果的判断有一定的意义。尿毒症和氮质血症组的HbA_1c 含量为12.6±2.85%,亦较正常对照组为高,这是由于在患尿毒症和氮质血症时,氨基甲酰血红蛋白增高而导致 HbA_1c 含量增加。非糖尿病的高脂血症组 HbA_1c的变化是属于假性升高。     

联合检测在地中海贫血诊断中的价值

目的探讨红细胞平均体积、红细胞脆性和血红蛋白电泳联合检测在地中海贫血诊断中的应用价值。方法对100例患病组（地贫患病组）和80例非地贫组（对照组）进行血细胞计数仪血常规测定、红细胞脆性检测、血红蛋白电泳仪进行血红蛋白电泳分析。结果MCV、红细胞脆性、Hb电泳单项检测对地中海贫血诊断的灵敏度及特异度分别为90．3％、77．5％、71．3％及70．1％、91．0％、91．8％；MCV、红细胞脆性、Hb电泳3项检测联合检测的灵敏度、特异度为100％、61．8％；经u检验，联合检测的灵敏度、特异度与单项检测相比，差异有统计学意义（P〈0．05）。单项MCV、红细胞脆性和Hb电泳的阳性例数分别为91例、78例和71例，联合检测阳性数为68例。结论地中海贫血患者联合检测优于单项检测。     

原发性肝癌91例临床病理分析

本文报告91例原发性肝癌,其中男性74例(81.3％),女性17例(18.7％)。平均发病年龄44.3岁。组织学观察:其中肝细胞性肝癌77例(84.6％),胆管癌9例(9.9％),混合细胞性肝癌2例(2.2％)和肝母细胞瘤3例(3.3％)。在91例肝癌中37例(40.6％)合并肝硬变,11例(12％)合并肝血吸虫病;4例(4.4％)合并慢性病毒性肝炎。作者发现胆管细胞性肝癌所伴有的临床症状如发热、腹水、AFP(+)、恶病质等明显地轻于肝细胞性肝癌(P<0.05)。     

胃粘膜尿素酶试验的临床价值

已有报告胃粘膜尿素酶试验可以预测幽门弯曲菌感染及活动性炎症程度。本文报告164例胃病患者胃粘膜尿素酶试验结果。胃粘膜大致正常者该试验结果全部阴性;慢性活动性胃炎阳性率为63.5％;消化性溃疡82.1％;轻度浅表性胃炎为14％、中度87.3％、重度100％。结果提示尿素酶试验阳性率与胃内炎症活动性有关,该试验简单、迅速,临床可常规用来判断胃内炎症程度及有无幽门弯曲菌感染。     

两种α-地中海贫血检测方法的应用探讨

目的 探讨血红蛋白电泳试验和PCR基因确证试验在α-地中海贫血临床诊断上的优劣.方法 先用红细胞渗透脆性试验筛查新生儿、产检、婚检三类人群血液标本.阳性者重采标本,做血红蛋白电泳试验和PCR基因试验确证试验,比较两种方法的α-地贫检出率.结果 共筛查血液标本7 820例,其中获得红细胞脆性试验阳性1526例,占总人数的19.51％(包含α-地贫和β-地贫患者).1 526例阳性血液经用血红蛋白电泳试验,诊断为α-地贫者822例,占阳性人数的53.87％;分别同时进行PCR基因试验和三种广东地区最常见的缺失型α-地贫检测,获得确证患者785例,占阳性人数的51.44％.两种方法经统计比较,x2=1.80,P＜0.25,差异没有统计学意义,说明两种方法对α-地贫患者的检出率相近,有较理想的可比性.结论 血红蛋白电泳试验是一种既经济便宜又简单快捷的α-地贫诊断方法,其优越特性值得在临床实验室推广普及使用.     

银染和组化法对肝内神经的显微观察

本文取20例新生儿肝脏和10例动物包括兔、狗和猴的肝脏材料,采取Cajal-Faworsky银染和神经组化技术研究肝内神经的形态和配布。来自肝固有神经的分支通过肝门进入肝内伴随血管走行,在肝内各自形成肝内丛、血管丛,肝实质丛和终丛。参与神经丛形成的神经含有肾上腺素能和胆碱能两种神经成份,前者属于交感神经节后纤维,分布于血管壁中膜和胆管肌层,以肝动脉尤以丰富;后者为副交感神经节后纤维,主要分布血管壁外膜和中膜。并证实肝小叶内结构受双重神经支配,肝内也含有内脏传入神经纤维,粗神经纤维末梢在肝小叶内呈结样膨大。在肝内丛、血管丛、肝实质丛和肝小叶内的肝细胞索之间散在有大小不等神经节和孤立神经细胞元已经得到证实文中还讨论肝内神经配布的机能。     

血红蛋白释放试验在轻型β-地中海贫血的应用

目的：探讨血红蛋白释放试验的意义。方法对轻型β-地中海贫血患者的红细胞做琼脂糖混合胶电泳，经过第一次电泳后，再接着做第二次或更多次电泳，并且观察轻型β-地中海贫血患者的血红蛋白释放情况。结果通过第二次电泳试验发现，原点再次释放出血红蛋白，通过此次研究发现，轻型β-地中海贫血患者所释放出来的血红蛋白数量远远多于正常人所释放出的血红蛋白。结论在人体红细胞中，血红蛋白以不同的状态存在，在经过第一次电泳试验后，绝大部分血红蛋白会被释放，残存少量血红蛋白在红细胞中，通过第二次电泳试验会被全部释放。     

妊娠期肝内胆汁郁积症综合文献335例临床分析

本文收集我国1964～1984年335例ICP临床资料,近二年占80％,多发地区在长江流域。临床特点是在妊娠晚期以搔痒和黄疸为特征。实验室检查:阻塞性黄疸。肝活检示肝内胆汁郁积。胆酸增高有助于本病的早期诊断。本症误诊率为11.6％。病因尚不清楚,可能与孕期血浆中雌、孕激素过高,或与遗传因素有关。对母儿有一定的不良影响,围产期病死率85％,防治目的是降低围产期病死率。     

乙酰胆碱对蟾蜍心脏的双重作用

将Ach配成10~(-14)、10~(-13)……10~(-2)M—系列溶液,观察对离体蟾蜍心脏收缩的影响。发现在阿托品化前和后,10~(-14)～10~(-11)M和10~(-9)～10~(-6)M的Ach使心脏收缩产生轻度增强效应;10~(-9)～10~(-6)M和10~(-4)～10~(-3)M的Ach使其产生抑制作用。兴奋效应与NE释放有关;抑制作用在阿托品化前为Ach作用M_1受体所致,阿托品化后主要与M_2受体有关。