地昔帕明预处理改善心肌缺血后的交感神经重构

目的:研究地昔帕明预处理对大鼠急性心肌缺血后交感神经重构的影响,并探讨室颤阈值的变化。方法:60只SD大鼠随机分为3组:心肌缺血组夹闭左冠状动脉前降支30min;地昔帕明预处理组先单次静脉给予地昔帕明0.8mg/kg,5min后夹闭左冠状动脉前降支30min;地昔帕明组夹闭左冠状动脉前降支10min后再给予地昔帕明。喂养1周后开胸测定室颤阈值,免疫组化法观察大鼠心室肌中生长相关蛋白43(GAP43)和酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经纤维的分布和密度。结果:心肌缺血组的神经纤维分布紊乱,密度明显高于预处理组和地昔帕明组(P<0.05);其室颤阈值(7.2±1.30)V较预处理组的(11.0±2.65)V显著降低。预处理组的室颤阈值与地昔帕明组的(10.4±3.05)V相比无显著差异(P>0.05),神经纤维密度却明显降低(P<0.05)。结论:地昔帕明预处理能够改善心肌缺血后的交感神经重构,提高室颤阈值,发挥抗心律失常作用。     

美托洛尔对大鼠心肌梗死周边区缝隙连接蛋白43的影响

目的:探讨美托洛尔对大鼠心肌梗死(心梗)后梗死周边区缝隙连接蛋白43(Cx43)的影响。方法:80只大鼠随机分为假手术组(20只)、心梗组(30只)和美托洛尔组(30只),用结扎冠状动脉左前降支的方法制备心梗模型,美托洛尔组给予美托洛尔5mg/(kg.d)灌胃,心梗组给予安慰剂。手术8周后,测量梗死周边区心室颤动阈值(室颤阈值)。用蛋白印记分析和RT-PCR分别观察心梗后梗死周边区缝隙连接蛋白43(Cx43)磷酸化的蛋白质及总量表达和mRNA表达的变化;免疫荧光法观察梗死周边区Cx43的分布。结果:8周后,美托洛尔组室颤阈值高于心梗组[(11.0±2.65)V比(7.1±4.1)V,P<0.05],美托洛尔组Cx43磷酸化的蛋白质及总量均显著高于心梗组,Cx43mRNA的表达也明显高于心梗组。Cx43的密度和分布均显著高于心梗组。结论:美托洛尔能显著改善梗死周边区缝隙连接重构,这可能是美托洛尔能够抑制心梗后室性心律失常的一个机制。     

通心络对大鼠心肌梗死后神经重构和室颤阈值的影响

目的 探讨通心络(TXL)对大鼠心肌梗死(MI)后神经重构和室颤阈值的影响. 方法 应用结扎冠状动脉前降支的方法制备大鼠MI模型,将大鼠随机分为3组:假手术组、MI组和TXL组(n=8),第6周应用超声心动图测定心脏结构和功能后进行室颤阈值测定;免疫组化法研究大鼠心室肌中生长相关蛋白43(GAP43)和酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经纤维的分布和密度. 结果 与假手术组相比,MI组心室肌神经分布紊乱,神经纤维密度明显增高(P<0.05),室颤阈值明显降低(P<0.05);TXL组较MI组神经纤维密度明显降低(P<0.05),室颤阈值明显升高(P<0.05),并接近假手术组. 结论 TXL能改善MI后神经重构反应,提高室颤阈值,有预防MI后室性快速心律失常的潜在作用.     

通心络对大鼠心肌梗死后神经重构和室颤阈值的影响

目的探讨通心络(TXL)对大鼠心肌梗死(MI)后神经重构和室颤阈值的影响。方法应用结扎冠状动脉前降支的方法制备大鼠MI模型,将大鼠随机分为3组:假手术组、MI组和TXL组(n=8),第6周应用超声心动图测定心脏结构和功能后进行室颤阈值测定;免疫组化法研究大鼠心室肌中生长相关蛋白43(GAP43)和酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经纤维的分布和密度。结果与假手术组相比,MI组心室肌神经分布紊乱,神经纤维密度明显增高(P<0.05),室颤阈值明显降低(P<0.05);TXL组较MI组神经纤维密度明显降低(P<0.05),室颤阈值明显升高(P<0.05),并接近假手术组。结论TXL能改善MI后神经重构反应,提高室颤阈值,有预防MI后室性快速心律失常的潜在作用。     

