20(S)-原人参二醇对SMMC-7721细胞体内外作用的研究

目的观察不同剂量的20(S)-原人参二醇(Protopanaxadiol,PPD)在体内外对人肝癌细胞株SMMC-7721抗肿瘤作用。方法建立人肝癌裸鼠皮下移植瘤模型,观察20(S)-原人参二醇的肿瘤抑制作用。MTT比色法检测20(S)-原人参二醇对SMMC-7721细胞的增殖抑制作用,Ho-echst33342核染色观察细胞凋亡形态学改变,采用FITC-An-nexinⅤ/PI双染流式细胞术分析凋亡情况,同时检测Caspase-3活性。结果在体内,PPD可抑制SMMC-7721细胞裸鼠异种移植瘤生长;在体外,PPD对SMMC-7721细胞的增殖具有明显的抑制及诱导其凋亡作用,呈时间和剂量依赖性,Hoechst33342核染色可见凋亡小体,同时伴有Caspase-3活性的增加。结论20(S)-原人参二醇在体内外均可抑制SMMC-7721细胞增殖,并诱导其凋亡,其机制可能通过活化Caspase-3诱导细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用。     

不同粒径纳米血竭和普通血竭对肿瘤细胞的体外效应

目的 观察不同粒径血竭纳米颗粒在体外对宫颈癌细胞株Hela、肺癌细胞株A549、肝癌细胞株SMMC7721、卵巢癌细胞株A2780和粒细胞白血病细胞株HL-60的杀伤作用,并探讨其作用机制。方法 以不同浓度和不同粒径纳米血竭分别加入培养的上述肿瘤细胞株中,流式细胞仪检测各种细胞的死亡率、凋亡率及其细胞周期,并与普通血竭比较。结果 粒径为171,167和23.8 nm的纳米血竭在浓度3.9～31.2 mg·L^-1范围对细胞株HL-60的杀伤百分率明显高于普通血竭,其主要作用机制不是诱导细胞凋亡,细胞周期测定表明血竭纳米颗粒主要将HL-60细胞阻滞在G0/G1期。纳米血竭对其他肿瘤细胞的作用与普通血竭差别不明显。结论 粒径为171,167和23.8 nm的纳米血竭对肿瘤细胞株HL-60有明显的杀伤作用,其效率高于非纳米血竭.     

多西他赛体外抗肝癌作用及对细胞内氧化还原状态的影响

目的：研究多西他赛（docetaxel）体外抗肝癌作用及其与氧化还原状态的关系。方法：用不同浓度的多西他赛处理肝癌细胞株（SMMC-7721细胞），用集落形成试验检测多西他赛对SMMC-7721细胞生长抑制作用，通过流式细胞术测定多西他赛对SMMC-7721细胞株细胞周期及凋亡的影响。用DCF／DA作为活性氧（reactive oxygen species，ROS）捕获剂检测用药后细胞内ROS产生。用试剂盒测定细胞谷胱甘肽（glutathione。GSH）水平。结果：多西他赛能抑制SMMC-7721细胞增殖，并呈浓度依赖性；诱导SMMC-7721细胞凋亡和G2／M期阻滞；导致SMMC-7721细胞内ROS产生增多和GSH降低。结论：多西他赛能通过诱导细胞凋亡和G2／M期阻滞而抑制SMMC-7721细胞增殖，用药后细胞内ROS产生增多和GSH降低可能在多西他赛体外抑制SMMC-7721细胞增殖和促进细胞凋亡中起重要作用。     

丹参多酚酸盐对胶质瘤U251细胞增殖及凋亡的影响

目的 研究丹参多酚酸盐对胶质瘤U251细胞增殖及凋亡的影响,并探讨其发生机制。方法 应用CCK-8试剂盒检测丹参多酚酸盐对U251细胞增殖的影响,流式细胞仪观察丹参多酚酸盐对U251细胞周期及细胞凋亡的影响,qRT-PCR检测自噬基因Beclin-1的表达。结果 丹参多酚酸盐可明显抑制胶质瘤U251细胞增殖,使细胞阻滞在G₀/G₁期,促进细胞凋亡,上调自噬基因Beclin-1 mRNA的表达。结论 丹参多酚酸盐可抑制胶质瘤U251细胞生长,诱导细胞发生凋亡,促凋亡效应可能与自噬基因Beclin-1 mRNA表达增多有关。     

