虫草素对人舌癌细胞凋亡、自噬的影响及其分子机制

目的研究虫草素对人舌癌TCA-8113细胞的细胞周期、凋亡和自噬的影响并探讨虫草素抑制舌癌发生的作用机制。方 法用CCK-8法检测虫草素对TCA-8113细胞增殖的作用;用流式细胞术检测不同浓度药物对细胞周期、细胞凋亡的影响;用荧 光定量PCR和Western blot 的方法检测凋亡相关基因Caspase-3,Caspase-9,Bcl-2、Bax;免疫组化方法检测自噬相关蛋白LC- 3β,P62,p-mTOR,AMPK。结果CCK-8 细胞增殖检测结果表明,虫草素能明显抑制TCA-8113 细胞的增殖,24 h 时IC50为 3.548 mg/mL;48 h时IC50为1.185 mg/mL;流式细胞结果显示,诱导细胞周期阻滞与S期,虫草素能显著的诱导TCA-8113细胞 凋亡,并且呈浓度依赖性。荧光定量PCR和Westen blot结果表明,虫草素可诱导促凋亡基因Bax、Caspase-3、Caspase-9的表达, 抑制抗凋亡基因Bcl-2的表达（P<0.05）;免疫组化的结果表明,虫草素可促进LC-3β和AMPK的表达,抑制P62和p-mTOR的表 达（P<0.05）。结论虫草素对TCA-8113细胞的抑制并促进细胞凋亡,同时通过AMPK/mTOR通路诱导细胞自噬。     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂FK-228诱导人舌癌细胞的凋亡研究

目的探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂FK-228对Tca-8113细胞增殖、凋亡机制。方法低糖DMEM培养Tca-8113;倒置显微镜观察Tca-8113细胞受FK228的作用;在不同药物浓度处理24 h、48 h、72 h后利用CCK-8检测Tca-8113细胞增殖情况;Tca-8113凋亡细胞利用DNA ladde试剂盒检测。结果 0.1μg/m L,2μg/m L,4μg/m L FK-228对Tca-8113处理24 h、48 h、72 h后均有抑制作用,且与剂量、作用时间呈正相关。经FK228药物处理48 h后的细胞有DND LDEER出现。结论组蛋白去乙酰化酶抑制剂FK-228可呈降低人口腔鳞癌Tca-8113细胞活性,抑制其细胞增殖,诱导细胞凋亡。     

醋酸棉酚对人舌鳞癌Tca8113细胞hMLH1蛋白及mRNA表达的影响

目的：研究醋酸棉酚（gossypol acetic acid,GAA）对人舌鳞癌Tca8113细胞hMLH1蛋白及mRNA表达的影响,探讨GAA的抗肿瘤作用机制．方法（1）应用Western-blot法检测Tca8113细胞在GAA作用48 h后hMLH1基因的蛋白表达变化;（2）应用实时荧光定量（RFQ-PCR）法检测Tca8113细胞在GAA作用48 h后hMLH1基因mRNA 的表达变化．结果（1） Western-blot检测显示：分别用终浓度5μmol/L、10μmol/L、15μmol/L的GAA作用人舌鳞癌Tca8113细胞48 h后,hMLH1基因的蛋白表达比对照组明显增高（＜0.05）;（2） RFQ-PCR检测显示：以终浓度5μmol/L、10μmol/L、15μmol/L的GAA作用于Tca8113细胞48 h后hMLH1基因的mRNA表达水平高于对照组（＜0.05）．结论一定浓度的GAA能够使人舌鳞癌Tca8113细胞系hMLH1基因的蛋白及mRNA表达上调,这可能是GAA抗肿瘤作用机制之一．     