神经调节蛋白-1对心肌梗死大鼠心脏交感神经重构的保护效应研究

目的观察神经调节蛋白-1(NRG-1)对心肌梗死大鼠心脏交感神经重构的影响。方法 2014年9—12月在武汉大学心血管病研究所完成实验。将18只SD大鼠按随机数字表法分为假手术组(n=6)、心肌梗死组(n=6)、NRG-1干预组(n=6);以冠状动脉前降支结扎方法建立心肌梗死模型,NRG-1干预组于心肌梗死模型建立后每天经鼠尾静脉给予NRG-1(0.01μg/g)干预,连续7 d;心肌梗死组则给予生理盐水干预,假手术组仅开胸切开心包膜不结扎冠状动脉。所有大鼠均于术后7 d利用Real-time PCR技术和Western-blot技术检测梗死周边区心肌组织交感神经重构标志物——酪氨酸羟化酶(TH)和生长相关蛋白43(GAP43)的mRNA和蛋白水平。结果心肌梗死组梗死周边区心肌组织TH、GAP43的mRNA水平较假手术组明显升高(P<0.05),而NRG-1干预组梗死周边区心肌组织TH、GAP43的mRNA水平均明显低于心肌梗死组(P<0.05)。与TH、GAP43的mRNA水平变化一致,心肌梗死组TH、GAP43的蛋白表达量明显增高,而NRG-1的干预明显降低了TH、GAP43的蛋白表达(P<0.05)。结论NRG-1可降低大鼠心肌梗死后交感神经重构,有利于稳定心电活动,改善心功能,是其发挥心肌保护效应的机制之一。     

枸杞多糖对心肌梗死后交感神经重构的影响

目的 探讨枸杞多糖对大鼠心肌梗死后交感神经重构的影响.方法 将大鼠随机分为心肌梗死模型组、枸杞多糖组、假手术组,每组20只.对左冠状动脉前降支穿线结扎制备心肌梗死模型.程序刺激各组大鼠诱发室性心律失常进行易感性测定,免疫组织化学方法检测各组大鼠心肌梗死周边区组织TH和GAP43的阳性神经纤维密度,Western Blo...     

三七皂苷R1对急性心肌梗死后心脏神经重塑的影响及机制

目的 探讨三七皂苷R1对急性心肌梗死小鼠交感神经重塑的改善作用及潜在机制。方法 将60只SPF级成年雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组、三七皂苷R1组,采用冠状动脉左前降支结扎法构建急性心肌梗死模型。心脏超声测定小鼠左室射血分数（LVEF）、左室缩短分数（LVFS）等指标评价心功能,免疫组化染色观察酪氨酸羟化酶（TH）和生长相关蛋白43(GAP43)的表达,qRT-PCR法检测心肌组织中神经生长因子（NGF）、白细胞介素-1β（IL-1β）和精氨酸酶-1(Arg-1)的mRNA表达情况,Western Blot法检测心肌组织NGF、GAP43、TH、IL-1β和Arg-1的蛋白表达水平。结果 与假手术组相比,模型组小鼠心功能显著降低,神经再生指标TH、GAP43阳性神经纤维密度显著增高,NGF、TH、GAP43蛋白表达水平明显升高,M1型巨噬细胞标志物IL-1β和M2型巨噬细胞标志物Arg-1的mRNA和蛋白表达水平显著增加（均P<0.05）;与模型组相比,三七皂苷R1组小鼠心功能显著增强,TH、GAP43阳性神经纤维密度明显降低,NGF、TH、GAP43蛋白表达水平...     

