血清基质细胞衍生因子-1水平与糖尿病周围神经病变的相关性

目的探索基质细胞衍生因子-1(SDF-1)与糖尿病周围神经病变(DPN)的相关性。方法回顾性分析2018年9月至2019年10月中国科学技术大学附属第一医院(安徽省立医院)内分泌科138例2型糖尿病患者的临床资料,根据有无神经病变,分为无DPN组与DPN组,每组69例。探讨SDF-1与DPN发病的关系。结果 DPN组患者SDF-1水平为(0.33±0.17)μg/mL,低于无DPN组,差异有统计学意义(P<0.05);Spearman分析结果显示,SDF-1水平与病程呈负相关(r=-0.178,P<0.05);logistic回归分析显示,血清SDF-1水平降低、病程可能是影响DPN发病的因素(P<0.05)。结论 SDF-1水平降低可能与DPN的发病有关。     

牛蒡子合剂对糖尿病大鼠肾组织核因子-кB表达的影响

目的: 探讨牛蒡子合剂对糖尿病大鼠肾组织核因子-кB(NF-кB)表达的影响及其对糖尿病大鼠肾脏的作用.方法: 将大鼠随机分成正常对照组(C组)、糖尿病组(DM组)、牛蒡子合剂治疗组(DF组);免疫组织化学法检测各组大鼠肾组织NF-кB和纤维连结蛋白(FN)的表达;生化法测定血清肌酐及24 h尿蛋白;过碘酸-雪夫(PAS) 及苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠肾组织形态变化.结果: 牛蒡子合剂能下调糖尿病大鼠NF-кB和FN的表达(P<0.05),减少血肌酐和24 h尿蛋白的水平(P<0.05),减轻肾脏病理损害.结论: 牛蒡子合剂对糖尿病肾病有治疗作用,其可能机制之一是下调NF-кB 的表达,进而影响细胞外基质的合成与降解,减轻肾脏损害.     

糖尿病大鼠肾组织TGF-β1及细胞外基质表达

目的观察糖尿病早期大鼠肾组织TGF-β1的表达与肾功能改变的相关性.方法用AV1000全自动生化分析仪观察链脲菌素实验性大鼠肾功能变化情况;取糖尿病2、4周大鼠双肾称重后取材,常规制片HE及PAS染色观察组织学改变;免疫组化采用LSAB法分别测实验组及对照组大鼠肾组织TGF-β1、FN 、LN的表达.结果糖尿病组大鼠肾功能障碍,部分指标糖尿病4周组比糖尿病2周组显著增高(P＜0.05).组织学观察糖尿病组大鼠亦显示肾小球肥大,系膜区增宽及部分肾小球囊壁、近曲小管基底膜出现PAS阳性均质蛋白性物质.结论 DM大鼠肾小球TGF-β1表达上调,与两种ECM成分LF、FN过度聚集呈显著正相关,证实了TGF-β1对ECM的异常调节和促进肾小球硬化的作用.     

基质细胞衍生因子-1α在皮肤创伤愈合过程中的表达特点

目的 探讨小鼠全层皮肤缺损伤创面愈合过程中基质细胞衍生因子-1α(stromal cell derived factor-1α,SDF-1α)的表达规律及其在创伤愈合中的可能作用.方法 建立小鼠背部正中近颈侧皮肤1.5 cm × 1.5 cm的正方形全层缺损伤模型,分别于伤后1、2…3 4 5、7、10、14 d获取创缘组织,应用RT-PCR方法检测SDF-1α mRNA表达,Western blot和免疫组织化学方法检测SDF-1α的蛋白表达.结果 RT-PCR检测结果显示创面SDF-1α呈双峰表达,损伤后1 d,与正常皮肤组织相比,表达显著增加(P<0.05),3 d表达最低(P<0.05),5 d表达达峰值(P<0.05);Western blot检测结果显示创面SDF-1α蛋白也呈双峰表达,峰值分别在伤后2 d(P<0.05)和7 d(P<0.05),免疫组织化学检测结果显示SDF-1α主要表达在新生表皮细胞和血管内皮细胞.结论 SDF-1α可能参与了皮肤的创伤愈合过程.     