人参皂苷Rg1对LPS致心肌细胞损伤的保护作用及其对细胞lincRNA-COX2表达的影响

目的 探讨人参皂苷Rg1对脂多糖(LPS)诱导的小鼠心肌细胞损伤的保护作用及其对促炎分子lincRNA-COX2表达的影响.方法 分离培养原代BALB/c乳鼠的心肌细胞,用终浓度为25、50、100 μmol/L人参皂苷Rg1预处理12 h后,分别加入终浓度为10 mg/L的LPS刺激6 h(25、50、100 μmol/L人参皂苷Rg1+LPS组),以单纯10 μg/L LPS(LPS组)、未经人参皂苷Rg1及LPS处理(对照组)作对照,ELISA法检测心肌细胞培养上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)蛋白分泌;MTT法检测细胞存活率;流式细胞仪检测细胞活性氧(ROS)生成;RT-qPCR法检测细胞内lincRNA-COX2表达变化情况.结果 与LPS组相比,25、50、100 μmol/L人参皂苷Rg1+LPS组细胞培养上清液中的TNF-α、IL-6蛋白浓度呈剂量依赖性地减少,心肌细胞中lincRNA-COX2表达被抑制,心肌细胞的存活率相应提高.结论 人参皂苷Rg1能够保护LPS所致小鼠心肌细胞损伤,其机制可能与抑制炎症因子TNF-α、IL-6分泌,下调促炎因子lincRNA-COX2表达有关.     

羊栖菜多糖对离体小鼠NK细胞活性和巨噬细胞功能的影响

目的观察羊栖菜多糖对离体小鼠NK细胞活性和巨噬细胞功能的影响。方法10、30、100mg/L浓度的羊栖菜多糖分别作用小鼠脾细胞6、12和18h,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法测定NK细胞对YAC-1细胞的杀伤活性;10、30、100mg/L浓度的羊栖菜多糖分别作用小鼠腹腔巨噬细胞16、24和48h,测定其所分泌的一氧化氮（NO）量。结果10、30mg/L浓度组的羊栖菜多糖作用6、12h对离体小鼠NK细胞活性有明显的促进作用,以30mg/L浓度羊栖菜多糖作用组效果最为显著（P〈0.01）;10、30mg/L浓度组的羊栖菜多糖促进小鼠腹腔巨噬细胞分泌NO作用更为明显,以10mg/L浓度组作用48h效果最为显著（P〈0.01）。结论羊栖菜多糖能明显增强离体小鼠NK细胞活性,促进巨噬细胞释放NO。     

黄芪多糖应用于人外周血源性树突状细胞体外培养的实验研究

目的 探讨黄芪多糖对人外周血源性树突状细胞(DC)成熟的影响.方法 从健康人外周血中分离获得PBMC,体外采用多种细胞因子(TNFα、IL-4、GM-CSF)联合诱导,获得了分化与功能相对成熟的DC.并采用流式细胞仪检测技术,观察了不同浓度黄芪多糖(终浓度为50、100、200 mg/L)对DC表面分子表达以及DC与T细胞在体外混合培养体系中活细胞相互作用过程的干预作用.结果 LPS组、50mg/L组、100mg/L组的细胞呈悬浮生长,可见部分细胞聚集成簇,细胞表面可见数量不等、形态不一的树突样突起,扫描电镜下细胞呈不规则形,表面粗糙,胞体有形态不一的突起,α-萘酸酯酶非特异性酯酶染色呈阴性,200 mg/L组细胞大量凋亡崩解.培养6 d后实验组的DC表面CD86(TCD86*LPS=9.1302、TCD86*50 mg/L=6.4024、TCD86*100 mg/L=8.3165,P<0.001)、HLA-DR(THLA-DR*LPS=6.3118、THLA-DR*100mg/L=7.0752,P<0.001;THLA-DR*50 mg/L=3.5797,P<0.01)等表型表达上调,与对照组比较差异有显著性意义.LPS组和100mg/L组的CD14等表达下调,与对照组比较差异有显著性意义(TCD14*LPS=8.5709、TCD14*100=8.6103,P<0.001),50mg/L组的CD14表达下调,但与对照组比较差异无显著性意义(TCD14*50 mg/L=1.7918,P>0.05).结论 研究初步表明,适当剂量黄芪多糖可以上调DC膜表面与抗原递呈相关的HLA-DR、CD86等共刺激分子的高表达,对促进DC的分化与成熟,有着显著的影响,并增加DC的免疫活性.     

