Rb基因功能片段重组质粒的构建

Ｒｂ基因功能片段重组质粒的构建郭奕斌（中山医科大学医学遗传学教研室；广州，５１００８９）主题词基因，抑制，肿瘤；视网膜神经母细胞瘤；质粒；基因表达；克隆，分子中图号Ｑ３３；７８视网膜母细胞瘤基因（Ｒｂ）是首先被公认的肿瘤抑制基因。它与视网膜母细胞瘤、...     

Rb基因对人视网膜母细胞瘤株SO—Rb50的影响

目的：探讨视网膜母细胞瘤（Ｒｂ）的发生与Ｒｂ基因缺失、失活等异常的关系。     

点突变导致Rb1基因内部密码形成终止

本实验中使用聚合酶链反应－单链构象多态联合序列分析对视网膜母细胞瘤肿瘤组织Ｒｂ１基因进行检测时，发现Ｒｂ１基因第６外显子内Ｔ至Ｇ点突变，第２３外显子内Ｇ至Ｔ点突变，其结果导致Ｂｂ１基因编码序列终止密码的形成，这种改变无疑使Ｒｂ１基因的完整表达受挫。     

视网膜母细胞瘤基因生物学功能的研究

视网膜母细胞瘤基因生物学功能的研究陈大年，李岱宗，黄倩等。华西医科大学第一临床医学院眼科中华眼科杂志１９９５；３１（２）：８７用电穿孔转染技术将构建的视网膜母细胞（Ｒｂ）基因正义表达载体ＤＯＬＲＢ和反义表达载体ＤＯＬＲＢＡＳ分别导入Ｒｂ基因完全失活的...     

视网膜母细胞瘤基因生物学功能的研究

２０视网膜母细胞瘤基因生物学功能的研究陈大年，李岱宗，黄倩等。华西医科大学眼科学教研室中华眼科杂志１９９５；３１（２）∶８７用电穿孔转染技术将构建的视网膜母细胞瘤（Ｒｂ）基因正义表达载体ＤＯＬＲＢ和反义表达载体ＤＯＬＲ－ＢＡＳ分别导入Ｒｂ基因完全失活...     

Rb基因调节细胞周期抑制乳腺癌细胞生长及其肿瘤特性

２９Ｒｂ基因调节细胞周期抑制乳腺癌细胞生长及其肿瘤特性陈大年，等。华西医科大学附属第一医院眼科中华眼底病杂志１９９３；９（３）：１３５视网膜母细胞瘤易感基因（Ｒｂ基因）在多种肿瘤组织中有缺失或失活。我们构建了含正常人ＲｂｃＤＮＡ全长序互列的逆转录病毒...     

Rb基因调节细胞周期抑制乳腺癌细胞生长及其肿瘤的特性

［１５］Ｒｂ基因调节细胞周期抑制乳腺癌细胞生长及其肿瘤的特性陈大年等。华西医科大学附一院眼科（中华眼底病杂志１９９３；９（３）：１３５）视网膜母细胞瘤易感基因（Ｒｂ基因）在多种肿瘤组织中有缺失或失活。我们构建了含正常人ＲｂｃＤＮＡ全长序互列的逆转录病...     

应用Rb基因内多态位点作家系连锁分析预测视网膜母细胞瘤

应用Ｒｂ基因内探针ｐ６８ＲＳ２．０，ｐ１２３Ｍ１．８及ＰＣＲ扩增Ｒｂ基因内多态位点Ｒｂｌ．２０及ＸｂａＩ，对６个遗传性Ｒｂ家系进行连锁分析，结果６个家系均可获得信息。证实以上方法可用于遗传性视网膜母细胞瘤突变基因携带者的检测，为产前诊断提供了有效途径。     

Rb1基因在直,结肠癌中的重排与扩增

目的：检测１４例经临床及病理确诊的直，结肠癌及其癌旁组织标本基因组ＤＮＡ中Ｒｂ１基因结构状态，方法；利用Ｒｂ１基因特异性ｃＤＮＡ探针，采用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交分析方法；结果；４例（４／１４）现Ｒｂ１重排，其中３例有异常酶切片段的扩增（１０～２０倍）。Ｒｂ１基因重排，扩增的病例其临床恶性度高，预后不好，结论：Ｒｂ１基因在直，结肠癌中可能有癌基因样功能，其作用机理可能与其在视网膜母细胞瘤等肿瘤中的不尽     

反义Rb基因促进细胞生长

３７反义Ｒｂ基因促进细胞生长陈大年，李岱宗，顾健人等。华西医科大学附属第一医院眼科中华眼底病杂志１９９３；９（４）：１９８视网膜母细胞瘤易感基因（Ｒ６基因）是一个抗癌基因，在多种肿瘤组织中存在缺失、突变或失活。我们成功地构建了Ｒｂ基因的反义表达载体Ｄ...     

108例视网膜母细胞瘤Rb基因突变的特征

１０８例视网膜母细胞瘤Ｒｂ基因突变的特征黄倩，ＴｈａｄｄｅｕｓＰ，ＤｒｙｊａＤａｖｉｄＷ等。华西医科大学附属第一医院眼科中华眼底病杂志１９９７；１３（１）∶１２为研究ＲＢ患者肿瘤及体细胞内Ｒｂ基因的存在状态、细微结构、Ｒｂ基因突变的特征、起源与传递。...     