参松养心胶囊对兔心肌梗死后交感神经重构的影响

目的探讨参松养心胶囊对心肌梗死后心脏交感神经重构的影响。方法选择新西兰兔作为研究对象,通过结扎兔冠状动脉前降支制作心肌梗死模型,随机分为心肌梗死+参松养心胶囊组(参松养心胶囊0.3g/kgd,SSYX组)、心肌梗死组(MI组)和假手术组(Sham组)。术后8周所有成活兔均行程序电刺激诱发室性心律失常试验。并通过免疫组织化学染色结合计算机图像处理技术对心室交感神经纤维的形态、密度及分布进行对比分析。结果 MI组室性心律失常诱发率明显高于Sham组(46.7%比13.3%,P<0.01),参松养心胶囊干预后室性心律失常诱发率明显降低(26.7%,P<0.05)。MI组梗死灶周及非梗死左室游离壁酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxy-lase,TH)阳性神经纤维的密度(3505±235m2/mm2,3179±190m2/mm2)显著高于Sham组(2533±173m2/mm2,2343±177m2/mm2,P<0.01),且神经纤维空间分布紊乱。经参松养心胶囊治干预后SSYX组梗死灶周及非梗死左室游离壁TH阳性神经纤维密度降低(2823±181m2/mm2,2445±159m2/mm2),与MI组相比具有明显统计学差异(P<0.01)。SSYX组TH阳性神经纤维形态及分布状况接近于Sham组。结论参松养心胶囊能够改善兔心肌梗死模型的神经重构,并且降低室性心律失常的发生率。     

犬肾去交感神经对长期快速心房起搏后心房重构的影响

目的:探讨犬肾去交感神经对长期快速右心房起搏后心房重构的影响。方法:20只杂种犬经右侧颈外静脉途径植入高频率心脏起搏器,分为假手术组、右心房起搏(RAP)组、肾去交感神经(RSD)组。所有犬在试验基线期和终点取静脉血检测醛固酮水平;处死动物后迅速取左右心房组织,检测心房利钠肽(ANP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素(IL-6),缝隙连接蛋白40(Cx40)、缝隙连接蛋白43(Cx43)及神经密度水平。结果:右心房快速起搏5周后,与假手术组相比,RAP组犬血清醛固酮水平明显增加(P<0.05);与RAP组相比,RSD组犬血清醛固酮显著减少(P<0.05)。与假手术组相比,RAP组和RSD组左心房的ANP、TNF-α和IL-6水平,Cx40蛋白表达及交感神经密度(TH表达水平)和生长的神经纤维密度(GAP43表达水平)均明显增加(P<0.05);与RAP组相比,肾去交感神经可显著抑制右心房快速起搏引起的ANP、TNF-α、IL-6、Cx40及TH和GAP43阳性的神经密度等的升高(P<0.05)。结论:肾去交感神经可抑制长期快速右心房起搏后的心房重构。     

卡托普利对心肌梗死后心脏神经重构的影响

目的：探讨心肌梗死后早期应用血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）卡托普利对心脏自主神经重构的影响。方法：42只兔随机分为三组：卡托普利组（n=15）结扎冠状动脉前降支及卡托普利（10mg/kg·d）干预;对照组（n=15）结扎冠状动脉前降支;假手术组（n=12）穿线不结扎冠状动脉。术后8周行电生理检测,并用免疫组织化学及RT-PCR的方法观察心脏S100、GAP43及TH等神经标志物蛋白或基因表达水平的变化。结果：对照组在术后8周室性心律失常诱发率显著高于假手术组（P＜0.01）,而卡托普利干预后其诱发率较对照组显著下降（P＜0.01）。对照组梗死灶周S100及GAP 43阳性神经纤维密度显著高于假手术组（P均＜0.01）,且神经纤维分布紊乱;卡托普利组神经密度较对照组有所下降（P=0.07,P=0.13）,但神经形态及分布状况更接近于假手术组。在非梗死左室游离壁,对照组神经密度显著高于假手术组（P均＜0.01）,而卡托普利组与对照组差异无统计学意义（P＞0.05）。同时,对照组梗死灶周及非梗死左室游离壁TH mRNA表达水平显著高于假手术组（P＜0.01）,而卡托普利组与对照组差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：卡托普利可降低心肌梗死后室性心律失常的发生率,其机理可能与改善心脏神经纤维异常的形态及分布有关。     