视神经部分损伤后视网膜基质细胞衍生因子-1α表达的变化

目的 研究大鼠视神经部分损伤后视网膜基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)的表达变化.方法 制作大鼠视神经部分损伤模型,于损伤后1、2、3、5、7、10、14 d收集视网膜组织,采用酶联免疫吸附法和实时荧光定量PCR分别测定损伤组(n=28)、假手术组(n=28)和正常对照组(n=12)大鼠视网膜组织中的SDF-1α蛋白及mRNA的表达.结果 视神经损伤后各时间点,损伤组视网膜组织中SDF-1α蛋白和mRNA的表达较假手术组及正常对照组均明显升高(P<0.01),均在损伤后第5天出现峰值.伤后14 d,损伤组视网膜组织中SDF-1α蛋白及mRNA仍维持在高表达状态.结论 视神经部分损伤后SDF-1α在视网膜中的表达出现上调,并可在较长时间内维持高表达.     

基质细胞衍生因子-1与趋化因子受体4在大鼠角膜移植排斥反应中的作用

目的探讨基质细胞衍生因子-1（SDF-1）与基质细胞衍生因子-1（CXCR4）在大鼠角膜组织中的表达及其在角膜移植术后 免疫排斥反应中的作用。方法取15只Wistar大鼠作为正常对照组;取22只Wistar大鼠行自体角膜移植术作为自体组;取22只 SD大鼠与44只Wistar大鼠,以SD大鼠为供体,Wistar大鼠为受体行穿透性角膜移植,术后随机抽取22只归入典必殊组,术眼滴 典必殊眼液（每日2次）,剩余22只归入异体组,术眼滴同等量生理盐水,共一个月。参照Larkin法对各组角膜植片进行临床评 估;分别于术后第5、9天取术眼角膜植片,行组织病理学观察、免疫组化检查、实时荧光定量PCR检测。结果自体组不发生排 斥反应,典必殊组角膜存活时间为24±0.32 d,远高于异体组10±0.36 d（P<0.001）。组织病理学检查发现异体组角膜有大量炎 性细胞浸润以及新生血管形成。SDF-1和CXCR4 mRNA在异体组角膜组织中表达水平明显升高（第5天P<0.001,第9天P< 0.01）,典必殊组较异体组明显降低。免疫组化检查发现SDF-1/CXCR4主要表达在角膜植片的上皮层与基质层,异体组角膜组 织SDF-1和CXCR4含量明显升高。结论SDF-1/CXCR4可能参与了大鼠角膜移植术后早期的排斥反应,其机制可能为SDF-1 特异性诱导CXCR4+细胞成熟和朝着排斥部位趋化,并促进角膜新生血管形成。     

基质细胞衍生因子1在IgA肾病小鼠肾脏的表达及FTY720对其的影响

目的 探讨基质细胞衍生因子1(SDF-1)在IgA肾病小鼠的表达以及FTY720对SDF-1表达的影响.方法 30只BALB/c小鼠,随机分为3组,每组10只.IgA肾病模型组及FTY720治疗组均采用黏膜免疫复合物法造模,第9周起对FTY720组给予FTY720干预,另设正常对照组.收集实验第4、8、12周时尿液,检测尿红细胞及尿蛋白定量;第12周末处死动物留取肾脏,普通光镜及免疫荧光法检测肾脏病理改变,SABC法检测肾脏SDF-1蛋白的表达,实时定量PCR技术分析肾脏SDF-1 Mrna的表达差异.结果 模型组小鼠自8周后开始出现蛋白尿,肾脏呈现典型的系膜增殖性改变,FTY720干预组蛋白尿及肾小球病变较轻.SDF-1蛋白在正常小鼠及经FTY720干预小鼠肾脏组织均呈低表达,但在模型鼠肾脏组织中呈强阳性表达.SDF-1mRNA在模型组小鼠肾脏组织中的表达较正常组有所增加,而在经FTY720干预的小鼠肾脏组织中的表达则较模型组明显减少.结论 SDF-1可能作为IgA肾病肾脏损伤及肾间质纤维化的一项指标存在.FTY720对IgA肾病具有良好的治疗效果,它可能通过影响SDF-1在肾脏的表达发挥治疗作用.     

