沙门菌Ⅲ型分泌系统的若干研究

沙门菌（Salmonella.spp）感染人类的肠道系统，能够引起不同的疾病，且其致病性都依赖型分泌机制和/或接触依赖，使分泌蛋白转位到宿主细胞。由沙门菌素力岛-1编码的Ⅲ型分泌系统能促进沙门菌进入皮细胞，而由沙门菌毒力岛-2编码的Ⅲ型分泌系统则在吞噬细胞内具有活性，是吞噬细胞生存所必需的。Ⅲ型分泌系统在动、植物的作用研究可以进一步了解微生物的致病机制，探讨细菌性疾病的治疗策略提供新的理论和技术支持。     

沙门菌Ⅲ型分泌系统的若干研究

沙门菌(Salmonella.spp)感染人类的肠道系统,能够引起不同的疾病,且其致病性都依赖型分泌机制和/或接触依赖,使分泌蛋白转位到宿主细胞。由沙门菌毒力岛-1编码的Ⅲ型分泌系统能促进沙门菌进入上皮细胞,而由沙门菌毒力岛-2编码的Ⅲ型分泌系统则在吞噬细胞内具有活性,是吞噬细胞生存所必需的。Ⅲ型分泌系统在动、植物的作用研究町以为进一步了解微生物的致病机制,探讨细菌性疾病的治疗策略提供新的理论和技术支持。     

沙门菌显色培养基在健康体检沙门菌检测中的应用

传统检测沙门氏菌的培养基以SS、HE为主,但柠檬酸杆菌,变形杆菌在上述培养基上与沙门菌不易区分,若用沙门菌显色培养基成本太高,不适宜基层防疫站在健康体检沙门菌检测中的大量应用,此次采用可疑菌接种三糖铁并同时点种沙门氏显色培养基的大量应用,此次采用可凝菌落接种三糖铁并同时点种沙门菌显色培养基的方法,不仅减少工作量,还提高检出率,具体实验过程如下.     

常州市沙门菌和志贺菌的菌型分布及药敏分析

目的了解常州地区沙门菌和志贺菌的菌型分布和药敏情况。方法对51株沙门菌和115株志贺菌的菌群分布及药敏进行分析。结果51株沙门菌,B群占37.25%,D群占31.37%,C群占17.64%,E群占11.76%;115株志贺菌中,B群占82.34%,D群占13.04%,B群中以F2型为主。药敏试验显示对氨苄西林、四环素、青霉素、复方磺胺甲恶唑耐药严重,对阿莫西林/克拉维酸、氨曲南、亚胺培南敏感。结论该地区沙门菌的菌群分布比较分散,志贺菌主要以F2型为主;药敏试验显示2种细菌对使用时间越久、使用范围越广、使用频率越高的抗生素,耐药现象越普遍。     

临床常见沙门菌及其耐药性分析

[目的]了解淅东南沿海地区临床分离的常见沙门菌分布及耐药情况。[方法]采用ATB药敏反应和鉴定系统对395株甲型副伤寒沙门菌、9株伤寒沙门菌及1株猪霍乱沙门菌进行鉴定,对395株甲型副伤寒沙门菌进行药敏试验。[结果]405株沙门菌经鉴定,甲型副伤寒菌395株(97．5％)、伤寒沙门菌9株(2．2％)、猪霍乱沙门菌1株(0．25％)。其中2000年检出109株(26．9％),2001年检出38株(9．4％),2002年检出135株(33．3％),2003年检出115株(28．4％)。[结论]2000-2003年本市临床检出的沙门菌以甲型副伤寒沙门菌为主并呈散发流行。第3代头孢类抗生素仍是目前耐药性较低的药物。     