齐拉西酮对脂多糖损伤海马神经干细胞的保护作用

目的 探讨齐拉西酮对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）损伤后海马神经干细胞（neural stem cells,NSCs）活性的作用及其凋亡的影响.方法 建立体外大鼠海马NSCs的LPS损伤细胞模型,分为对照组（sham组）、LPS组、LPS＋齐拉西酮组（包括1μmol/L、5μmol/L、10 μmol/L和20 μmol/L等4个不同剂量组）,药物作用48 h或72 h后,采用WST-1试剂检测细胞活性,乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）试剂盒检测乳酸脱氢酶释放情况,并采用流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果 （1）细胞活力：作用48 h后,与对照组（吸光度值0.380±0.029）相比,LPS组（吸光度值0.265±0.047）细胞活力显著下降（P＜0.01）,而LPS＋齐拉西酮5μmol/L组（吸光度值0.316±0.008）组与LPS＋齐拉西酮10 μmol/L组（吸光度值0.321±0.006）则显著提升其活力（与LPS相比较,均P＜0.05）.作用72 h后的细胞活力结果与48 h相似,LPS组细胞活力显著低于对照组（P＜0.01）,而LPS＋齐拉西酮5μmol/L组与LPS＋齐拉西酮10μmol/L组则缓解了LPS对其活力的抑制.（2）LDH检测结果显示,作用48 h或72 h后,LPS组LDH的释放水平显著高于sham组（均P＜0.01）,而LPS＋齐拉西酮5μmol/L组与LPS＋齐拉西酮10 μmol/L组的LDH释放水平均显著低于LPS组（均P＜0.01）.（3）流式细胞术检测凋亡的结果显示,作用48 h后,与对照组[（9.15±1.54）％]相比,LPS组[（22.67±2.15）％]凋亡百分率显著上升（P＜0.01）,而LPS＋齐拉西酮5μmol/L组[（18.45±3.84）％]组与LPS＋齐拉西酮10 μmol/L组[（17.87±2.29）％]则显著抑制其凋亡（与LPS相比较,均P＜0.05）.作用72 h后,LPS组的凋亡百分率[（15.70±2.97）％]仍然显著高于对照组[（8.45±1.04）％],而LPS＋齐拉西酮10 μmol/L组[（10.52±1.42）％]则显著低于LPS组（P＜0.05）.结论 适当浓度的齐拉西酮能抑制LPS导致的海马NSCs损伤,这一作用可能是其发挥神经保护效应的细胞学基础之一.     

茶多酚对体外培养人胚肝细胞生存率的影响

目的 探讨不同浓度茶多酚对体外培养人胚肝细胞(L-02细胞)生存率的影响.方法 体外培养L-02细胞,采用50、100、250、500、1 000 mg/L浓度的茶多酚分别干预12、24、36、48 h,倒置显微镜观察各组细胞形态学的变化,用噻唑蓝法测定细胞的存活率.结果 与对照组比较,250 mg/L及以上浓度茶多酚组干预12 h后细胞形态即发生变化,初期表现为细胞皱缩、体积变小,而后细胞固缩变为圆形,出现大量漂浮细胞及细胞碎片,形态学变化的程度与茶多酚浓度及作用时间有关.50 mg/L、100 mg/L茶多酚组作用48 h时L-02细胞存活率均高于对照组(P＜0.05);250 mg/L及以上浓度茶多酚组干预后L-02细胞存活率均低于对照组(P＜0.05),并且随着作用时间的延长和茶多酚浓度的增加,L-02细胞存活率减少(P＜0.01).结论 低剂量(≤100 mg/L)茶多酚可能具有促进肝细胞生长、保护肝细胞的作用,较大剂量(≥250 mg/L)则有细胞毒性和抑制细胞生长的作用.     

苦参碱对人舌癌Tca-8113细胞增殖抑制及机制研究

目的 探讨分化诱导剂苦参碱(Matrine Mat)对人舌癌Tca-8113细胞系增殖抑制作用及其发生的机制.方法 体外培养舌癌TCA-8113细胞,用不同浓度的苦参碱对体外培养的舌癌TCA-8113细胞进行干预.分别采用MTT;细胞周期检测;免疫细胞化学染色、间接免疫荧光联合流式细胞仪定量检测等方法,观察其对舌癌TCA-8113细胞的增殖抑制作用并探讨该作用发生的机制.统计学分析采用12.00统计软件包,计量资料用均数±标准差(x±s)表示,t检验做显著性比较,P<0.05为显著性检验水准.结果 经Mat处理后的舌癌TCA-8113细胞生长速度减慢,细胞周期明显阻滞;其PCNA表达明显下降.结论 Mat对舌癌TCA-8113细胞的增殖有显著的抑制作用;其增殖抑制作用发生可能是通过对细胞周期阻滞及调控增殖相关基因表达发生.     