腺病毒介导的人基质细胞衍生因子-1 对心肌梗死大鼠心室重构的影响

目的探索腺病毒介导的人基质细胞衍生因子-1对心肌梗死心室重构的影响。方法利用细菌内同源重组快速构建重组腺病毒质粒和制备hSDF-1α重组腺病毒(AdV-EGFP-hSDF-1α,Ad-SDF-1)。采用成年SD大鼠,经左冠状动脉前降支结扎建立急性心肌梗死模型。术后1h,将1×1010PFU AdV-SDF-1分6个点注射到心肌梗死部位及其周边区域。移植后4周测定心脏功能,随后取材、连续冰冻切片,观察心肌组织形态学、心肌梗死部位胶原含量的变化以及心室壁厚度的变化。结果AdV-SDF-1组心室壁明显增厚,胶原含量明显减少,心室膨胀程度明显降低,心脏功能改善。结论SDF-1过表达通过抑制心肌梗死部位胶原的合成与沉积,延缓心室重构,达到改善心脏功能的目的。     

腺病毒介导的基质细胞衍生因子-1对心肌梗死大鼠心脏功能的影响

目的：探索腺病毒介导的基质细胞衍生因子-1对心肌梗死心脏功能的影响．方法：采用成年SD大鼠,经左冠状动脉前降支结扎建立急性心肌梗死模型．术后1h,将1×10^10 PFU Adv—SDF-1分6个点注射到心肌梗死部位及其周边区域．移植后4wk测定心脏功能,随后取材、连续冰冻切片,观察CD133和CD31的表达以及心肌组织形态学．结果：注射在心肌梗死部位的Adv—SDF-1高表达,促进了CD133和CD31阳性细胞迁移到心肌梗死部位,增加了心肌梗死部位毛细血管的密度（Ad—SDF-1组与模型组和Ad—LacZ组相比：32±4vs15±2,16±3,P〈0．05）,保护并促进了心肌再生,从而缩小梗死区域面积,心室壁的厚度和弹性增加;心室胶原含量减少[Ad—SDF-1组与模型组和Ad—LacZ组相比：（41±3）％vs（78±8）％,（76±7）％,P〈0．05],延缓心室重构而改善心脏的收缩和舒张功能．结论：SDF-1过表达通过促进血管新生改善心肌的血供,达到改善心脏功能的目的．     

基质细胞衍生因子-1在视网膜培养中促进节细胞存活的研究

目的:研究基质细胞衍生因子-1(SDF-1)在视网膜培养中对节细胞存活的影响。方法:取大鼠眼球并分离视网膜,把视网膜平铺放入培养板中培养7 d;经多聚甲醛固定后用神经细胞特异性抗体TUJ-1标记视网膜节细胞(RGCs),在荧光显微镜下观察TUJ-1阳性RGCs并计数。结果:随着浓度的增加,SDF-1可显著促进视网膜培养中节细胞的存活,阻断剂AMD3100可明显降低SDF-1的作用效果。结论:SDF-1具有促进RGCs存活的作用。     

胰岛素样生长因子-1在糖尿病合并结肠癌患者血清及癌组织中的表达

目的:研究胰岛素样生长因子-1(IGF-1)在2型糖尿病合并结肠癌患者血清及癌组织中的表达,探讨其在2型糖尿病并发结肠癌中的作用.方法:采用放射免疫测定法及免疫组化SP染色法检测40例2型糖尿病合并结肠癌患者(A组)、30例2型糖尿病合并结肠腺瘤患者(B组)、20例结肠癌病患者(C组)、20例2型糖尿病患者(D组)及健康对照者(E组)血清IGF-1水平及其在组织中的表达.结果:5组间血清IGF-1水平差异有统计学意义(F=14.577,P＜0.01).组间两两比较结果提示A组血清IGF-1水平高于其他4组(P＜0.05),E组血清IGF-1水平低于其它4组(P＜0.05).与正常结肠黏膜组比较,结肠腺瘤组、结肠癌组IGF-1的表达增强,差异有统计学意义(P＜0.01);与结肠腺瘤组比较,IGF-1在结肠癌中的表达显著增强(P＜0.05).结论:2型糖尿病并发结肠癌的过程中,IGF-1可能发挥了一定作用.     

哮喘小鼠肺组织中基质细胞衍生因子1的表达及布地奈德雾化液的干预作用

目的探讨哮喘小鼠肺组织中基质细胞衍生因子1（SDF-1）的表达及布地奈德雾化液干预的影响。方法清洁级雌性昆明小鼠30只,随机分为对照组、哮喘组和布地奈德雾化液干预组,每组10只。建立卵白蛋白致敏的哮喘小鼠模型并用布地奈德雾化液进行干预,用免疫组织化学方法检测各组小鼠肺组织中SDF-1的表达,分别用HE染色和Wright-Giemsa染色方法对各组小鼠气道及支气管肺泡灌洗液（BALF）中炎症细胞情况进行评估。结果 SDF-1在对照组中呈低表达（0.21±0.02）,在哮喘组中表达明显增加（0.48±0.03）,使用布地奈德雾化液进行干预后SDF-1表达明显降低（0.29±0.01）,差异有统计学意义（P〈0.01）。哮喘组气道炎症细胞浸润程度明显高于对照组,干预后降低;哮喘组中BALF中炎细胞总数及嗜酸粒细胞、淋巴细胞、中性粒细胞计数均高于对照组,布地奈德雾化液干预后炎性细胞总数及各分类计数均降低,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论SDF-1在哮喘小鼠气道炎症细胞募集中可能有重要作用,布地奈德雾化液减轻哮喘小鼠气道炎症可能与降低SDF-1的表达有关。     

