原发性胰腺癌中p16基因突变及其蛋白表达的研究

目的：探讨p16基因与胰腺癌发生的关系。方法：采用PCR基础缺失分析，PCR－SSCP及免疫组织化学方法检测28例胰腺癌组织，相应癌旁组织和4例正常胰腺组织中p16基因缺失，突变及其蛋白表达状况，并结合临床病理资料进行分析，结果：28例原发性胰腺癌组织中4例发生p16基因纯合缺失。5例发生p16基因突变，p16基因变异频率为32．1％，28例癌旁组织和4例正常胰腺组织中未发现纯合缺失及突变。p16基因变异频率与淋巴结转移（P＜0．025），转移淋巴结个数（P＜0．01）及临床分期（P＜0．05）密切相关。28例原发性胰腺癌的癌组织，癌旁组织和4例正常胰腺组织p16蛋白阳性表达率分别为57．1％（16／28），85．7％（24．28）和100％（4／4），癌组织中p16蛋白阳性表达率与组织学分化（P＜0．05），淋巴结转移（P＜0．05），转移淋巴结个数（P＜0．05）及临床病理分期（P＜0．05）密切相关。结论：p16基因变异及其蛋白失表达可能是胰腺癌发生发展过程中重要因素之一，而且二者均可作为评估胰腺癌恶性程度及其侵袭能力的有用指标，存在p16基因变异及蛋白失表达的原发性胰腺癌具有更强的恶性潜能。     

高低发区食管癌p16基因甲基化及其表达的比较

目的比较p16基因甲基化在食管癌高发区广东揭阳和低发区广东佛山之间的异同,探讨p16基因甲基化在两地食管癌变过程中所起的作用。方法采用甲基化特异性PCR方法（MSP）分别检测两地食管癌组织、癌旁组织和切缘组织p16基因启动子区域CpG岛甲基化状态。采用EnVision免疫组化法检测两地食管癌组织及癌旁组织的p16蛋白的表达。结果高发区75例标本中,食管鳞癌、癌旁及切缘组织的p16基因甲基化率分别为41．3％（31／75）、13．3％（10／75）和6．7％（5／75）。鳞癌及癌旁组织p16蛋白的阳性表达率分别为29．3％（22／75）和56．7％（17／30）。31例甲基化阳性标本中有2例（6．4％）检测到p16蛋白表达,而44例甲基化阴性的标本中有20例（45．5％）检测到p16表达;低发区55例标本中,食管鳞癌、癌旁及切缘组织的p16基因甲基化率分别为18．2％（10／55）、5．5％（3／55）和0（0／55）。食管鳞癌、癌旁组织p16蛋白阳性表达率分别为36．4％（20／55）和66．7％（20／30）。10例甲基化阳性标本中有1例（10．0％）检测到p16蛋白的表达;而45例甲基化阴性的标本中有19例（42．2％）检测到p16表达。两组鳞癌组织的p16基因甲基化率均明显高于癌旁及切缘组织（P〈0．05）;p16蛋白表达与p16基因甲基化呈负相关。高发区癌组织p16基因甲基化率明显高于低发区,差异有显著性（P〈0．05）。两组间癌组织p16蛋白表达率差异无显著性（P〉0．05）。结论p16基因异常甲基化可能是高发区食管癌癌变过程的重要事件,而在低发区p16基因异常甲基化可能不是其失活的主要机制。高、低发区可能存在不同的食管癌致癌机制。本研究从环境因素和p16基因之间的相互作用方面,为高发区和低发区食管癌的发生提供了一定的理论依据。     

