热疗调控铁死亡通路对舌鳞癌细胞生物学行为影响的研究

目的探讨热疗(HT)对舌鳞癌细胞系CAL-27铁死亡的调控作用和可能机制。方法采用CCK-8法检测铁死亡抑制剂Fer-1的半抑制浓度(IC50)并用于后续实验。CAL-27细胞系按实验设计分为HT组、对照组、Fer-1组以及HT+Fer-1组。采用各自检测试剂盒检测活性氧水平、铁离子浓度, 采用实时反转录PCR检测p53、转铁蛋白受体1(TfR1)的mRNA水平, 细胞划痕法检测细胞迁移, 流式细胞术检测细胞凋亡。结果热疗组CAL-27细胞系活性氧水平(P<0.01)和铁离子浓度(P<0.001)显著上调, p53及TfR1的mRNA表达量也明显增加(P值均<0.01), 细胞迁移能力下降(P<0.001), 凋亡率升高(P<0.01)。HT+Fer-1组与HT组相比活性氧水平(P<0.001)、铁离子浓度(P<0.001)、p53及TfR1的mRNA表达量均降低(P值均<0.01), 细胞迁移能力恢复(P<0.01), 凋亡率也降低(P<0.01)。结论热疗可能通过激活p53/TfR1通路诱导舌鳞癌细胞系CAL-27铁死亡,...     

热疗联合紫杉醇对卵巢癌A2780细胞增殖、侵袭及AKT磷酸化的影响

目的:探讨热疗联合紫杉醇（Paclitaxel）对卵巢癌A2780细胞增殖、侵袭及AKT磷酸化的影响。方法:将A2780细胞分为4组:热疗组(41℃加热90min)、紫杉醇组、热疗联合紫杉醇组及对照组(常规培养细胞)。用MTT法检测细胞增殖情况,测定紫杉醇联合热疗对A2780细胞体外增殖抑制的影响;Transwell侵袭实验检测细胞的侵袭能力的变化,测定紫杉醇联合热疗对A2780细胞体外侵袭能力的影响;Western blot检测各组细胞中AKT磷酸化的变化。结果:热疗联合紫杉醇组细胞增殖率与其他各组比较均明显降低,差异有统计学意义（P＜0.05）;热疗联合紫杉醇组细胞的侵袭能力同样明显减弱,差异有统计学意义（P＜0.05）;同时,热疗联合紫杉醇组细胞中AKT磷酸化水平与其他各组相比亦显著降低,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论:热疗联合紫杉醇可通过降低A2780细胞中AKT的磷酸化水平从而明显抑制细胞的增殖及侵袭能力。     

芦荟大黄素纳米脂质体联合5-氟尿嘧啶对人舌鳞癌CAL-27细胞增殖、凋亡、侵袭及迁移的影响

目的:探究芦荟大黄素纳米脂质体（aloe-emodin nanoliposome,AE-L）联合5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil,5-FU）对人舌鳞癌CAL-27细胞的作用效果。方法:逆相蒸发法制备AE-L;CCK-8检测应用不同浓度AE-L和5-FU对CAL-27细胞抑制率的影响;克隆形成实验检测细胞增殖;划痕修复实验检测细胞迁移能力;Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力;Hoechst 33342检测细胞凋亡情况;实时定量荧光PCR（real-time quantitative fluorescent PCR,qRT-PCR）检测Bcl-2、Caspase-3 mRNA的表达情况。结果:芦荟大黄素纳米脂质体联合5-FU能够明显抑制CAL-27细胞的增殖,降低细胞迁移能力,同时还可以降低细胞侵袭能力。通过Hoechst 33342染色可发现联合用药组细胞凋亡数量明显高于空白对照组和单药组。qRT-PCR检测可发现联合组抗凋亡基因Bcl-2表达明显下降,凋亡基因Caspase-3表达明显增高。结论:芦荟大黄素纳米脂质体联合5-FU对人舌鳞癌CAL-27细胞具有明显的抑制作用,其机制可能与促进凋亡发生相关。     