转铁蛋白靶向脂质体转导SDF-1治疗大鼠缺血性脑卒中

目的 通过转铁蛋白靶向脂质体将外源性SDF-1基因跨血脑屏障转运至脑缺血大鼠脑内,观察SDF-1在脑缺血大鼠脑内的表达及对神经功能恢复的作用.方法 将脑缺血大鼠分为两组,分别注射Tf-SDF-1-PLs和生理盐水,观察SDF-1是否可以进入脑内实现高表达,并对新生血管、大鼠神经功能评分和脑血流量进行检测,评估Tf-SDF-1-PLs的治疗作用.结果 药物注射24h后,Tf-SDF-1-PLs治疗组可见SDF-1 mRNA在脑内表达升高,而生理盐水注射组无SDF-1mRNA表达.药物注射48h后,检测脑中SDF-1蛋白的表达,免疫荧光检测脑中SDF-1染色,提示Tf-SDF-1-PLs治疗组的SDF-1蛋白表达均高于生理盐水注射组(P＜0.05).药物注射21天后,Tf-SDF-1-PLs治疗组的神经功能评分高于生理盐水注射组(P＜0.05),新生血管数量高于生理盐水注射组(P＜0.05),恢复的脑血流高于生理盐水注射组(P＜0.05).激光共聚焦结果提示SDF-1主要在胶质细胞中表达,Tf-SDF-1-PLs治疗组脑缺血大鼠的体重恢复早于生理盐水注射组.结论 TfSDF-1-PLs可以将SDF-1基因转运到脑缺血大鼠脑内,实现高表达.SDF-1可以发挥促进血管新生的作用,进而促进了脑血流量的恢复,有助于脑缺血大鼠神经功能的改善.     

2型糖尿病患者血清生长分化因子-15的水平及其与大血管病变的关系

目的:探讨血清生长分化因子(GDF)-15与2型糖尿病(T2DM)及T2DM合并大血管病变的关系.方法:选择60例初发T2DM患者,根据是否合并大血管病变分为A组(单纯T2DM) 30例,B组(T2DM合并大血管病变)30例,另选择30例体检健康老年人作为正常对照(C组);记录年龄、身高、体重,测量血压、腰围、臀围,计算体制指数(BMI)、臀腰比(WHR),检测血清GDF-15、血脂、糖化血红蛋白(HbA1c)及超敏C反应蛋白(hsCRP)水平;对检测结果进行统计学处理,分析其影响因素.结果:A组及B组血清GDF-15水平均高于C组;B组血清GDF-15水平高于A组;GDF-15水平与WHR、SBP、TC、TG、LDL、HbA1c、hsCRP呈正相关,与HDL呈负相关;多元线性逐步回归分析显示hsCRP、LDL是影响血清GDF-15水平的主要因素.结论:血清GDF-15在T2DM及T2DM合并大血管病变中均升高,且在T2DM合并大血管病变中升高更为明显.GDF-15可能通过脂质代谢和炎症反应等多个环节参与2型糖尿病及其大血管病变的发生发展.     

对暴发性1型糖尿病临床特征的探讨

目的对2010年1月至2019年7月发表的暴发性1型糖尿病(FT1DM)个案共81篇116例患者临床特征进行分析和探讨。方法回顾性分析116例患者的临床资料,总结其临床特点。结果男女发病比例为1∶1.17,女性患者发病更早[(31.20±11.24)岁vs(36.93±15.24)岁],均于1周内出现DKA。部分患者伴有前驱感染症状、消化系统症状及三多一少症状。女性患者发病时血糖较低[(34.40±9.75)mmol/L vs(38.77±13.54)mmol/L],HbA1c水平4.6%~8.6%,且女性患者空腹C肽水平更低[(0.03±0.06)mmol/L vs(0.06±0.09)ng/mL],胰岛功能几乎完全丧失。少部分患者T1DM自身抗体阳性。多数患者使用胰岛素强化替代治疗。结论FT1DM病情危重,进展迅速,需长期使用外源性胰岛素替代治疗,应引起高度重视。     