常州市饮食服务业人员携带沙门菌菌型分布及耐药分析

目的了解常州市饮食服务行业从业人员携带沙门菌的情况及其菌型分布和耐药性。方法按国家标准对饮食服务行业从业人员进行体检,并对检出的沙门菌进行分型和耐药性检测。结果沙门菌的检出率为0.21%,检出的73株沙门菌中,分为B-E群内4个群,12个菌型。显示德尔卑沙门菌最多(28.76%),其次是阿贡纳沙门菌(17.81%)和火鸡沙门菌(12.32%)。药敏试验显示对复方磺胺甲恶唑、四环素、氯霉素、青霉素、萘啶酸和氨苄西林的耐药性严重;对阿莫西林/克拉维酸、氨曲南和亚胺培南最为敏感。结论该市饮食服务从业人员沙门菌携带情况不可忽视,应继续加强其检测,以预防食源性疾病和保障食品安全。     

浙江省海盐县2007年志贺菌、沙门菌菌型分布及耐药性分析

目的:了解海盐县志贺菌、沙门菌的菌型分布及耐药情况,为制定有效防治措施及指导临床合理用药提供科学依据。方法:按照GB16002-1995、GB17012-1997进行志贺菌、沙门菌检验,药敏试验采用K-B法,依据NCCLS(美国临床实验室标准委员会)规定判断结果。结果:2007年度检出的志贺菌中,B群占60.0%,D群占40.0%,A群和C群未检出,B群中以福氏2 a占优势,构成比为58.3%;检出的沙门菌中,A群占4.8%、B群占47.6%、C群占19.0%、D群占19.0%、E群占9.5%,各菌型中以B群的阿贡纳沙门菌和D群的肠炎沙门菌所占比例稍高,构成比均为19.0%。药敏试验显示志贺菌对四环素、复方新诺明、氨苄青霉素、萘啶酸的耐药率分别为95.0%、90.0%、95.0%、95.0%;沙门菌对四环素、复方新诺明、氨苄青霉素、萘啶酸的耐药率分别为28.6%、33.3%、19.0%、42.9%。结论:2007年海盐县志贺菌感染的优势菌型为福氏志贺菌2 a和宋内志贺菌,沙门菌没有明显的优势菌型。志贺菌和沙门菌的耐药情况相当严重,均对1种或多种抗生素耐药,志贺菌和沙门菌的耐药率无显著性差异,临床治疗宜选诺氟沙...     

fliC基因在快速分型鉴定伤寒沙门菌和甲型副伤寒沙门菌的应用

目的:探讨沙门菌1相鞭毛蛋白抗原fliC基因在快速分型鉴定伤寒沙门菌和甲型副伤寒沙门菌的应用。方法:根据伤寒沙门菌和甲型副伤寒沙门菌1相鞭毛蛋白fliC-d和fliC-a基因以及菌体抗原rfbS基因的核酸序列,设计针对fliC-d、fliC-a及rfbS基因的3对特异性引物,采用多重PCR法进行检测。结果:实验结果显示,伤寒沙门菌和甲型副伤寒沙门菌分别在750 bp和329 bp处扩增出2条特异性目的条带,在258 bp处扩增出1条相同条带,非伤寒沙门菌株和甲型副伤寒沙门菌株均为阴性。结论:fliC基因检测可用于伤寒沙门菌和甲型副伤寒沙门菌的分型鉴定,而rfbS基因则无助于分型鉴定。     

CHROM平板在沙门菌初筛中的应用

目的：用CHROM平板对上海口岸从业人群进行沙门菌初筛。方法：采用cHROM平板进行沙门菌初筛，可疑菌落做血清凝集、肠道综合发酵管生化、VITEK生化鉴定、血清分型。结果：CHROM平板的灵敏度为100％，本中心用CHROM平板初筛，比前两年用SS平板初筛沙门菌检出率高12.2倍。结论：采用CHROM平板初筛，能快速、灵敏、简便、准确地提高沙门菌检出率，该平板尤其适用于食物中毒中沙门菌的快速筛查。     

Effect of river water exposition on adhesion and invasion abilities of Salmonella Oranienburg and Saintpaul