热疗通过下调Notch1/Jagged1/Hes1诱导舌鳞癌细胞凋亡的初步研究北大核心CSCD

目的观察舌鳞癌细胞Cal-27短时多次热疗的最佳间隔时间并探究Notch信号通路在热疗诱导舌鳞癌细胞凋亡中的作用。方法将Cal-27细胞置入42℃培养箱热疗45 min,分别在6、12、24、48、72 h后进行第2次热疗,并在热疗结束后0、12、24 h通过CCK-8实验检测细胞增殖能力变化。确定最佳热疗间隔时间后进行多次热疗,分别通过CCK-8实验及流式细胞术检测热疗对Cal-27细胞增殖及凋亡能力的影响。通过实时反转录PCR实验及蛋白质印迹法实验分析Notch1、Jagged1、发状分裂相关增强子1(Hes1)的mRNA及蛋白表达变化。实验数据以x^(-)±s表示,两组间比较采用单因素方差分析。结果每隔12 h给予42℃45 min热疗1次可持续抑制舌鳞癌Cal-27细胞的增殖(P<0.05)。在热疗持续进行7次后与对照组相比,热疗可明显抑制舌鳞癌Cal-27细胞的增殖并诱导其凋亡(P<0.05),且热疗组细胞的Notch1、Jagged1、Hes1的mRNA及蛋白表达均显著降低(P值均<0.05)。结论12 h热疗1次为抑制舌鳞癌Cal-27细胞增殖的最佳间隔时间,其机制可能与热疗通过抑制Notch信号通路的表达诱导舌鳞癌Cal-27细胞凋亡有关。     

紫杉醇联合紫草素对U87脑胶质瘤细胞的作用及机制初探

目的:探讨紫杉醇联合紫草素通过协同作用杀伤人脑胶质瘤的作用。方法:将不同浓度的紫杉醇与紫草素单药及两种药物半量联合作用于胶质瘤细胞后,用CCK-8法检测细胞增殖抑制率,用划痕实验和Transwell法检测细胞生物学行为（迁移与侵袭）的影响,流式细胞技术检测细胞周期及凋亡率,Western-blot测定细胞外调节蛋白激酶（ERK）的蛋白表达。结果:紫杉醇与紫草素对胶质瘤细胞株U87细胞增殖具有抑制作用,且呈时间和剂量依赖性,并且发挥协同作用。紫杉醇与紫草素单独以及联合应用抑制U87细胞迁移与侵袭。两种药物联合应用促进U87细胞凋亡,紫草素组G1期的RNA含量增多,紫杉醇组及联合应用组的G2期RNA含量显著增高。Western-blot结果显示两者联合应用时,p-ERK蛋白表达降低。结论:与紫杉醇或紫草素单用组相比,两者半量联用通过协同作用能显著抑制U87胶质瘤细胞增殖、迁移、侵袭能力,促进细胞凋亡,阻滞细胞周期。紫杉醇与紫草素的协同效应机制与二者联合应用抑制p-ERK蛋白表达相关。     

热疗增加足叶乙甙对K562细胞体外抑制效应的实验研究

目的:观察热疗联合足叶乙甙增强对慢性髓系白血病细胞株K562的体外增殖的抑制作用及对凋亡的影响。方法:采用MTT法确定足叶乙甙的工作浓度,以该浓度进行化疗或与热疗的联合,选择温度40℃及42℃,体外作用于K562。作用前及48小时,采用台盼蓝拒染法检测肿瘤细胞的存活率,MTT法检测对肿瘤细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪检测肿瘤细胞的凋亡。观察热疗联合足叶乙甙的抗肿瘤效果。结果:作用48小时IC50的药物浓度作为实验的工作浓度。单纯40℃、42℃热疗60分钟对K562细胞系有抑制作用(P<0.01),并随温度增高而增强;单纯化疗对K562细胞也有抑制作用;各热化疗组对K562有显著的抑制作用(P<0.01),随着温度的增高而增强。流式细胞仪检测细胞凋亡,热疗组、化疗组及热化疗组细胞凋亡率均较对照组显著升高,各组之间均有显著性差异(P<0.01)。结论:热疗联合足叶乙甙能增强对K562细胞的体外抑制作用,并可以提高肿瘤细胞的凋亡率。     