药物对提高人胰岛素基因在糖尿病大鼠体内表达效能的研究

目的 本实验通过探索药物对胰岛素基因表达效能的影响,以期提高以逆转录病毒为载体进行糖尿病基因治疗的效能,为该方法治疗糖尿病的临床实施缩短距离.方法 建立链脲佐菌素诱导的1型糖尿病大鼠模型,对含有目的基因的重组质粒转染组给予肝细胞生长因子(HGF)、3碘甲状腺原氨酸(T3),以不加干预措施的转染组为对照,观察各组大鼠血糖的控制情况和胰岛素表达水平.结果 经腹腔导入含有目的基因的重组质粒同时给予HGF、T3组的胰岛素基因表达效果最佳,仅注入重组质粒组的基冈表达有轻度改善,仅注入HGF、B组和糖尿病对照组表达无改善.结论 在动物实验中通过观测各组大鼠胰岛素及血糖水平和体重的变化表明,应用HGF、T3后可明显提高含有目的基因的重组质粒的转染和整合效率.该实验为基因治疗糖尿病的临床实验奠定基础.     

造血干细胞移植与SDF-1在急性放射病治疗中的研究进展

急性放射病病情凶险,发展快,预后差,给临床治疗带来较大困难。造血干细胞移植是治疗急性放射病的主要方法之一,能帮助恢复造血功能,为患者存活创造机会;作为造血微环境的重要分泌因子,SDF-1在造血系统方面发挥着重要作用。在此综述造血干细胞与SDF-1在治疗急性放射病方面的成果和研究进展。     

骨髓基质细胞的生长特性和转染胰岛素样生长因子-1后的凋亡研究

目的:探讨体外培养大鼠骨髓基质细胞(MSC)的生长特性,同时转染胰岛素样生长因子-1(IGF-1)观察对其凋亡的影响。方法:相差显微镜观察细胞的大体形态,亚甲蓝染色观察细胞集落,细胞计数法研究细胞的增殖能力;逆转录病毒载体pBabe-IGF-1或pBabe转染到MSC,RT-PCR检测IGF-1的表达,流式细胞仪Annexin V-FITC凋亡试剂盒检测细胞凋亡,RT-PCR检测促凋亡基因Bax和抗凋亡基因Bcl-2的表达。结果:骨髓基质细胞主要呈梭形,细胞呈集落性生长,细胞生长到第6代几乎生长停滞;转染IGF-1的MSC组的细胞凋亡率和Bax的表达明显低于其它转染空载体组和对照组,而Bcl-2的表达率则高于后两组(P<0.05)。结论:此方法能较容易地获得大量骨髓基质细胞,IGF-1基因转染后能够明显降低MSC的细胞凋亡,并和Bax基因的升高、Bcl-2基因的降低相关。     

间充质干细胞移植对阿霉素肾病大鼠肾脏中基质细胞衍生因子-1表达的影响

目的:观察基质细胞衍生因子-1(SDF-1)在阿霉素慢性肾病大鼠肾脏内的表达变化以及移植异体骨髓间充质干细胞后对SDF-1表达的影响。方法:体外培养SD大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs),缺氧培养,采用流式细胞术检测其表面CXCR4表达,用绿色荧光蛋白(GFP)标记MSCs。SD大鼠左侧肾切除后以2.5mg/kg剂量给大鼠尾静脉注射阿霉素,1次/周,连续2次,慢性肾病模型成功后,将成模大鼠随机分为2组:阿霉素慢性肾病模型组(n=8)和MSCs移植组(n=8),另选8只正常大鼠行假手术做正常对照组。于MSCs移植后不同时间点(1,7,14,30d)处死动物,采用Real-time PCR、Western blotting检测大鼠肾脏组织中SDF-1mRNA和蛋白表达的改变情况,并观察MSCs在大鼠肾脏的分布情况以及大鼠肾脏病理改变。结果:阿霉素慢性肾病SD大鼠肾组织内SDF-1表达较对照组明显增加(P<0.05),并随着时间推移而逐渐增加;GFP标记的MSCs移植后1d发现分布在肾小管,之后逐渐增加,14d时最明显;经缺氧培养的异体骨髓MSCs移植后,SDF-1表达较阿霉素慢性肾病模型组降低,在14d有统计学意义(P<0.05)。结论:在阿霉素慢性肾病大鼠肾组织内,SDF-1表达增加可能与骨髓间充质干细胞迁移增加有一定关系。