肺肿瘤癌基因与抑癌基因表达的研究

目的：探讨癌基因与抑癌基因的表达与肺癌发生、发展的关系。方法：对６１例肺肿瘤标本。用免疫组化方法同时检测癌基因Ｂｃｌ－２、抑癌基因视网膜母细胞（Ｒｂ）、ｐ５３、ｐ１６。结果：Ｒｂ与ｐ１６表达、ｐ５３与Ｂｃｌ－２表达呈负相关（Ｐ〈０．０５）,Ｒｂ与Ｐ５３表达、Ｐ１６与Ｂｃｌ－２表达呈正相关（Ｐ〈０．０５）。结论：肺癌的发生与发展是癌基因激活、抑癌基因失活及细胞凋亡调控基因异常等多基因损害的积累过程和     

急性淋巴细胞白血病Rb基因的分析

应用限制性内切酶片段长度多态性分析了３２例原发急性淋巴细胞白血病Ｒｂ基因的等位基因变化，采用＾３２Ｐ－标记的ＲｂＣｄｎａ３．８ｋｂ探针，结果在８例患者中发现Ｒｂ基因结构异常。其中４例出现新的３．１ｋｂ和２．３ｋｂ片段，选用Ｒｂ基因外显子１８，１９，２１，２２，２７五对引物，对已发现Ｒｂ基因异常的６例患者进行了分析，发现１例在外显子１８和２１无扩增产物。     

Rb基因对血管平滑肌细胞生长抑制作用的研究

目的探讨腺病毒载体介导的Ｒｂ基因对血管平滑肌细胞的作用，及其应用于动脉粥样硬化及动脉再狭窄基因治疗的可能性。方法构建Ｒｂ基因的重组腺病毒载体，体外转染兔血管平滑肌细胞。应用生化染色、免疫组化及聚合酶链反应检测基因的转染效率、基因表达情况。应用细胞计数、同位素掺入、流式细胞仪检测手段，观察Ｒｂ基因对平滑肌细胞生长的作用。结果腺病毒载体能快速有效地将外源性基因导入平滑肌细胞并表达。Ｒｂ基因导入可抑制平滑肌细胞生长，减少细胞ＤＮＡ合成，减少合成后期和分裂期细胞量，增加静止期和合成前期细胞。结论腺病毒载体介导Ｒｂ基因导入有可能作为动脉粥样硬化及动脉再狭窄的基因治疗手段。     

MTT法研究三种放射增敏剂对视网膜母细胞瘤的毒性作用

采用离体培养的视网膜母细胞瘤（Ｒｂ）细胞株Ｙ－７９和Ｓｏ－Ｒｂ５０研究ＭＴＴ法及用ＭＴＴ法观察了三种放射增敏药物对Ｒｂ细胞的毒性作用。结果显示：ＭＴＴ法用于Ｒｂ体外药物筛选，具有客观，方便，迅速，重复性好和不需特殊设备等优点。三种放射增敏药物对Ｒｂ细胞的毒性作用则与细胞特性，药物浓度及作用时间有关。     

MTT法研究三种放射增敏剂对视网膜母细胞瘤的毒性作用

采用离体培养的视网膜母细胞瘤（Ｒｂ）细胞株Ｙ－７９和Ｓｏ－Ｒｂ５０研究ＭＴＴ法及用ＭＴＴ法观察了三种放射增敏药物对Ｒｂ细胞的毒性作用。结果。显示：ＭＴＴ法用于Ｒｂ体外药物筛选，具有客观、方便、迅速、重复性好和不需特殊设备等优点。三种放射增敏药物对Ｒｂ细胞的毒性作用则与细胞特性、药物浓度及作用时间有关。     

野生型Rb基因转移预防血管成形术后再狭窄的实验研究

目的：探讨人野生型Ｒｂ基因转移对预防血管成形术后再狭窄的作用，方法；通过逆转录病毒载体介导，将野生型Ｒｂ基因的转导至大鼠球囊损伤的颈动脉再狭窄模型中，２１天后观察其对新生内膜形成的影响，并检测Ｒｂ蛋白表达水平，结果：成功地构建和包装了人野生型Ｒｂ基因的重组逆转录病毒载体，并在体外细胞中成功表达；     

人肝细胞癌组织p15及Rb基因的表达意义

目的 探讨ｐ１５，Ｒｂ基因的肝细胞肝癌（ＨＣＣ）的表达情况、相互关系及其临床病理意义。方法 用免疫组织化学方法（ＳＡＢＣ法）检测ｐ１５，Ｒｂ基因在３０例ＨＣＣ标本中的表达。结果 ｐ１５基因阳性表达率为６３％，Ｒｂ基因阳性表达率为４３％。ｐ１５，Ｒｂ基因阳性表达率在肿瘤分级间比较分别为Ｐ〈０．０５，Ｐ〉０．０５。ｐ１５，Ｒｂ基因在ＨＣＣ中阳性表达率无差异（Ｐ〉０．０５）。结论 ｐ１５，Ｒｂ基因在ＨＣ     

两例同一位点处的相同Rb1基因缺失

目的：检测Ｒｂ１基因的杂合性突变,探讨Ｒｂ１基因突变的分子生物学机理;方法：应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ－直接测序技术;结果：在检出有杂合性缺失的５０个病例中,一种相同序列的碱基、相同的突变形式（缺失）发生于毫无血缘关系的两个不同的病人的双眼视网膜母细胞瘤（ＲＢ）患者中;结论：“滑动错配”机理、“隐蔽拼接位点”的激活和利用可能促使此缺失发生。     

神经胶质瘤中的Rb基因存在状态检测

利用Ｒｂ３．８Ｋｂ特异性ｃＤＮＡ探针，采用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｂｌｏｔ方法，用脑外伤病人脑组织和正常胎盘组织作为对照，结果显示１２例神经胶质瘤标本中均未见有Ｒｂ基因的丢失或异常。检测结果表明Ｒｂ基因在神经胶质瘤中无显著缺失，但是否存在有Ｒｂ基因的微小缺失，点突变等当需用其它方法进一步证实。