广西眼镜蛇毒蛋白Natrin在体外诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡作用的研究

目的观察广西眼镜蛇毒蛋白Natrin在体外对人肝癌SMMC-7721细胞的增殖抑制作用及凋亡诱导作用。方法以不同浓度的Natrin作用于SMMC-7721细胞24 h后,用MTT法检测细胞的生长抑制率;AO/EB双染色法、透射电子显微镜法观察细胞凋亡、流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期。结果 Natrin对人肝癌SMMC-7721细胞有体外抑制作用,随着药物浓度的增大抑制率也随之增大,24 h半数抑制浓度IC50为138.69 mg·L-1;给药后,荧光显微镜下与透射电子显微镜下细胞呈现典型的凋亡形态改变;流式细胞仪检测到随着药物浓度的增大凋亡百分数也随之增大;Natrin能诱导SMMC-7721细胞发生S期和G2/M期阻滞。结论Natrin在体外能抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖并诱导其凋亡。     

白芍总苷对SMMC-7721细胞增殖的抑制作用

目的探讨白芍总苷(total glucosides of paeony,TGP)对人肝癌细胞株SMMC-7721的增殖抑制作用及其机制。方法采用MTT法检测TGP对SMMC-7721增殖的影响;应用荧光显微镜观察药物作用后的细胞的形态。结果白芍总苷(0.5~2.5g.L-1)能抑制SMMC-7721细胞生长,且呈浓度依赖性;TGP(1.0、1.5 g.L-1)分别作用72 h后,SMMC-7721细胞出现体积缩小,荧光染色增强,胞核或胞质中可见致密浓染的块状或颗粒状黄绿色荧光染色。结论白芍总苷在体外能够抑制人肝癌细胞SMMC-7721的增殖,并能诱导细胞凋亡。     

榄香烯对B细胞淋巴瘤Raji细胞株的体内外抑制作用

目的:探讨榄香烯对B细胞淋巴瘤Raji细胞株的体内外作用。方法:不同浓度的榄香烯体外作用Raji细胞不同时间,CCK-8法检测增殖抑制作用,Annexin V/PI双染色法检测细胞凋亡,DAPI染色进行细胞核形态学分析,PI单染色法检测细胞周期改变;动物实验观察榄香烯体内抑瘤作用。结果:榄香烯对Raji细胞生长具有明显的抑制作用,呈量效和时效关系;榄香烯能诱导Raji细胞凋亡,呈量效关系;DAPI染色显示榄香烯作用Raji细胞具有凋亡细胞核的特征性核形态;细胞周期分析显示G0/G1期细胞相对增多、S期和G2/M期细胞均相对减少;榄香烯明显抑制Raji细胞在SCID小鼠体内增殖。结论:榄香烯对Raji细胞具有明显的增殖抑制作用,其机制可能是通过G0/G1期阻滞导致细胞凋亡发挥效用的。     

源于健康人与乳腺癌患者CIK细胞的生物学特性及抗癌活性的研究

目的探讨健康人与乳腺癌患者CIK细胞在体外增殖能力及抗肿瘤作用的差异。方法分离健康人和乳腺癌患者外周血单个核细胞(PBMC)加入细胞因子,体外诱导CIK细胞,观察CIK细胞增殖能力,用MTT法检测其对不同肿瘤细胞株的杀伤活性。结果与健康人CIK细胞相比,乳腺癌患者CIK细胞的增殖速度较慢,其最大增殖倍数低(P<0.05);健康人CIK细胞对乳腺癌细胞株(MCF-7)、肝癌细胞株(SMMC-7721)、肺癌细胞株(SPC-A-1)的杀伤活性明显高于乳腺癌患者来源的CIK细胞(P<0.05)。结论健康人CIK细胞的体外增殖力及对肿瘤细胞的杀伤活性均高于乳腺癌患者的CIK细胞。健康人CIK细胞对3种肿瘤细胞株均有较强的杀伤效果。     

雷公藤内酯醇抗人肝癌SMMC-7721细胞活性研究

目的: 评价雷公藤内酯醇抗人肝癌SMMC-7721细胞的作用.方法: 采用体外细胞培养和SD大鼠体内肿瘤接种两种衡量方法,体外细胞培养检测指标包括细胞形态观察,台盼蓝染色,DAPI染色,DNA ladder;SD大鼠体内接种肿瘤指标检测用游标卡尺测量肿瘤体积大小.结果: 与对照组相比,体外培养肿瘤细胞在用药后活细胞大幅减少,体内接种肿瘤细胞在用药后,肿瘤块体积较小且增长缓慢,而对照组肿瘤体积却大幅增长.结论: 雷公藤内酯醇对体外和体内培养的人肝癌SMMC-7721细胞有明显的生长抑制作用和促凋亡作用.     