基于小鼠黑色素瘤肺转移模型探讨丙泊酚上调DR5表达发挥抑瘤作用的研究

目的 恶性黑色素瘤是一种恶性化程度高、易转移的由黑色素细胞恶性增殖引起的皮肤癌。本研究旨在探讨丙泊酚对小鼠B16F10黑色素瘤肺转移的抑制作用,以期为丙泊酚是否更适用于黑色素瘤相关手术麻醉提供一定的理论基础。方法 体外细胞实验采用CCK-8方法考察不同浓度的丙泊酚对B16F10细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测不同实验组B16F10细胞凋亡率;Western blotting法检测各实验组DR5蛋白表达的变化。体内实验采用尾静脉注射B16F10细胞方法建立模型组,将C57BL/6J雄性小鼠24只,采用随机数字表法分为4组,即正常对照组,黑色素瘤肺转移模型组,丙泊酚50 mg/kg、10 mg/kg剂量组,每组6只,观察腹腔注射丙泊酚对小鼠肺组织肿瘤转移结节的影响。结果 体外实验结果显示,对照组与10μmol/L、50μmol/L、100μmol/L 3个浓度实验组于72 h时的细胞相对增殖能力(490 nm OD值)分别为0.91±0.03、0.81±0.02、0.71±0.02和0.61±0.02;100μmol/L丙泊酚处理B16F10细胞在24 h、48 h和72 h三个时间点的...     

Akt抑制剂MK2206对舌鳞癌TCA-8113细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制

目的：探讨Akt抑制剂MK2206对舌鳞状细胞癌(舌鳞癌)TCA-8113细胞增殖和凋亡的影响,并阐明其可能的作用机制。方法：取处于对数生长期舌鳞癌TCA-8113细胞株随机分为对照组和1、5、25、125及250 nmol/L MK2206实验组。在不同剂量及时间处理因素下,采用MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率,蛋白质印迹分析检测细胞中caspase-9、Bad 、GSK-3β、p-Akt和T-Akt蛋白表达水平。 结果：舌鳞癌TCA-8113细胞在MK2206
作用12、24和36 h的半数抑制浓度（ＩＣ５０）分别为（112.54±1.67）、（79.67±2.01）和(33.33±1.98） nmol/L。FCM法检测,1、5、25、125和250 nmol?L-1 MK2206作用舌鳞癌TCA-8113细胞12 h后,细胞凋亡率分别为（14.2±0.74）%、（19.3±0.45）%、（35.1±0.45）%、（39.6±0.48）%和（52.1±0.19）%,与对照组比较差异均有统计学意义（P<0.01）。蛋白质印迹分析,随着MK2206药物剂量和作用时间的增加,p-Akt、Bad 和GSK-3β蛋白表达水平下降,与对照组β-actin比较其条带的颜色变暗;caspase-9蛋白表达水平升高,与对照组β-actin比较其条带的颜色变深。T-Akt蛋白表达变化不明显,与对照组β-actin比较条带的颜色无明显不同。结论：Akt抑制剂MK2206可抑制舌鳞癌TCA-8113细胞增殖并诱导凋亡。     

miR-200c对舌癌Tca8113细胞增殖和凋亡的影响

目的：探讨 miR-200c 对人舌鳞状细胞癌 Tca8113细胞增殖和凋亡的影响。方法将 miR-200c 的模拟物通过脂质体转染到人舌鳞状细胞癌 Tca8113细胞内,通过四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞增殖能力、流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率、Western blot 检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）和 Bcl-2蛋白的表达。结果与对照组相比,miR-200c 模拟物20、40、80 nmol／L 组的 Tca8113细胞生长受到明显抑制,差异有统计学意义（P ＜0．05）,miR-200c 模拟物的浓度越大,作用时间越长,抑制效果越明显（P ＜0．05）;转染 miR-200c 模拟物48 h 后,Tca8113细胞停滞于 G0／G1期,细胞凋亡率显著增加,差异有统计学意义（P ＜0．05）;Western blot 证明20、40、80 nmol／L 组 Bcl-2蛋白表达量明显低于对照组,而 Caspase-3蛋白表达量明显高于对照组（P ＜0．05）。结论miR-200c 过表达可抑制舌癌 Tca8113细胞增殖并诱导细胞凋亡。     