热疗通过下调Notch1/Jagged1/Hes1诱导舌鳞癌细胞凋亡的初步研究

目的观察舌鳞癌细胞Cal-27短时多次热疗的最佳间隔时间并探究Notch信号通路在热疗诱导舌鳞癌细胞凋亡中的作用。方法将Cal-27细胞置入42℃培养箱热疗45 min, 分别在6、12、24、48、72 h后进行第2次热疗, 并在热疗结束后0、12、24 h通过CCK-8实验检测细胞增殖能力变化。确定最佳热疗间隔时间后进行多次热疗, 分别通过CCK-8实验及流式细胞术检测热疗对Cal-27细胞增殖及凋亡能力的影响。通过实时反转录PCR实验及蛋白质印迹法实验分析Notch1、Jagged1、发状分裂相关增强子1(Hes1)的mRNA及蛋白表达变化。实验数据以xˉ±s表示, 两组间比较采用单因素方差分析。结果每隔12 h给予42℃ 45 min热疗1次可持续抑制舌鳞癌Cal-27细胞的增殖(P<0.05)。在热疗持续进行7次后与对照组相比, 热疗可明显抑制舌鳞癌Cal-27细胞的增殖并诱导其凋亡(P<0.05), 且热疗组细胞的Notch1、Jagged1、Hes1的mRNA及蛋白表达均显著降低(P值均<0.05)。结论 12 h热疗1次为抑制舌鳞癌Cal-27细胞增殖...     

微波热疗联合表柔比星抑制乳腺癌细胞增殖并诱导其凋亡北大核心CSCD

目的:探讨微波热疗联合表柔比星对BALB/c小鼠乳腺原位移植瘤生长及鼠源乳腺癌4T1和人源乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响,以及可能的作用机制。方法:在雌性BALB/c小鼠乳腺脂肪垫下注射4T1细胞,建立小鼠乳腺癌原位模型,再分别进行微波热疗、表柔比星和微波热疗联合表柔比星治疗,观察小鼠肿瘤体积、肿瘤质量和肺转移结节数。微波热疗、表柔比星和微波热疗联合表柔比星处理4T1和MDA-MB-231细胞后,分别应用MTS法和FCM法检测各组细胞的增殖和凋亡情况,蛋白质印迹法检测各组细胞中磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路的变化,以及细胞凋亡相关蛋白的表达。结果:微波热疗联合表柔比星组小鼠原位肿瘤的体积和质量均小于未治疗的对照组(P值均<0.05),同时微波热疗联合表柔比星可以减少乳腺癌的肺转移结节数(P<0.01)。微波热疗联合表柔比星可以抑制乳腺癌4T1和MDA-MB-231细胞的增殖并促进其凋亡(P值均<0.05)。微波热疗联合表柔比星可抑制4T1和MDA-MB-231细胞中mTOR的活化(P值均<0.05),同时上调4T1和MDA-MB-231细胞中凋亡相关蛋白的表达水平(P值均<0.05)。结论:微波热疗联合表柔比星可有效抑制乳腺癌的生长和转移,这一作用可能与下调mTOR通路和上调乳腺癌细胞凋亡相关蛋白的表达有关。     