串珠素参与碱性成纤维细胞生长因子对于缺血心肌的保护

目的观察串珠素参与碱性成纤维细胞生长因子对于缺血心肌的保护。方法大鼠心肌梗死模型建立后,随机分为碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）＋心肌缺血（MI）组（bFGF＋MI组,缺血边缘区注射bFGF）、MI组（缺血边缘区注射等体积生理盐水）和假手术组（sham组）。分别于梗后24h、14d、28d结束实验。检测血流动力学参数,红四氮唑法测定心肌梗死面积,免疫组化法计数微血管数目,实时定量PCR检测串珠素mRNA表达,Western印迹检测FAK、P—p38MAPK变化。结果缺血区边缘注射hFGF后,心肌功能改善,心梗面积较MI组减小,微血管数目增加,多于MI组,串珠素mRNA在缺血边缘区、梗区表达增加,FAK、P—p38表达上调。结论bFGF明显改善大鼠急性心肌梗死后心肌功能,缩小梗死面积,促进缺血心肌血管新生,串珠素参与bFGF对于缺血心肌的保护,其细胞信号转导机制涉及FAK的激活和p38MAPK信号转导途径。     

雪旺细胞移植改善心肌梗死后副交感/交感神经重塑

目的： 对心肌梗死后的心脏进行雪旺细胞（Schwann cells）移植,从而改善心肌梗死的心脏神经的重塑,降低心肌梗死后室性心律失常易感性,以达到雪旺细胞移植治疗心肌梗死后心率失常的目的。方法： 利用结扎Lewis大鼠冠状动脉前降支的方法建立急性大鼠心肌梗死模型,并将心肌梗死的大鼠随机分为细胞移植组（ n=31）和对照组（ n=30）。雪旺细胞取自大鼠坐骨神经,经爬片S100染色鉴定雪旺细胞表面标记物。并将经体外培养扩增后的雪旺细胞（5×106）通过注射的方式移植于心肌梗死周边区,并在细胞移植后的2 周用免疫荧光及免疫组织化学方法检测心肌梗死边缘区副交感、交感神经,动态心电图和程序性电刺激（PES）检测室性心律失常的易感性。 结果： 通过S100染色发现,培养获得的雪旺细胞纯度达到95%以上,在雪旺细胞移植后的2 周,免疫组织化学和免疫荧光结果显示,雪旺细胞移植能够显著改善心肌梗死边缘区副交感/交感神经的比例,并且能够显著降低动态心电图频域检测中低频/高频的比值,同时显著降低了室性心律失常的易感性。结论： 雪旺细胞移植能够有效改善心肌梗死部位副交感/交感神经的比例,从而降低心肌梗死后室性心律失常的发生率。     

结缔组织生长因子在大鼠心肌梗死后心肌间质重塑中表达的研究

目的:探讨心肌梗死后心肌间质重塑中结缔组织生长因子(CTGF)在心肌组织的表达,以进一步探讨心肌重塑的分子机制。方法:SD大鼠24只,随机分为假手术组和心肌梗死组,结扎左冠状动脉前降支建立大鼠心肌梗死后心肌间质重塑模型,假手术组不结扎左冠状动脉,均观察8w。用生物化学方法测定心肌组织胶原蛋白含量以了解心肌间质重塑。用免疫组织化学染色法进行检测分析CTGF表达的变化。用RT-PCR方法检测CTGF m RNA表达的变化。结果:心肌梗死组CTGF蛋白和m RNA表达增强,与假手术组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:CTGF与心肌梗死后心肌间质重塑有关,其可能参与心肌梗死后心力衰竭的发展,影响患者预后。     