KTDA抑制肿瘤细胞增殖和诱导凋亡的研究

目的探讨3-Keto-tirucall-8,24-dien-21-oic acid(KTDA)体外抑制肿瘤细胞增殖及诱导凋亡的作用。方法使用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察KTDA对肿瘤细胞的增殖抑制作用;通过吖啶橙染色,观察肿瘤细胞的形态学变化;琼脂糖凝胶电泳法检测它们对细胞DNA降解的影响。结果KTDA浓度为100、10、1μg.mL-1,作用72 h时,能抑制人乳腺癌细胞系MCF-7、人肝癌细胞株SMMC-7721、人慢性髓性白血病细胞系K562、人宫颈癌细胞系Hela、人舌癌细胞系Tca 8113的生长,并呈浓度依赖性。当KTDA浓度为10μg.mL-1时,处理72 h后,于荧光显微镜下观察到凋亡小体,电泳结果显示典型的DNA梯状条带。结论KTDA能抑制5种肿瘤细胞的增殖,并呈浓度依赖性,KTDA对MCF-7、SMMC-7721、K562、Hela比较敏感,Tca 8113次之,其机制可能为通过诱导5种肿瘤细胞凋亡而发挥抗肿瘤的作用。     

甘草酸修饰阿霉素壳聚糖纳米粒对人肝癌细胞系SMMC-7721的杀伤作用研究

目的:研究甘草酸修饰阿霉素壳聚糖纳米粒对人肝癌细胞系SMMC-7721的杀伤作用。方法:采用MTT实验研究载药纳米粒对肿瘤细胞增殖的抑制效应,激光共聚焦显微镜观察纳米粒的胞内分布及处理肿瘤细胞实验前后的形态学变化,应用TUNEL染色技术研究载药纳米粒诱导肿瘤细胞凋亡的情况。结果:甘草酸修饰阿霉素壳聚糖纳米粒对SMMC-7721细胞生长的抑制效应增强了6.36倍(与游离药物比较),而未修饰阿霉素壳聚糖纳米粒对肿瘤细胞的杀伤作用未见显著提高。激光共聚焦显微镜下可见甘草酸介导的纳米粒促进阿霉素向细胞核分布,从而提高了阿霉素的抗肿瘤作用。TUNEL染色技术证明甘草酸介导的纳米粒可促进阿霉素对细胞核内DNA的断裂及细胞核的破碎分解,增加阿霉素对肿瘤细胞诱导凋亡的作用。结论:甘草酸表面修饰阿霉素壳聚糖纳米粒可作为潜在的治疗肝细胞性肝脏疾病药物的主动传输载体,其体内药效学评价值得进一步研究。     

Anticancer effect of two diterpenoid compounds isolated from Annona glabra Linn

INTRODUCTION Traditional Chinese medicine afforded a valuableapproach in the searching for new anticancer drugs.Studies on the pharmacological mechanism and search-ing for new chemical structures from herbal extractfor new anticancer drugs caught great interest[1]. Taxol,isolated from the stem bark of Taxus brevifolia, pro-vided a typical example in this respect. Taxol was rankedas “the most important new drug we have had in can-cer for 15 years”[2]. Annonaceous acetogenius were …     

丹参对离体红细胞与内皮细胞粘附特性的影响

用流室系统定量研究了体外丹参注射液对健康人红细胞与培养的人脐静脉内皮细胞粘附的影响。结果发现，丹参通过同时作用于红细胞与内皮细胞，从而使红细胞与内皮细胞粘附的数目减少、强度减弱，这可能是丹参能改善血液循环状况的又一重要机制；同时还发现在体外预防用丹参较治疗用时效果更佳，这一发现具有重要的临床学意义。     