This study was performed to evaluate in vitro the adherence and invasiveness capacity of Salmonella Oranienburg and Saintpaul (isolated from river water) exposed to laboratory and river water growth conditions and inoculated into epithelial HEp-2 cell. Results showed that Salmonella Oranienburg and Salmonella Saintpaul showed lower ability to adhere and invade epithelial HEp-2 cells under both growth conditions as compared to Salmonella Typhimurium reference strain. S. Oranienburg adhesion capacity was not affected by the growth conditions, while S. Saintpaul exposed to river water significantly (p < 0.05) decreased its adhesion capacity by 75.7 %. On the contrary, S. Oranienburg exposed to river water reduced its invasion efficiency by 80 %, whereas S. Saintpaul showed no differences between growth conditions. In conclusion, this study suggests that the exposure to non-host conditions, such as river water, adversely affects the adhesion and invasiveness of Salmonella serotypes differently, impacting on their ability to re-enter a new host.     

表达疟原虫裂殖子表面蛋白1减毒鼠伤寒杆菌的稳定性

目的检测含恶性疟原虫裂殖子表面蛋白１基因片断的重组减毒鼠伤寒杆菌Ｘ４０６４（ｐＱＥＭ１）的入侵宿主能力,所含质粒的稳定性和再表达能力。方法用含恶性疟原虫裂殖子表面蛋白１第１号基因片段的重组减毒鼠伤寒杆菌Ｘ４０６４（ｐＱＥＭ１）灌胃接种ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,用平板培养法、质粒酶切和免疫印迹反应,鉴定从小鼠组织中分离到的该重组菌,测定其表达能力,及在小鼠组织中的消长。结果从小鼠组织中分离到的减毒鼠伤寒杆菌Ｘ４０６４株含有重组的ｐＱＥＭ１质粒;减毒鼠伤寒杆菌Ｘ４０６４（ｐＱＥＭ１）体外表达了恶性疟原虫裂殖子表面蛋白１第１号片断;Ｘ４０６４（ｐＱＥＭ１）在小鼠组织中的消长曲线与Ｘ４０６４的消长曲线基本一致。结论重组ｐＱＥＭ１质粒能稳定地存在于减毒鼠伤寒杆菌Ｘ４０６４株中,不妨碍其入侵宿主细胞,从小鼠组织中分离到的Ｘ４０６４（ｐＱＥＭ１）依然具有表达Ｍ１蛋白的能力。     

沙门菌属对常用抗菌药物敏感性的变化

目的比较近年来伤寒及甲型副伤寒沙门菌属药物敏感性的变化趋势。方法本研究中自2001-2004年分离的沙门菌属菌株42株,其中伤寒沙门菌属22株,甲型副伤寒沙门菌属20株,集中作菌株的鉴定及抗菌药物敏感性的检测。结果药敏结果显示分离的沙门菌属菌株90.0%对氯霉素敏感,对环丙沙星及左氧氟沙星的敏感率分别为88.2%及96.8%,对酶抑制剂复合制剂呈94.7%~100.0%敏感;伤寒沙门菌属对头孢菌素的敏感性自2001-2004年呈上升趋势,而甲型副伤寒沙门菌属则呈下降趋势。结论根据沙门菌属对抗菌药物敏感率的变化,如对环丙沙星敏感率的下降及对氯霉素敏感性的恢复,对于伤寒、副伤寒的经验抗菌治疗方案需要进一步调整。     

一起鼠伤寒暴发流行病学调查

作者调查了包头某医院发生的一起鼠伤寒暴发,发病30例,罹患率16.67％,病死率为20％。鼠伤寒沙门氏菌噬菌体分型以47740噬型为主,占87.10％,是内蒙首次发现。流行病学调查与噬菌体分型相一致。传播途径是由密切接触传播。     