Akt通路在热化疗联合诱导人小细胞肺癌细胞凋亡中的作用

背景与目的:Akt通路是细胞内一条重要的信号通路,与细胞生长、凋亡密切相关,本研究旨在探讨Akt通路在热化疗诱导人小细胞肺癌细胞凋亡中的作用,进而探讨热疗抑制肺部肿瘤细胞增殖可能的机制。方法:参考临床常用剂量,采用43℃加热联合120μg/L紫杉醇(热化联合组)、43℃加热联合120μg/L紫杉醇并加入1μmol/LAkt特异抑制剂Wortmannin(Wortmannin组)、43℃加热联合120μg/L紫杉醇并加入30μmol/L活性氧(reactive oxygen species,ROS)特异抑制剂NAC(NAC组)、单纯使用120μg/L紫杉醇(单纯化疗组)处理H446细胞,以未处理的H446细胞作为对照组,应用噻唑蓝比色法(MTT法)检测各处理方式下细胞增殖率,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率,荧光法检测细胞内ROS,通过蛋白免疫印迹法(Westernblot)检测Akt磷酸化水平和caspase-3的表达,采用SPSS13.0统计软件对数据进行统计分析。结果:热化联合组细胞增殖率(59.83±3.36)%低于对照组(100.00±0.00)%和单纯化疗组(69.16±2.95)%(P0.05);热化联合组的细胞凋亡率最高(27.59±5.47)%(P0.05);热化联合组的ROS表达增高(102.14±18.34)(P0.05),NAC可抑制其表达(28.01±1.19),Wortmannin对其无影响(99.87±8.35);Akt磷酸化水平在热化联合组降低(0.69±0.03)(P0.05),Wortmannin可抑制其磷酸化(0.00±0.00),NAC使其磷酸化水平升高(1.05±0.29)(P0.05);热化联合组的caspase-3表达(1.07±0.08)高于其他各组(P0.05)。结论:热化疗联合应用可以明显抑制H446细胞的生长,这种抑制作用可能是通过诱导ROS的产生,继而抑制Akt通路活化,并通过caspase途径导致细胞凋亡。     

奥沙利铂联合热疗抑制人大肠癌细胞LOVO体外增殖作用的研究

目的探讨奥沙利铂联合热疗体外抑制人大肠癌细胞增殖的效果,以确定联合方案是否具有协同效应。方法使用MTT法测定单独或联合应用奥沙利铂与热疗对人大肠癌LOVO细胞体外增殖的抑制作用,使用流式细胞仪检测不同方案对LOVO细胞凋亡率的影响。根据Veleriote法判断热化疗联合的作用效果;透射电镜观察细胞形态。结果与奥沙利铂化疗或单纯热疗相比,奥沙利铂与43℃热疗联合后对LOVO细胞增殖有显著的抑制作用(P＜0．01),24 h时流式细胞仪检测LOVO细胞的凋亡情况发现,热疗组、化疗组和热化疗组细胞凋亡率均较对照组显著升高(P＜0．01)。结论奥沙利铂与热疗联合对LOVO细胞的增殖抑制具有明显的协同作用,这可能与细胞凋亡的增多有关。     

基于caspase-3/Bcl-2/Bax信号通路探究SMAC基因对肺腺癌细胞紫杉醇敏感度及细胞活性的影响

目的 基于caspase-3/Bcl2/Bax信号通路探究SMAC基因对肺腺癌细胞紫杉醇敏感度及细胞活性的影响。方法 建立肺腺癌紫杉醇耐药细胞株A549/Taxol，将细胞分为pcDNANC组（转染pcDNA-NC空白载体）、pc DNA-SMAC组（转染pc DNA-SMAC载体）、siRNA-NC组（转染siRNANC空病毒载体）和siRNA-SMAC组（转染siRNA-SMAC慢病毒载体）。qRT-PCR法检测细胞中SMACmRNA表达；MTT法检测细胞敏感度；克隆实验法检测细胞增殖能力；Transwell法检测细胞侵袭能力；流式细胞术检测细胞凋亡能力；Western blot法检测细胞中caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白表达。结果 肺腺癌A549细胞较BEAS-2B正常细胞中SMAC mRNA表达明显降低（P<0.05）。pcDNA-SMAC组较pcDNA-NC组细胞中SMAC mRNA表达显著升高（P<0.05）。和siRNA-NC组相比，siRNA-SMAC组细胞中SMAC mRNA表达显著降低（P<0.05）。和pcDNA-NC组相比，pcDNA...     