瑞舒伐他汀对压力超负荷肥厚大鼠心脏结构和交感神经重构的影响

目的 探讨大鼠肥厚心肌结构重构、交感神经重构机制及他汀药物的保护作用.方法 62只雄性Wistar大鼠行腹主动脉缩窄术,8周造成压力超负荷性心肌肥厚模型,分为肥厚组和瑞舒伐他汀组,另设22只作为假手术组.瑞舒伐他汀组灌胃给药(10 mg·kg-1·d-1)连续12周后进行超声心动图和血流动力学指标测定.免疫组化法测定心肌中酪氨酸羟化酶(TH)和生长相关因子43(GAP43),Western印迹法检测心肌的TH、GAP43和神经生长因子(NGF)表达水平.结果 (1)肥厚组左室重量(LVW)、左室重量指数(LVWI)、室间隔厚度(IVSd)、左心室后壁厚度(PWd)、左心室舒张末期内径(LVEDd)、左心室收缩末压(LVSP)、收缩期左心室内压最大变化速率(+dp/dtmax)和舒张期左心室内压最大变化速率(-dp/dtmax)均高于假手术组和瑞舒伐他汀组.(2)Western印迹显示,肥厚组比假手术组,NGF、GAP43分别增加了1.5倍和1.7倍.瑞舒伐他汀组均低于肥厚组,分别降低46.4%(0.82±0.06比1.53±0.10)和16%(0.68±0.06比0.81±0.10).肥厚组比假手术组,TH水平降低45.7%(0.44±0.10比0.81±0.10),瑞舒伐他汀组(0.62±0.06)比肥厚组增高41%.结论 压力超负荷性大鼠肥厚心肌出现结构重构、交感神经重构现象;他汀药物能改善肥厚心肌的结构重构和交感神经重构.     

静脉输注内皮祖细胞治疗大鼠急性心肌梗死的实验研究

目的:探讨静脉输注体外培养扩增的内皮祖细胞(EPC)对急性心肌梗死大鼠的血管新生、心肌梗死面积以及心功能的影响。方法:分离大鼠骨髓单个核细胞,EBM-2+Single Quots培养基培养,鉴定EPC表面标志,EGFP-Ad标记。建立大鼠急性心肌梗死模型,在心梗后24 h,将体外培养的EPC经尾静脉缓慢注入动物体内。分别在细胞输注后7,14,28 d,检测输注细胞在心肌梗死周边区的分布、新生血管密度、心梗面积以及心功能等多项指标。结果:细胞输注后第7天,EPC治疗组心梗面积(25.08±1.18)%,明显低于对照组的(32.63±1.16)%;细胞输注后第14天时,EPC治疗组梗死周边区可见大量EGFP阳性细胞,并形成管腔样结构,EPC治疗组血管密度为(14.36±1.48)/mm2,明显高于对照组的(6.33±0.69)/mm2;细胞输注第28天,EPC治疗组大鼠各项心功能指标均明显优于对照组。结论:静脉输注的EPC能有效的向心肌梗死周边区募集,形成新生血管,减少心肌梗死面积,促进心功能的恢复。     

Effects of sympathetic nerve stimulation on ischemia-induced ventricular arrhythmias by modulating connexin43 in rats

BACKGROUND: Increased cardiac sympathetic nerve activity is thought to contribute to ventricular tachyarrhythmias during acute myocardial ischemia (MI). However, the mechanism is not completely understood. This study investigated the effects of sympathetic nerve stimulation (SNS) on ventricular tachyarrhythmias and connexin43 (Cx43) during acute MI in rats. METHODS: Ninety five male Wistar rats were randomly assigned into four groups receiving the following treatments: myocardial ischemia with sympathetic nerve stimulation (MI-SNS, n = 25), sham-operation treated with sham stimulation (SO, n = 20), myocardial ischemia with sham stimulation (MI, n = 25), myocardial ischemia pretreated with sympathetic nerve stimulation (pSNS-MI, n = 25). RESULTS: During the 30-min ischemia, the incidence of ventricular tachyarrhythmias, i.e., ventricular tachycardia or ventricular fibrillation (VT/VF) was increased in the MI-SNS group and decreased in the pSNS-MI group compared to that in the MI group (p <0.05 for both). The total amount of Cx43 protein was significantly decreased in the MI-SNS group but not in the MI group and the pSNS-MI group. The amount of phosphorylated Cx43 in the MI-SNS group was significantly lower compared to that in the SO group and the MI group (p <0.05). However, the amount of phosphorylated Cx43 was significantly increased in the pSNS-MI group compared to that in the MI group and the MI-SNS group (p <0.05). CONCLUSIONS: SNS promoted the degradation of Cx43 protein, especially the phosphorylated Cx43 protein, whereas pSNS inhibited the ischemia-induced loss of phosphorylated Cx43 during acute MI. These changes may be related to the pro- or anti-arrhythmic effect of SNS or pSNS during acute MI.