补骨脂乙素对舌鳞状细胞癌Tca8113细胞增殖的抑制作用和凋亡诱导作用及其机制

目的：观察补骨脂乙素（IBC）对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞增殖和凋亡的影响,并阐明其可能的作用机制。方法：将体外培养的Tca8113细胞分为对照组（0 μmol·L^-1）和不同浓度IBC组（10、20、40及80 μmol·L^-1）。通过MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞中Akt、p-Akt、Erk、p-Erk、Bax、Bcl-2和Caspase-3蛋白的表达水平。结果：MTT法检测,随着IBC浓度的增加和作用时间的延长,Tca8113细胞的增殖抑制率逐渐增加,12、24和48h半数抑制浓度（IC₅₀）分别为（285.13±8.97）、（132.40±7.76）和（58.56±5.93） μmol·L^-1,不同时间点IC₅₀比较差异有统计学意义（P < 0.05）。流式细胞术检测,与对照组（1.69%±0.65%）比较,作用48h后20和40 μmol·L^-1 IBC组细胞凋亡率（分别为8.21%±2.32%和22.45%±1.18%）明显升高（P < 0.05）。Western blotting法检测,与对照组比较,作用48h后20和40 μmol·L^-1 IBC组细胞中Bcl-2、p-Akt和p-Erk表达水平明显降低（P < 0.05）,Bax表达水平明显升高（P < 0.05）;Akt和Erk蛋白表达水平无明显变化（P > 0.05）;与对照组比较,作用48h后40 μmol·L^-1 IBC组Tca8113细胞中Caspase-3蛋白表达水平明显升高（P < 0.05）。结论：IBC可抑制Tca8113细胞的增殖并诱导细胞凋亡,Akt和Erk通路可能是其诱导肿瘤细胞凋亡的途径。     

三七总皂苷对高糖诱导大鼠视网膜微血管内皮细胞损伤的保护作用

目的观察三七总皂苷(PNS)对高浓度葡萄糖致大鼠视网膜微血管内皮细胞(RRCECs)损伤的保护作用和对细胞黏附分子-1(ICAM-1)的影响。方法体外原代培养RRCECs,并通过免疫荧光化学方法鉴定;用PNS作用于4~6代的RRCECs,实验分为正常组、高糖组(30 mmol/L)和高糖不同浓度PNS(20、50、100 mg/L)组,分别使用MTT比色法和台盼蓝计数法观察PNS对细胞活力及数目的影响,使用Western blotting检测药物作用前后ICAM-1的表达变化。结果 MTT比色法结果显示,PNS 50、100 mg/L作用48 h和72 h可明显减轻高糖造成的RRCECs损伤,提高RRCECs活力(P0.01);台盼蓝计数结果显示,在PNS作用48 h后PNS 100 mg/L组细胞数目明显增加(P0.01),72 h后PNS 50、100 mg/L组细胞数目均明显增加(P0.05)。Western blotting检测显示,随着PNS药物浓度的增高,高糖环境下RRCECs中的ICAM-1表达量逐渐减少(P0.05)。结论PNS可以减轻高糖引起的RRCECs损伤,减少高糖环境下RRCECs中ICAM-1表达。PNS对RRCECs的保护作用与ICAM-1表达调节之间的关系有待进一步研究。     

PTEN基因调控口腔鳞癌细胞TCA-8113增殖及凋亡

目的 评估PTEN基因在人口腔鳞癌细胞系TCA-8113中的增殖抑制和促凋亡功能.方法 利用PTEN真核表达质粒转染TCA-8113细胞,另设PBS处理作为空白组,转染pcDNA3.1质粒和Lipofectamine处理作为对照组.采用MTT和克隆形成实验检测细胞增殖情况,采用流式细胞术、TUNEL和Western b...     

COX-2抑制剂对人舌鳞状细胞癌Tca-8113细胞COX-2和Ang-1基因表达的影响

目的 探讨环氧化酶（COX-2）抑制剂尼美舒利（NIM）对人舌鳞状细胞癌Tca-8113细胞中COX-2和Ang-1基因表达的影响及其意义. 方法 不同浓度的COX-2抑制剂NIM（25,50,100,200 μmol/L）,以含0.4％的二甲基亚砜为对照组,处理人舌鳞状细胞癌Tca-8113细胞48 h,用RT-PCR法检测不同浓度的COX-2抑制剂处理人舌鳞状细胞癌Tca-8113细胞48 h后其COX-2 mRNA、Ang-1 mRNA的表达情况. 结果 与对照组相比,人舌鳞状细胞癌Tca-8113细胞中COX-2 mRNA、Ang-1mRNA经过不同浓度COX-2抑制剂NIM处理后表达水平下降,且下降呈浓度依赖性. 结论 COX-2抑制剂NIM可通过COX-2途径下调Ang-1基因表达以抑制肿瘤血管生成.     