牙髓干细胞外泌体对口腔鳞状细胞癌CAL-27增殖、迁移的影响及其机制的研究

目的 研究人牙髓干细胞来源的外泌体(human dental pulp stem cell-derived exosome,hDPSCs-exo)对口腔鳞状细胞癌细胞(CAL-27)增殖和迁移的影响。方法 收集来哈尔滨医科大学附属第一医院治疗的16~28岁患者因阻生或正畸拔除的牙髓组织,通过超速离心法提取hDPSCs-exo,不同浓度hDPSCs-exo处理CAL-27细胞,通过MTT实验、Transwell实验和划痕实验检测CAL-27细胞增殖和迁移能力的变化;Western blot研究PI3K/Akt信号通路相关蛋白的表达。结果 MTT实验结果显示,仅80 μg/mL hDPSCs-exo组在第5d对CAL-27细胞的增殖有抑制作用(P＜0.05),其余各浓度组均没有显著影响;Transwell和划痕实验结果显示20、60、80 μg/mL组可以显著地促进CAL-27细胞的迁移(P＜0.05);Western blot结果显示经hDPSCs-exo处理后,CAL-27细胞中PI3K/Akt信号通路相关蛋白PI3K、P-Akt的表达水平明显上调(P＜0.05)。结论 hDPSCs-exo高浓度时抑制CAL-27细胞的增殖,适宜浓度能显著促进CAL-27细胞的迁移能力,其作用机制可能与激活PI3K/Akt信号通路有关。     

慢病毒介导的RNA干扰FOXC2表达对皮肤鳞状细胞癌A431细胞功能影响

目的:探讨慢病毒介导的RNA干扰叉头框C2（FOXC2）表达对皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及其机制。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）和免疫印迹法检测人正常永生化上皮Hecate细胞和皮肤鳞状细胞癌A431细胞中FOXC2 mRNA和蛋白的表达水平。将体外培养的A431细胞分为对照组（正常培养）、NC-shRNA组（LV-NC-shRNA慢病毒感染）和FOXC2-shRNA组（LV-FOXC2-shRNA慢病毒感染）,采用噻唑蓝（MTT）法检测细胞活力,平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,Transwell小室实验检测细胞侵袭,流式细胞术检测细胞凋亡,免疫印迹法检测细胞中蛋白激酶B（AKT）、磷酸化（p）-AKT、细胞周期蛋白D1（CyclinD1）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）和B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）蛋白表达水平。结果:与Hecate细胞比较,A431细胞中FOXC2 mRNA和蛋白表达水平均明显升高（P＜0.05）。与对照组比较,NC-shRNA组细胞中FOXC2 mRNA表达水平、细胞存活率、侵袭数目、克隆形成率、细胞凋亡率和FOXC2、p-AKT、CyclinD1、MMP-9、Bcl-2蛋白表达水平差异均无统计学意义（P＞0.05）;与对照组或NC-shRNA组比较,FOXC2-shRNA组细胞中FOXC2 mRNA表达水平、细胞存活率、侵袭数目、克隆形成率和FOXC2、p-AKT、CyclinD1、MMP-9、Bcl-2蛋白表达水平均明显降低,而细胞凋亡率明显升高（P＜0.05）。结论:沉默FOXC2表达可抑制皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖、侵袭并促进细胞凋亡,其作用机制可能与抑制AKT信号通路活化有关。     