HPV16/18与喉鳞状细胞癌发生发展的关系

目的：研究喉鳞状细胞癌的发生与HPV16／18的相关性。方法：采用原位杂交法检测54例喉癌中HPV16／18的表达。结果：54例喉癌组织中30例HPV16／18阳性，喉癌组HPV16／18的阳性表达为55．6％，癌旁不典型增生组为38．1％，二者比较有显著性差异（P〈0．05）；HPV16／18在癌周正常组织、癌旁单纯增生及轻度不典型增生组织中无表达。随着不典型增生程度的增大，HPV16／18阳性表达率增高，轻、中、重度增生分别为0％、7．1％和12．5％；HPV16／18的表达与喉癌的分化程度及有无淋巴结转移无关（P〉0．05）。结论：HPV16／18与喉癌的发生有关，与喉癌的分化程度及有无淋巴结转移无关。     

乳腺癌中p16,Cyclin D1基因蛋白的表达及意义

目的：探讨细胞周期调控因子p16及Cyclin D1蛋白的表达与乳腺癌发生发展的关系。方法：采用免疫组织化学染色检测49例乳腺癌及14例癌旁组织中p16及CyclinD1蛋白表达。结果：Cyclin D1在乳腺癌中有较高表达，过表达率为49％（24／49），明显高于癌旁正常组织（P＜0．05）；p16在乳腺癌中过表达率（40．8％）低于癌旁正常组织（阳性率为92．8％，P＜0．05）；淋巴结转移组的p16蛋白表达明显低于淋巴结无转移组（P＜0．05）；p16的低表达与CyclinD1的高表达有关。结论：Cyclin D1过表达及p16蛋白的失表达参与乳腺癌的发生；p16蛋白的表达异常可能参与乳腺癌的转移。     

P~(16)蛋白表达与胃癌的生物学行为

目的探讨P16蛋白与胃癌生物学行为的关系。方法采用免疫组化SP法检测33例胃癌、17例癌旁和13例正常胃粘膜中P16蛋白的表达。结果胃癌P16蛋白阳性表达率明显高于正常胃粘膜（P＜0．05）。癌旁与正常胃粘膜、胃癌阳性表达之间无显著性差异（P＞0．05）。伴淋巴结转移胃癌阳性细胞密度高于未转移者（P＜0．05）。P16蛋白表达与胃癌的其它生物学行为无统计学相关。结论P16基因异常有促进胃癌转移的效应,可作为胃癌预后的一个参考指标。     

宫颈癌组织中HPV和p53基因表达的检测

①目的 探讨人乳头瘤病毒（HPV）感染和p53基因异常在宫颈癌发生发展中的作用。②方法 用PCR技术检测12例宫颈原位癌、45例宫颈癌和20例正常宫颈组织中HPVl6／18DNA，RT-PCR检测HPV16／18阳性标本E6基因mRNA表达，聚合酶链反应-单链构象多态性（PCR-SSCP）技术检测p53基因外显子5～8的突变，同时采用免疫组化技术检测P53蛋白的表达。③结果 宫颈原位癌、宫颈癌HPV16／18阳性率均为66．67％，明显高于正常宫颈组织（20．00％），差异有显著性（χ^2=5．12、12．09，P〈0．05、0．01）。宫颈癌组织中HPV16／18 E6基因mRNA阳性表达率明显高于正常宫颈组织，差异有显著性（P=0．039）。宫颈原位癌和正常宫颈组织间、宫颈原位癌和宫颈癌间HPV16／18 E6 mRNA阳性表达率差异均无显著性（P=0．141、0．272）。45例宫颈癌标本中测得exon5和exon7突变各1例，均发生在HPV阴性宫颈癌组织，未检测到exon6和exon8的突变。宫颈原位癌和正常宫颈组织中均未检测到p53基因突变。正常宫颈组织中未检测到P53蛋白表达，宫颈原位癌和宫颈癌组织中P53蛋白阳性表达率分别为25．00％和42．22％，明显高于正常宫颈组织（χ^2=10．81，P（0．01）。P53蛋白的表达与HPV16／18感染无明显相关性（P〉O．05）。④结论 HPV感染和p53基因异常与官颈癌的发生密切相关，官颈癌组织中p53基因的突变率较低，推测P53蛋白的异常累积可能并非p53基因突变所致。     