塞来昔布对人舌鳞癌Tca-8113细胞表达乙酰肝素酶的影响

目的探讨塞来昔布(celecoxib)对人舌鳞癌Tca-8113细胞表达乙酰肝素酶(heparanase,Hpa)的影响。方法用0(对照),10,20,40,80μmol/L五个浓度的塞来昔布干扰Tca-8113细胞24 h后,应用免疫细胞化学方法观察细胞胞质中Hpa的合成情况。结果与对照组相比,实验组中Hpa的表达都明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),用20-80μmol/L塞来昔布干预时Hpa降低水平显著。结论塞来昔布有抑制人舌鳞癌Tca-8113细胞表达Hpa的作用。     

橙皮素对舌癌细胞的生长抑制作用及其机制

目的:检测橙皮素对舌癌细胞生长及Notch1活化的影响,探讨橙皮素抑癌作用机制。方法:将培养的Tca8113细胞分为DMSO对照组和25、50、75、100和125 μmol·L^-1橙皮素处理组。MTT法检测不同浓度橙皮素作用后Tca8113细胞增殖抑制率,流式细胞术检测各组细胞凋亡率和细胞周期分布,定量PCR和免疫印迹分别用于分析橙皮素作用前后Tca8113细胞中Notch1和Hes-1 mRNA及蛋白表达。结果:与DMSO对照组比较,125 μmol·L^-1橙皮素处理组24、48和72 h Tca8113细胞增殖抑制率明显升高(7.88%±1.90%、26.28%±2.2%和47.05%±1.90%)(P<0.05);在橙皮素处理72 h后,25、50、75、100 和125 μmol·L^-1橙皮素处理组细胞增殖抑制率分别为(6.14±1.20)%、(28.69±2.10)%、(28.33±2.60)%、(45.26±3.00)%和(47.05±1.90)%,橙皮素对Tca8113细胞的增殖抑制作用呈现时间剂量依赖性。流式细胞术,橙皮素作用72 h后, 0、50和100 μmol·L^-1橙皮素处理组细胞凋亡百分率从 2.9%±0.5%升高至23.4%±1.7%和 35.1%± 1.9%(P<0.05);G₀/G₁期细胞由(18.6±1.3)%升高至(33.4±1.5)%和(40.5±1.9)%(P<0.05), S期细胞百分率由(70.3±2.5)%下降至(56.8±2.0)%和(48.7±1.8)%(P<0.05)。定量PCR和免疫印迹分析,与DMSO对照组比较,橙皮素作用后Tca8113细胞中Notch1和Hes-1 mRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论:橙皮素能够抑制Tca8113细胞增殖并诱导其发生细胞凋亡和细胞周期G₀/G₁期阻滞,其机制可能与活化Notch1有关联。     

量子点为载体转染survivin siRNA至人舌鳞癌Tca8113细胞的研究

目的靶向survivin基因的siRNA通过量子点为载体转染至人舌鳞癌Tca8113细胞中,研究其对survivin基因表达的影响,为量子点在肿瘤的基因治疗方面提供实验依据。方法 Survivin siRNA通过量子点转染至人舌鳞癌Tca8113细胞中,同时设立LIPOFECTTAMINE2000脂质体为转染载体的对照组以及未转染的空白组,采用实时定量RT-PCR检测各组Tca8113细胞中survivin mRNA表达的改变情况。结果实验组用50pmolQD转染100pmol survivin siRNA入Tca8113细胞48h后,检测到survivin siRNA mRNA表达量相对于空白组下降64%,QD与siRNA的使用比例为1∶2;对照组中用100pmol lipofectamine2000脂质体转染100pmol survivin siRNA入Tca8113细胞48h后,检测到survivin siRNA mRNA表达量相对于空白组下降90%,QD与siRNA的使用比例为1∶1。结论量子点为载体转染survivin siRNA能够有效的抑制Tca8113细胞survivin mRNA的表达,量子点有望作为RNA干扰技术的新型载体。