丹参与三七配伍对大鼠慢性肝损伤的作用

目的：观察丹参与三七配伍对慢性肝损伤的治疗作用。方法：采用CCl4复制大鼠慢性肝损伤模型．测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、白蛋白、球蛋白、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、肝纽织羟脯氨酸(Hyp)含量．以反映肝细胞损伤及肝纤维化程度．并进行肝脏病理组织学检查。结果：丹参与三七配伍治疗后肝细胞损害，肝脏脂肪变性、炎细胞浸润的程度均较轻，成纤维细胞和胶原纤维增生亦较少。结论：丹参与三七配伍对损伤肝病组织的修复，肝细胞再生显示良好的治疗作用。     

对甲氧基肉桂醛左氧氟沙星酰腙诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的作用

目的探讨喹诺酮酰腙类化合物诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的作用。方法用不同浓度的对甲氧基肉桂醛左氧氟酰腙(FQ-10)与SMMC-7721细胞体外培养。MTT法检测FQ-10对SMMC-7721细胞的增殖抑制作用;Hoechst33258/PI双染荧光染色法、TUNEL法及琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡变化;高内涵活细胞成像系统测定细胞线粒体膜电位(△ψm)变化;Western blot方法测定caspase-9、caspase-8、caspase-3、p53、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果 FQ-10在0.625～10.00μmol.L-1的浓度范围能抑制细胞增殖,呈时间、浓度依赖性;作用于细胞24 h的IC50值是4.40μmol.L-1;各组FQ-10作用24 h后,细胞凋亡率高于对照组(P<0.05);琼脂糖凝胶电泳可见凋亡细胞典型的梯状DNA条带,并伴有线粒体膜电位降低。荧光染色观察细胞形态学变化,显示凋亡细胞染色质凝集,细胞核碎裂成碎片等典型细胞凋亡特征性变化,晚期凋亡细胞可见特异性PI染色。与对照组比较,FQ-10作用后p53、Bax、caspase-9、caspase-3蛋白表达量增加,其中caspase-9、caspase-3活性裂解片段明显增加,caspase-8无变化,而Bcl-2蛋白表达水平下降。结论对甲氧基肉桂醛左氧氟酰腙能够激活线粒体凋亡通路,诱导人肝癌细胞凋亡。     

Reactive oxygen species production and Bax/Bcl-2 regulation in honokiol-induced apoptosis in human hepatocellular carcinoma SMMC-7721 cells

We investigated possible mechanism(s) where honokiol induces apoptosis in human hepatocellular carcinoma SMMC-7721 cells. MTT assay showed that honokiol has strong inhibition on SMMC-7721 cells in a dose-dependent manner. SMMC-7721 cells after honokiol treatment display morphological characteristics such as cell shrinkage, detachment from the culture plate, formation of apoptotic bodies, change to a round shape, and marked nuclear condensation and fragmentation after 32258 staining. Cell apoptosis was measured by Annexin-V/PI staining and alternatively, by the subG0/G1 percentage of the cell cycle analysis followed by FACS. An obvious loss of ΔΨ(m) and a quick burst of ROS was detected when honokiol reached 4μg/ml, which was coincident with the high apoptosis percentage in our previous research. Up-regulation of Bax and down-regulation of Bcl-2 were observed, suggesting that honokiol-induced apoptosis was associated with reactive oxygen species (ROS) production and an increase of Bax/Bcl-2 ratios.     

丹参注射液诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的研究

目的:探讨丹参注射液在体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向神经元样细胞分化的作用。方法:采用差速贴壁法体外分离培养大鼠MSCs,流式细胞仪检测其表面标志,经碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)预诱导24h,采用含丹参注射液的无血清L-DMEM培养液诱导MSCs,倒置显微镜下观察细胞形态的变化,免疫荧光细胞化学检测巢蛋白、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白(NF-M)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。结果:体外培养的大鼠MSCs表达CD29、CD44、CD105、CD166。丹参注射液诱导后MSCs胞体收缩,突起伸出,较密的部分神经元拉成网状,免疫细胞化学显示巢蛋白、NSE、NF-M表达阳性,阳性率分别为(58.68±4.50)%、(61.23±5.72)%、(63.47±6.38)%,GFAP阳性细胞率(1.47±0.23)%。结论:丹参注射液在体外可以将大鼠MSCs诱导分化为神经元样细胞。