甲状腺癌组织端粒酶激活与p16基因失活的关系

目的探讨甲状腺癌细胞增殖、分化与端粒酶激活及抑癌基因p16失活（缺失突变）之间可能存在的关系。方法应用TRAP、多重PCR、免疫组化法检测42例甲状腺癌与16例癌旁组织端粒酶活性、P16基因外显子2缺失、P16蛋白表达。结果甲状腺癌组端粒酶活性90．48％,高于癌旁组织（P〈0．01）;甲状腺癌p16基因外显子2纯合缺失率28．57％,相应癌旁组未检出（P〈0．01）;甲状腺癌P16蛋白表达缺失率40．48％,高于癌旁组（P〈0．05）;甲状腺癌P16蛋白表达缺失率高于p16基因外显子2缺失率。结论端粒酶激活与p16基因失活以及P16蛋白表达下调可能是甲状腺癌变过程中的重要分子事件,甲状腺癌中p16基因失活可能是端粒酶激活的一种途径。     

p73基因在结肠癌组织中的表达及其临床意义

目的：研究p73基因在结肠癌组织中的表达及其与结肠癌发生，发展的关系。方法：采用逆转录聚合酶链反应和催化信号放大法检测48例结肠癌及癌旁组织中p73基因和P73蛋白的表达情况，分析其表达与临床分期及病理分级的关系。结果：结肠癌组织中p73mRNA的表达明显高于癌旁组织，免疫组织化学显示，48例结肠癌标本中21例呈阳性表达，癌旁组织无阳性表达。结肠癌不同临床分期之间以及不同分化程度之间P73阳性表达率有显著差异（分别为P＜0．005和P＜0．05）。结论：结肠癌组织中p73基因过主工表达，其蛋白表达水平与结肠癌临床分期，组织学分型有关。     

p73蛋白在肺鳞癌中的表达及与临床病理特征的关系

目的：检测p73蛋白在肺鳞癌组织中的表达情况，并探讨p73蛋白的表达与肺鳞癌临床病理特征的关系。方法：采用免疫组织化学法检测p73蛋白在56例肺鳞癌及癌旁组织中的表达情况。结果：p73蛋白在肺鳞癌组织中的阳性表达率为73．2％（41／56），而在癌旁肺组织中的阳性表达率为32．1％（18／56），两者比较有显著性差异（P〈0．01）。p73蛋白的表达与肺磷癌分化程度密切相关（P〈0．05），其在低分化鳞癌组织中的阳性表达率（94．4％）显著高于在高分化癌组织中的阳性表达率（40．0％）。p73蛋白的表达与肺磷癌的TNM分期、淋巴结转移均无明显相关性（P〉0．05）。结论：p73蛋白在肺磷癌组织中呈高表达，可能参与肺鳞癌的发生与发展。     

胃癌、癌旁病变中p53与Bcl—2的作用及其相互关系

目的：探讨p53和Bcl-2基因在胃癌和癌旁病变中的作用及其相互关系。方法：应用SP免疫组化法,检测33例胃癌、17例癌旁变和13例正常胃粘膜中p53和Bcl-2蛋白表达。结果：p53蛋白在正常胃粘膜未见表达,胃癌p53阳性表达率和阳性细胞密度均高于癌旁病变,两组间存在显著性差异（P＜0．05）。正常胃粘膜中Bcl-2仅1例表达,癌和癌旁病变中Bcl-2蛋白表达分别高于正常胃粘膜（P＜0．05－0．01）,胃癌与癌旁病变间Bcl-2表达无显著性差异（P＞0．05）。p53和Bcl-2蛋白表达与胃癌的分化程度、病理分期和淋巴转移无明显相关性。虽p53阳性组Bcl-2表达高于p53阴性组,但无统计学意义。结论：p53和Bcl-2蛋白在癌旁病变中均有表达,表明两基因异常是胃癌发生的早期分子生物学事件。p53与Bcl-2基因在胃癌和癌旁病变中有协同作用,但未见二者之间的负性调控作用。     