瑞戈非尼联合哌立福辛诱导人肝癌HepG2细胞凋亡的分子机制研究

目的 探讨瑞戈非尼联合哌立福辛(AKT抑制剂)对人肝癌HepG2细胞凋亡的分子机制。 方法 不同浓度瑞戈非尼(1、5、10、15、20、25 μmol/L)处理肝癌细胞后,通过CCK-8检测其细胞存活率;再设置不同浓度瑞戈非尼(0、5、10、20 μmol/L)处理肝癌细胞后,流式细胞仪检测细胞凋亡;用免疫印迹法(Western blot)检测Bax、Bcl-2、p-AKT、AKT、p21、p27、Cleaved-caspase-8、Cleaved-caspase-9的表达情况;设置哌立福辛组(10 μmol/L)、瑞戈非尼组(20 μmol/L)及双药联合组(哌立福辛10 μmol/L联合瑞戈非尼20 μmol/L),检测细胞凋亡及相关蛋白表达变化。 结果 从5 μmol/L浓度起,瑞戈非尼可剂量依赖性的抑制肝癌细胞增殖(P＜0.05);Bcl-2及p-AKT表达下调,Bax、p21、p27、Cleaved-caspase-8、Cleaved-caspase-9表达上调(P＜0.05);瑞戈非尼和哌立福辛双药联合应用后,细胞凋亡率、Bax表达量明显增加(P＜0.05),Bcl-2、p-AKT表达量下降程度均较单独应用哌立福辛及瑞戈非尼明显(P＜0.05)。 结论 瑞戈非尼通过增加p21、p27、Bax、caspase-8、caspase-9的表达,减少Bcl-2、p-AKT的表达,来诱导肝癌细胞凋亡,并且瑞戈非尼与哌立福辛双药联合应用后,明显增加肝癌细胞凋亡率,为药物治疗肝癌提供新的理论基础和思路。     

Gab2基因在胃癌中的表达及对胃癌细胞增殖、凋亡、迁移及AKT、p-AKT、Bax、Bcl-2表达的影响研究

目的 探讨Gab2基因在胃癌中的表达及对胃癌细胞增殖、凋亡、迁移及对AKT、p-AKT、Bax、Bcl-2表达的影响.方法 采用RT-PCR及Western Blot检测胃癌组织和癌旁组织中Gab2的表达.培养人胃癌细胞株SGC-7901,分别用Gab2小干扰RNA(Gab2-siRNA)和阴性对照(siRNA-NC)转染细胞,以空脂质体转染的细胞作为对照组,各组细胞培养48 h.应用Western Blot检测细胞中Gab2、AKT、p-AKT、Bax、Bcl-2蛋白表达的变化,CCK-8检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡,Transwell小室检测细胞迁移能力.结果 胃癌组织中Gab2的mRNA及蛋白表达水平均明显高于癌旁组织(P﹤0.01);Gab2-siRNA组Gab2蛋白表达水平明显低于对照组(P﹤0.01);siRNA-NC组细胞的存活率、凋亡率、迁移数及AKT、p-AKT、Bax、Bcl-2蛋白表达与对照组比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05);Gab2-siRNA组细胞的AKT蛋白表达与对照组比较,差异无统计学意义(P﹥0.05),细胞的存活率、迁移数及p-AKT、Bcl-2蛋白表达明显低于对照组(P﹤0.01),细胞凋亡率及Bax蛋白表达明显高于对照组(P﹤0.01).结论 Gab2在胃癌组织高表达,沉默Gab2的表达能显著抑制人胃癌细胞株SGC-7901的增殖和迁移,并通过调节Bax、Bcl-2蛋白表达促进细胞凋亡,其可能的机制与AKT信号通路的调控有关.     

miR-126在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的:检测miR-126在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达,分析其表达与患者临床病理特征及预后的关系,探讨其过表达对Tca8113细胞恶性生物学行为的影响.方法:选取2016年6月至2018年6月在郑州大学第一附属医院手术治疗的62例OSCC患者的癌及癌旁组织...     