食品中沙门菌检验方法的优化与应用

目的选择最适合食品中沙门菌生长的增菌培养基和分离培养基，促进沙门菌生长，提高沙门菌的检出率。方法在市场上购买一批生的禽、畜类肉制品，分别通过均质器混匀，各分成两份，分别用常规培养基和本实验培养基同时增菌培养，应用改良分子信标荧光PCR检测试剂盒和mini-VIDAS全自动荧光免疫分析仪对两种增菌液进行初筛，对结果阳性者划线分离，阳性菌株经VITEK2 COMPACT生化鉴定仪鉴定。结果样品经本实验增菌液增菌后，分离平板上的可疑菌落明显增多，检出沙门菌的几率也有很大提高。结论改用本实验培养基后，能有效提高沙门菌的检出率。     

应用DNA探针检测食品等标本中的沙门氏菌

我们采用缺口翻译技术,以放射性32~p标记来自鼠伤寒沙门氏菌23566的染色体DNA 8.0kb片段,作为特异性探针,对从食品、污水标本中分离出的13种(型)16株沙门氏菌及1株亚利桑那菌进行了菌落杂交检测,同时对17株非沙门氏菌进行了检测。结果表明:该特异性探针可100％地检出实验沙门氏菌而不与非沙门氏菌发生交叉。接种的菌量在10~2时,经培养就可得到良好的杂交结果。     

水产品扇贝中沙门氏菌检测方法的优化

对水产品扇贝中的沙门氏菌进行检测,用其阳性物质进行质量控制,避免了使用标准菌株的繁琐,检测结果准确可靠。     

食品中沙门氏菌血清及PFGE分型研究

目的了解吉林省食品中分离的沙门氏菌血清型与脉冲场凝胶电泳（PFGE）基因分型,探索沙门氏菌的分子多态性。方法将从市售鸡肉、鸡胴体、中式凉拌菜及婴儿配方奶中分离出的10株沙门氏菌进行血清学分型、PFGE分子分型,BioNumerics version软件分析比较同源性。结果 10株沙门氏菌血清型分别为4株肠炎沙门氏菌,3株里定沙门氏菌,2株阿贡纳沙门氏菌和1株雷摩沙门氏菌。PFGE聚类分型结果主要分为4型：1型4株,相似度超过95%;2型3株,又分2个亚型,亚型间的相似度为78%;3型2株,相似度为100%;4型1株。结论吉林省食品中沙门氏菌具有不同血清学及PFGE型别,相同来源和血清型的菌株PFGE型别显示高度同源性。     

肠炎沙门菌随机扩增多态性DNA分子分型

目的对不同来源的12株肠炎沙门菌分离株进行分子分型。方法分别提取不同菌株基因组DNA,建立和优化随机扩增多态性DNA（RAPD）反应体系,试用22条随机引物对不同菌株进行RAPD扩增,筛选清晰稳定的扩增条带做统计分析。结果筛选到OPG-03、OPG-06、OPG-07和OPG-13共4条随机引物具有鉴别作用,每一菌株均可扩增出4~10条DNA片段,大多数片段在100~2000bp之间,共扩增出42条RAPD条带,其中共有条带7条,多态性条带35条,多态性为83.3%。不同来源的肠炎沙门菌分离株之间的遗传相似系数在42.6%~100%之间,在0.850的相似性水平上可将12株肠炎沙门菌分离株分为5个不同的亚型。结论应用RAPD技术在分子水平上对肠炎沙门菌进行鉴别和分型具有简便、快速和辨别能力高的优势,对肠炎沙门菌的分子流行病学研究具有较好的应用前景。     

能力验证试验中沙门菌分离与鉴定

目的食品微生物学能力验证试验,是利用实验室间比对确定疾控中心实验室检测、校准能力〔1〕,以完善和强化实验室质量管理体系,增强和提高实验室的市场竞争力。方法采用食品安全国家标准GB 4789.4-2010《食品微生物学检验沙门氏菌检验》〔2〕、SN/T 1870-2007《食品中致病菌检测方法实时PCR法》等方法〔3〕。结果样品T0504-D采用多种鉴定方法检测出可疑菌为甲型副伤寒沙门菌,细菌鉴定仪VITEK 2 COMPACT鉴定可信度达99%。结论中国合格评定国家认可委员会(CNAS)对本实验室检测的能力验证样品试验结果判断为满意。