细胞增殖抗原Ki-67在喉癌中的表达及临床意义

目的 :探讨细胞增殖抗原Ki- 6 7在喉癌组织中的表达及临床意义。方法 :采用免疫组织化学S -P法检测 4 1例喉癌组织中Ki- 6 7的表达 ,并与 12例癌旁正常组织作对照 ,进行分析比较。结果 :4 1例喉癌组织中Ki - 6 7的阳性表达率为5 3.6 % ,12例癌旁正常组织阳性表达率为 16 .7% ,二者具有显著性差异 (P <0 .0 5 )。Ki- 6 7的阳性表达率与喉癌病人的不同性别、年龄、病程、肿瘤部位和TNM分期无关 (P >0 .0 5 ) ,但与吸烟、饮酒、淋巴结有无转移以及喉癌组织的病理分级之间具有显著性差异 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1)。结论 :Ki- 6 7在喉癌的发生发展中起一定的作用 ,可作为判断喉癌恶性程度和预后的重要参考指标。     

核糖体S6蛋白激酶4和热休克蛋白90在乳腺癌中的表达情况及其与患者临床病理特征及预后的关系

目的 探讨核糖体S6蛋白激酶4(RSK4)和热休克蛋白90(HSP90)在乳腺癌中的表达情况及其与患者临床病理及预后的关系.方法 采用免疫组织化学法检测72例手术切除的乳腺癌组织和72例癌旁组织的RSK4和HSP90蛋白的表达情况,分析不同临床病理特征患者RSK4和HSP90蛋白的表达情况,比较不同RSK4和HSP90表达水平患者的生存期.结果 RSK4蛋白在乳腺癌癌旁组织中的阳性表达率高于癌组织(P<0.05),HSP90蛋白在乳腺癌癌组织中的阳性表达率高于癌旁组织(P<0.05),在乳腺癌组织中RSK4与HSP90蛋白的表达呈负相关(P<0.05).不同分化程度、TNM分期患者的乳腺癌组织RSK4蛋白阳性表达率比较,差异均有统计学意义(P<0.05),不同肿瘤大小、有无淋巴结转移、不同组织学分化、不同TNM分期患者乳腺癌组织的HSP90蛋白阳性表达率比较,差异均有统计学意义(P<0.05).RSK4蛋白阳性表达患者的中位生存期为71个月,多于RSK4蛋白阴性表达患者的54个月(P<0.05),HSP90蛋白阳性表达患者的中位生存期为41个月,少于HSP90蛋白阴性表达患者的82个月(P<0.05).结论 乳腺癌组织中RSK4的表达降低,HSP90的表达升高,RSK4和HSP90在乳腺癌中可能通过某些通道存在相互影响的关系.     

肺腺癌患者组织中肿瘤标志物P16和P53蛋白的表达及意义

目的:研究肺腺癌患者组织中P16和P53蛋白的表达及临床意义。方法:应用免疫组织化学方法对57例不同临床病理参数肺腺癌患者肺腺癌组织和癌旁组织中p16和p53基因表达产物进行检测,并进行比较。结果:肺腺癌组织中P16蛋白的阳性率为35.1%,明显低于癌旁组织59.6%;P53蛋白的阳性率为80.7%(46/57),明显高于癌旁组织42.1%(P<0.05)。P16和P53蛋白表达与肺腺癌分化程度、浸润深度及淋巴结有无转移有关(P<0.05)。结论:肺腺癌组织P16和P53蛋白的异常表达可能与其发生、发展和预后有关。     