沉默MCM7基因介导AKT信号通路参与黑色素瘤细胞增殖及凋亡的实验

目的 探讨MCM7基因沉默介导AKT信号通路参与人皮肤黑色素瘤细胞的增殖及凋亡。方法 构建MCM7基因和沉默MCM7基因表达的慢病毒RNA（LV-shRNA-MCM7）的表达载体;将A375细胞分为Control组、Empty vector转染组（空载质粒转染组）、siRNA（LV-shRNA-MCM7）转染组、siRNA NC（LV-shRNA-MCM7 negative control）转染组;MTT法检测每组细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期、细胞凋亡情况;划痕实验法检测细胞迁移能力;qRT-PCR法测定细胞中MCM7基因、AKT信号通路相关基因、Cyclin D1及凋亡相关基因Bcl-2、Bax、caspase-3的相对表达量;Western blot法测定蛋白相对表达量。结果 沉默MCM7后,黑色素瘤细胞中的MCM7基因、CyclinD1、Bcl-2、AKT信号通路相关基因AKT3的mRNA和蛋白相对表达量显著下调（P<0.05）;凋亡相关基因Bax、caspase-3的mRNA和蛋白表达量显著上调（P<0.05）;siRNA转染组凋亡率显著上升,G₀/G₁期细胞数目明显增多,S期细胞数目明显减少;细胞增殖、迁移能力显著下降（P<0.05）。结论 沉默MCM7基因抑制AKT信号通路的激活,从而抑制A375黑色素瘤细胞增殖、迁移,促进A375黑色素瘤细胞凋亡。     

Prucalopride通过促进自噬抑制胶质瘤细胞U251增殖

目的:研究Prucalopride对胶质瘤U251细胞增殖、自噬、凋亡的影响,并探讨其相关信号通路。方法:通过CCK8检测细胞增殖的变化;Transwell检测迁移和侵袭的变化;细胞流式实验、Western blot检测细胞凋亡的变化;Western blot检测自噬相关蛋白LC3、Beclin1、p62的表达;AKT/mTOR通路相关蛋白的变化。结果:CCK8显示Prucalopride显著抑制U251细胞的增殖（P＜0.05）;Transwell侵袭实验显示Prucalopride可以抑制脑胶质瘤细胞的迁移和侵袭（P＜0.05）;细胞流式实验显示Prucalopride促进U251细胞的凋亡（P＜0.05）,Prucalopride处理后细胞凋亡相关蛋白Bax、Active Caspase3水平升高,Bcl-2表达降低;自噬相关蛋LC3、Beclin1表达上调,p62表达下调;p-AKT蛋白和p-mTOR蛋白水平显著降低。结论:Prucalopride通过抑制AKT/mTOR信号通路激活自噬抑制U251细胞增殖和迁移,促进其凋亡。     

siRNA靶向沉默MALAT-1对鼻咽癌细胞增殖、凋亡及PI3K/AKT通路的影响

目的:探究siRNA靶向沉默MALAT-1对鼻咽癌细胞增殖、凋亡及PI3K/AKT通路的影响。方法:分别以10、20、30、40、50 nmol/L浓度的siRNA靶向沉默体外培养的人鼻咽癌细胞株CNE的基因MALAT-1,以实时荧光定量（qRT-PCR）分别在24、48 h后检测MALAT-1 mRNA表达水平,筛选合适的siRNA作用浓度和时间。将CNE细胞分为三组:空白对照组、siRNA阴性对照组和siRNA组,siRNA处理细胞后,采用CCK-8法检测细胞增殖情况,采用流式细胞技术检测细胞凋亡情况,Western blot 检测各组细胞凋亡相关蛋白（Bcl-2、Bax、caspase-3）及PI3K/AKT通路蛋白（PI3K、ATK、p-AKT）表达情况。结果:选定30 nmol/L浓度的siRNA作用于CNE细胞48 h;siRNA处理细胞后,与空白对照组相比,siRNA组细胞增殖率明显降低,凋亡率明显升高,Bax、caspase-3蛋白表达明显升高,Bcl-2、PI3K、p-AKT蛋白表达明显降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）;AKT蛋白表达无明显变化,差异无统计学意义（P＞0.05）。siRNA阴性对照组各指标均无明显变化,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论:siRNA可靶向沉默MALAT-1,抑制鼻咽癌细胞增殖,促进其凋亡,可能是通过抑制PI3K/AKT通路实现的。