p16蛋白和CD44V6在胃癌中的表达及临床意义的研究

目的　探讨 p16蛋白 ,CD44V6在胃癌的发生发展及转移中的临床意义。 方法　应用免疫组织化学方法对 46例胃癌及癌旁组织中 p16和CD44V6表达进行检测。 结果　胃癌组织中 p16蛋白阳性率 (8/ 46 ,2 1.0 5 % )明显低于癌旁组织中表达率 (2 7/ 46 ,5 8.70 % )。而CD44V6在胃癌中的表达率为 (71.74% ,33/ 46 ) ,癌旁组织中未见CD44V6表达。两者的表达与年龄、性别、肿癌大小无相关性 ,而与有无淋巴结转移显著相关。p16与分化程度有显著差异 ,而CD44 6则与之无关。在TNM分期中 ,CD44V6在Ⅲ、Ⅳ期中的表达显著高于Ⅰ期中 ,而p16在Ⅰ期中的表达率明显高于Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期中的表达率。p16与CD44V6两者在胃癌中的表达无相关性。但有淋巴结转移组(2 7例 )中 ,p16阳性表达率 3 .70 %明显低于CD44V6阳性表达率 88.89% ,且有显著差别 (P <0 .0 5 )。 结论　p16蛋白、CD44V6是胃癌发生发展的重要因素 ,特别是CD44V6可作为胃癌淋巴结转移的重要指标 ,p16蛋白、CD44V6可为临床诊断胃癌、判断预后、指导手术提供重要依据     

P16蛋白在胃癌组织中的异常表达及其意义

目的：通过研究P16蛋白表达与胃癌相关临床指标的关系,探讨P16蛋白对胃癌发生和发展 的影响。方法：应用免疫组化S-P法检测10例正常胃黏膜组织和63例胃癌组织中P16蛋白的表达情况。 结果：①正常胃黏膜组织P16蛋白阳性表达率为80.0%,胃癌组织阳性表达率为44.4%,二者之间差异有显著性(P<0.05);②位于贲门部、胃底体部和幽门部的胃癌P16蛋白阳性表达率之间差异无显著性(P>0.05);③高分化组P16蛋白阳性表达率明显高于中低分化组(P<0.05);④癌组织侵犯肌层组P16蛋白阳性表达率低于未侵犯肌层组(P<0.05);⑤有淋巴结转移组P16蛋白阳性表达率低于无淋巴结转移组(P<0.05)。结论：P16蛋白表达缺失与胃癌之间存在密切关系,暴露于不同侵袭因素作用下所形成的胃 癌中P16的表达缺失无差异。     

c-met在喉鳞状细胞癌中的表达及意义

目的:探讨原癌基因c-met在喉癌组织中的表达及其与喉癌临床病理的相关性。方法:采用免疫组织化学染色方法检测了42例喉癌组织,25例非癌组织(癌旁组织及声带息肉)中c-met蛋白的表达情况。结果:免疫组织化学检测结果显示c-met蛋白在喉癌组织中的阳性表达率为64.3%,显著高于癌旁组织及声带息肉(P<0.05)。c-met蛋白表达与肿瘤的病理分级、临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05),而与患者年龄无关(P>0.05)。结论:c-met在喉癌组织中异常高表达,提示在喉癌的发生、发展中可能起重要作用。     

p16和HER-2蛋白在胃癌中的表达及其临床意义

目的:探讨p16和HER-2蛋白在胃癌组织中的表达及其与临床病理参数的关系.方法:采用免疫组织化学S-P法检测60例胃癌及其30例胃正常组织中p16和HER-2蛋白的表达,并分析其与胃癌临床病理参数之间的关系.结果:p16在胃癌组织中的阳性率为21.7%,低于胃正常组织中的73.3%(P＜0.01);p16在无淋巴结转移、Ⅰ~Ⅱ期胃癌患者的阳性率分别高于有高、中分化、Ⅲ~Ⅳ期患者(P＜0.05和P=0.05).HER-2蛋白在胃癌组织中阳性率为38.3%,高于在胃正常组织中的0.00%(P＜0.01);HER-2蛋白在高、中分化、有远处转移和Ⅲ~Ⅳ期胃癌患者的阳性率分别高于低、未分化、无远处转移和Ⅰ~Ⅱ期患者(P<0.05~P＜0.01).p16和HER-2蛋白阳性之间无相关关系(P＞0.05).结论:p16蛋白的失表达和HER-2蛋白的过表达可能与胃癌的转移进展有关,对评估胃癌生物学行为及判断预后具有重要意义.     

p53蛋白和ki-67蛋白在食管鳞癌、癌前病变的表达及其临床意义

目的探讨食管鳞癌、癌前病变、正常黏膜p53蛋白和ki-67蛋白的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学SP法检测35例食管鳞癌、18例轻度不典型增生、11例重度不典型增生、18例食管正常上皮p53蛋白和ki-67蛋白的表达。结果正常黏膜及轻度不典型增生与重度不典型增生、食管鳞癌p53阳性率比较差别有统计学意义（P〈0．01），正常黏膜与轻度不典型增生之间、重度不典型增生与食管鳞癌p53阳性率比较差别无统计学意义（P〉0．05），p53表达与鳞癌分级及淋巴结转移无关（P〉0．05）。正常黏膜与轻度不典型增生、轻度不典型增生与食管鳞癌ki-67阳性检出率比较有统计学意义（P〈0．05，P〈0．01）、轻度不典型增生与重度不典型增生ki-67阳性检出率比较无统计学意义（P〉0．05），重度不典型增生与食管鳞癌、中-高分化鳞癌与低分化鳞癌ki-67高表达率比较有统计学意义（P〈0．01，P〈0．05），ki-67表达与淋巴结转移无关（P〉0．05）。p53与ki-67表达呈正相关（P〈0．01）。结论p53基因的缺失或突变在食管鳞癌的早期阶段；联合检测P53与ki-67作为筛选癌前高危个体可能更有意义。     

非小细胞肺癌组织中p33~(ING1)蛋白的表达及临床意义

目的:研究p33ING1在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其与临床病理特征的关系;探讨p33ING1在NSCLC发生、发展中的可能作用机制。方法:用免疫组化SP法检测p33ING1在40例NSCLC和10例正常肺组织中的表达。结果:p33ING1在NSCLC组织中阳性率(57.5%,23/40)低于正常肺组织(100.0%,10/10),两组有显著性差异(P<0.05)。p33ING1低表达与肺癌的分化程度、TNM分期及淋巴结转移均有关:p33ING1在无淋巴结转移组及淋巴结转移组癌组织中的阳性表达率分别为76.2%(16/21)、36.8%(7/19),两组有显著性差异(P<0.05);在UICC的TNM分期~期、~期组病例中分别为69.0%(20/29)、27.3%(3/11)(P<0.05);在高、中、低分化组病例中分别为87.5%(7/8)、66.7%(12/18)和14.3%(2/14),其中高、低分化组间及中、低分化组间的阳性表达率均具有极显著差异(P<0.01)。p33ING1的表达与其他临床病理参数(患者性别、年龄、病理组织学类型等)不相关(P>0.05)。结论:p33ING1在NSCLC中低表达,它的低表达对判断NSCLC恶性程度、浸润甚至转移有重要价值。p33ING1蛋白的低表达在NSCLC的发生发展中可能起重要作用。     

p16,nm23-H_1基因蛋白在膀胱癌的表达及与临床意义(英文)

目的:探讨抑癌基因p16及肿瘤抑制基因nm23-H1在膀胱中的表达及临床意义。方法:应用免疫组织化学s-p法检测18例正常膀胱组织中及38例膀胱移行细胞癌组织中p16及nm23-H1的表达。结果:p16在正常组织、膀胱癌中阳性表达率分别为88.8％(16/18),47.4％(18/38),二者间有显著差异性(P<0.01)。nm23-H1在正常膀胱组织、膀胱癌中阳性表达率分别为83.3％(15/18),44.7％(17/38),二者间有显著差异(P<0.01)。提示p16,nm23-H1阳性表达率与膀胱移行细胞癌的临床分期、临床分级、肿瘤大小及是否转移有密切关系。结论:p16、nm23-H1在膀胱癌中的阳性表达对抑制肿瘤生长、浸润和转移起重要作用,可作为膀胱癌患者预测转移和预后及判断膀胱移行细胞癌生物学行为的良好指标。